DEK

摘要： 目的 探讨DEK在乳腺癌中的表达情况和临床价值.方法 60例乳腺癌患者,术中进行肿瘤和癌旁组织(正常组织)病理取样,分别获得60份乳腺癌组织和60份癌旁组织样本作为研究样本.比较患者乳腺癌组织和癌旁组织DEK蛋白表达情况、免疫组化结果、DEK mRNA表达水平,统计不同肿瘤大小、病理分级和预后患者的DEK蛋白高表达情况,观察不同预后患者DEK蛋白表达情况.结果 乳腺癌组织DEK蛋白相对表达量为(4.92±1.02),高于癌旁组织的(1.56±0.58),差异具有统计学意义(P<0.05).乳腺癌组织DEK蛋白表达阳性率78.33％高于癌旁组织的8.33％,差异具有统计学意义(P<0.05).乳腺癌组织DEK mRNA平均表达量(4.85±1.07)高于癌旁组织的(1.14±0.42),差异具有统计学意义(P<0.05).肿瘤大小T2、T3和T4患者DEK蛋白高表达率均显著高于T1患者,差异具有统计学意义(P<0.05).病理分级Ⅱ级和Ⅲ级患者DEK蛋白高表达率均显著高于Ⅰ级患者,差异具有统计学意义(P<0.05).60例患者2年生存率为70.00％(42/60),死亡患者乳腺癌组织DEK蛋白高表达率94.44％(17/18)显著高于未死亡患者的71.43％(30/42),差异具有统计学意义(P<0.05).60例患者5年生存率为60.00％(36/60),死亡患者乳腺癌组织DEK蛋白高表达率95.83％(23/24)显著高于未死亡患者的69.44％(25/36),差异具有统计学意义(P<0.05).60例患者随访5年显示,复发或远处淋巴结转移者共28例,其乳腺癌组织DEK蛋白高表达率为89.29％(25/28)显著高于无复发和转移患者的65.63％(21/32),差异具有统计学意义(P<0.05).结论 乳腺癌患者存在肿瘤组织DEK蛋白高表达情况,而其表达水平与肿瘤大小、病理分级、预后情况存在一定联系,DEK基因具有潜在的鉴别、诊断与预后评估价值.

摘要： 目的 构建DEK基因的RNA干扰(RNAi)慢病毒表达载体,并探讨其对肝癌细胞生物学行为的影响. 方法 采用RNAi技术,根据DEK基因的干扰序列,合成Oligo DNA,退火形成双链DNA,将其克隆到酶切后的小干扰RNA表达载体pLKO.1上,构建重组慢病毒载体pLKO.1-sh hDEK,经293T细胞包装,收集病毒上清液,感染细胞.采用实时逆转录PCR (RTPCR)和免疫蛋白印迹法(Westem blot)检测人肝癌细胞Bel-7402、Huh-7、SMMC-7721和HepG2中DEK的表达及感染慢病毒的各组细胞中DEK的敲低效率.分别通过细胞计数试剂盒-8(CCK8)增殖实验、流式细胞术、划痕实验检测细胞增殖能力、克隆形成能力、凋亡及迁移能力.两组间均数比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA). 结果 酶切鉴定和DNA测序结果证实,重组慢病毒载体pLKO.1-sh hDEK1及pLKO.1-sh hDEK3构建成功.RT-PCR和Western blot结果显示,肝癌细胞Bel-7402和Huh7中DEK的表达较高,pLKO.1-shhDEK3能更有效地抑制DEK基因的表达(P＜0.05),因此选择pLKO.1-Sh hDEK3重组慢病毒感染肝癌细胞Bel-7402和Huh7进行后续的功能实验.CCK8细胞增殖实验结果显示肝癌细胞Bel-7402和Huh7感染重组慢病毒后,细胞增殖能力与空白对照及阴性对照相比减弱(P＜0.05);细胞凋亡结果显示敲低组细胞凋亡率高于空白对照及阴性对照组(P＜ 0.05);细胞划痕实验结果显示敲低组划痕愈合率低于空白对照及阴性对照组(P＜0.05),差异均有统计学意义;而空白对照及阴性对照组比较,差异无统计学意义. 结论 靶向沉默肝癌细胞中DEK的表达,能够抑制细胞增殖及迁移能力,并诱导凋亡,为进一步研究DEK基因在肝癌中的作用奠定基础.

