酶联免疫测定

摘要： 目的 探讨血清胃蛋白酶原(PG)与胃泌素-17(G-17)水平变化对慢性萎缩性胃炎的筛查价值.方法 100例胃镜受检者,根据胃镜与病理诊断结果分成对照组(检查未见异常者,20例)、慢性萎缩性胃炎组(慢性萎缩性胃炎,55例)及慢性非萎缩性胃炎组(慢性非萎缩性胃炎,25例).检测三组血清胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)与G-17水平.对比三组PGⅠ、胃蛋白酶原Ⅰ与胃蛋白酶原Ⅱ比值(PGR)与G-17水平及不同萎缩部位PGⅠ、PGR与G-17水平.结果 慢性非萎缩性胃炎组PGⅠ、PGR与G-17水平与对照组对比差异无统计学意义(P>0.05);慢性萎缩性胃炎组PG I水平(118.34±41.35)μg/L、PGR水平(7.13±2.32)均明显低于对照组的(146.77±45.47)μg/L、(10.55±4.93),G-17水平(41.85±9.55)pg/ml高于对照组的(36.45±10.66)pg/ml,差异有统计学意义(P0.05),G-17水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);全胃多灶性萎缩组PGⅠ、PGR及G-17水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 临床通过检测血清PG与G-17水平可有效筛查出慢性萎缩性胃炎,若有异常情况可作进一步检查,具有较高的筛查价值.

摘要： 丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌可以引起十字花科细菌性黑斑病,是侵染萝卜、白菜、花椰菜等农作物的重要病害之一.以灭活的丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌(NCPPB1820)为免疫原免疫小鼠,通过杂交瘤细胞技术,筛选最终获得6株产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞.将辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)与抗体偶联,作为检测探针,分别将6种单克隆抗体作为包被抗体,进行两两配对筛选.结果表明,所制备的抗体特异性较好,对水稻细菌性谷枯病菌、水稻细菌性条斑病菌、玉米细菌性枯萎病菌、丁香假单胞菌丁香致病变种均没有交叉反应.以6号抗体作为检测抗体(6-HRP),以1号抗体作为包被抗体,建立酶联免疫分析法获得了最佳的敏感度.检测丁香假单胞杆菌斑点致病变种的最低检测限为1.5×105 cfu/mL,定量限为4.12×105 cfu/mL.基于双抗体夹心的酶免疫方法特异性好,便捷,可以实现对丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌高通量测定.

摘要： 目的了解SEROZYME—I型磁分离酶联免疫内分泌定量测定仪检测生殖内分泌激素FSH、LH、T、P、E2、PRL的性能。方法使用SEROZYME—I型磁分离酶联免疫内分泌定量测定仪及其配套试剂对FSH、LH、T、P、E2、PRL检测结果的线性、精度、互染率、可比性、抗干扰能力进行评价。结果SEROZYME—I型磁分离酶联免疫内分泌定量测定系统及其配套试剂对FSH、LH、T、P、E2、PRL检测结果的线性良好；总重复性CV〈6％，批内变异CV〈4％，批问变异CV〈12％，互染率〈3％；与RIA法同时检测20份标本，其结果经统计学分析，两者相关性良好。结论磁分离酶联免疫激素定量分析系统检测生殖内分泌六项激素重复性好，灵敏度高，快速简便，无放射性污染，有推广应用价值。

摘要： 目的:通过检测外周血中生存素来分析其对胃癌的诊断价值.方法:以反转录-聚合酶链式反应-酶联免疫(RT-PCR-ELISA)方法对胃内良性病变及胃癌患者进行对照检测外周血生存素的表达,分析外周血生存素检测对诊断胃癌的价值及其与胃癌不同临床病理因素之间的关系.结果:通过以胃内良性病变为对照,外周血生存素诊断胃癌的敏感度为60.4％,特异度为79.9％.肿瘤＞5cm及≤5cm生存素mRNA表达率分别为78.3％、46％.肿瘤漫润深度达浆膜层者生存素mRNA表达率为74.2％,远高于侵及黏膜下层及肌层的表达率(33.3％),淋巴结存在转移者生存素表达率为75.0％,也高于淋巴结无转移的生存素表达率(29.4％).结论:RT-PCR-ELICA法检测外周血生存素特异度高,可作为诊断胃癌的重要依据.生存素mRNA在胃癌患者外周血的阳性表达与胃癌肿瘤大小、癌肿浸润深度、是否淋巴结转移和临床分期均有显著相关性,所以其对于进展期胃癌可能有更高的诊断价值.

