表达系统

摘要： 乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)是工业应用中一种重要的模式菌株,具有非致病性、分泌蛋白能力强、容易分离培养等特性,是异源蛋白表达和分泌的理想宿主。高效可控的启动子是实现外源蛋白高效表达的关键因素之一。根据诱导机制,启动子可分为组成型和诱导型。本文阐述了乳酸乳球菌表达系统及其启动子结构,总结了生物信息学预测启动子及筛选克隆新启动子的方法,并对乳酸乳球菌启动子未来的研究方向进行了展望,可为深入研究启动子的结构和功能并进一步在工业上生产外源蛋白提供参考。

摘要： 【目的】对猪黏膜保护因子——血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)基因进行克隆及原核表达,为研究高表达HO-1在肠黏膜损伤中的保护作用提供技术支持。【方法】根据GenBank中公布的HO-1序列(登录号:NM_001004027.1),利用Primer Premier 6.0设计1对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增HO-1基因片段,将其与pMD19-T克隆载体连接,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆进行PCR鉴定;将载体pNCMO2与重组载体pMD19-T-HO-1进行SalⅠ和KpnⅠ双酶切,使用T4 DNA连接酶连接,利用电击转化技术将重组表达载体pNCMO2-HO-1转入感受态短小芽孢杆菌,使用IPTG进行诱导表达,应用SDS-PAGE和Western blotting分析HO-1在短小芽孢杆菌中的融合表达情况。【结果】猪HO-1基因全长897 bp,编码298个氨基酸。双酶切后在约5200和897 bp处分别观察到pNCMO2载体片段和HO-1基因片段,证明成功构建基因表达载体pNCMO2-HO-1;电转后的双酶切结果表明,在相同的位置观察到pNCMO2和HO-1片段,证明重组表达载体pNCMO2-HO-1成功导入短小芽孢杆菌。SDS-PAGE和Western blotting鉴定结果发现,在36.5 ku处出现了明显的蛋白印迹,表明成功表达了HO-1的重组蛋白,且为胞外分泌。【结论】本研究成功构建了HO-1的重组原核表达载体,pNCMO2-HO-1重组载体可以在短小芽孢杆菌中诱导表达。

摘要： 纳米抗体(nanobody,Nb)是在骆驼血清中发现的一种新型抗体,具有相对分子质量小、稳定性高、亲和力高、组织渗透性强以及可识别抗原缝隙表位、进一步改造和表达等特点.Nb筛选技术分为噬菌体展示、酵母双杂交、mRNA展示以及高通量测序和质谱分析等4种,它们都能够快速筛选到特异性Nb.对具有高度亲和力的Nb,多种表达系统均可以实现高效表达.其中:原核表达最常用,其操作相对简单、产量大、生产成本低,但要去除表达出的重组蛋白内毒素;酵母表达可以直接收集培养基上清纯化,杂蛋白含量少,但可能存在过度糖基化问题;植物宿主可以大量表达Nb,但基因操作过程繁琐,且分离纯化Nb相对困难;哺乳动物细胞生产抗体也是较常用的方式,但生产成本较高.针对每一种筛选方法和表达系统目前没有统一的评价标准,在选择时,应以实验室条件为基础,充分了解筛选对象的结构、功能和用途,根据不同目的选用.本文对Nb结构特点、筛选及表达以及在动物疫病防治中的应用展开论述,可为相关领域研究提供技术支持.

摘要： 猪圆环病毒2型(PCV2)是引起猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)的主要病原体,会破坏免疫系统,引起多种病毒或细菌的混合感染与继发感染,给养猪业造成了巨大经济损失.目前疫苗免疫仍然是防控PCVAD的有效手段,核衣壳蛋白(Cap)是主要免疫保护性抗原,因此Cap蛋白基因工程疫苗是研究的理想靶抗原,获得大量、可溶性、富有活性的PCV2 Cap蛋白是疫苗研制的关键因素.论文综述了利用大肠埃希氏菌、酵母菌、活病毒载体等体外表达系统表达PCV2 Cap蛋白的进展,为PCV2新型基因工程疫苗的研制提供依据.

摘要： 重组蛋白药物是生物药物中的核心产品,主要是通过基因工程菌来生产功能蛋白或其突变体,用于弥补体内蛋白的缺失,从而对疾病的治疗发挥关键作用.近年来,重组蛋白药物在疾病治疗中发挥作用越来越大,相关技术也发展迅速.通过综述重组蛋白药物的中上游生产流程,并重点分析了重组蛋白药物在表达系统、细胞培养、纯化和质量控制等环节的最新技术进展,展示了重组蛋白药物制备的技术提升水平,以期为国内重组蛋白药物的生产提供一定的参考依据.

