转分化

摘要： 目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对加速纤维肉瘤蛋白(Raf)/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的调控作用,及对血小板源生长因子(PDGF)诱导的气道上皮细胞转分化(EMT)的影响。方法取人气道上皮细胞株16-HBE,分为对照组、PDGF不同浓度刺激组(5、25、50、100、200 ng/L),用免疫荧光法检测各组细胞EMT标志物波形蛋白(vimentin)阳性表达,选出合适的PDGF诱导浓度。将16-HBE细胞分为正常对照组、PDGF诱导组(100 ng/L)、AngⅡ不同浓度组(10^(-7)、10^(-6)、10^(-5) mol/L),用倒置显微镜检测细胞形态;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞EMT相关蛋白E-粘钙素(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、vimentin,气道纤维化相关蛋白-纤维连接蛋白(FN)、胶原蛋白Ⅳ(ColⅣ),Raf/MEK/ERK通路相关蛋白Raf、MEK及磷酸化水平(p-MEK)、ERK及磷酸化水平(p-ERK)、转化生长因子β1(TGF-β1)等蛋白相对表达水平。将16-HBE细胞分为正常对照组、PDGF诱导组、AngⅡ组(10^(-6) mol/L)、Raf/MEK/ERK通路抑制剂(sorafenib)组(10μmoL/L)、AngⅡ+sorafenib(10^(-6) mol/L+10μmol/L)组,检测细胞形态及Raf/MEK/ERK通路相关蛋白表达。结果PDGF不同浓度处理下,细胞vimentin阳性表达随浓度升高逐渐升高,并在100~200 ng/L时上升至稳定水平,选取100 ng/L为诱导浓度。AngⅡ不同浓度处理后,与正常对照组比较,PDGF诱导组细胞紧密连接减少,细胞呈长梭形等改变,E-cadherin表达降低(P0.05)。AngⅡ与sorafenib联合应用后,与正常对照组比较,PDGF诱导组细胞紧密连接减少,长梭形改变较多,Raf、p-MEK/MEK、p-ERK/ERK、TGF-β1蛋白表达升高(P<0.05)。与PDGF诱导组相比,AngⅡ组细胞紧密连接减少,长梭形改变较多,Raf、p-MEK/MEK、p-ERK/ERK、TGF-β1蛋白表达进一步升高(P<0.05),sorafenib组Raf、p-MEK/MEK、p-ERK/ERK、TGF-β1蛋白表达降低(P<0.05)。AngⅡ+sorafenib组上述指标变化与AngⅡ组相反,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论AngⅡ可通过激活Raf/MEK/ERK通路表达,促进PDGF诱导的气道上皮细胞EMT进程。

摘要： 周细胞是与内皮细胞接触并部分包埋于血管基底膜的间充质细胞。周细胞具有分化能力,其表面标志物根据不同组织、不同发育阶段、不同病理生理环境而发生变化。研究表明,周细胞是肾脏肌成纤维细胞的主要来源,多种信号通路参与了周细胞/成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞的过程。本文综述了周细胞在肾间质纤维化发病机制中的研究进展,提出了周细胞作为靶点治疗肾间质纤维化的价值。

摘要： 目的:评估和优化血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的小鼠心脏成纤维细胞(CFs)转分化模型的实验条件。方法:分别分离培养成年和新生C57BL/6小鼠的CFs,在完全培养液中培养至不同代数(P1~P4);无血清培养4 h后,更换为含不同浓度(0%、2%和5%)胎牛血清(FBS)的培养液,并给予AngⅡ(10-6mol/L)刺激不同时间(24和48 h)后,收集细胞样品;通过Western blot、细胞免疫荧光和qPCR技术检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原(Col I)和纤连蛋白(FN)的表达水平,以评估CFs的转分化情况。结果:(1)培养代数:在培养不同代数的成年和新生小鼠CFs中,只有P1 CFs在AngⅡ刺激48 h后(无血清),α-SMA、Col I和FN的mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05);(2)AngⅡ刺激时间:AngⅡ刺激24和48 h,无血清培养的成年小鼠P1 CFs中α-SMA、Col I和FN的mRNA和蛋白水平均显著上升(P<0.05);P1新生小鼠CFs在无血清培养时,AngⅡ刺激48 h后细胞中α-SMA、Col I和FN的mRNA和蛋白水平均显著上升(P<0.05);(3)培养液血清浓度:AngⅡ刺激48 h后,P1成年/新生小鼠CFs在含0%和2%FBS的培养液条件下,α-SMA、Col I和FN的mRNA和蛋白水平显著上升(P<0.05)。结论:在含0%或2%FBS的培养液中,利用AngⅡ刺激24或48 h可以促进P1成年小鼠CFs出现显著的转分化,利用AngⅡ刺激48 h可以促进P1新生小鼠CFs出现显著的转分化。以上条件可作为细胞模型中研究CFs转分化较优的实验条件。