摘要： 目的 探讨DEK与MMP-9在胃腺癌组织中的表达及临床意义.方法 收集2017年1～12月南京医科大学附属无锡人民医院手术切除的胃腺癌组织(胃腺癌组)及癌旁正常胃黏膜组织(癌旁组)标本各238例,采用免疫组化法检测两组中DEK及MMP-9蛋白的表达,分析两者与胃腺癌临床病理特征的关系,并进一步分析两者表达的相关性.结果 DEK在胃腺癌组织中的阳性率(75.6％,180/238)高于癌旁正常胃黏膜组织(45.8％,109/238) (P＜0.05);MMP-9在胃腺癌组织中的阳性率(73.5％,175/238)高于癌旁正常胃黏膜组织(52.9％,126/238)(P＜0.05);DEK及MMP-9的表达与胃腺癌患者性别、年龄均无关(P＞0.05),与胃腺癌分化程度、浸润深度及淋巴结转移均密切相关(P＜0.05).胃腺癌中DEK与MMP-9的表达呈正相关(r=0.813,P＜0.05).结论 DEK与胃腺癌的发生有关,且与胃腺癌的组织分化、侵袭及转移有关;其在胃腺癌中的作用机制可能与MMP-9有关.

摘要： 目的:探讨DNA结合蛋白果蝇Eph激酶(DEK)和NF-κB信号通路对神经胶质瘤细胞凋亡的影响及机制.方法:采用脂质体法将Control siRNA、si-DEK、pcDNA 3.1-DEK和pCDNA3.1转染神经胶质瘤细胞U87;qRT-PCR法检测人正常神经胶质细胞SVGp12、人神经胶质瘤细胞U87和U118中DEK mRNA水平;Western blot检测U87细胞中DEK、p65、Bcl-2和Bax的蛋白表达;流式细胞术检测U87细胞凋亡;应用裸鼠成瘤实验分析DEK对神经胶质瘤生长的影响.结果:与SVGp12相比,U87和U118细胞中DEK高表达.沉默DEK可促进U87细胞凋亡,抑制NF-κB信号通路,抑制裸鼠成瘤的生长;过表达DEK可抑制U87细胞凋亡,激活NF-κB信号通路,促进裸鼠成瘤的生长.结论:DEK可抑制神经胶质瘤细胞凋亡,其机制可能与激活NF-κB信号通路有关,将为临床治疗神经胶质瘤提供新的靶点.

摘要： 目的:分析卡培他滨术前和术后同步放化疗对中低位直肠癌患者血清肿瘤坏死因子相关凋亡配体(TRAIL)及原癌基因(DEK)水平的影响.方法:将100例中低位直肠癌依照随机信封法分为观察组及对照组;对照组采用手术+术后放化疗方案治疗,观察组采用术前放化疗+手术+巩固化疗方案治疗;随访30个月记录两组患者生存率;治疗前及治疗结束后6个月采用ELISA法检测黏膜组织中TRAIL及DEK水平.结果:治疗后观察组黏膜组织中TRAIL水平显著高于对照组(P<0.05),治疗后观察组黏膜组织中DEK水平显著低于对照组(P<0.05);观察组患者随访生存期明显优于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05).结论:采用卡培他滨术前和术后同步放化疗对中低位直肠癌患者治疗后可有效升高患者手术病灶部位TRAIL水平并降低DEK水平,具有较高的临床应用价值.

