阳性对照

摘要： PCR实验在操作过程中,由于众多原因,易出现"假阳性"和"假阴性"实验结果.在实验中引入"实验对照",无须新构造平台,投入更多的人力物力,能帮助学生理清思路、合理分析实验结果,培养学生的"对照"意识.

摘要： 目的 构建一种经济实用的免疫组化组织微阵列对照体系,并介绍组织微阵列蜡块、切片的简易制作方法.方法 根据实际临床工作经验,在遵循国际特殊专家委员会建议、免疫组织化学检测技术共识的基础上构建组织微阵列对照体系;利用临床病理外检中满足临床诊断后剩余组织,常规脱水处理,镜下筛选目的区域,用废旧一次性病理刀片,将组织目的区域切成约0.2 cm×0.2 cm×0.2 cm的小组织块,根据组织微阵列对照体系,用尺寸较小的包埋磨具(约0.7 cm×0.7 cm)将目的组织包埋,制成组织微阵列蜡块并标记编号;组织微阵列蜡块冷冻后切片,切片厚度2～2.5μm,蜡片贴裱于免疫组化专用粘附性载玻片据底端0.5 cm处中央,用铅笔标记阳性对照组织微阵列的编号,72°C烤片15～30 min或室温自然凉片至干燥,制成组织微阵列切片.结果 构建了5个组织微阵列对照体系;制作了5种组织微阵列蜡块;制作了5种组织微阵列切片.结论 5个组织微阵列对照体系,设计科学合理,可满足百余种抗体的阴性及阳性对照;组织微阵列蜡块的制作方法简单,无需特殊仪器设备,组织来源充足;组织微阵列切片的制作简单易行.该免疫组化组织微阵列对照体系的构建经济实用,其蜡块、切片的制作方法简单,可操作性强,值得在实际临床工作中推广.

摘要： 通过PDL1(22C3)在不同平台的染色结果分析选择最佳的染色平台.利用PDL1(22C3)的阳性对照(扁桃体和胎盘组织)在DAKO、ROCHE、Leica和手工的免疫组化染色平台的染色结果,根据PDL1(22C3)的判读标准进行染色结果分析,选择合适的染色平台.PDL1(22C3)在DAKO、ROCHE免疫组化染色平台的染色结果最佳,而在Leica和手工平台的染色效果次之.PDL1(22C3)可以在不同平台进行染色,得到相同或接近的染色效果.

摘要： 本研究构建了一种可用于10种检疫性有害生物鉴定需求的阳性质粒。通过分析植物疫情数据,筛选出10种入侵风险高的检疫性有害生物,采用DNA同源重组技术,将这10种检疫性有害生物的特征序列定向整合到同一pUCm-T载体质粒中,并对质粒的特异性进行验证。本研究得到一种包含10种检疫性有害生物特征序列的重组质粒,该质粒具有易储存、低风险、特异性的显著优势,能够作为阳性对照有效鉴定10种检疫性有害生物。

摘要： 本研究构建了一种可用于10种检疫性有害生物鉴定需求的阳性质粒.通过分析植物疫情数据,筛选出10种入侵风险高的检疫性有害生物,采用DNA同源重组技术,将这10种检疫性有害生物的特征序列定向整合到同一pUCm-T载体质粒中,并对质粒的特异性进行验证.本研究得到一种包含10种检疫性有害生物特征序列的重组质粒,该质粒具有易储存、低风险、特异性的显著优势,能够作为阳性对照有效鉴定10种检疫性有害生物.

