荭草苷

摘要： 目的探讨荭草苷调控Wnt/β-catenin信号通路对小鼠七氟烷麻醉手术后认知功能及大脑β淀粉样蛋白、微管相关蛋白Tau蛋白水平的影响。方法将成年雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组,麻醉手术组,荭草苷低、中、高剂量组,高剂量荭草苷+Wnt/β-catenin信号通路抑制剂(IWR-1)组,对照组不做处理,其余各组在七氟烷麻醉后行腹腔探查术,低、中、高剂量荭草苷组分别于术前1 h经腹腔注射5、10、20 mg/kg荭草苷,高剂量荭草苷+IWR-1组于术前1 h经腹腔注射20 mg/kg荭草苷和5 mg/kg IWR-1。对照组、麻醉手术组腹腔注射同剂量生理盐水。采用Western印迹检测各组海马Wnt/β-catenin信号通路水平及β淀粉样蛋白、磷酸化Tau蛋白水平;Morris水迷宫实验检测各组逃避潜伏期、穿越平台次数和目标象限游泳时间;qRT-PCR检测各组海马白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组海马IL-6、TNF-α水平。结果与对照组相比,麻醉手术组海马Wnt3a及β-catenin水平、穿越平台次数和目标象限游泳时间明显降低,β淀粉样蛋白、磷酸化Tau蛋白水平、逃避潜伏期、IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.05);与麻醉手术组相比,低、中、高剂量荭草苷组海马Wnt3a及β-catenin水平、穿越平台次数和目标象限游泳时间显著升高,β淀粉样蛋白、磷酸化Tau蛋白水平、逃避潜伏期、IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.05);与高剂量荭草苷组相比,高剂量荭草苷+IWR-1组海马Wnt3a及β-catenin水平、穿越平台次数和目标象限游泳时间明显降低,β淀粉样蛋白、磷酸化Tau蛋白水平、逃避潜伏期、IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.05)。结论荭草苷通过调控Wnt/β-catenin信号通路,对小鼠七氟烷麻醉手术后认知功能及大脑β淀粉样蛋白、Tau蛋白水平具有一定影响。

摘要： 目的:建立同时测定线叶金雀花及其制品中异荭草苷、荭草苷和阿司巴汀3种黄酮类成分含量的一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single-marker,QAMS)。方法:采用高效液相色谱法,以乙腈-醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱,以异荭草苷为内参物,建立其与荭草苷和阿司巴汀的相对校正因子(relative correction factor, F),并对方法进行验证;同时分别采用QAMS法和外标法计算线叶金雀花及其制品中3个成分的含量,比较2种测定方法所得结果的差异,验证QAMS法的准确性和可行性。结果:3个成分在线性范围内线性关系良好,R;>0.999,重复性RSD值均小于3%,回收率在97.4%~101.8%之间;该方法在不同实验条件下均有良好的重复性(RSD0.05)。结论:建立的QAMS法简便可行、准确可靠,可作为线叶金雀花及其制品中多指标质量控制方法。

摘要： 目的考察金莲花中荭草苷调控PI3K/Akt通路对脑缺血再灌注大鼠的保护作用。方法选用健康SPF雄性SD大鼠,使用线栓法制备大鼠脑右侧中动脉阻塞(MCAO)模型,将制备成功的大鼠随机分为I/R组、荭草苷组、荭草苷+LY294002组和LY294002组、假手术组作对照组。荭草苷给药组于术后1 h和12 h腹腔注射6.48μmol/kg荭草苷溶液2次,荭草苷+LY294002组和LY294002组于术前24 h和30 min腹腔注射2.60 mg/ml的LY294002溶液2次;再灌注24 h后,采用Zea-Longa评分法对大鼠进行神经功能缺损评分,TTC法测定大鼠脑梗死体积和脑半球肿胀度,western blot法测定大鼠缺血侧脑组织线粒体中LC3和BNIP3蛋白和胞浆中p-Akt和Akt蛋白表达水平。结果与模型组比较,荭草苷能明显降低大鼠脑梗死体积和神经功能缺损评分以及脑半球肿胀度(P<0.01);与荭草苷组比较,给予抑制剂LY294002干预后,荭草苷对MCAO大鼠的脑保护作用减弱,表现为大鼠脑梗死体积和神经功能缺损评分以及脑半球肿胀显著增加(P<0.05)。Western blot结果显示,与I/R组比较,荭草苷组大鼠LC3和BNIP3蛋白水平明显降低(P<0.05或P<0.01),p-Akt的相对表达量显著增加(P<0.01);与荭草苷组比较,荭草苷+LY294002处理组大鼠LC3和BNIP3蛋白表达明显增加(P<0.05),p-Akt相对表达量显著降低(P<0.05)。结论荭草苷对脑缺血再灌注大鼠脑保护作用可能是通过激活PI3K/Akt信号通路抑制脑缺血再灌注大鼠线粒体自噬过度激活来实现的。