摘要： 肝脏是人体内最大的实质器官,负责机体的代谢解毒,具有较强的再生能力,在重度损伤条件下胆管细胞能够转分化为肝实质细胞,以补充损伤的肝实质细胞,但是具体机制尚不清楚。胆管类器官在体外可长期扩增并保持向肝实质细胞分化的潜能,同时利用腺相关病毒AAV载体可实现胆管类器官高效基因操纵。我们结合AAV介导的基因操纵与胆管类器官分化模型,探究了转录因子HMGA2及CEBPD在肝脏细胞谱系转化过程中的重要功能。研究结果发现过表达HMGA2能够抑制胆管细胞向肝实质细胞的分化,而过表达CEBPD可以促进胆管细胞向肝实质细胞分化。我们的工作揭示了HMGA2和CEBPD作为新的转录调节因子,可能参与胆管细胞的谱系维持以及肝实质细胞的分化。

摘要： [目的]探究栀子苷(GE)对高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化中转化生长因子-β和Smad相关蛋白(TGF-β/Smad)通路的影响。[方法]实验分为对照组、高糖组、GE 1、10、50、100μmol/L组。对照组HK2细胞在5.5 mmol/L低糖DMEM培养液中培养,除对照组外,其余各组均于25 mmol/L高糖DMEM培养液中培养,GE 1、10、50、100μmol/L组同时添加GE,使GE终浓度分别为1、10、50、100μmol/L,干预48 h。显微镜下观察HK2细胞形态;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中纤连蛋白(FN)、E-钙黏素(E-cad)、Ⅳ型胶原(COLⅣ)mRNA水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清液中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3、磷酸化Smad3(p-Smad3)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白水平。[结果]对照组细胞呈多边形或卵圆形,分布均匀;高糖组细胞部分呈现长梭形、胞核呈梭形变;随着GE剂量的升高,细胞形态逐渐恢复正常。与对照组相比,高糖组细胞中FN、COLⅣmRNA水平,TGF-β1、p-Smad3/Smad3、α-SMA蛋白水平,上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高,细胞中E-cad mRNA水平降低(P<0.05);与高糖组相比,GE 1μmol/L组细胞中FN mRNA水平,TGF-β1、p-Smad3/Smad3、α-SMA蛋白水平,上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05),GE 10、50、100μmol/L组细胞中FN、COLⅣmRNA水平,TGF-β1、p-Smad3/Smad3、α-SMA蛋白水平,上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低,细胞中E-cad mRNA水平升高(P<0.05)。[结论] GE可以抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化中TGF-β/Smad通路。

摘要： 糖尿病是一种以高血糖为特征的代谢性疾病,其病因很复杂。目前关于糖尿病发病机制的研究更多地关注于胰岛β细胞去分化。多项研究证实,胰岛β细胞在高血糖状态下能够去分化为类似祖细胞的状态,而不是凋亡。本文综述了2型糖尿病患者发生胰岛β细胞去分化的相关研究进展,包括胰岛β细胞去分化的证据及去分化相关的转录因子和调节因子,这些发现有望阻止β细胞去分化或者促进去分化后的β细胞再分化,为2型糖尿病的治疗提供新的思路。