摘要： 为明确ERK和AKT在TGF-β调节PD-L1和EMT中所起的作用,本实验用TGF-β1处理SW620细胞15、30、60min后,Western blot检测ERK和AKT的磷酸化水平;SW620细胞中加入ERK和AKT抑制剂预处理30min后加入TGF-β1共同培养48h,Western blot检测PD-L1蛋白和EMT相关标志物E-cadherin、Vimentin和Snail的表达;用含30mmol/L葡萄糖的L-15培养基培养SW620细胞,模拟体内高糖环境,以ROS诱导剂作为高糖培养的阳性对照,设置不处理的对照组、TGF-β1组、高糖组、ROS诱导剂组和高糖+TGF-β1组,Western blot检测培养48h后PD-L1蛋白和EMT相关标志物E-cadherin、Vimentin和Snail的表达。

摘要： 目的探究采用新型冠状病毒肺炎确诊患者标本核酸作为新型冠状病毒核酸检测阳性对照的可行性。方法收集该院确诊的1例经灭活后的新型冠状病毒患者核酸检测阳性标本,保存于-20°C条件下,分别采用3种不同的试剂对该核酸进行10次检测,分析评价检测结果。结果3种不同核酸检测试剂对临床确诊新型冠状病毒肺炎核酸标本分别进行重复10次检测,发现该样本均为阳性,阳性率为100%。华大试剂在检测过程中出现弱阳性的结果。3种试剂对该样本核酸检测总体重复性较好,对于ORF1ab基因的变异系数(CV值)伯杰试剂低于华大和圣湘;而对于N基因,圣湘试剂优于伯杰试剂。结论在常规新型冠状病毒核酸筛查检测过程成中,可以采用经灭活后的新型冠状病毒肺炎患者的核酸作为新型冠状病毒核酸检测的额外阳性对照,以保证核酸检测的准确性和结果可靠性。

摘要： 目的 探索避免用归档蜡块做病理特殊染色阳性对照以节约资源,同时也能获得可靠染色结果的方法.方法 在过碘酸希夫染色和六胺银染色中,用酵母菌和蛋清混合物制成蜡块,作为显示真菌的特殊染色的新型阳性对照.结果 新型阳性对照镜下真菌分布合理,染色鲜艳,背景干净清晰.结论 新型阳性对照具有来源广泛,制作快速、简便,不消耗归档蜡块等优点,适合作为病理真菌染色的阳性对照.

摘要： 目的:探讨免疫组化室内质控中应用组织悬液作为HER-2(人表皮生长因子受体-2)阳性对照的效果,为建立更好的HER-2免疫组化室内质控提供参考.方法:择取2018年1月-2019年12月笔者所在医院的37例HER-2(3+)的胃癌根治标本,包埋成石蜡块连续切片,行免疫组化染色,另取切片搅碎后制成组织悬液,分别进行免疫组化染色和常规HE染色,于试验后4、12周时,复行免疫组化染色,比较观察染色定位及强度情况.结果:组织悬液标本HE染色镜下观察均可见异形癌细胞,多数平铺,轮廓清晰.免疫组化染色的胃癌组织悬液标本,HER-2表达均见于细胞膜,染色强度均为强阳性(3+),同石蜡切片定性定位与染色均相符.试验后4、12周复行免疫组化,HER-2染色定位与强度同前无明显改变.结论:组织悬液癌细胞HER-2阳性定位明确,染色强度准确,质量稳定易判读,能够保障染色过程可靠,可以作为免疫组化室内质控,为HER-2染色提供阳性参考.

摘要： 为观察以10mg/ml的磷酸组胺为点刺试验阳性对照的安全性及反应的程度,本文对1000例点刺试验的组胺阳性对照结果进行了统计学分析,结果显示以该浓度的磷酸组胺作阳性对照所形成的风团和红晕大小适中、反应清晰且无全身不良反应.风团面积的几何均值为42.1mm,红晕面积的几何均值为567.5mm,据此可协助判断皮肤的敏感性、避免假阴性.

摘要： 随着公司的不断发展,产能的提高,检验工作的强度越来越大,原方法耗时长,为找到快速新方法,提高工作效率,在保证阳性对照适用性的同时,降低检验成本,特开展QC小组活动.