摘要： 通过显微鉴别、薄层鉴别和含量测定试验对不同来源的金莲花药材质量控制进行研究。对不同来源金莲花粉末显微特征进行观察,以确定粉末显微鉴别特征;以主要活性成分牡荆素和荭草苷为指标,对不同来源的金莲花药材进行薄层鉴别和含量测定;初步确定了金莲花药材的粉末特征,建立了薄层定性鉴别和含量测定方法,8个不同来源的金莲花样品中,荭草苷含量为0.463%~0.933%,牡荆素含量为0.192%~0.283%。结果表明:薄层和显微鉴别可以很好地对金莲花药材进行定性,含量测定中牡荆素较稳定,可用于金莲花质量控制,而荭草苷含量差异较大,有待进一步增加样本量,才能制定合理的限度。

摘要： 目的 随着现代中药的发展,以"物质基础基本清楚"、"作用机制基本清楚"为原则的组分中药研宄成为新的热点,初步建立了"标准组分、组效关系、组分配伍、优化设计"的组分中药研发模式.本研宄以荭草苷为关键成分进行组分设计,探寻"试验设计-建立模型-多目标优化"的组分优化方法,探究"以荭草苷为关键成分的组合药物比单个成分在心肌缺氧/复氧损伤(MIRI)模型上的保护作用更好,且组合药物抗MIRI作用机制与调控自噬相关"的假说,为组分优化研究提供方法学上的参考及实验依据.方法 研究前期通过筛选条件:①黄酮类成分;②与荭草苷共同存在在同一植物中;③有抗氧化、抗炎等相关药理作用,选出槲皮苷、牡荆素、槲皮素、木犀草素、异荭草素5个成分,采用CCK-8法检测各成分对H9c2细胞存活率的影响,采用三气培养箱混合气体法建立心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,通过CCK-8法和LDH法研究各成分对H9c2缺氧/复氧损伤细胞存活率、损伤率的影响.通过均匀设计得到荭草苷、槲皮苷、牡荆素的不同配比组合,利用CCK-8法和LDH法检测各配比对H9c2缺氧/复氧损伤模型细胞存活率和损伤率的影响;检测培养基中NO含量,利用R语言建立逐步回归模型,基于模拟退火算法理论,用Python编程解出当综合药效最佳时各成分的给药浓度,即最佳配比组合OQV-e,对OQV-e进行药效学实验验证,通过Western印迹法检测H9c2细胞内LC3,Beclin-1,p-JNK和JNK的蛋白表达水平,评价最佳配比对缺氧/复氧损伤H9c2细胞内JNK通路及细胞自噬的影响.结果 ①荭草苷(0～200μmol·L-1),槲皮苷(0～200μmol·L-1),牡荆素(0～80μmol·L-1),异荭草苷(0～200μmol·L-1)孵育36 h内对H9c2细胞增殖无明显影响;除异荭草苷外,荭草苷、槲皮苷、牡荆素均能显著性下调细胞损伤率.②OQV-e能显著提高H9c2心肌细胞存活率,降低细胞损伤率,降低NO含量,且OQV-e比其他单个成分降低细胞损伤率效果更明显(P<0.05).③与模型组相比,OQV-e的p-JNK/JNK的比值降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著性降低,Beclin-1的表达水平明显升高(P<0.05).结论 ①结合文献调研与初步药效实验结果,选择荭草苷、槲皮苷、牡荆素进行组合药物设计;②采用均匀设计为试验设计方法,以H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤为实验研究模型,逐步回归分析为建模准则,模拟退火算法为计算理论,计算出最佳配比组合OQV-e,即荭草苷12.55μmol·L-1,槲皮苷39.99μmol·L-1,牡荆素19.99μmol·L-1.③OQV-e抗MIRI可能是通过抑制JNK信号通路,抑制过度自噬,进而达到保护缺氧/复氧损伤心肌的目的.

