试剂盒法

摘要： 本文采用《食品安全国家标准食品中泛酸的测定》(GB 5009.210—2016)的第一法——微生物法和试剂盒法对5种婴幼儿配方乳粉和泛酸质控样品中的泛酸含量进行检测。结果表明:微生物法标准曲线相关系数为0.992 8,精密度为1.16%~2.43%,试剂盒法标准曲线相关系数为0.994 3,精密度为1.14%~2.29%。经t检验,两种检测方法对婴幼儿乳粉泛酸检测无明显差异。与国家标准微生物法相比,试剂盒法方便、快捷,检测周期短,更适于企业实验室大量实验样本的检测。

摘要： 以白及为试验材料,采用优化的CTAB法和试剂盒法提取白及叶片的基因组DNA.结果 表明:优化的CTAB法提取出的DNA检测浓度值为252.8～664.8 ng/μL,试剂盒法的检测浓度值为31.7～52.3 ng/μL.证明优化CTAB法和DNA试剂盒法都能获得基因组DNA的良好完整性和高纯度.

摘要： 选择试剂盒法、总核糖核酸(RNA)提取试剂(Trizol)法、热酚法3种方法提取酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)总RNA,根据提取效果,选用酵母破壁酶辅助破壁并进行不同菌体量优化,通过对总RNA进行浓度和纯度的分析,比较不同方法对酿酒酵母总RNA提取的影响.结果表明,试剂盒法和Trizol法不适合提取酿酒酵母总RNA,但通过添加酵母破壁酶,可以提高提取效果.热酚法适合提取酿酒酵母总RNA,但添加酵母破壁酶反而会导致RNA降解.因此,使用热酚法提取酿酒酵母总RNA是较为有效且简便的方法.

摘要： 本研究探讨了脂联素基因多态性、基因型与广西壮族人群骨质疏松症(OP)之间的关系。测定了广西壮族623人的跟骨骨密度,采集静脉血2mL,试剂盒法提取DNA。选取APN基因的5个单核苷酸序列(rs1063539、rs12495941、rs266729、rs3774261、rs710445)进行多态性分析。结果显示,广西壮族中老年男性和女性的BUA测定值、T值均随年龄增长逐渐下降。男性BUA值45岁年龄组与70岁以上年龄组间差异有统计学意义,其余年龄组之间差异无统计学意义。女性的BUA值也随年龄增长而逐步降低。同一年龄组内,45岁组、50岁组男性与女性的BUA值无差别,其余年龄组男性的BUA值均高于女性。

摘要： [目的]提高牛奶中牛DNA的分离提取效率,建立稳定的牛奶中牛DNA提取的试剂盒法.[方法]以从牧场中采集的新鲜牛奶为材料,在前期建立的牛奶中牛DNA提取方法基础上,针对消化温度(55,60,65°C)、消化时间(10,60,120,180,240 min)、质量分数20％十二烷基硫酸钠(SDS)裂解液用量(20,35,50,65,80 μL)、20mg/mL蛋白酶K用量(0,10,30,50,70 μL)等重要参数依次进行优化,通过DNA品质测定筛选最佳的DNA提取条件,建立稳定的牛奶中牛DNA提取的试剂盒方法,并用深加工的奶粉和高低温液态奶制品对试剂盒方法进行验证.[结果]不同消化温度和消化时间从牛奶中提取的总DNA、线粒体DNA(mtDNA)和核DNA(nDNA)的完整性均表现良好,但不同消化温度和消化时间的DNA质量浓度和纯度存在差异,在消化温度为60°C、消化时间为10 min、SDS裂解液用量为50μL、蛋白酶K用量为50μL时,提取的DNA品质较优,是最佳的DNA提取条件,该条件下DNA平均质量浓度为97 ng/μL,平均纯度为1.44.对优化指标后建立的试剂盒方法进行验证,结果表明该方法不仅适用于生鲜牛奶,而且还适用于液态和固态奶制品.[结论]在所获得的最佳DNA提取条件下,牛奶体细胞裂解充分、完全,所提DNA质量浓度和纯度较高,完整性较好,PCR扩增性能较强.建立的牛奶中牛DNA提取试剂盒法适用范围较广.