摘要： 病毒样颗粒(Virus Like Particles,VLPs)疫苗通过表达病毒的结构蛋白组装形成与病毒相似的蛋白粒子结构,模拟病毒进入机体的过程,激活机体的免疫反应,从而达到抵御病毒的目的.VLPs疫苗凭借其高效安全的特性逐渐成为疫苗制备的热门选择.对VLPs疫苗的分类、优势、表达系统、组装纯化、鉴定方法、免疫通路、疫苗修饰等方面的研究进行综述,以期对VLPs疫苗的研究提供参考.

摘要： 由于成本低廉、易于规模化生产、可减少污染哺乳动物病原的风险且能对表达蛋白进行翻译后修饰等优点,植物正逐渐成为一种重要的重组蛋白生产平台,而以转基因植物作为工业与化工产品生产的天然生物反应器也越来越受关注.植物生物反应器主要有稳定表达系统和瞬时表达系统,概述了这两种不同的表达系统的优缺点及其研究进展,并阐述了植物生物反应器的发展趋势,以期为植物生物反应器的发展和应用奠定理论基础.

摘要： 成纤维细胞生长因子21是一种在代谢调节方面发挥着重要的作用的应激诱导的激素.因其实质性的改善胰岛素敏感性、血糖控制和血脂谱等的药理作用而被广泛研究.药用蛋白FGF21用于代谢性疾病的治疗,具有重要的药用价值.了获取更多的高纯度的FGF21蛋白,许多科研人员采用多种表达系统表达生产FGF21蛋白.本文就现有的表达系统进行了综述.

摘要： 本文对蛋白质抗肿瘤作用进行综述,并对人工合成抗肿瘤蛋白的改造方向进行讨论.从植物药、动物药、菌物药、海洋药及食品方面对天然来源蛋白的抗肿瘤作用进行归纳.未来人工合成抗肿瘤蛋白应同时具备:活性强、药效高、毒性小、具有靶向性的特点.

摘要： 人胰高血糖素样肽1 (glucagon-like peptide-1,GLP-1)是治疗2型糖尿病的主要药物,其长效性是一个重要指标.GLP-1化学合成工艺复杂、成本较高,因此通过基因工程获得重组长效GLP-1类似物成为目前的研究方向.此文对近年来通过基因工程获得重组长效GLP-1类似物的研究进行综述.

摘要： 竹黄菌主要寄生于箭竹属和短穗竹属竹子植物.可用于治疗虚寒胃病、风湿性关节炎、气管炎、百日咳、坐骨神经痛、跌打损伤及贫血头痛等病症.竹黄菌素主要从天然竹黄中提取,与金丝桃素结构相似,许多学者对其比较研究表明,两者具有类似的作用机理,均是通过光照激活产生活性氧从而达到治的目的,在医领域具有抗肿瘤的功能和抗HIV、HSV等病毒的功能.因在竹黄菌Shiraia sp.SUPERH-168中缺乏有效的表达系统,使得该菌仍停留在发酵优化、纯化及其医药应用领域,然而其合成竹红菌素的代谢机理研究甚少.另一方面,随着高通量技术的快速发展,竹黄菌全基因组序列已测序,合成竹红菌素代谢基因簇也相应的被注释.因此,目前有必要在竹黄菌中建立有效表达系统,为解析竹红菌素代谢途径奠定分子基础.rn 本研究运用聚乙二醇/CaCl2转化技术，在竹黄菌SUPERH-168建立了含潮霉素与绿色荧光蛋白筛选标记的慢病毒表达系统。该过程主要包括原生质体制备、聚乙二醇/CaC12转化及阳性克隆子筛选。从酶种类、酶量、酶解温度、和渗透压稳渗剂及浓度等5个方面优化原生质体制备条件。结果表明:“81.25U/ml破壁酶+5mg/mL崩溃酶+5mg/mL葡聚糖酶”酶组合，抱子菌龄15h、酶解时间3h、酶解温度30°C,酶液pH5.8、以0.6mol/L MgS04·7H2O为渗透压稳定剂制备原生质体最好，原生质体产率为5×106/g。表达质粒经聚乙二醇/CaCl2转化后，在含500μg/mL潮霉素PDA，挑选克隆子，荧光显微镜下，观测到较强的绿色荧光型号，野生菌SUPER-H168无此信号。

