随机扩增多态DNA

摘要： [目的]掌握渤海地区梭鱼种群的种质资源状况.[方法]应用随机扩增多态DNA(RAPD)技术,对梭鱼养殖群体与自然群体的遗传多样性进行了分析.[结果]从45个随机引物中选出20个扩增效果稳定的引物进行群体分析.其中,梭鱼自然群体共检出了204个扩增位点,多态位点136个,多态位点比例为66.7％；养殖群体中共检出了217个扩增位点,多态位点130个,多态位点比例为59.9％.[结论]目前梭鱼群体的遗传多样性较为丰富,人工养殖还未对其造成明显的影响.%[Objective] The research aimed to study the resources of Liza haematocheila population in Bohai Region. [Method] Using Random amplified polymorphic DNA (RAPD) , the genetic diversity of cultivated population and natural population of L. haematocheila was analyzed. [Result] 20 primers with stable amplification effects were selected from 45 random primers for population analysis. In natural population, 204 amplification sites were detected, and 136 sites were polymorphic and the percentage of polymorphic loci was 66.1%. In cultivated population, 217 amplification sites were detected, and 130 sites were polymorphic and the percentage of polymorphic loci was 59.9%. [Conclusion] At present, L haematocheila population has abundant genetic diversity and artificial cultivation hasn' t obvious effects.

摘要： 采用RAPD技术从40个随机引物中筛选出17个引物对张家口坝上高背鲫鱼水泉淖群体的遗传多样性进行研究,结果共检测出71个位点,其中多态位点25个,多态位点比例(P)为35.2％,平均每个引物提供的标记为4.2个；利用NTsyspc2.1软件获得该水库野生鲫鱼群体20个个体间的遗传距离,个体间遗传距离(D)在0.007 2～0.140 7之间,平均为0.063 5；个体间遗传相似系数(S)在0.859 3～0.992 8之间,平均遗传相似系数为93.65％；研究表明,张家口坝上野生高背鲫鱼群体由于环境封闭,没有外来品种引起的杂交现象,基因纯和程度较高,种群内遗传多样性低.

摘要： OBJECTIVE To compare specific primer method and random amplified polymorphic DNA ( RAPD) method for identification of Velvet Antler, thus to choose a simpler method. METHODS DNA samples were extracted from sika deer antler, wild deer antler, reideer pilose antler and commercially available Velvet Antler, and then purified and amplified with specific primer amplification and RAPD amplification. RESULTS The sika deer antler, wild deer antler, reideer pilose antler and some of the commercially available Velvet Antler all showed 313 bp segment in the agarose gel with different brightness while the other commercial products did not show this segment. RAPD not only effectively showed positive and negative DNA amplification results, but also showed the difference in PCR products of sika deer antlerwild deer antler with different strip numbers and strip brightness. CONCLUSION RAPD method is more accurate and rapid and it has wide application prospect.%目的 通过鹿茸特异性引物鉴别和随机扩增多态DNA(RAPD)鉴别的比较,选择一种更简便的方法用于鉴别鹿茸.方法 采用盐析法从梅花鹿茸、马鹿茸、驯鹿茸、市售鹿茸等样品中抽提线粒体DNA,并应用试剂盒进行纯化.进行特异性引物扩增和序列测定,同时进行随机扩增多态DNA扩增.结果 梅花鹿茸,马鹿茸,驯鹿茸以及部分市售鹿茸经特异性引物扩增后均可在琼脂糖凝胶中显示313 bp片段,只是条带亮度不同.而其余市售鹿茸无扩增条带；随机扩增多态DNA不仅有效显示阳性与阴性的DNA扩增结果,而且对梅花鹿茸,马鹿茸,驯鹿茸的聚合酶链反应产物的差异,以不同的条带数目和条带亮度得以验证.结论 随机扩增多态DNA鉴别鹿茸真伪的方法更准确快捷,通过随机扩增多态DNA扩增后主条带与梅花鹿茸或马鹿茸扩增的条带大小和亮度一致,则为正品；如不一致,则为《中国药典》规定外的鹿茸或其他混淆品.这种方法对于筛选、甄别市售动物中药材,特别是名贵中药具有广阔的应用前景.