摘要： 目的 探讨靶向沉默DEK对肝癌细胞株增殖及细胞周期的影响.方法 常规培养人肝癌细胞株HepG2,待细胞生长至90％融合度时分为空白对照组、小分子干扰RNA (siRNA)对照组和DEK siRNA组.空白对照组细胞正常培养,不做任何处理;siRNA对照组和DEK siRNA组细胞分别在LipofectamineTM 2000脂质体介导下进行siRNA表达载体和DEK siRNA表达载体转染.应用实时定量聚合酶链反应检测HepG2细胞中DEK mRNA的表达,免疫蛋白印迹法检测HepG2细胞中DEK、CyclinD1蛋白的表达,四甲基偶氮唑盐法检测HepG2细胞增殖情况,流式细胞术观察细胞周期变化.结果 空白对照组、siRNA对照组和DEK siRNA组HepG2细胞中DEK mRNA表达分别为0.826±0.052、0.776±0.051、0.420±0.050,DEK蛋白表达分别为0.691±0.073、0.726±0.061、0.311±0.038,Cy-clinD1蛋白表达分别为0.712±0.069、0.780±0.074、0.434±0.039;DEK siRNA组HepG2细胞中DEK mRNA及DEK、CyclinD1蛋白表达均低于空白对照组和siRNA对照组(P＜0.05);空白对照组和siRNA对照组HepG2细胞中DEK mRNA及DEK、CyclinD1蛋白表达比较差异均无统计学意义(P＜0.05).DEK siRNA组转染后24、48、72、96、120 h时细胞增殖能力均低于空白对照组和siRNA对照组(P＜0.05);空白对照组和siRNA对照组各时间点细胞增殖能力比较差异均无统计学意义(P＜0.05).DEK siRNA组Go+G1期细胞所占比例高于空白对照组和siRNA对照组(P＜0.05);DEK siRNA组S期、G2 +M期细胞所占比例均低于空白对照组和siRNA对照组(P＜0.05);空白对照组和siRNA对照组G0+G1期、S期、G2 +M期细胞所占比例比较差异无统计学意义(P＜0.05).Pearson相关分析显示,CyclinD1蛋白表达与DEK mRNA和DEK蛋白表达均呈正相关(r=0.909、0.899,P＜0.05).结论 DEK siRNA可下调HepG2细胞中DEK基因表达,抑制HepG2细胞增殖,改变细胞周期分布,这一过程可能与下调CyclinD1表达有关.%Objective To study the influence of targeted silencing of DEK on the proliferation and cell cycle of human hepatoma cell lines.Methods The human hepatoma cells line HepG2 were routinely cuhured and the cells were divided into blank control group,siRNA control group and DEK siRNA group when the cells grew to 90％ tusion.The cells in blank control group were cultured normally without any treatment;the cells in siRNA control group and DEK siRNA group were transfected with siRNA expression vector and DEK siRNA expression vector mediated by LipofectamineTM2000 liposomes,respectively.The expression of DEK mRNA in HepG2 cells was detected by real-time polymerase chain reaction;the expression of DEK and CyclinD1 protein in HepG2 cells was detected by Western blot;the proliferation of HepG2 cells was detected by methyl thiazolyl tetrazolium method,and the cell cycle was observed by flow cytometry.Results The expression of DEK mRNA in the blank control group,siRNA control group and DEK siRNA group was 0.826 ±0.052,0.776 ±0.051 and 0.420 ±0.050 respectively;the expression of DEK protein in the blank control group,siRNA control group and DEK siRNA group was 0.691 ± 0.073,0.726±0.061 and 0.311 ±0.038 respectively;the expression of CyclinDl protein in the blank control group,siRNA cuntrol group and DEK siRNA group was 0.712 ± 0.069,0.780 ± 0.074 and 0.434 ± 0.039 respectively.The expressions of DEK mRNA,DEK protein and CyclinD1 protein in DEK siRNA group were significantly lower than those in the blank control group and siRNA control group (P ＜ 0.05);there was no statistic difference in the expression of DEK mRNA,DEK protein and CyclinD1 protein between the blank control group and siRNA control group(P ＜0.05).The proliferation ability of HepG2 cells in DEK siRNA group after transfection of 24,48,72,96,120 h was significantly lower than that in the blank control group and siRNA control group(P ＜0.05);there was no statistic difference in the proliferation ability of HepG2 cells between the blank control group and siRNA control group at each time point(P ＜ 0.05).The proportion of G0 + G1 phase cells in DEK siRNA group was significantly higher than that in the blank control group and siRNA control group(P ＜ 0.05);the proportions of S phase and G2 + M phase cells in DEK siRNA group were significantly lower than those in the blank control group and siRNA control group(P ＜ 0.05);there was no statistic difference in the proportion of G0 + G1 phase,S phase and G2 + M phase cells between the blank control group and siRNA control group (P ＜ 0.05).The result of Pearson correlation analysis showed that the expression of CyclinD1 protein was positively correlated with the expression of DEK mRNA and protein(r =0.909,0.899;P ＜ 0.05).Conclusion DEK siRNA can inhibit the proliferation of HepG2 cells,and change the cell cycle distribution through down regulating the expression of DEK gene in HepG2 cells.This process may be related to the down regulation of the expression of CyclinD1.

摘要： 目的 阐明原癌基因DEK在结直肠腺癌(CRC)发展过程中及预后中的作用.方法 应用免疫组化染色,检测109例CRC及其癌旁正常肠粘膜组织、12个转移淋巴结标本中DEK蛋白的表达.卡方检验分析DEK表达与临床病理因素的关系,Kaplan-Meier生存曲线计算生存率,Cox分析评估各指标与患者生存期之间的关系.结果 结直肠癌、癌旁正常肠粘膜组织、转移淋巴结内DEK蛋白阳性表达率分别为53(48.6％)、10(9.2％)和8(66.7％),DEK蛋白在结直肠癌中的表达与肿瘤大小(P=0.029)、组织分化程度低(P=0.009)、有淋巴结转移(P=0.006)、浆膜侵犯(P=0.031)、高分期(P=0.010)及低5年生存率(P=0.025)呈正相关.进一步分析显示年龄、肿瘤分级、肿瘤大小、浆膜转移、分期、DEK阳性表达均与患者生存率明显相关,而且DEK表达与组织分级、浆膜侵犯、淋巴结转移共同影响CRC的预后,肿瘤分期联合DEK表达影响CRC的5年生存率.结论 检测结直肠癌组织中DEK蛋白的表达对其诊断及预后有一定的参考价值,有望成为结肠癌靶向治疗的分子靶点.