摘要： 家蚕杆状病毒基因表达系统是目前高效的真核表达系统之一,但目前的技术在重组病毒构建和纯化过程中存在着重组率低、空斑分析技术繁琐、花费时间长的缺点.为了较好地解决这个问题,我们借鉴国外AcNPVBac-to-Bac快速基因表达系统工作原理,利用细菌转座子的基因定位转移作用,在大肠杆菌内实现基因的转移重组,快速获得重组病毒,构建了可利用我国特色资源昆虫-家蚕的快速基因表达系统.具体的工作即对家蚕BmNPV基因组进行改造,通过同源重组的方法,将含有单拷贝数细菌F复制子、插入有细菌转座子整合靶位点、编码LacZα肽的部分DNA片段和抗性选择标记基因的基因片段重组入家蚕BmNPV基因组,替换多角体蛋白基因,获得家蚕BmNPV病毒穿梭截体BmBacmid;并利用供体质粒上的表达金和细菌转座子,在细菌体内实现外源目的基因向家蚕BmNPV基因组上的转移整合,快速完成重组BmNPV病毒的构建.本研究的科学意义在于:在理论上它突破了家蚕BmNPV表达系统中重组病毒必须在昆虫活体或昆虫细胞内产生的思路,利用细菌转座子在细菌内构建完成家蚕BmNPV重组病毒,丰富了家蚕杆状病毒表达系统的理论;在应用上,由于它具有快速简便这一突出优点,很好地解决了家蚕杆状病毒表达系统目前存在的关键问题,具有较好的应用价值,在未来生物技术产业利用家蚕作为"生物工厂"表达生产重组蛋白及后基因组时代蛋白质结构功能分析方面,有望成为一个强有力的工具.

摘要： 家蚕杆状病毒基因表达系统是目前高效的真核表达系统之一，但目前的技术在重组病毒构建和纯化过程中存在着重组率低、空斑分析技术繁琐、花费时间长的缺点。为了较好地解决这个问题。我们借鉴国外AcNPV Bac—to—Bac决速基因表达rn 系统工作原理，利用细菌转座子的基因定位转移作用，在大肠杆菌内实现基因的转移重组，快速获得重组病毒，构建了可利用我国特色资源昆虫一家蚕的快速基因表达系统。具体的工作即对家蚕BmNPV基因组进行改造．通过同源重组的方法，将含有单拷贝数细菌F复制子、插入有细菌转座子整合靶位点、编码LacZ仅肽的部分DNA片段和抗性选择标记基因的基因片段重组人家蚕BmNPV基因组，替换多角体蛋白基因，获得家蚕BmNPV病毒穿梭载体BmBacmkl；并利用供体质粒上的表达盒和细菌转座子，在细菌体内实现外源目的基因向家蚕BmNPV基因组上的转移整合，快速完成重组BmNPV病毒的构建。本研究的科学意义在于：在理论上它突破了家蚕BmNPV表达系统中重组病毒必须在昆虫活体或昆虫细胞内产生的思路，利用细菌转座子在细菌内构建完成家蚕Bm-NPV重组病毒，丰富了家蚕杆状病毒表达系统的理论；在应用上，由于它具有快速简便这一突出优点．很好地解决了家蚕杆状病毒表达系统目前存在的关键问题，具有较好的应川价值，在未来生物技术产业利用家蚕作为“生物工厂”表达生产重组蛋白及后基冈组时代蛋白质结构功能分析方面，有望成为一个强有力的工具。

摘要： 病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)由病毒衣壳蛋白或由衣壳蛋白和囊膜蛋白自我组装而成的一种多聚蛋白纳米结构.在形态和结构上与天然病毒相似, 但不含有原病毒的遗传物质,具有较好的免疫原性和安全性, 能够有效的刺激机体产生体液免疫和细胞免疫反应.它是一种比较安全的疫苗替代物,具有广阔的应用前景.自19世纪70年代,基于VLPs的乙肝病毒表面抗原VLPs (HBsAg)的第一个商品化疫苗获得许可之后,对于VLPs的研究也越来越多.到目前为止,已有30多种人和动物病毒的VLPs被成功包装.本文综述了病毒样颗粒分类、表达系统、免疫原性和研究进展，并总结了本实验室的工作：自2012年就致力于鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)病毒样颗粒的研究。利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统，表达了vvIBDV JL株VP2蛋白，经过电镜观察，VP2蛋白在昆虫细胞中自组装VLPs，本动物实验表明此VLPs能够诱导特异性的体液免疫和细胞免疫，表现出了良好的免疫原可对vvIBDV的攻击产生较好的保护作用，为研制IBD新型、高效、安全的疫苗奠定了基础，为成性IBD的有效防控提供了参考依据。