摘要： @@%用RAPD技术对广东省佛山地区、浙江省菱湖地区和江苏省吴江地区的养殖大口黑鲈3个群体进行群体遗传变异分析,结果表明,用17条随机引物对3个群体共90尾大口黑鲈的基因组DNA进行扩增,共获得123个位点,平均每条随机引物扩增出7.24个位点,多态位点比例为43.09％;佛山、菱湖、吴江养殖大口黑鲈群体内的相似系数为0.8699、0.8922、0.8780;Nei指数分别为0.1734、0.1165、0.1543;佛山与菱湖、菱湖与吴江、佛山与吴江群体间的遗传距离分别为0.1657、0.512、0.1366.这表明,3个群体都具有一定的遗传变异,其中佛山群体最高,菱湖群体最低;佛山和菱湖群体间的遗传距离最大,佛山与吴江群体的遗传距离最小,用MEGA4.0软件进行聚类分析,佛山与吴江群体首先聚在一起,后与菱湖群体聚在一起.

摘要： 采用RAPD标记技术对叉尾斗鱼Macropodus opercularis 5个地理群体（南宁群体、桂林群体、龙岩群体、福州群体和广州群体）的遗传多样性进行了检测。结果表明：从40个随机引物中筛选出11个有效引物,对每条叉尾斗鱼的基因组DNA进行扩增,共扩增出139条片段;各群体的多态位点比例为26.44%～40.95%,Nei基因多样性指数为0.1042～0.1457,Shannon指数为0.1543～0.2176;而总体的多态位点比例、Nei基因多样性指数和Shannon指数分别高达84.89%、0.3110和0.4606。研究表明,叉尾斗鱼的遗传变异主要来自群体间,而群体内部的遗传多样性水平较低。

摘要： Random amplified polymorphic DNA (RAPD) technique was employed to detect the genetic variations in paradisefish Macropodus opercularis populations distributed in five geographical colonies. In this study, 11 effective primers out of 40 random primers were selected to amplify genomic DNA, resulting in 139 repeatable RAPD bands. The 5 populations were shown to have polymorphism frequency of 26.44%-40.95% , Shannon genetic diversity index of 0. 1042-0. 1457 and Nei genetic diversity of 0.1543-0.2176. On the average, all the population showed the frequency of polymorphism of 84. 89% , Nei genetic diversity of 0. 3110 and Shannon genetic diversity index of 0.4606, indicating that the genetic variation of the paradiseliish was not from the intra-populations but from inter-populations.%采用RAPD标记技术对叉尾斗鱼Macropodus opercularis 5个地理群体(南宁群体、桂林群体、龙岩群体、福州群体和广州群体)的遗传多样性进行了检测.结果表明:从40个随机引物中筛选出11个有效引物,对每条叉尾斗鱼的基因组DNA进行扩增,共扩增出139条片段；各群体的多态位点比例为26.44％～40.95％,Nei基因多样性指数为0.1042～0.1457,Shannon指数为0.1543～0.2176；而总体的多态位点比例、Nei基因多样性指数和Shannon指数分别高达84.89％、0.3110和0.4606.研究表明,叉尾斗鱼的遗传变异主要来自群体间,而群体内部的遗传多样性水平较低.

摘要： 以改进的氯化苄法抽提发酵肉制品总微生物DNA,进行随机扩增多态DNA(random amplifiedpolymorphicDNA,RAPD)分析.采用单因子梯度试验法对影响发酵肉制品微生物RAPD反应的反应体系、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、TaqDNA聚合酶的用量及DNA模板浓度进行了筛选.结果表明,发酵肉制品微生物RAPD扩增条件为25μLPCR反应体积中,2.5mmol/LMgCl2,0.15mmol/LdNTPs,15pmol引物,50ng模板DNA,1.0U Taq DNA聚合酶.%The total microbial DNA was extracted by the improved benzyl chloride method from fermented meat and was analyzed by random amplified polymorphic DNA (RAPD) markers. The influence of the concentration of Mg2+, dNTPs, primer, Taq DNA polymerase and the templates on RAPD-PCR reaction system were investigated by single-factor gradient test method. The optimal conditions were as follows: MgCl2 concentration 2.5mmol/L, dNTPs concentration 0.15mmol/L, primer concentration 15pmol, DNA template 50ng and Taq DNA polymerase 1.0U in 25μL RAPDPCR reaction system.