摘要： 为了研究长链非编码RNA-SchLAP1在结直肠癌(CRC)患者血清中的表达及临床意义,收集CRC患者血清标本60例、 健康人血清标本20例,利用RT-PCR方法检测SchLAP1和DEK的表达情况,分析二者与CRC患者临床病理学参数及生存期的相关性.结果显示,SchLAP1和DEK在CRC患者血清中的表达水平均明显高于健康人群;SchLAP1高表达率与临床分期明显相关,而DEK高表达与组织分化程度及临床分期明显相关,两种基因的高表达率经Spearmans检验具有明显相关性;SchLAP1和DEK同时高表达的患者5年生存率和无瘤生存率明显低于单独一种表达或两种均不表达者.因此,检测血清中SchLAP1和DEK基因的表达对评估CRC预后均有一定的临床意义,二者同时检测时价值更明显.

摘要： 目的:探讨DEK在乳腺癌中的表达和临床意义.方法:收集628例乳腺癌患者的临床病理标本,采用Real-time PCR、免疫组化染色及蛋白印迹法检测乳腺癌和癌旁组织中DEK的表达,分析DEK与乳腺癌临床病理参数及预后的关系.结果:DEK在乳腺癌组织中的表达显著高于癌旁组织,其与乳腺癌病理分级、淋巴结转移、远处转移、肿瘤大小相关(P均＜0.01).此外,DEK蛋白高表达的乳腺癌患者的OS和DFS比DEK低表达的患者差.DEK蛋白高表达在早期、中晚期均对乳腺癌预后的判断具有评估价值,高表达的DEK乳腺癌患者与DEK蛋白低表达患者相比,总生存及无病生存时间均明显减少(P＜0.001).74.30％(185/249)乳腺癌远处转移病例表现出DEK高表达,53.83％(204/379)的非远处转移例表现出DEK高表达(P＜0.001).结论:乳腺癌中DEK基因高表达与远处转移显著相关.乳腺癌中DEK基因高表达与不良预后显著相关.DEK基因表达情况是评估乳腺癌预后的独立指标.DEK基因高表达与化疗耐药有一定的相关性.DEK基因是潜在的预测乳腺癌患者预后的一项生物标志物.

摘要： 本发明涉及类风湿性关节炎药物研究领域，特别是指一种特异性结合DEK蛋白的核酸适配体及其应用。本发明提供的核酸适配体，在保留与DEK蛋白高亲和力结合的基础上，稳定性显著提高。该适配体可以通过与DEK蛋白结合抑制中性粒细胞形成NETs的能力，从而抑制炎症发生。本发明所述的核酸适配体具有广阔的应用前景，有望成为治疗类风湿性关节炎的新型核酸分子，在临床应用上具有巨大的潜力。

摘要： 本发明公开了DEK48基因在调控玉米籽粒发育中的应用，属于基因工程技术领域。本发明公开的DEK48基因在调控玉米籽粒发育中的应用，完成了DEK48基因的克隆，并利用基因编辑和等位测验方法验证了该基因的功能，研究结果为该基因在玉米产量和品质改良中的应用奠定了基础。

摘要： 本发明公开了一种用于DEK印刷机的自动支撑机构，包括：主体、磁铁座、磁铁、旋转电机、螺杆、勾板、抽拉板、支撑杆、弹簧、位置传感器。通过上述方式，本发明一种用于DEK印刷机的自动支撑机构，通过使用多个支撑杆里对各种电路板进行精准稳定的支撑，满足不同电路板的使用需求，还可以降低生产成本和人员的维护成本。

摘要： 本发明公开了一种DEK印刷机配套轨道自动调整宽度的方法，包括：在DEK控制系统中设置多组轨道宽度数据，将DEK控制系统与多条送料轨道信号连接，DEK印刷机抓取当前宽度数据并发送至第一送料轨道；第一送料轨道通过无线模块将当前宽度数据发送至第二送料轨道，第二送料轨道通过无线模块将接收的当前宽度数据发送至第三送料轨道，以此类推直至将当前宽度数据传送至最后一条送料轨道；多条送料轨道为可以调节滑轨宽度的PCB板送料轨道，包括可调节的动导轨和驱动动导轨滑移的丝杆和马达；当送料轨道的宽度调节为与当前宽度数据一致后，DEK印刷机开始印刷操作。本发明自动下板的控制方法，智能化程度高，提高生产效率。

