摘要:
目的 探讨朗道血清质控品作为酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清可溶性生长刺激表达基因2蛋白(soluble growth stimulation expressed gene 2 protein,sST2)室内质控物的可行性。方法 连续性倍比稀释试剂盒中的sST2标准品来确定标准值和空白。使用双抗体夹心ELISA法检测sST2浓度,结果用线性回归拟合,建立标准曲线并计算相关系数(r),确定线性范围。取朗道血清质控品中值Level 2和高值Level3进行纯水复溶,分别混合均匀后用无菌EP管分装,-20°C冷冻保存。参照中国合格评定国家认可委员会发布的《CNAS-GL03能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》,首先进行均匀性验证,从分装的中值Level 2质控品中随机抽取10管,重复检测两次,用单因素方差分析比较两次测量值;然后进行稳定性验证,随机取中值Level 2质控品6管,每管重复检测两次,将所得均值作为初始均值,分别于第3,6,9和12个月随机抽取6管,同样方法获得均值并分别与初始均值进行t检验比较。高值Level 3评价方法与Level 2相同。结果 在3.125~200.0 ng/ml范围区间,按标准品sST2的结果建立标准曲线(r=0.99)。在均匀性检验中,中值Level 2和高值Level3中的F值分别为1.932,0.519,P值分别为0.181,0.481,差异均无统计学意义(均P>0.05)。在中值Level 2和高值Level 3中sST2的初始均值分别是20.03 ng/ml,22.01 ng/ml。在中值Level 2中,第3,6,9和12个月的均值分别与初始均值进行t检验(t=0.857,0.506,0.683,1.144;P=0.412,0.624,0.510,0.279),差异均无统计学意义(均P>0.05);同样在Level 3中,t值分别为0.260,0.639,0.660,1.372;P值分别为0.800,0.537,0.524,0.200,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 在朗道血清质控品中值Level 2和高值Level 3中,sST2的浓度均较低且均匀性和稳定性好,因此二者均可以作为sST2低值质控品。