摘要： 本试验旨在探究不同方法提取娟姗牛乳源性外泌体的优缺点.采用差速超速离心法和试剂盒法2种提取方法对娟姗牛乳源性外泌体进行提取,通过透射电镜(TEM)、Bradford蛋白定量、免疫印迹(WB)和粒径分析(NTA)方法对2种提取方法得到的外泌体进行比较鉴定,并采用细胞毒性试验对试剂盒法提取的外泌体进行细胞毒性评估.结果显示:2种提取方法均获得了茶托样结构的囊泡,但TEM视野下试剂盒法提取的外泌体较差速超速离心法多.试剂盒法提取的外泌体蛋白浓度显著高于差速超速离心法(P<0.05).2种提取方法均能够检测到外泌体的标志性蛋白凋亡连接基因2相互作用蛋白X(ALIX)和四次跨膜蛋白(CD81);差速超速离心法提取的外泌体CD81蛋白丰度极低,且并未鉴定出标志性蛋白肿瘤敏感基因101蛋白(TSG101),但试剂盒法检测到了TSG101.2种提取方法得到的外泌体粒径分布均符合外泌体的正常粒径大小(30～150 nm).进一步通过细胞毒性试验发现,试剂盒法提取的外泌体对细胞的增殖分化几乎没有影响.因此,基于本试验条件下,试剂盒法更适用于提取娟姗牛乳源性外泌体.

摘要： 目的 建立一种检测生乳中体细胞含量的快速检测方法(试剂盒法).方法 本试剂盒法通过生物酶溶解奶样中的蛋白质,缓冲液稳定脂肪球和蛋白并改变体细胞通透性,细胞裂解液及荧光染料快速渗透进入体细胞并沾染DNA,培养过程中,染液进入DNA的双螺旋结构,与DNA结合后荧光量子产率明显提高,最后通过荧光信号探测系统捕捉荧光强度来测定生乳中的体细胞数量.结果 该方法与快速仪器法对比,相关系数达94％以上,2种方法在统计学上无显著性差异(P>0.05).与标准方法对比,针对同一样品的检测结果的Log差值小于0.25,2种方法统计学上也无显著性差异(P>0.05).对不同样品进行重复性检测,相对标准偏差均小于15％.结论 该试剂盒法具有较高的准确度和精密度,检测结果与标准方法和市售仪器快速检测法无明显差异,检测时间缩短50％,提升了检测效率.由于无需大型的检测设备及配套试剂,适合牧场和企业实验室的快速定量检测.

摘要： 目的:采用试剂盒法以及差速超速离心法提取的人牙髓细胞外泌体(hDPC-DEs),并进行鉴定与比较.方法:培养原代人牙髓细胞(hDPCs)并鉴定,收集hDPCs培养上清,分别采用试剂盒法和差速超速离心法提取hDPC-DEs,在透射电镜下进行形态学观察,利用免疫印记(Western blotting)法对外泌体表面标记蛋白CD9的表达进行检测,并通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定外泌体表面标记蛋白CD63的浓度.结果:透射电镜下试剂盒法与差速超速离心法所提hDPC-DEs均表现为典型的茶托状双层膜结构,直径在50～120nm,试剂盒组背景杂质较多,差速离心组背景较为清晰.两种方法提取的hDPCDEs特异性标志蛋白CD9均呈阳性表达.试剂盒组外泌体标志蛋白CD63的浓度高于差速超速离心组(P<0.05).结论:试剂盒法与差速超速离心法均可获得hDPC-DEs,前者操作简便,所提取的hDPC-DEs的浓度较高,但杂质可能比较多.%Objective:To identify and compare human dental pulp cells derived exosomes(hDPC-DEs) extracted by ExoQuick kit and ultra-centrifugation.Methods:Human dental pulp cells(hDPCs) were primarily cultured and identified,and the hDPC-DEs were extracted by ExoQuick kit or ultra-centrifugation.The morphology of extracted exosomes was observed under transmission electron microscopy.The expression of exosomal marker protein CD9was detected by western blotting,and the concentration of exosomal marker protein CD63was determined by ELISA.Results:HDPC-DEs obtained by ExoQuick kit and ultra-centrifugation methods showed typical saucer-like double-layer membrane structure,with the diameter of about 50-120nm under electronic microscopy.There were more impurities in ExoQuick kit group.The exosomal marker protein CD9in ExoQuick kit and ultra-centrifugation groups were positively expressed,and the concentration of the exosomal marker protein CD63 in the ExoQuick kit group was significantly higher than that in the ultra-centrifugation group(P<0.05).Conclusion:The hDPC-DEs could be successfully extracted by both ultra-centrifugation and ExoQuick kit.The latter method was easy to operate,and could obtain higher concentration of hDPC-DEs,but more impurities.