摘要： 昆虫杆状病毒表达系统是一个研究背景比较清楚、应用范围比较广泛的真核表达系统，能够对表达的重组蛋白质进行如糖基化等的翻译后修饰。目前人们的研究结果表明，昆虫的蛋白质糖基化过程要比高等动物简单的多，但昆虫能够以严格的方式表达一些功能化的糖蛋白。基于过去多年来所积累的关于昆虫蛋白质糖基化修饰的研究成果，本文对昆虫与哺乳动物的蛋白质N-糖基化修饰途径和分子机制的异同进行比较分析，同时本文也进一步讨论如何在前期人们的研究基础上，对昆虫杆状病毒表达系统的蛋白质糖基化修饰途径做些改造性工作，以期能够直接利用该昆虫杆状病毒表达系统生产人源化糖蛋白。

摘要： 对A08蛋白基因在柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段（未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子和裂殖子）的转录情况进行分析，同时以A08蛋白cDNA为模板扩增出1 083 bp的目的基因片段，将该基因连接到pGEM-T-easy载体上，经序列测定和双酶切鉴定表明为A08基因。用EcoR I和Not I酶切回收目的片段连接至用同样酶切的真核表达载体pPIC9k上，构建了重组质粒pPIC9k-A08，转化大肠杆菌TOP10后，提取质粒，经酶切鉴定正确后用Sac I将重组质粒线性化，再电转入毕赤酵母GS115菌株，G418筛选抗性重组子，经PCR鉴定正确重组子后做甲醇诱导表达。RT-PCR结果显示该基因在子孢子阶段的转录拷贝数显著高于其他发育阶段，是一个子孢子高表达基因。重组酵母诱导表达产物经SDS-PAGE检测证实，柔嫩艾美耳球虫A08基因在毕赤酵母中获得表达。Western blot初步分析表明，表达产物具有免疫学反应活性。

摘要： 利用益生乳酸菌表达外源基因已成为当前生物学研究的热点。nisin是一种对人体无害的抗菌素,可以作为食品级表达载体的筛选标记。此外,利用nisin翻译后修饰系统对生物活性多肽进行修饰可提高其稳定性。本文对乳酸菌的表达系统和修饰系统进行了综述,并涉及到了本实验室利用乳酸菌食品级表达载体表达小鼠胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)和利用nisin翻译后修饰系统对功能蛋白进行稳定性修饰的研究。

摘要： 目的：克隆HEV-ORF-2基因，构建酵母整合型表达质粒，在巴斯德毕赤酵母表达系统里表达，并对发酵工艺进行优化。rn 方法：从戊肝病毒基因库中，用PCR方法获取目的基因，克隆至表达载体pPIC9和pPICZαB，并转化至毕赤酵母宿主菌GS115，KM71H，通过实验确定最佳发酵条件，rn 结果：应用RT-PCR方法成功扩增到约1.65 kb的DNA条带。获得ORF-2 aa 113-658，ORF-2 aa 113-660的目的基因片段，在巴斯德毕赤酵母表达系统里表达。rn 结论：已成功构建了表达。HEV-ORF-2编码蛋白的巴斯德毕赤酵母工程菌，HEV ORF-2 113-660aa，HEV ORF-2 113-658aa在毕赤酵母中获得了高效、分泌性表达。

摘要： 为了探讨gga-miR-21对传染性法氏囊病病毒(IBDV)复制的影响,用PCR方法从鸡的肝细胞基因组中扩增细胞pri-gga-miR-21,定向克隆于慢病毒表达质粒pL-EGFP中,获得重组慢病毒表达质粒pL-miR-21.将pL-miR-21和3个包装质粒pLP1、pLP2和pLP/VSVG混合物共转染293FT细胞,获得含gga-miR-21基因的重组慢病毒VL+miR-21.用VL+miR-21感染DF-1细胞,经杀稻瘟菌素筛选获得了过表达gga-m iR-21的细胞株DF-miR-21,用qRT-PCR检测gga-miR-21的表达量比正常DF-1细胞提高了60％.将IBDV接种到DF-miR-21细胞,在96 h后,病毒滴度为10475 TCID50/0.1 mL,而正常DF-1细胞的病毒滴度为108.75 TCID50/0.1mL.用生物信息学方法和双荧光素酶报告系统分析验证,在IBDV基因组B片段上具有gga-miR-21的结合靶点.将IBDV感染的DF-miR-21细胞,用western-blot分析,VP1蛋白的表达量较正常DF-1细胞显著降低;用qRT-PCR分析,VP1 mRNA水平与正常DF-1细胞没有明显差异.本实验结果表明:细胞gga-miR-21可抑制IBDV的复制,其分子作用机理是在VP1基因翻译水平上(VP1蛋白的合成)而不是在转录水平上(VP1mRNA的转录)实现的.