摘要： 个人体会,目前我国免疫组化方面主要存在三大问题:固定问题、修复问题和阳性对照问题。本文就这三个问题谈谈自己的一点看法,供大家参考。

摘要： 目的:建立对我国构成严重威胁的尼帕病毒(Nipah virus,NiV)的TaqMan荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测方法.方法:根据NiV N基因序列设计并合成两套引物、探针及阳性对照的序列,分别对应两套TaqMan检测体系;将阳性对照序列克隆到质粒PMD-18上,再用含有T7启动子的两条引物扩增,扩增产物纯化后进行体外转录,以转录的dsRNA为阳性对照,用RNA酶消化等方法检测其稳定性;以倍比稀释的NiV的cDNA、阳性对照和一些阴性对照为模板,检验此两套检测体系以及文献报道的普通RT-PCR的灵敏度和特异性.结果:第一套TaqMan实时荧光RT-PCR最为灵敏,能够检测到600拷贝的RNA模板,并且特异性很强;此dsRNA阳性对照性质稳定,能够排除阳性对照的核酸污染引起的假阳性.结论:建立的尼帕病毒荧光RT-PCR方法检测方法灵敏且特异,其阳性对照克服了此类试剂中RNA对照容易降解以及难以排除其核酸污染引起的假阳性等缺点.

摘要： 在阳性对照药物疗效缺乏科学的证明资料时,可以增加安慰剂对照组.一些功能性疾病、疾病的早期、自愈性疾病等均可以采用多种形式的安慰剂对照试验设计方法,并认真进行受益/风险评估.要重视中药临床试验中量效关系的设计,量效对照可以结合阳性对照、安慰剂对照同时进行设计,以便全面客观科学地反应中药的真正特点和疗效.

摘要： 世界医学协会于2000年发表的赫尔辛基宣言对以安慰剂为对照的优效性试验的伦理问题提出了质疑。因此,以阳性药为对照的非劣效试验在肿瘤等威胁生命的疾病的研究中的作用越来越突出。目前提出的非劣效性检验方法主要针对两分类或者等级资料,然而,当临床试验的主要疗效指标为带有删失数据的生存时间时,如何检验其非劣效性的仍然需要进一步的研究。

摘要： 世界医学协会于2000年发表的赫尔辛基宣言对以安慰剂为对照的优效性试验的伦理问题提出了质疑。因此,以阳性药为对照的非劣效试验在肿瘤等威胁生命的疾病的研究中的作用越来越突出。目前提出的非劣效性检验方法主要针对两分类或者等级资料,然而,当临床试验的主要疗效指标为带有删失数据的生存时间时,如何检验其非劣效性的仍然需要进一步的研究。

摘要： 世界医学协会于2000年发表的赫尔辛基宣言对以安慰剂为对照的优效性试验的伦理问题提出了质疑。因此,以阳性药为对照的非劣效试验在肿瘤等威胁生命的疾病的研究中的作用越来越突出。目前提出的非劣效性检验方法主要针对两分类或者等级资料,然而,当临床试验的主要疗效指标为带有删失数据的生存时间时,如何检验其非劣效性的仍然需要进一步的研究。

摘要： 世界医学协会于2000年发表的赫尔辛基宣言对以安慰剂为对照的优效性试验的伦理问题提出了质疑。因此,以阳性药为对照的非劣效试验在肿瘤等威胁生命的疾病的研究中的作用越来越突出。目前提出的非劣效性检验方法主要针对两分类或者等级资料,然而,当临床试验的主要疗效指标为带有删失数据的生存时间时,如何检验其非劣效性的仍然需要进一步的研究。

摘要： 世界医学协会于2000年发表的赫尔辛基宣言对以安慰剂为对照的优效性试验的伦理问题提出了质疑。因此,以阳性药为对照的非劣效试验在肿瘤等威胁生命的疾病的研究中的作用越来越突出。目前提出的非劣效性检验方法主要针对两分类或者等级资料,然而,当临床试验的主要疗效指标为带有删失数据的生存时间时,如何检验其非劣效性的仍然需要进一步的研究。