摘要： 采用纳米磁珠法对细菌基因组DNA、总RNA和质粒DNA进行提取纯化,并与试剂盒法和Trizol法提取效果进行比较,以期获得核酸最佳提取方法.结果发现,与试剂盒法和Trizol法相比,磁珠法在细菌基因组DNA和RNA提取、PCR产物检测及纯化中效率更高;而在PCR产物回收和质粒DNA的提取中,效率低于试剂盒法,质粒酶切效果与试剂盒法无差异.结果表明,纳米磁珠法相比试剂盒法和Trizol法在核酸提取纯化效果上更佳.

摘要： 为筛选出适合马铃薯组培苗的RNA提取方法,本试验以‘青薯9号’马铃薯组培苗叶片为材料,采用植物RNA提取试剂盒法(R6827-01)、CTAB法和SDS法等3种方法提取马铃薯组培苗叶片的RNA,并对其提取的RNA样品进行电泳及凝胶成像分析.实验结果表明:SDS法提取RNA的OD260/OD280比值平均值为1.367,OD260/OD230比值平均值为1.067,并且电泳条带模糊有拖尾现象,不适合马铃薯组培苗的RNA提取.CTAB法的OD260/OD280比值平均值为1.961,OD260/OD230比值平均值为2.073,并且电泳条带较为清晰,可用于马铃薯组培苗的RNA提取.试剂盒法的OD260/OD280比值平均值为1.987,OD260/OD230比值平均值为2.100,并且条带清晰亮度明显,适用于马铃薯组培苗的RNA提取.

摘要： 建立了一种快速、简单、准确测定水中氰化物的试剂盒目视比色法.探讨了缓冲液pH值和浓度、氯制剂和显色剂种类与用量等因素对显色深浅的影响.在最佳实验条件下,氰化物含量在0.001～0.5mg/L范围内与吸光度呈良好的线性关系,相关系数为0.9999.方法应用于生活污水和河涌水中氰化物的测定,加标回收率为96.0～113.0％.

摘要： 本研究分别采用CTAB法和试剂盒法,对朱顶红的嫩叶、成熟叶、花瓣、试管苗叶、试管苗鳞茎和试管苗根6种材料进行基冈组DNA提取.DNA检测结果表明,对于6种组织材料,CTAB法提取DNA的纯度和产量均较高.而对于试管苗鳞茎,则CTAB法和试剂盒法提取的DNA纯度均较高,产量也较高.

摘要： DNA分子标记在植物研究中的地位越来越受到重视,因此植物DNA有效提取也成为研究最活跃的方面之一.本综述主要阐述了DNA提取的主要应用方法:CTAB法、SDS法、高盐低pH值法、简易操作法、采用基因释放剂法以及采用试剂盒法,为初步进行DNA分子标记的科学研究者提供有效的信息.

摘要： 本发明公开了克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇一次性检测的酶联免疫检测方法，在酶标板上预包被上单克隆抗体，待检测样品中的克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺和酶标抗原竞争结合包被的单克隆抗体后，用显色剂显色，待检测样品中的克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇含量与待检测样品的百分吸光度值呈反比，与标准曲线比较即可得出待检测样品中克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺含量，专用于前述检测方法的检测试剂盒，包括酶标板、标准品溶液、浓缩酶标记物、酶标记物稀释液、显色液、浓缩洗液、终止液。本发明运用直接竞争酶联免疫技术，同时对三种瘦肉精即盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇做一次性分析检测，使用简便，特异性高，检测范围为0.1ng/mL-2μg/mL。

摘要： 本发明提供一种液体试样检测试剂盒用膜载体(3)，其是检测液体试样中的被检测物质的试剂盒用的膜载体(3)，所述液体试样检测试剂盒用膜载体(3)具备至少一个能输送液体试样的流路(2)，在流路(2)的底面设置有产生用于输送液体试样的毛细管作用的微细结构，微细结构以沿着液体试样的输送方向(d)发生变化的方式设置。

摘要： 本申请涉及生物检测技术领域，具体公开了一种ELISA试剂盒包被板用稳定剂及其制备方法、试剂盒包被板、试剂盒。ELISA试剂盒包被板用稳定剂包括水和如下质量百分比的组分：丙三醇5%‑15%，海藻糖0.5%‑1.5%，谷氨酸钠0.005%‑0.015%，硫氧还蛋白0.002%‑0.008%；其制备方法为：S1:将丙三醇、海藻糖、谷氨酸钠、水混合均匀，调节pH为7后制得混合液；S2:将硫氧还蛋白加入步骤S1中的混合液内混合均匀后即得。本申请的ELISA试剂盒包被板用稳定剂可用于ELISA试剂盒包被板的制备，其制作的ELISA试剂盒具有稳定性好、保存期长的优点。