摘要： 目的:探讨配对盒因子6(PAX6)在血管紧张素II(Ang II)诱导的心脏成纤维细胞(CFs)转分化中的作用及其机制.方法:培养原代成年小鼠CFs,用Ang II(10-6 mol/L)建立CFs转分化模型,利用小鼠PAX6腺病毒载体感染小鼠CFs;实验分为Ad-GFP+Ctrl组(感染对照腺病毒)、Ad-GFP+Ang II组(感染对照腺病毒再给予Ang II处理)、Ad-PAX6+Ctrl组(感染过表达PAX6腺病毒)和Ad-PAX6+Ang II组(感染过表达PAX6腺病毒再给予Ang II处理).倒置荧光显微镜下观察CFs感染后荧光表达情况;采用Western blot检测CFs中PAX6、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原(Col I)、纤连蛋白(FN)和转化生长因子β1(TGFβ1)的表达;固定细胞免疫荧光技术检测α-SMA、Col I和FN的表达与分布;qPCR检测PAX6和TGFβ1的mRNA表达.结果:(1)倒置荧光显微镜下观察腺病毒载体感染CFs成功,qPCR和Western blot证明CFs中PAX6过表达成功(P<0.01);(2)在Ang II作用下,CFs中肌成纤维细胞标志物α-SMA显著升高,而过表达PAX6显著抑制Ang II诱导的α-SMA表达(P<0.01);(3)过表达PAX6显著抑制CFs中Ang II诱导的细胞外基质蛋白Col I和FN的表达与分泌(P<0.05);(4)在Ang II处理后,TGFβ1的mRNA和蛋白表达显著升高,而过表达PAX6显著抑制Ang II诱导的CFs中TGFβ1的mRNA和蛋白表达(P<0.05).结论:PAX6通过抑制TGFβ1的表达从而抑制Ang II诱导的CFs转分化及细胞外基质蛋白的表达与分泌.

摘要： 目的 通过研究大鼠骨髓内皮祖细胞转染PAX6基因后角膜内皮细胞相关特征性基因的表达,探讨其作为角膜内皮细胞移植的种子细胞的可能性.方法 采用密度梯度离心法分离出大鼠骨髓单核细胞,接种到纤连蛋白铺层的细胞皿,以EGM-2培养液选择培养,获得大鼠骨髓内皮祖细胞.通过免疫荧光染色检测CD31、CD34、CD133、LDL、UEA-1等骨髓内皮祖细胞基因表达情况;病毒转染PAX6基因进入内皮祖细胞,蛋白免疫印迹鉴定转染成功与否;实时荧光定量PCR检测AQP-1、ZO-1、ATP1A1、SNAI1、SNAI2角膜内皮细胞相关特征性基因的表达情况.结果 分离获得的细胞在选择培养基中形成类铺路石样克隆,细胞间连接紧密,荧光染色显示内皮祖细胞基因表达且PAX6基因可被成功转染,实时荧光定量PCR检测显示转染后的细胞角膜内皮细胞功能性蛋白基因表达上升,纤维化蛋白基因表达下降.结论 大鼠骨髓内皮祖细胞通过过表达PAX6基因可被诱导向角膜内皮细胞转分化,转染后的细胞具有作为角膜内皮细胞移植种子细胞的潜力.

摘要： 目的 缺氧诱导因子1α(HIF-1α)基因沉默对缺氧诱导晶状体上皮细胞(HLECs)转分化的影响.方法 取处于对数生长期的HLEC-B3细胞,随机分为常氧对照组、缺氧对照组、阴性siRNA缺氧组和HIF-1αsiRNA缺氧组.缺氧对照组、阴性siRNA缺氧组和HIF-1αsiRNA缺氧组加入终浓度为100μmol/L的CoCl2溶液中缺氧培养24 h,阴性siRNA缺氧组和HIF-1αsiRNA缺氧组缺氧处理24 h,再分别转染阴性siRNA和HIF-1αsiRNA.转染24 h后,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞HIF-1α及上皮细胞间质转化指标E-cadherin、α-SMA mRNA表达,Western blotting法检测各组细胞HIF-1α、E-cadherin、α-SMA蛋白表达.结果 与常氧对照组比较,缺氧对照组、阴性siRNA缺氧组HIF-1αmRNA及蛋白相对表达量均升高,HIF-1αsiRNA缺氧组HIF-1αmRNA及蛋白相对表达量降低(P均<0.05).与常氧对照组比较,缺氧对照组、阴性siRNA缺氧组E-cadherin mRNA及蛋白相对表达量均降低、α-SMA mRNA及蛋白相对表达量均升高(P均<0.05).与缺氧对照组、阴性siRNA缺氧组比较,HIF-1αsiRNA缺氧组E-cad-herin mRNA及蛋白相对表达量均升高、α-SMA mRNA及蛋白相对表达量均降低(P均<0.05).结论 HIF-1α基因沉默可以抑制缺氧诱导的HLECs发生转分化.