摘要： 目的 掌握儿童感染金黄色葡萄球菌耐药性和耐甲氧西林株(MRSA)基因型分布,为临床治疗和感染控制提供依据.方法 采用纸片扩散法对临床分离MRSA进行药敏试验,随机扩增多态DNA(RAPD)方法进行MRSA基因多态性分析,WHONET5.4软件进行药敏数据分析.结果 287例金黄色葡萄球菌对头孢西丁耐药62株,MRSA检出率21.60%.MRSA对β-内酰胺类抗菌药物耐药率为25.81%～100%.对非β-内酰胺类抗菌药物庆大霉素、复方新诺明、克林霉素、四环素和大环内酯类耐药率较高为53.23%～85.48%,对呋喃妥因、利福平、左氧氟沙星和环丙沙星耐药率较低为6.45%～27.42%,未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药株.其中MRSA对12种抗菌药物耐药率高于MSSA(P<0.05).经RAPD分型,62株MRSA分为5型,以Ⅰ型和Ⅲ型为主.结论 本地区儿童MRSA感染较高,且有不同耐药谱,加强儿童感染MRSA耐药性监测和了解MRSA流行情况,是防止耐药性进一步蔓延和MRSA感染爆发的有效措施.

摘要： 目的 了解儿童感染金黄色葡萄球菌的耐药性和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的基因型及分布,为临床治疗提供依据和确定MRSA流行情况.方法 采用ATB分析系统对菌株进行药敏试验,头孢硝基噻吩显色法检测β-内酰胺酶,随机扩增多态DNA(RAPD)方法进行MRSA同源性分析.结果 348株金黄色葡萄球菌中,334株产β-内酰胺酶,对β-内酰胺类抗菌药物的耐药率为6.03%～100.00%.耐药率较高的有四环素(65.23%)、大环内酯类(64.66%)、复方新诺明(48.28%)和克林霉素(43.97%),较低的有呋喃妥因(3.74%)、利福平(4.02%)、左氧氟沙星(8.91%)和环丙沙星(16.38%).未发现对万古霉素、替考拉林和利奈唑胺耐药.MRSA的检出率为9.77%,MRSA对17种抗菌药物的耐药率高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA).经RAPD分型,34株MRSA分为6型,以Ⅰ型为主(64.71%),主要分布于儿科PICU.结论 本地区儿童感染金黄色葡萄球菌有不同耐药谱,应加强儿童感染金黄色葡萄球菌的耐药性监测和掌握MRSA流行情况,对防止耐药性进一步蔓延和MRSA感染暴发有重要意义.%Objective To investigate the drug resistance of Staphylococcus aureus ( SA ) infection in children and genotype distribution of Methicillin resistant staphylococcus aureus ( MRSA ), so as to provide a reference for clinical use of antibiotics and determine the prevalence of MRSA. Methods All strains were performed antimicrobial susceptibility testing by ATB analysis system, β -lactamase was detected by the nitrocefin assay, and MRSA was genotyped by random amplified polymorphic DNA ( RAPD ) . Results Among 348 strains of SA, β -lactamase was detected in 334 stains. The drug resistant rate of β -lactamase antibiotics was 6. 03％ ～ 100. 00％. The drug resistant rates of SA to tetracycline ( 65. 23％ ). macrolides ( 64. 66％ ). cotrimoxazole ( 48. 28 7％ ) and clindamycin ( 43. 97％ ) were higher, but those to nitrofurantoin ( 3. 74％), rifampicin ( 4. 02％　 ), levofloxacin ( 8. 91％ ) and ciprofloxacin ( 16. 38％ ) were lower. The SA isolates resistant to Vancomycin, Teicoplanin and Linezolid were not found. The detection rate of MRSA was 9. 77％ . MRSA was more resistant t0 17 kinds of antibiotics than Methicilin Susceptible Staphylococcus aureu ( MSSA ). Genotyped hy RAPD , 34 MRSA strains were divided into 6 types, with a dominant type of RAPD Ⅰ ( 64. 71％ ), and they were mainly distributed in pediatric intensive care unit ( ICU ).Conclusion There were different resistance patterns of SA in the; local area of Nanning. In order to prevent the spread of drug resistance and the outbreak of MRSA infection, it was essential to strengthen monitor of drug resistance and investigate the prevalence of MRS.