摘要： 本发明公开一种融合基因阳性对照标准品及其制备方法，其通过非融合基因阳性样品扩增融合伴侣基因，并以不对称PCR结合自身退火PCR方法将融合伴侣基因核酸片段连接，获得相应融合基因，巢式PCR和琼脂糖凝胶电泳纯化回收，浓度测定后制备成相应融合基因阳性对照标准品。本发明解决了融合基因核酸序列阳性对照标准品难以获得和人工合成造价高的问题。在临床融合基因检测辅助诊断、治疗和判断预后方面有应用前景。另外，人工合成的融合基因严格控制两侧伴侣基因浓度为1:1，可以作为基因拷贝数分析等定量分析的内对照。本发明制备融合基因阳性对照品具有制作简单、灵活、造价低廉等优点，在临床检测和相关质检等方面具有重要意义。

摘要： 本发明公开了同时制备多种病毒RNA片段用作核酸检测阳性对照的方法。所述方法包括以下步骤：体外合成多种待检测病毒的保守区核苷酸序列，将各序列分别插入到质粒载体中，获得含有病毒保守序列的重组质粒；以所述各病毒的保守序列作为靶序列设计用于PCR扩增的特异性引物对；设计并合成一对非特异性通用引物，其中正义引物含有T7 RNA聚合酶的同源启动子序列；将通用引物与各病毒特异性引物相连，形成针对各种待检测病毒的嵌合引物对；以重组质粒为模板，采用Tem‑PCR技术，使用多对嵌合引物和一对通用引物进行病毒核酸的扩增；基于体外转录技术将多重PCR的产物转录为RAN片段。本发明操作简单，成本低廉，可同时制备多种病毒保守区序列RNA片段。

摘要： 本发明公开了一种用于2019‑CoV‑2检测的冻干粉状RNA阳性对照品，它包括含有2019‑CoV‑2的ORF1和N基因片段的RNA序列、冻干保护剂和复溶液，利用在PCR扩增时，通过对阳性对照标准品的平行检测，首先判断PCR扩增体系的配制、扩增程序以及检测实验操作是否正确，试验是否成立。当加入有阳性对照品的体系出现扩增曲线，说明PCR扩增实验体系配制、扩增程序及检测操作正确，此时可根据样本有无扩增曲线来判读样本中是否检出2019‑CoV‑2，因此，检测过程中阳性对照品的使用能够消除环境和人为操作带来的误差或错误，指示实验的有效性，减少结果判读过程中的变量，从而提高检测试剂盒的检测准确性，该对照品为固态粉状物，方便运输、使用快捷、独立分装，进一步提高检测的稳定性和可靠性。

摘要： 本发明公开了一种用于感染性病原体检测的阳性对照品及其制备方法与应用，包括第一、第二阳性对照品，第一阳性对照品中病原体包括革兰氏阳性菌发酵乳杆菌、芽孢梭菌、枯草芽孢杆菌、表皮葡萄球菌、威尔斯李斯特菌、革兰氏阴性荧光假单胞菌、产气克雷伯菌、大肠埃希氏杆菌；真菌黑曲霉、酿酒酵母及噬菌体T1，第二阳性对照品中病原体核酸包括细菌表皮葡萄球菌、真菌黑曲霉、病毒单纯疱疹病毒、噬菌体T1、病毒腺相关病毒、病毒轮状病毒、病毒呼吸道合胞病毒、病毒水疱性口炎病毒、噬菌体MS2。本发明提供了方便、安全、直接可用的双重对照标准品，同时从不同角度进行阳性标准对照，确保了感染性疾病宏基因组检测流程的准确性和稳定性。