摘要： 孕前糖尿病(PGDM)可能引起许多并发症和健康问题,包括胚胎和胎儿发育过程中软骨内成骨的异常,但其具体机制仍不清楚。本研究首先证实了链脲佐菌素(STZ)诱导的E18.5PGDM小鼠较对照组生长发育受到限制,茜素红/阿利新蓝双染色显示其长骨变短,HE染色表明其股骨生长板中肥大区占比增加。

摘要： 目的:作为可注射性心肌组织工程的支架材料,OPF水凝胶心梗部位注射后具有明显的抑制纤维化、改善心室重塑的作用,然而其机制尚未明确.Cardiac fibroblasts(CF)向Myofibroblast(MF)的转分化(CFT)在心梗后的心室重塑中发挥重要作用.本研究探讨OPF水凝胶对CFT的作用及其携带细胞及生长因子修复损伤心肌的效果.rn 方法:将分离培养的CF与OPF及OPF降解产物(富马酸)体外共培养研究其对CFT的影响,并利用OPF水凝胶携带报告基因标记的iPS-CM及bFGF小鼠心梗部位移植研究其修复作用.rn 结果:OPF及富马酸均能够通过下调TGF-β介导的SRF信号来降低α-SMA的表达，从而抑制CF的转分化作用，且添加bFGF后，上述作用进一步增强。心梗移植后，OPF水凝胶能显著降低心梗部位的CFT及胶原沉积。以OPF水凝胶作为载体携带iPS-CM及bFGF注射到心梗部位后能够显著提高细胞在心梗部位滞留及存活，促进心梗区域的血管化，减少心梗面积并显著改善心梗的心脏收缩功能及心肌活性。rn 结论:OPF水凝胶通过抑制心肌成纤维细胞转分化改善心梗后的心室重塑。以其为载体携带iPS-CM及bFGF具有明显的心梗修复作用。

摘要： 目的：观察AECⅡ体外培养的生长状况及转分化过程。方法：将细胞随机分为2天、4天、6天、8天时间点，利用倒置显微镜观察细胞生长情况，记录细胞数目，绘制生长曲线；台盼兰据染法观察细胞活力；采用免疫荧光技术，共聚焦显微镜观察SP-C、水通道蛋白5(AQP5)的阳性表达。结果：细胞数目：0天、2天、4天、6天、8天的细胞数目(×105/ml)分别是4.02±0.99、10.41±0.24、27.90±1.91、27.12±0.85、26.29±1.59，单因素方差分析显示2天与0天、4天与2天细胞数目进行比较具有统计学意义。细胞活力：细胞在2天、4天、6天、8天时与4天、8天与6天比较有统计学意义。细胞凋亡：空气组在4天时所占比例最高，与2天及6天时比较具有统计学意义。结论：原代培养的ASCⅡ在培养早期增殖能力最强，细胞增殖分化能力在培养晚期减低。体外培养的ASCⅡ有向AECI转分化的能力。

摘要： 目的：探讨TGF-β1诱导皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞转分化的可能途径和调控机制。rn 方法：将小鼠皮肤成纤维细胞(野生型和Smad 3 Knockout型)分为9组：野生型FB组、野生型FB+TGF-β1组、野生型FB+SB 431542组、野生型FB+SB 431542+TGF-β1组、Smad 3 KO FB组、Smad 3 KO FB+TGF-β1组、野生型FB+SB 203580+TGF-β1组、野生型FB+PD 98059+TGF—β1组和野生型FB+SP600 125+TGF-β1组。各组细胞经同步化处理后，直接以TGF—β1刺激或经上述各激酶抑制剂预处理后再以TGF-β1刺激。收集细胞，一部分以单细胞RT—PCR检测α—SMA阳性表达百分比，另一部分细胞抽提总RNA后采用实时荧光定量RT—PCR检测α—SMA的表达水平变化。rn 结果：Smad 3KO组与SB 431542组的α-SMA表达水平和阳性百分比显著升高(Smad 3 KO FB组vs野生型FB组;野生型FB+SB 431542+TGF-β1组vs野生型FB+SB 431542组;Smad 3 KO FB+TGF-β1组vs Smad 3 KO FB组，P<0.01)，而SB 203580组和SP600125组中α-SMA表达水平和阳性百分比升高的作用则被显著抑制(野生型FB+SB 203580+TGF—β1组、野生型FB+SP 600125+TGF—β1组vs野生型FB+TGF-β1组，P<0.05)。rn 结论：在TGF—β1诱导成纤维细胞向肌成纤维细胞的转分化过程中，Smad3途径介导抑制作用，而p38/MAPK、JNK/MAPK途径则介导正向调节作用。