摘要： We used RAPD software to analyze the genetic diversity of seven Hawksbill Turtles（Eretmochelys imbricata） captured in the South China Sea.We used 20 random primers to amplify 1351 fragments.On average,193 bands were amplified for each individual.Sixty - nine of 193 loci were polymorphic（35.8%）.The size of DNA fragments ranged from 200 bp to 3 000 bp.The genetic distance among individuals ranged from 0.082 9 to 0.181 3 and averaged 0.132 7±0.029 9.The phylogenetic tree of the seven turtles was constructed by NJTREE analysis using the RAPDistance 1.04 program.We conclude that the genetic diversity of Eretmochelys imbricata in the South China Sea is low.%应用RAPD技术分析了玳瑁的遗传多样性。用20个随机引物对中国南海海域玳瑁7个个体的基因组DNA进行了PCR扩增,共扩增出1 351条DNA片段,平均每个个体扩增出193条条带。在检测到的193条条带中,多态性条带为69条,多态性条带百分比为35.8%,条带大小在200 bp～3 000 bp之间,7个个体间遗传距离为0.082 9～0.1813,平均遗传距离为0.132 7±0.029 9,表明中国南海海域玳瑁的遗传多样性水平较低,应加强该区域玳瑁种质资源的保护。采用类平均聚类法（NJTREE）构建了7个个体相互关系的分子聚类图,表明该7个玳瑁个体没有形成种群的分化。

摘要： 随机扩增多态DNA(RAPD)技术在动物、植物、微生物种属鉴定，亲缘关系的划分及多态性分析中得到广泛应用，但应用于小型猪方面的研究报道很少，尤其是对我国特有的实验用小型猪的研究目前国内外尚未见报道。rn 贵州小型香猪、广西巴马小型猪及西双版纳近交系小耳猪由于其近交程度高、遗传性稳定以及良好的实验应用效果，已引起了国内外相关领城的关注，本文应用100条随机引物对上述3品系小型猪的基因组DNA进行RAPD研究，旨在筛选具有品系间多态性的RAPD引物，以利于3品系小型猪的遗传背景和遗传标准的建立，同时对3品系小型猪间的亲缘关系进行初步分析。

摘要： 随机扩增多态DNA(RAPD)技术在动物、植物、微生物种属鉴定，亲缘关系的划分及多态性分析中得到广泛应用，但应用于小型猪方面的研究报道很少，尤其是对我国特有的实验用小型猪的研究目前国内外尚未见报道。rn 贵州小型香猪、广西巴马小型猪及西双版纳近交系小耳猪由于其近交程度高、遗传性稳定以及良好的实验应用效果，已引起了国内外相关领城的关注，本文应用100条随机引物对上述3品系小型猪的基因组DNA进行RAPD研究，旨在筛选具有品系间多态性的RAPD引物，以利于3品系小型猪的遗传背景和遗传标准的建立，同时对3品系小型猪间的亲缘关系进行初步分析。

摘要： 随机扩增多态DNA(RAPD)技术在动物、植物、微生物种属鉴定，亲缘关系的划分及多态性分析中得到广泛应用，但应用于小型猪方面的研究报道很少，尤其是对我国特有的实验用小型猪的研究目前国内外尚未见报道。rn 贵州小型香猪、广西巴马小型猪及西双版纳近交系小耳猪由于其近交程度高、遗传性稳定以及良好的实验应用效果，已引起了国内外相关领城的关注，本文应用100条随机引物对上述3品系小型猪的基因组DNA进行RAPD研究，旨在筛选具有品系间多态性的RAPD引物，以利于3品系小型猪的遗传背景和遗传标准的建立，同时对3品系小型猪间的亲缘关系进行初步分析。