摘要： 本发明公开了一种试剂盒，包括试剂R1、试剂R2，所述试剂R1含有：三羟甲基氨基甲烷(Tris‑HCL)缓冲液，抗牛磺酸抗体，抗甘氨胆酸抗体，葡萄糖‑6‑磷酸(G6P)；所述试剂R2含有：三羟甲基氨基甲烷(Tris‑HCL)缓冲液，甘氨胆酸‑G‑6‑PD偶联物，NADP，BSA。本发明同时公开了试剂盒的制备方法，尤其是抗牛磺酸抗体、抗甘氨胆酸抗体的制备方法。同时，本发明也公开了利用该试剂盒实现的外周血甘氨胆酸的检测方法。本发明能够封闭牛磺胆酸的干扰，检测灵敏度高达0.1ug/mL，特异性强，检测重复性高和稳定性好等优点。

摘要： 本发明公开了克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇一次性检测的酶联免疫检测方法，在酶标板上预包被上单克隆抗体，待检测样品中的克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺和酶标抗原竞争结合包被的单克隆抗体后，用显色剂显色，待检测样品中的克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇含量与待检测样品的百分吸光度值呈反比，与标准曲线比较即可得出待检测样品中克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺含量，专用于前述检测方法的检测试剂盒，包括酶标板、标准品溶液、浓缩酶标记物、酶标记物稀释液、显色液、浓缩洗液、终止液。本发明运用直接竞争酶联免疫技术，同时对三种瘦肉精即盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇做一次性分析检测，使用简便，特异性高，检测范围为0.1ng/mL-2μg/mL。

摘要： 本发明公开了一种新型冠状病毒qRT‑PCR一步法试剂盒反应液及其试剂盒和方法，包括包括：PT‑PCR反应液、酶混合液、Solution、特异性引物及探针，且Solution的配方为：(NH4)2SO4 20～40mM、吐温20 1.8E‑6～3.6E‑6、三氮化钠4.5E‑2～9E‑2、甘油0.05～0.1mM、二甲基亚砜0.07～0.14mM、牛血清蛋白1.5E‑7～3E‑7；包括含有已知ORF1ab基因或N基因、Solution配方的试剂盒；包括试剂盒的检测方法。本发明可有效降低已知基于ORF1ab基因或N基因靶标的qRT‑PCR检测技术对2019‑nCoV新型冠状病毒检测出现假阴性的情况，从而提高试剂盒诊断准确性，降低减少传染隐患、安全风险以及资源消耗。

摘要： 本申请涉及生物检测技术领域，具体公开了一种ELISA试剂盒包被板用稳定剂及其制备方法、试剂盒包被板、试剂盒。ELISA试剂盒包被板用稳定剂包括水和如下质量百分比的组分：丙三醇5%‑15%，海藻糖0.5%‑1.5%，谷氨酸钠0.005%‑0.015%，硫氧还蛋白0.002%‑0.008%；其制备方法为：S1:将丙三醇、海藻糖、谷氨酸钠、水混合均匀，调节pH为7后制得混合液；S2:将硫氧还蛋白加入步骤S1中的混合液内混合均匀后即得。本申请的ELISA试剂盒包被板用稳定剂可用于ELISA试剂盒包被板的制备，其制作的ELISA试剂盒具有稳定性好、保存期长的优点。

摘要： 提供一种液体试样检测试剂盒用膜载体(3)，其为对液体试样中的被检测物质进行检测的液体试样检测试剂盒用膜载体(3)，所述液体试样检查试剂盒用膜载体(3)具备能够输送液体试样的至少一个流路(2)，在流路(2)的底面设置有产生用于输送液体试样的毛细管作用的微细结构，在流路(2)之中设置有底面的高度水准变化的台阶。膜载体优选具有检测液体试样中的被检测物质的检测区。

摘要： 本发明提供一种液体试样检测试剂盒用膜载体(3)，其是检测液体试样中的被检测物质的试剂盒用的膜载体(3)，所述液体试样检测试剂盒用膜载体(3)具备至少一个能输送液体试样的流路(2)，在流路(2)的底面设置有产生用于输送液体试样的毛细管作用的微细结构，微细结构以沿着液体试样的输送方向(d)发生变化的方式设置。

摘要： 本发明涉及适用于免疫疗法的自然杀伤细胞培养技术，更具体而言，涉及与现有的免疫细胞培养方法相比，即便是采血后经过1天以上或极为衰弱的免疫细胞，也能够实现有效率的扩增以及激活的同时，显著增加NK细胞所占比率进行培养的免疫细胞无血清培养用培养基添加试剂盒、利用该试剂盒的免疫细胞培养方法、通过该试剂盒或培养方法获得的免疫细胞无血清培养液以及包含该培养液的化妆材料组合物。