摘要： 在创面组织中含有丰富的EGF和TGF-β1等生长因子以及Col Ⅰ等ECM，完全具备与肾脏、角膜和肝脏等器官组织纤维化相类似的EMT发生的多种条件和因素。对临床深度烧伤创面愈合过程和病理性瘢痕标本研究显示，病理性瘢痕形成过程中表皮和皮肤附件上皮细胞向间质细胞转分化(epithelial-mesenchymal transformation，EMT)可能是异质性纤维化细胞的一个来源。

摘要： 通过研究姜黄素(curcumin，Cur)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化及分泌细胞外基质(ECM)成分的影响，探讨姜黄素在防治肾小管-间质纤维化方面可能的作用机制。方法：应用不同浓度Cur处理经TGF-β1诱导活化的HK-2细胞，通过显微镜观察细胞形态改变，免疫组化技术检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙粘蛋白(E-cadherin)的表达;应用酶联免疫吸附法(BLISA)检测细胞培养上清Ⅰ型胶原(col Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)和纤连蛋白(FN)的分泌.结果：①正常HK-2细胞表达E-cadherin，不表达α-SMA，经TGF-β1刺激后细胞表型发生转变，E-cadhcrin的表达明显减弱，α-SMA表达明显增强;⑦不同浓度Cur组与单纯TGF-β1刺激组相比α-SMA的表达有所减弱，而E-cadherin的表达增强;③不同浓度Cur抑制了Col Ⅰ、Col Ⅲ和FN的分泌，与单纯TGF-β1刺激组相比有显著性差异(P<0.05).结论：姜黄素能抑制TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞转分化及细胞外基质成分Col Ⅰ、Col Ⅲ和FN的合成，在一定程度上具有防治肾小管-间质纤维化的作用.

摘要： 目的 研究结缔组织生长因子(CTGF)在组织生长因子-发挥促转分化中的地位和作用。方法 培养人增生性瘢痕成纤维细胞，分组：(1)对照组;(2) CTGF刺激组：培养基中加入重组人CTGF (rhCTGF)，终浓度为lOng/ml;(3)TGF-刺激组：培养基中加入TGF-，终浓度为lOng/ml：(4)CTGF ASODN转染组;(5)CTGF ASODN转染后TGF-刺激组;用Western blot方法比较各组间a-SMA的表达变化，流式细胞仪检测a-SMA(+)绌胞表达率。结果 刺激48h后，CTGF刺激组与TGF-刺激组a-SMA蛋白表达明显增强(PO．05);流式细胞仪检测结果显示5组细胞a-SMA(+)细胞表达率依次为：10.76±2．81﹪、29．13±4.01﹪、28．74±4.75﹪、10.66±2．29﹪、14.29±2．92﹪。结论 CTGF在体外也能促进人增生性瘢痕成纤维细胞向肌成纤维细胞(myofibroblast，MyoF)的转分化，是TGF-发挥促纤维化作用的重要下游效应分子之一。

摘要： EMT(epithelial-mesenchymal transition)即上皮.间质转化,又称转分化.经研究其在胚胎发育、肿瘤转移及组织纤维化过程中都发挥着重要的作用.已有研究发现转化生长因子TGF-β在诱发EMT过程中起着十分关键的作用.转化生长因子(transforming growth factor beta,TGF-β)是一种多功能的多肽类细胞因子,研究其引起EMT信号的机制有助于为进一步研究奠定基础.