摘要： 为了探讨gga-miR-21对传染性法氏囊病病毒(IBDV)复制的影响,用PCR方法从鸡的肝细胞基因组中扩增细胞pri-gga-miR-21,定向克隆于慢病毒表达质粒pL-EGFP中,获得重组慢病毒表达质粒pL-miR-21.将pL-miR-21和3个包装质粒pLP1、pLP2和pLP/VSVG混合物共转染293FT细胞,获得含gga-miR-21基因的重组慢病毒VL+miR-21.用VL+miR-21感染DF-1细胞,经杀稻瘟菌素筛选获得了过表达gga-m iR-21的细胞株DF-miR-21,用qRT-PCR检测gga-miR-21的表达量比正常DF-1细胞提高了60％.将IBDV接种到DF-miR-21细胞,在96 h后,病毒滴度为10475 TCID50/0.1 mL,而正常DF-1细胞的病毒滴度为108.75 TCID50/0.1mL.用生物信息学方法和双荧光素酶报告系统分析验证,在IBDV基因组B片段上具有gga-miR-21的结合靶点.将IBDV感染的DF-miR-21细胞,用western-blot分析,VP1蛋白的表达量较正常DF-1细胞显著降低;用qRT-PCR分析,VP1 mRNA水平与正常DF-1细胞没有明显差异.本实验结果表明:细胞gga-miR-21可抑制IBDV的复制,其分子作用机理是在VP1基因翻译水平上(VP1蛋白的合成)而不是在转录水平上(VP1mRNA的转录)实现的.

摘要： 与动画或声音或字符串等的表达数据相关联，终端将表达动作/状态的图标(111…)显示在图标调色板(110)上。此外，在终端的显示画面上，设置可混合显示图标(121)和字符串(122)的控制输入区(120)，用户从图标调色板(110)选择图标(111)并输入图标(121)，同时从键盘等输入字符串(122)。终端根据输入的结果，对应于图标(121)来控制动画显示区(100a)上显示的自方字符的动作/状态，同时与自方字符的动画同步显示位于图标(121)之后的字符串(122)。由此，即使各表达间的不同微妙，也可以实现迅速并且准确地可控制多种表达的表达数据控制系统。

摘要： 与动画或声音或字符串等的表达数据相关联，终端将表达动作/状态的图标(111…)显示在图标调色板(110)上。此外，在终端的显示画面上，设置可混合显示图标(121)和字符串(122)的控制输入区(120)，用户从图标调色板(110)选择图标(111)并输入图标(121)，同时从键盘等输入字符串(122)。终端根据输入的结果，对应于图标(121)来控制动画显示区(100a)上显示的自方字符的动作/状态，同时与自方字符的动画同步显示位于图标(121)之后的字符串(122)。由此，即使各表达间的不同微妙，也可以实现迅速并且准确地可控制多种表达的表达数据控制系统。

摘要： 本发明涉及一种提高CHO细胞重组蛋白表达水平的方法及其应用，表达载体、表达系统及其制备方法，属于基因工程技术领域。本发明中的方法应用CHO细胞内源miRNAs与3′‑UTR转录区互补结合来对筛选标记基因表达进行负性调节，进而提高目的基因的表达量。将miRNAs与3′‑UTR转录区克隆到筛选标记基因的下游，构建真核表达载体；然后将目的基因克隆到真核表达载体获得重组表达载体，然后将其转染细胞，获得CHO细胞表达系统，实现目的基因的高效表达。本发明的CHO细胞表达系统，可以显著提高目的基因在CHO细胞中的表达水平，实现目的蛋白在CHO细胞的高产量稳定表达。