摘要： Objective Reverse transcriptase polymerase chain reaction and enzyme-linked immuncoassay(RT-PCR-ELISA)was used to assess the expression of survivin mRNA in the peripheral blood of patients with gastric cancer. We investigated it's relationship with biological behaviors of gastric cancer to discuss the possibility of being a method to cvaluate the prognosis of gastric cancer. Methods the peripheral blood was collected from 53 patients with gastric cancer. RT-PCR-ELISA was used to assess the expression of survivin mRNA in the peripheral blood of patients with gastric cancer. Calculate the dependability between the expression and the sites, size, infiltration, degree of tumor differentiation, lymph node metastasis and clinical stages. Results The expression rate of survivin mRNA in the peripheral blood of the 53 cases of patients with gastric cancer is 60. 4%(32 cases). The expression rate for the tumor size >5 cm and ≤5 cm is according to 78. 3%、46. 0%. The expression rate of patients whose plasma membrane were infiltrated is 74. 2% , which is higher than others(33. 3%). When there was lymph node metastasis, the expression rate is 75.0%, which is higher than the rate when there was no lymph node mctastasis(29. 4%). Conclusion The expression of survivin in the peripheral blood was related with the size, infiltration, lymph node metastasis and clinical stages, but was not correlated with sites or the degree of tumor differentiation. The expression of survivin in the peripheral blood might be a referenced indicator in evaluating the biological behaviors and prognosis of gastric cancer.%目的 以反转录-聚合酶链式反应-酶联免疫测定(RT-PCR-ELISA)方法,检测胃癌患者外周血中生存素基因的表达.并分析其与胃癌生物学行为的关系,探讨其作为评价胃癌生物学行为及预后检验指标的可能性.方法 收集53例胃癌患者外周血,以RT-PCR-ELISA方法检测胃癌患者外周血中生存素mRNA的表达,比较其是否与肿瘤部位、大小、浸润深度、分化程度、淋巴结转移和临床分期具有相关性.结果 53例胃癌外周血中60.4%(32例)生存素mRNA表达阳性.肿瘤>5 cm及≤5 cm生存素mRNA表达率分别为78.3%、46.0%.浸润深度达浆膜层者外周血生存素mRNA表达率74.2%,高于侵及黏膜下层及肌层的表达率(33.3%),淋巴结有转移者外周血表达率为75.0%,高于无淋巴结转移的表达率(29.4%).结论 生存素mRNA在外周血的表达与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移和临床分期均有明显相关性,但与肿瘤部位、分化程度无明显相关.外周血生存素的表达可作为评价胃癌生物学行为及预后的参考指标.

摘要： 目的 研究内皮素(ET)-1在慢性心力衰竭大鼠心肌的表达及生长激素释放肽(GHRP)的干预作用,并探讨其相关机制.方法 60只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和GHRP组,每组20只.采用腹腔注射阿霉素法建立心衰模型；检测心功能变化；HE染色观察心肌细胞形态变化；ELISA法检测心肌组织匀浆中ET-1含量.结果 心功能和心肌细胞形态与对照组比较,模型组有显著变化,而GHRP组变化不明显.心肌组织中ET-1的含量,模型组高于对照组和GHRP组(P＜0.05),而GHRP组和对照组间无明显差异(P＞0.05).结论 GHRP能降低心肌组织中ET-1的表达,具有保护和改善心功能的作用.