摘要： 本发明公开了基于疟原虫18s rRNA基因阳性对照标准品及其制备方法和应用，其通过构建包含疟原虫18s rRNA基因序列的质粒以制备疟原虫检测样品。应用该质粒可模拟疟原虫感染的生物样本，制备成相应的阳性对照品。本发明解决了疟原虫阳性样本需求大，但是疟原虫阳性滤纸血或全血样本数量有限且又不易定量的问题。本发明制备的基因阳性样本具有制作简单及成本低等优点，在实验室和临床的疟原虫核酸检测技术能力质量控制中具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种PCR阳性对照品的制备方法，可以明显区分阳性对照品对核酸扩增体系的污染，提高PCR检测的准确性，降低假阳性。将PCR阳性片段的核酸序列从两个引物之间剔除一段序列，然后将其转化克隆工程菌，提取阳性质粒作为对照品，经改造的对照品不影响PCR引物的结合，也不影响PCR产物的扩增效率，而且由于片段长度小于正常阳性样本产物，所以在进行琼脂糖电泳的时候可以显著的区分开来，从而起到区别污染的作用。

摘要： 本发明公开一种融合基因阳性对照标准品及其制备方法，其通过非融合基因阳性样品扩增融合伴侣基因，并以不对称PCR结合自身退火PCR方法将融合伴侣基因核酸片段连接，获得相应融合基因，巢式PCR和琼脂糖凝胶电泳纯化回收，浓度测定后制备成相应融合基因阳性对照标准品。本发明解决了融合基因核酸序列阳性对照标准品难以获得和人工合成造价高的问题。在临床融合基因检测辅助诊断、治疗和判断预后方面有应用前景。另外，人工合成的融合基因严格控制两侧伴侣基因浓度为1:1，可以作为基因拷贝数分析等定量分析的内对照。本发明制备融合基因阳性对照品具有制作简单、灵活、造价低廉等优点，在临床检测和相关质检等方面具有重要意义。

摘要： 本实用新型公开了一种无菌包装密封性检测阳性对照品样品的制作装置，包括样品瓶和密封盖，密封盖包括有密封塞和密封层，密封塞采用材料为丁基胶乳，密封层采用材料为铝制材料，密封塞通过卡合安装在样品瓶顶部瓶口，密封塞表面均通过包覆有密封层，密封层顶部中心开设有刺孔，密封盖中心通过嵌入安装有针管，针管穿过刺孔和密封塞延伸至样品瓶内部，针管内部放置有微管，微管穿过针管延伸至样品瓶内部，样品瓶瓶壁内开设有真空层，样品瓶、密封盖、针管和微管使用前均采取杀菌处理；本实用新型一种无菌包装密封性检测阳性对照品样品的制作装置具有密封性好、无菌处理、结构简单、使用方便、绝热保温的优点。

摘要： 本实用新型公开了一种无菌包装阳性对照样品的制作装置，包括瓶盖和样品瓶，所述样品瓶的顶部设置有瓶盖，本实用新型中，通过将瓶盖中心加工台阶孔，用切割刀片将成品毛细管切割成一小段，将切割好的毛细管放至瓶盖中心，在毛细管和孔的缝隙中注入树脂，进一步的将样品瓶放入瓶盖的凹槽中，在缝隙中注入树脂，至此包装无损泄漏检测阳性样品制作完成，本技术采用毛细管封装的方式，将毛细管用胶封装在样品上，从而实现阳性样品的制作，在样品上形成的孔的尺寸精确，形状无变形，成本低，毛细管被堵后可将样品加热将被污染的毛细管去除，重新封装新毛细管，可重复使用。

摘要： 本实用新型公开了一种免疫组化阳性对照蜡块模型，包括羊膜和至少一个模型组织，所述模型组织被所述羊膜包裹住。该模型的制作可以一批制作多个免疫组化阳性对照蜡块，此类阳性对照蜡块可同时用于多个不同检测指标的阳性对照，非常适用于各大中小医院日常免疫组化工作。