摘要： 目的：构建pegfpN1-BDNF真核表达载体，为体外构建基因工程细胞奠定基础。rn 方法：RT-PCR扩增人胚胎脑组织脑源性神经营养因子(BDNF)基因片段，将基因片段与pegfpNl质粒连接制成重组质粒。转化、筛选及扩增重组质粒，用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ酶切分析鉴定BDNF是否插入重组质粒。小量提取重组质粒后进行测序分析，将酶切检测和测序正确的pegfpN1-BDNF重组质粒用QIAGEN-TIP100大量提取。rn 结果：经酶切鉴定，成功地将BDNF与pegfpN1质粒连接，构建我们需要的pegfpN1-BDNF重组质粒。rn 结论：成功构建了pegfpN1-BDNF重组真核表达载体，为体外实验做好准备。

摘要： 目的：构建pegfpN1-BDNF真核表达载体，为体外构建基因工程细胞奠定基础。rn 方法：RT-PCR扩增人胚胎脑组织脑源性神经营养因子(BDNF)基因片段，将基因片段与pegfpNl质粒连接制成重组质粒。转化、筛选及扩增重组质粒，用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ酶切分析鉴定BDNF是否插入重组质粒。小量提取重组质粒后进行测序分析，将酶切检测和测序正确的pegfpN1-BDNF重组质粒用QIAGEN-TIP100大量提取。rn 结果：经酶切鉴定，成功地将BDNF与pegfpN1质粒连接，构建我们需要的pegfpN1-BDNF重组质粒。rn 结论：成功构建了pegfpN1-BDNF重组真核表达载体，为体外实验做好准备。

摘要： 目的：构建pegfpN1-BDNF真核表达载体，为体外构建基因工程细胞奠定基础。rn 方法：RT-PCR扩增人胚胎脑组织脑源性神经营养因子(BDNF)基因片段，将基因片段与pegfpNl质粒连接制成重组质粒。转化、筛选及扩增重组质粒，用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ酶切分析鉴定BDNF是否插入重组质粒。小量提取重组质粒后进行测序分析，将酶切检测和测序正确的pegfpN1-BDNF重组质粒用QIAGEN-TIP100大量提取。rn 结果：经酶切鉴定，成功地将BDNF与pegfpN1质粒连接，构建我们需要的pegfpN1-BDNF重组质粒。rn 结论：成功构建了pegfpN1-BDNF重组真核表达载体，为体外实验做好准备。

摘要： 本发明提供一种胰内分泌细胞的制造方法，该方法包括将下述(A)～(D)中的任一种基因或其基因产物导入体细胞内的导入工序：(A)与序列号:1和序列号:2中的任一个所表示的碱基序列具有85％以上的序列同源性的突变GLIS1基因或其基因产物、神经原素3基因或其基因产物、Pdx1基因或其基因产物和MafA基因或其基因产物；(B)与序列号:1和序列号:2中的任一个所表示的碱基序列具有85％以上的序列同源性的突变GLIS1基因或其基因产物、神经原素3基因或其基因产物和Pdx1基因或其基因产物；(C)GLIS1基因或其基因产物、神经原素3基因或其基因产物、Pdx1基因或其基因产物和MafA基因或其基因产物；以及(D)与序列号:1和序列号:2中的任一个所表示的碱基序列具有85％以上的序列同源性的突变GLIS1基因或其基因产物、神经原素3基因或其基因产物和MafA基因或其基因产物。

摘要： 本发明提供了一种诱导人成纤维细胞转分化为人生殖细胞的方法，包括以下步骤：S1、将人成纤维细胞贴壁培养至第二代后的细胞产物接种于人成纤维细胞染色体活化培养基中培养若干天，以进行染色体激活的诱导；S2、将步骤S1所获得的细胞进行消化后细胞产物接种于人生殖细胞诱导培养基中培养若干天，以进行生殖细胞的诱导。通过本发明所揭示的一种诱导人成纤维细胞转分化为人生殖细胞的方法，实现了在体外高效、安全地获得生殖细胞的技术效果，有效规避了因将多能性干细胞分化来的功能细胞移植回体内导致的包括致瘤性在内的风险，安全性更高，给干细胞分化技术治疗男性不育应用上临床提供了技术基础。

摘要： 本发明提供了一种利用小分子化合物体外诱导体细胞转分化为乳腺上皮细胞的方法，抑制TGFbeta R1及其相关位点的表达，实现体外诱导体细胞转分化为乳腺上皮细胞。本发明填补了利用小分子化合物诱导成纤维细胞向乳腺上皮细胞转分化技术的一个空白；为体外研究乳腺生物反应器、乳腺发育分化、乳腺癌以及成纤维细胞转分化为其他类型的功能性细胞的研究提供研究平台。