摘要： Objective: To investigate survivin expression in the peripheral blood of gastric cancer patients and whether it can predict the metastasis and recurrence of gastric carcinoma. Methods: Reverse transcriptase polymerase chain reaction and enzyme-linked immunosorbent assay ( RT-PCR-ELISA ) was used to assess the expression of survivin mRNA in the peripheral blood of patients with gastric cancer. The correlation between survivin expression and the clinicopathologic features was then calculated. During a follow-up period of 36 months, the correlation of time of metastasis and recurrence with survivin expression was analyzed. Results: The survivin mRNA expression rate in the peripheral blood of the 53 cases of patients with gastric cancer was 60.4% ( 32 cases ). The expression rates for tumors >5 cm and ≤5 cm were 78.3% and 46%, respectively. The expression rate among patients with infiltrated plasma membranes was 74.2%, which was higher than that in the remaining patients ( 33.3% ). With lymph node metastasis, the expression rate was 75.0%, which was higher than in those without lymph node metastasis ( 29.4% ). Conclusion: Survivin expression in the peripheral blood is correlated with the size, the presence of infiltration, lymph node metastasis, and clinical stages, but not with the primary tumor site or the degree of tumor differentiation. In addition, survivin expression can indicate that patients have a higher risk of metastasis and recurrence. Therefore, survivin expression in the peripheral blood might be a referenced indicator for evaluating the biological behavior and prognosis of gastric cancer.%目的:通过检测外周血中生存素来判断是否能预测胃癌的复发与转移.方法:以反转录-聚合酶链式反应-酶联免疫测定(RT-PCR-ELISA)方法检测胃癌患者外周血中生存素mRNA的表达,分析其与临床病理因素之间的关系.对部分患者进行36个月随访,分析复发及转移时间与外周血中生存素mRNA的表达之间的关系.结果:53例胃癌外周血中32例(60.4%)生存素mRNA表达阳性.肿瘤大小>5cm及≤5cm生存素mRNA表达率分别为78.3%、46.0%.浸润深度达浆膜层者外周血生存素mRNA表达率74.2%,高于侵及黏膜下层及肌层的表达率(33.3%),淋巴结有转移者外周血表达率为75.0%,高于无淋巴结转移的表达率(29.4%).通过随访研究发现外周血生存素阳性的患者复发及转移率明显高于阴性患者.结论:生存素mRNA在外周血的表达与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移和临床分期均有明显相关性,但与肿瘤部位、分化程度无明显相关.并可用于提示患者复发与转移风险.外周血生存素的表达可作为评价胃癌生物学行为及预后的参考指标.

摘要： [目的]建立血清中心肌肌钙蛋白I（cTnI）自身抗体的ELISA检测方法，探讨其在冠心病诊断中的临床意义。[方法]采用间接ELISA方法，检测90例冠心病患者血清，其中急性心肌梗死（AMI）患者30例，不稳定性心绞痛（UA）患者30例，稳定性心绞痛（SA）患者30例，另健康对照者30例，进行比较和统计学分析。[结果]cTnI自身抗体阳性率在冠心病各组明显高于健康对照组，AMI组阳性率高于UA组，uA组高于SA组。[结论]cTnI自身抗体的出现与心肌损伤程度显示呈正相关，对病情严重程度的判定具有一定意义。

摘要： ELISA（酶联免疫吸附测定法）检测结果是否准确可靠,除了有优质的试剂,良好的仪器,正确的操作在ELISA检测中是非常重要的一步.标本采集和保存、准确加样、温浴的温度与时间、洗涤液的浓度,均可直接影响到ELISA检测结果的准确性.对本底及假阳性产生原因的正确分析,正确对临界（CUT OFF）值附近的血清处理,对ELISA检测结果能否准确报告具有非常重要的临床意义.%Correct operating in ELISA test is very important besides high-quality reagents and good instruments.In addition,Specimen and preservation,accurate sample,water bath temperature and time,the concentration of washing directly affect the accuracy of the ELISA test result.It is also of great clinical significance for ELISA test result to correctly analyze the background and the false positive cause,handle the serum near critical value.