摘要： 随机扩增多态DNA(RAPD)技术在动物、植物、微生物种属鉴定，亲缘关系的划分及多态性分析中得到广泛应用，但应用于小型猪方面的研究报道很少，尤其是对我国特有的实验用小型猪的研究目前国内外尚未见报道。rn 贵州小型香猪、广西巴马小型猪及西双版纳近交系小耳猪由于其近交程度高、遗传性稳定以及良好的实验应用效果，已引起了国内外相关领城的关注，本文应用100条随机引物对上述3品系小型猪的基因组DNA进行RAPD研究，旨在筛选具有品系间多态性的RAPD引物，以利于3品系小型猪的遗传背景和遗传标准的建立，同时对3品系小型猪间的亲缘关系进行初步分析。

摘要： 随机扩增多态DNA(RAPD)技术在动物、植物、微生物种属鉴定，亲缘关系的划分及多态性分析中得到广泛应用，但应用于小型猪方面的研究报道很少，尤其是对我国特有的实验用小型猪的研究目前国内外尚未见报道。rn 贵州小型香猪、广西巴马小型猪及西双版纳近交系小耳猪由于其近交程度高、遗传性稳定以及良好的实验应用效果，已引起了国内外相关领城的关注，本文应用100条随机引物对上述3品系小型猪的基因组DNA进行RAPD研究，旨在筛选具有品系间多态性的RAPD引物，以利于3品系小型猪的遗传背景和遗传标准的建立，同时对3品系小型猪间的亲缘关系进行初步分析。

摘要： 利用随机扩增多态DNA(RAPD)技术,选用10个随机引物,对46个百合品种(种)总DNA进行随机扩增,10个引物均得到了稳定的RAPD图谱,扩增出的片段分子量在100～3000之间,每个随机引物扩增出的条带数在4～15条之间,共扩增出74个条带,多态性标记数为66条,占扩增总谱带数的89﹪.根据DNA谱带计算品种间的遗传距离,对46个品种(种)进行了聚类分析,分为5个组群,组群间差异较大,组群内差异较小.

摘要： 利用随机扩增多态DNA(RAPD)技术,选用10个随机引物,对46个百合品种(种)总DNA进行随机扩增,10个引物均得到了稳定的RAPD图谱,扩增出的片段分子量在100～3000之间,每个随机引物扩增出的条带数在4～15条之间,共扩增出74个条带,多态性标记数为66条,占扩增总谱带数的89﹪.根据DNA谱带计算品种间的遗传距离,对46个品种(种)进行了聚类分析,分为5个组群,组群间差异较大,组群内差异较小.

摘要： 利用随机扩增多态DNA(RAPD)技术,选用10个随机引物,对46个百合品种(种)总DNA进行随机扩增,10个引物均得到了稳定的RAPD图谱,扩增出的片段分子量在100～3000之间,每个随机引物扩增出的条带数在4～15条之间,共扩增出74个条带,多态性标记数为66条,占扩增总谱带数的89﹪.根据DNA谱带计算品种间的遗传距离,对46个品种(种)进行了聚类分析,分为5个组群,组群间差异较大,组群内差异较小.

摘要： 利用随机扩增多态DNA(RAPD)技术,选用10个随机引物,对46个百合品种(种)总DNA进行随机扩增,10个引物均得到了稳定的RAPD图谱,扩增出的片段分子量在100～3000之间,每个随机引物扩增出的条带数在4～15条之间,共扩增出74个条带,多态性标记数为66条,占扩增总谱带数的89﹪.根据DNA谱带计算品种间的遗传距离,对46个品种(种)进行了聚类分析,分为5个组群,组群间差异较大,组群内差异较小.