摘要： 本实用新型公开了一种用于DEK印刷机的自动支撑机构，包括：主体、磁铁座、磁铁、旋转电机、螺杆、勾板、抽拉板、支撑杆、弹簧、位置传感器。通过上述方式，本实用新型一种用于DEK印刷机的自动支撑机构，通过使用多个支撑杆里对各种电路板进行精准稳定的支撑，满足不同电路板的使用需求，还可以降低生产成本和人员的维护成本。

摘要： 本实用新型属于丝网印刷机技术领域，且公开了一种DEK蓝色擦拭结构，包括两个固定板，两个所述固定板之间分别安装有固定杆和回收辊，且两个固定板之间位于固定杆和回收辊之间的位置处连接有蓝色擦拭本体，所述蓝色擦拭本体的侧壁开设有容纳槽，所述容纳槽的内部安装有调节组件，所述固定杆的外壁套设有擦拭布卷筒，两个所述固定板远离固定杆的一侧均固定有固定框，本实用新型通过第一弹簧、夹环和固定旋钮等结构的配合，使得夹环能够夹紧固定杆，从而可将固定杆的端部紧固在固定框内，同时当需要更换擦拭布卷筒时可快速抽出固定杆，进而便于更换不同长度的擦拭布卷筒，操作简单方便，提高了装置的实用性。

摘要： 本实用新型属于丝网印刷机技术领域，且公开了一种DEK擦拭装置，包括蓝色擦拭骨架，所述蓝色擦拭骨架的顶部开设有卡槽，所述卡槽的内部安装有卡条，且卡槽的内壁开设有第二腔槽，所述卡条的侧壁安装有两个胶条，且卡条的侧壁位于两个胶条之间的位置处开设有与第二腔槽相匹配的第一腔槽，所述卡槽的内壁一端开设有第一螺孔，本实用新型通过将卡条插入卡槽，使胶条能够固定在蓝色擦拭骨架上，同时可将滑轴插入限位槽内，从而将滑轴固定在蓝色擦拭骨架上，以便更换不同孔径的喷孔，通过安装不同类型的胶条与滑轴，可实现各种规格的组合，使用灵活多变，同时喷孔堵塞时无需拆下蓝色擦拭骨架，只需更换滑轴，大大降低了经济成本。

摘要： 本发明涉及一种扩增检测玉米dek10基因用分子标记的特异性引物组及其应用。该特异性引物组中扩增该dek10基因左侧DNA片段的一对特异性引物AC204.28的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：TGACGATGGTCCTTGATTCT；反向引物从5′端至3′端为：CCGTGGTCCGTAGCTC；扩增该dek10基因右侧DNA片段的一对特异性引物GM168.7的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：GTTTCACTTTCTACCCTCGC；反向引物从5′端至3′端为：ATTAATTAAGAACTGCAGCAGGA。利用这两对特异性引物组能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定，检测杂交育种子代各单株中dek10基因的存在与否以及杂合或纯合状态。这种检测方法的准确性高，操作简单，为利用dek10基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。

摘要： 本发明涉及一种扩增检测玉米dek33基因用分子标记的特异性引物组及其应用。该特异性引物组中扩增该dek33基因左侧DNA片段的一对特异性引物AC208.4的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：CTACAGGAAGAGCACAAGCG；反向引物从5′端至3′端为：GGCAGAAGAACGACAAGGAA；扩增该dek33基因右侧DNA片段的一对特异性引物AC211.14的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：AAATCAACGGGGAGAGCCG；反向引物从5′端至3′端为：GGTCGGACACACATTGGTTA。利用这两对特异性引物组能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定，检测杂交育种子代各单株中dek33基因的存在与否以及杂合或纯合状态。这种检测方法的准确性高，操作简单，为利用dek33基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。

摘要： 本发明涉及一种用于检测玉米Dek6基因的特异性引物及其应用。该特异性引物扩增dek6基因DNA片段的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：TGGCATACATCCCACTACAGAGCA；反向引物从5′端至3′端为：ATGATCTGAGCACAACGATCTCCGA。利用这个与Dek6基因完全连锁的分子标记能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定，检测杂交育种子代各单株中Dek6基因的存在与否以及杂合或纯合状态。这种检测方法的准确性高，操作简单，为利用Dek6基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。