摘要： 目的 探讨激活素A(Activin A)在肝硬化患者外周血及肝组织中的表达水平.方法 采集临床诊断肝硬化患者80例及健康对照者60例,ELISA方法检测血清Activin A水平,免疫组织化学染色观察肝组织Activin A表达.结果 肝硬化患者ALT、AST水平均高于健康对照组,同时外周血Activin A水平升高,与健康对照组比较差异显著(P<0.01);肝硬化患者外周血Activin A水平随肝组织病理分期增加而升高.免疫组织化学染色显示,肝硬化患者肝组织Activin A表达水平也明显升高.结论 肝硬化患者外周血Activin A可能来源于肝纤维化组织,测定外周血Activin A水平有助于辅助诊断肝硬化.

摘要： 免疫分析是机体对外界或体内的异常物质产生的一种防御反应，可分为细胞免疫和体液免疫，其中体液免疫反应由抗原和抗体组成。本文介绍了免疫分析的基本原理，简述了免疫浊度测定、放射免疫分析、酶联免疫测定、免疫荧光分析、化学发光免疫测定的概况，指出放射免疫分析方法(RIA)的建立，大大提高了免疫测定的敏感度。这种标记免疫测定开拓了医学检验的新领域，应用于激素、蛋白质、感染性疾病地抗原抗体以及药物等的微量测定。

摘要： 本发明提供一种碱性磷酸酶标记检测用试剂盒，包括可与靶向物质结合的碱性磷酸酶标记物，相应底物，含抑制内源性碱性磷酸酶的抑制剂、在与上述靶向物质结合的碱性磷酸酶和底物反应时添加的辅助试剂液。免疫测定用试剂盒，包括经抗原抗体反应与待测物质结合的第一结合物，固定含第一结合物和待测物质的复合物的固相，与复合物中待测物质结合的碱性磷酸酶标记物，含有碱性磷酸酶相应底物的底物液；含有抑制内源性碱性磷酸酶的抑制剂、在与复合物中待测物质结合的碱性磷酸酶标记物的碱性磷酸酶和底物反应时添加的辅助试剂液。免疫测定的方法，包括固定步骤在固相上形成一种复合物；反应步骤让碱性磷酸酶与相应底物反应；测定步骤检测产物。

摘要： 本发明涉及用于免疫测定的具有一定直径和驻留面积的致敏的羧化物修饰的乳液微粒以及灵敏且特异的不需要样品预处理的免疫测定试剂。

摘要： 本发明提供一种碱性磷酸酶标记检测用试剂盒，包括可与靶向物质结合的碱性磷酸酶标记物，相应底物，含抑制内源性碱性磷酸酶的抑制剂、在与上述靶向物质结合的碱性磷酸酶和底物反应时添加的辅助试剂液。免疫测定用试剂盒，包括经抗原抗体反应与待测物质结合的第一结合物，固定含第一结合物和待测物质的复合物的固相，与复合物中待测物质结合的碱性磷酸酶标记物，含有碱性磷酸酶相应底物的底物液；含有抑制内源性碱性磷酸酶的抑制剂、在与复合物中待测物质结合的碱性磷酸酶标记物的碱性磷酸酶和底物反应时添加的辅助试剂液。免疫测定的方法，包括固定步骤在固相上形成一种复合物；反应步骤让碱性磷酸酶与相应底物反应；测定步骤检测产物。

摘要： 一种测定细胞DNA损伤标志物?H2AX含量的酶联免疫测定方法，其特征在于：是采用一种特异性?H2AX抗体及酶标二抗对目标蛋白?H2AX特异性夹心识别，加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有荧光产物，可根据底物的荧光值实现对?H2AX定量测定的方法。并利用该方法定量检测出由于卷烟烟气暴露而导致的细胞中?H2AX的含量变化，从而达到评价卷烟烟气基因毒性的目的。与传统有机染料相比，酶标抗体具有以下优势：酶的催化频率高,能放大反应效果，提高检测灵敏度；酶在室温下性质稳定且价格便宜，适于大量分析。酶联免疫分析方法具有快速、准确、高通量、高灵敏等优点。