摘要： 应用随机扩增多态DNA(RAPD)技术分析鹅群的分子标记与屠宰性状的相关性.结果表明,从40条随机引物中所筛选出的14条引物,在56日龄的四川白鹅与天府肉鹅两群体中扩增产物的多态率分别为93.10﹪和91.38﹪.两鹅群中具有共同的标记H0307对活重、屠体重和全净膛重的影响显著;具共同的互作标记组合对特定性状有显著效应:H0702与G1402的互作对活重;H1902与H1908的互作对翅重有显著效应.

摘要： 本发明涉及通过随机扩增多态性DNA技术对三种不同来源地的仿刺参进行快速鉴定、区分的方法。本发明提供实现上述方法的对仿刺参进行RAPD扩增的引物、含有所述引物的试剂盒，还涉及一种快速检测仿刺参来源地的随机扩增多态性DNA方法，通过提取待测样品的DNA模板，通过如SEQ No.1所示的引物D20为随机引物进行PCR反应，然后对PCR反应产物进行电泳检测。本发明通过RAPD技术实现仿刺参来源地的快速检测，克服了现有技术鉴定仿刺参时存在的成本高、费时长等缺点。本发明只需进行一次PCR反应和一次琼脂糖凝胶电泳即能分辨大连、威海、烟台的仿刺参，具有低成本、灵敏度高的优点。

摘要： 本发明涉及一种基因组随机扩增序列SNP多态性及甲基化多态性的方法，是选取目标物种提取DNA后选择酶切位点进行酶切；设计连接接头、标签，合成带有选择标签的EcoR？I酶切位点接头；分别用EcoR？I与Msp？I、EcoR？I与HpaⅡ对样本进行酶切，再将带有选择标签的EcoR？I酶切位点接头用T4连接酶与分别对应酶切好的基因组进行连接，同时分别连接上酶切位点接头；进行PCR扩增，选择高通量的Hiseq2000双端对PCR扩增产物进行混合测序。本发明利用现代高通量测序技术，通过对基因组进行降维，提高组装准确性，降低成本，提高分子育种效率，为现在分子育种提供一个高效、便利的SNP发现与甲基化多态性为一体的方法。

摘要： 本发明公开了一种利用甲基化敏感扩增多态性（MSAP）技术筛选白棉子叶衰老相关基因的方法。其步骤如下：待棉花幼苗长至10 d左右，两片子叶完全展开后，选取长势一致的幼苗，分别用300、500和700 mg·L‑1的乙烯利涂抹子叶，同时对照用蒸馏水涂抹，经过乙烯利处理5 d后，提取子叶的基因组DNA；再通过MSAP分析，对回收的差异条带纯化和测序继而进行功能分析。本发明利用MSAP技术，分析棉花子叶经乙烯利处理后CCGG位点胞嘧啶甲基化水平和模式的变化，进而分离乙烯利诱导的甲基化差异片段，以期从基因组水平上揭示乙烯利调控棉花衰老的调控机制提供理论依据。

摘要： 本发明涉及甲基化敏感扩增多态性技术在转基因植物毒性分析的应用，具体提供了一种转基因植物非预期毒性的分析预测方法，其检测方法为：1、获得转基因植株甲基化敏感多态性差异片段；2、转基因植株甲基化差异DNA片段的回收、克隆及测序；3、利用转基因植株甲基化差异DNA片段分析转基因植株的非预期毒性。本发明将甲基化敏感扩增多态性技术用于分析转基因植物的非预期毒性，建立了分析转基因植株中是否具有非预期毒性的技术体系，有助于转基因植株的监测和推广应用，具有重要的经济效益和社会效益。

摘要： 本发明公开一种保守序列扩增多态性分子标记及其分析方法，是根据表达序列标签EST和内含子的保守序列设计引物的PCR扩增产物，通过PCR、聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分析检测而得到DNA多态性。本发明所提供的保守序列扩增多态性分子标记技术具有经济简便、模板需要量少、产量中等、重复性高、结果可靠等优点，可研究植物、动物、人类以及微生物的遗传多态性、种质资源、亲缘关系和分子标记辅助选择育种等许多方面，是一种可广泛应用的普适技术。