摘要： 本发明提供了一种表达肠道病毒71型重组病毒样颗粒的表达系统，在原有内源表达盒的基础上增加了外源表达盒，通过采用不同的启动子实现两套表达盒表达水平不同，大大提高了对外源蛋白的表达能力，能够同时在一个表达系统内分别表达EV71病毒的P1前体蛋白和3CD蛋白酶、并完成自组装，最终形成均一、稳定的EV71病毒VLPs。该表达系统对于目标外源蛋白的表达能力强、产物纯度高，能够大规模制备免疫原型优异的EV71VLPs，进而可以用于优质的EV71手足口病疫苗的工业化生产；用该病毒样颗粒与其他肠道病毒的免疫原性成分联合制作多价手足口病疫苗，可以针对多种流行毒株提供广谱而全面的保护，从而有效提高对手足口病的预防效果。

摘要： 本发明提供了一种表达柯萨奇病毒6型重组病毒样颗粒的表达系统，在原有内源表达盒的基础上增加了外源表达盒，通过采用不同的启动子实现两套表达盒表达水平不同，大大提高了对外源蛋白的表达能力，能够同时在一个表达系统内分别表达CA6病毒的P1前体蛋白和3CD蛋白酶、并完成自组装，最终形成均一、稳定的CA6病毒VLPs。该表达系统对于目标外源蛋白的表达能力强、产物纯度高，能够大规模制备免疫原型优异的CA6VLPs，进而可以用于优质的CA6手足口病疫苗的工业化生产；用该病毒样颗粒与其他肠道病毒的免疫原性成分联合制作多价手足口病疫苗，可以针对多种流行毒株提供广谱而全面的保护，从而有效提高对手足口病的预防效果。

摘要： 本发明提供了一种表达柯萨奇病毒10型重组病毒样颗粒的表达系统，在原有内源表达盒的基础上增加了外源表达盒，通过采用不同的启动子实现两套表达盒表达水平不同，大大提高了对外源蛋白的表达能力，能够同时在一个表达系统内分别表达CA10病毒的P1前体蛋白和3CD蛋白酶、并完成自组装，最终形成均一、稳定的CA10病毒VLPs。该表达系统对于目标外源蛋白的表达能力强、产物纯度高，能够大规模制备免疫原型优异的CA10VLPs，进而可以用于优质的CA10手足口病疫苗的工业化生产；用该病毒样颗粒与其他肠道病毒的免疫原性成分联合制作多价手足口病疫苗，可以针对多种流行毒株提供广谱而全面的保护，从而有效提高对手足口病的预防效果。

摘要： 本发明提供了一种表达柯萨奇病毒16型重组病毒样颗粒的表达系统，在原有内源表达盒的基础上增加了外源表达盒，通过采用不同的启动子实现两套表达盒表达水平不同，大大提高了对外源蛋白的表达能力，能够同时在一个表达系统内分别表达CA16病毒的P1前体蛋白和3CD蛋白酶、并完成自组装，最终形成均一、稳定的CA16病毒VLPs。该表达系统对于目标外源蛋白的表达能力强、产物纯度高，能够大规模制备免疫原型优异的CA16VLPs，进而可以用于优质的CA16手足口病疫苗的工业化生产；用该病毒样颗粒与其他肠道病毒的免疫原性成分联合制作多价手足口病疫苗，可以针对多种流行毒株提供广谱而全面的保护，从而有效提高对手足口病的预防效果。

摘要： 本发明提供了透明质酸合酶表达系统、包含该表达系统的转化菌株以及使用该转化菌株生产透明质酸的方法，该表达系统即使在没有诱导剂的情况下也能够在非致病性菌株中合成透明质酸并进行组成型表达。

摘要： 本发明公开了Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在制备家蚕microRNA超量表达系统中的应用，家蚕microRNA超量表达系统含有重组pFastBac1载体，重组pFastBac1载体由pFastBac1载体多克隆酶切位点处依次插入红色荧光蛋白编码基因和表达家蚕microRNA的次级前体序列而得，本发明利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统作为家蚕microRNA超量表达系统能够在家蚕细胞和个体水平均实现超量表达家蚕簇microRNAs，为家蚕miRNA的功能研究提供了新的工具。

摘要： 本发明属于重组蛋白表达技术领域，具体涉及人源化细胞瞬时表达载体、表达系统及其应用。本发明构建的表达载体，引入TRE/TAP组成的反式激活蛋白元件，并且TAP作为独立表达框，相比未引入该元件的表达载体，能够成倍提高目的蛋白瞬时表达量；更进一步的，本发明将TRE/TAP组成的反式激活蛋白元件与核基质结合区元件MAR和IRES复配使用，相互之间协同增效，进一步提高目的蛋白的瞬时表达量。由此，本发明提供的表达载体和表达系统能够应用于制备蛋白类药物。