摘要： 一种测定细胞DNA损伤标志物 H2AX含量的酶联免疫测定方法，其特征在于：是采用一种特异性H2AX抗体及酶标二抗对目标蛋白H2AX特异性夹心识别，加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有荧光产物，可根据底物的荧光值实现对H2AX定量测定的方法。并利用该方法定量检测出由于卷烟烟气暴露而导致的细胞中H2AX的含量变化，从而达到评价卷烟烟气基因毒性的目的。与传统有机染料相比，酶标抗体具有以下优势：酶的催化频率高,能放大反应效果，提高检测灵敏度；酶在室温下性质稳定且价格便宜，适于大量分析。酶联免疫分析方法具有快速、准确、高通量、高灵敏等优点。

摘要： 本发明属生物医药领域。公开一种测定倍他米松的直接竞争酶联免疫测定试剂盒。本发明提供倍他米松抗原合成方案，用倍他米松合成倍他米松-3-羧甲基肟，后者在碳二亚胺催化下，用N-羟基丁二酰亚胺活化，与载体蛋白结合，合成免疫原；用倍他米松与琥珀酸酐反应生成倍他米松-21-半琥珀酸酯，后者通过混合酸酐法与酶结合，合成酶标抗原。用免疫原，免疫新西兰大白兔，获得地塞米松多抗。测定时，用羊抗兔多抗(二抗)包被酶标板，二抗与倍他米松多抗结合，洗涤后加入样品或标准和酶标抗原，显色测定，就可得出结果。本发明试剂盒组成一个不均一的直接竞争酶联免疫测定系统。为食品安全，药物检测中，倍他米松的检测，提供一个快速，特异，灵敏的检测方法。

摘要： 本发明提供一种酶联免疫测定增敏剂和一步测定法。酶联免疫测定用增敏剂主要由葡聚糖、丙三醇和明胶按一定比例配制而成，测定时将液相抗原、液相酶标记抗体、特异性抗体和上述增敏剂同时加在固相载体表面，可一次性生成固相抗体-抗原-酶标记抗体复合物，由于本发明采用了增敏剂，故加速了酶联免疫反应过程，仅用20分钟即可完成酶免检测，且加样微量，检测敏，准、快、简，为临床医学疾病诊断提供了一种最新最快最准确的手段和方法。

摘要： 检测人血清中蜱传脑炎病毒IgG抗体的酶联免疫测定试剂盒及其包被重组抗原的制备方法，涉及酶联免疫测定技术领域。本发明的目的是为了解决传统的蜱传脑炎病毒抗体检测试剂盒由于所包被的抗原大多为灭活的病毒，存在与黄病毒属内其他病毒交叉反应的情况，易造成检测结果假阳性，进而影响对是否感染蜱传脑炎病毒的判断准确性的问题。本发明酶联免疫测定试剂盒将抗原包被于ELISA板底部，通过抗原抗体原理结合血清中IgG抗体，再通过辣根过氧化物酶标记的羊抗人抗体与血清中抗体结合，最终加入TMB被HRP催化显色，得出结论。本发明可获得检测人血清中蜱传脑炎病毒IgG抗体的酶联免疫测定试剂盒及其包被重组抗原的制备方法。

摘要： 本发明公开了基于酶联免疫测定人血清中AAG单克隆抗体浓度的方法，涉及酶联免疫技术领域，通过酶联免疫法（ELISA）对人血清中的AAG单克隆抗体浓度进行测定，配置相关混合人血清，洗液，稀释液，封闭液，包被液，包被抗体工作液，检测抗体工作液并进行测定操作，验证标准曲线，准确度和精密度，基质效应。本发明的基于酶联免疫测定人血清中AAG单克隆抗体浓度的方法成本低，稳定性好，具有较高的灵敏度和准确度，优化了试验条件，操作简单，步骤简化，用时较短，且能够取得较好的结果，为基础研究和临床提供服务，有助于提高临床诊治水平。

摘要： 本发明涉及一种依替米星酶联免疫测定方法，所述方法，包括使用两种不同种属的特异性依替米星单克隆抗体，命名为抗体1，抗体2，其中，将抗体1固化到载体，抗体2进行辣根过氧化物酶标记，然后利用标准曲线对依替米星含量进行检测。