摘要： 本发明涉及一种半定量表达序列标签扩增多态性的分子标记及其分析方法，是根据目标表达序列标签设计固定引物，以CACGC为核心序列设计随机引物，通过RT-PCR(反转录聚合酶链式反应)而得到特定表达序列标签多态性。本发明通过引物设计，保留了最新创立的分子标记SRAP和TRAP技术的优点，克服了他们的缺陷，除具备操作简便、产量中等、条带易于分离及可测序，不需使用同位素等优点之外，还具有半定量的特点。可用于研究植物、动物、人类以及微生物的遗传多态性分析、种质资源鉴定、基因定位、亲缘关系分析和分子标记辅助选择育种等。

摘要： 本发明涉及通过随机扩增多态性DNA技术对三种不同来源地的仿刺参进行快速鉴定、区分的方法。本发明提供实现上述方法的对仿刺参进行RAPD扩增的引物、含有所述引物的试剂盒，还涉及一种快速检测仿刺参来源地的随机扩增多态性DNA方法，通过提取待测样品的DNA模板，通过如SEQ？No.1所示的引物D20为随机引物进行PCR反应，然后对PCR反应产物进行电泳检测。本发明通过RAPD技术实现仿刺参来源地的快速检测，克服了现有技术鉴定仿刺参时存在的成本高、费时长等缺点。本发明只需进行一次PCR反应和一次琼脂糖凝胶电泳即能分辨大连、威海、烟台的仿刺参，具有低成本、灵敏度高的优点。

摘要： 本发明涉及一种基因组随机扩增序列SNP多态性及甲基化多态性的方法，是选取目标物种提取DNA后选择酶切位点进行酶切；设计连接接头、标签，合成带有选择标签的EcoR I酶切位点接头；分别用EcoR I与Msp I、EcoR I与HpaⅡ对样本进行酶切，再将带有选择标签的EcoR I酶切位点接头用T4连接酶与分别对应酶切好的基因组进行连接，同时分别连接上酶切位点接头；进行PCR扩增，选择高通量的Hiseq2000双端对PCR扩增产物进行混合测序。本发明利用现代高通量测序技术，通过对基因组进行降维，提高组装准确性，降低成本，提高分子育种效率，为现在分子育种提供一个高效、便利的SNP发现与甲基化多态性为一体的方法。

摘要： 本发明公开了一种利用甲基化敏感扩增多态性（MSAP）技术筛选白棉子叶衰老相关基因的方法。其步骤如下：待棉花幼苗长至10d左右，两片子叶完全展开后，选取长势一致的幼苗，分别用300、500和700mg·L-1的乙烯利涂抹子叶，同时对照用蒸馏水涂抹，经过乙烯利处理5d后，提取子叶的基因组DNA；再通过MSAP分析，对回收的差异条带纯化和测序继而进行功能分析。本发明利用MSAP技术，分析棉花子叶经乙烯利处理后CCGG位点胞嘧啶甲基化水平和模式的变化，进而分离乙烯利诱导的甲基化差异片段，以期从基因组水平上揭示乙烯利调控棉花衰老的调控机制提供理论依据。

摘要： 本发明公开了一种外显子保守序列扩增多态性分子标记及其分析方法，能利用己知物种的公用数据库中的mRNA序列信息，找出基因外显子的5碱基寡聚核苷酸保守序列，以这个保守序列为核心，在其3’端连接6碱基随机序列构成11碱基序列，与5’端的固定序列共同组成20bp的引物。通过mRNA数据库初步筛选出11碱基序列出现频率较高的引物，再用PCR对其进行重复性筛选，得到作为基于FCR的外显子保守序列扩增多态性标记。本方法操作简便、有效、重复性好、减少引物筛选的时间和成本。这是遗传多样性分析的一种新的、有效的分子标记方法。可广泛应用于遗传图谱构建、基因或QTL定位、标记辅助育种、遗传多样性分析、基因组研究和mRNA表达差异分析等多种领域，应用前景广阔。