摘要： 本发明公开了一种干细胞定向分化及细胞转分化方法，包括以下步骤：步骤一：从年轻健康孕妇胎盘内提取胚胎组织，将胚胎组织放置在装有细胞培养液的培养皿内静置15min，静置后，将胚胎组织取出，将胚胎组织剪碎，获取胚胎母体细胞，将母体细胞放置在培养皿内继续培养，本发明通过采用不同分化刺激因子对胚胎干细胞进行不同分化诱导，并通过胚胎干细胞分化结果能够对不同刺激因子定向分化结果进行探究，从而能够了解胚胎干细胞在刺激因子作用下定向分化结果，实现对胚胎干细胞体外分化情况进行深层次探究，能够了解胚胎干细胞的定向分化结果和转分化结果，以便于科研人员了解胚胎干细胞的具体分化影响因素条件。

摘要： 本发明提供了一种雌性生殖干细胞转分化至功能精子的方法及应用。本发明首次提出体外诱导雌性生殖干细胞分化成单倍体精子细胞。该方法可为动物繁殖如优质奶牛的育种提供一种新策略。

摘要： 本发明提供pAd‑M3C感染大鼠胰腺导管细胞促进转分化方法。使用Biocoll分离液通过密度梯度离心分离胰岛能尽可能多的去除胰岛细胞团，使细胞得到初步分离纯化，取用去除了胰岛细胞团的管底细胞，则降低了胰岛细胞的影响；管底细胞经过40μm小过滤器筛选，进一步去除大的胰岛细胞，在培养不同时间段换用培养基a、b、c，且c中的成分烟酰胺、KGF、EGF比例和作用有利于导管细胞的成长，所获得的细胞数量和纯度都有提高；利用腺病毒（pAd‑M3C）感染胰腺导管细胞，其中加样体积经过感染力实验得到验证，使胰腺导管细胞的感染率高达80%以上，有利于后续的转分化实验。

摘要： 一种将非神经元细胞转分化为神经元的组合物及方法。公开一种诱导细胞转分化的组合物，包括Myosin抑制剂，以及异噁唑类化合物和/或其衍生物。还公开一种诱导非神经元细胞转分化为神经元的方法，包括：将非神经元细胞置于包含Myosin抑制剂的诱导培养液中培养，然后采用包含Myosin抑制剂与异噁唑类化合物和/或其衍生物的成熟培养液培养，直到得到成熟的神经元。还公开一种所述组合物在诱导非神经元细胞转分化为神经元中的用途，以及一种将受试者体内非神经元细胞转分化为神经元的方法，其包括给药受试者有效量的Myosin抑制剂与异噁唑类化合物和/或其衍生物。本申请方法简单，只需两种简单的小分子组合处理，不需通过特定基因过表达调控，并且在体内体外均可高效进行，从而简单、高效的实现神经元再生。

摘要： 本发明提供了一种使用转录因子ID4直接转分化包皮来源的间充质干细胞为精子的方法，将转录因子ID4通过转染的方式导入间充质干细胞，然后将间充质干细胞诱导培养为男性自体单倍体生殖细胞(精子)。本发明提供的方法利用转录因子ID4直接转分化从男性自体包皮培养出的间充质干细胞为男性自体的单倍体生殖细胞，获得具有男性自己遗传密码、具备受精能力的生殖细胞，为治疗生精障碍男性不育提供了一种有效的方案。

摘要： 本发明涉及生物医药领域，本发明公开了一种PD1抑制剂在制备心脏成纤维细胞转分化抑制剂中的用途，本发明通过细胞试验和动物试验发现PD1抑制剂可降低心肌梗死后成心脏纤维细胞的转分化水平。不仅为心肌梗死提供了一种治疗药物或者治疗策略，同时也为心脏成纤维细胞的转分化研究提供了一种工具药。

摘要： 本发明公开USP10基因和/或Ascl1基因在诱导成纤维细胞转分化为神经元细胞的应用及方法。本发明首先公开了USP10基因和/或Ascl1基因在诱导成纤维细胞转分化为神经元细胞的应用或在制备诱导成纤维细胞转分化为神经元细胞的产品中的应用。本发明进一步公开了诱导成纤维细胞转分化为神经元细胞的方法。本发明基于Ascl1的特性筛选得到了提高Ascl1蛋白的稳定性和对Ascl1去泛素化的USP10。将USP10基因和Ascl1基因应用于将成纤维细胞转化为神经元细胞的过程中，可高效获得GABA能神经元细胞，弥补了不能高效获得神经元细胞的不足，对于神经相关疾病的治疗具有重要的意义。