摘要： 目的 探究荭草苷对脊髓损伤的作用及潜在机制.方法 建立氧糖剥夺模型及脊髓损伤大鼠模型,通过CCK-8检测荭草苷对原代神经元是否具有细胞毒性.在氧糖剥夺模型中,采用了实时荧光定量PCR、蛋白印迹、免疫荧光染色,并对脊髓损伤大鼠的脊髓切片进行免疫荧光实验,共同探究荭草苷对轴突再生以及微管稳定的影响.最后,通过BBB量表评分、斜板实验评分验证其促进脊髓损伤大鼠运动功能恢复的作用.结果 CCK-8检测表明,荭草苷在0～50 μmol/L浓度之间对原代神经元无细胞毒性作用(P＞0.05).体外实验发现,荭草苷可显著上调Nefh、GAP43等轴突再生关键蛋白的mRNA和(或)蛋白表达,并使轴突长度增加,而且在上调乙酰化微管蛋白表达的同时降低酪氨酸化微管蛋白的表达,增加A/T比值(P＜0.05,P＜0.01).脊髓切片的免疫荧光结果与体外实验相符.在脊髓损伤大鼠中,荭草苷亦明显增加了BBB与斜板实验评分(P＜0.05,P＜0.01).结论 荭草苷可调节微管稳定以激活轴突内源性生长潜力,并改善脊髓损伤大鼠运动功能,为脊髓损伤治疗提供了新策略.

摘要： 目的建立HPLC方法同时测定金莲清热颗粒中牡荆苷和荭草苷的含量。方法采用phenomenex-C1800G-4435-E0色谱柱(250×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸(14∶86)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温25°C,检测波长340 nm。结果金莲清热颗粒中牡荆苷线性范围为7.26~58.08μg/mL(r=0.9999),平均回收率(n=6)为98.5%,RSD为1.62%;荭草苷线性范围为33.77~270.12μg/mL(r=0.9998),平均回收率(n=6)为99.0%,RSD为1.37%。结论所建立含量测定方法简便、准确、高灵敏度,能在金莲清热颗粒的质量控制中发挥作用。

摘要： 为建立适宜于宁夏南部山区发展的金莲花人工种植技术体系,综合运用系统观察及超高效液相色谱分析法对金莲花种植过程中育苗方式、移栽方式、种植密度、施肥方式、主要有效成分含量积累规律等进行研究,以探索金莲花适宜栽培技术。结果表明:不同育苗及移栽方式对金莲花幼苗生长存在显著影响,其中8月中旬采用起垄覆膜移栽金莲花穴盘苗,幼苗生长情况最佳,成活率达到98.3%;不同种植密度对金莲花植株生长及产量有显著影响,其中株行距采用30 cm×30 cm种植产量最高,达到22.3 kg·667 m-2;不同施肥方式对金莲花植株生长及产量存在显著影响,其中适时喷施叶面肥可显著提高产量;全开期金莲花干重与有效成分含量最高,为其适宜采收时期。金莲花人工种植技术的建立,对推动宁夏南部及周边地区金莲花标准化、规模化种植发展具有重要意义。

摘要： 目的:建立中成药金莲清热胶囊的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法对金莲清热胶囊中荭草苷、牡荆苷和毛蕊花糖苷进行含量测定.色谱柱采用Welch(月旭)C18(4.6mm×250mm,5μm),柱温:30°C,流动相A为乙腈,流动相B为0.2％冰醋酸溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为340nm.结果:荭草苷线性范围为0.100 8～0.403 2mg.mL-1 (r=0.999 6),加样回收率96.9％,RSD为1.30％;牡荆苷线性范围为0.0805～0.3220mg·mL-1 (r=0.999 7),加样回收率95.6％,RSD为1.73％;毛蕊花糖苷线性范围为0.006 2～0.024 8mg·mL-1(r=0.999 6),加样回收率为88.9％,RSD为2.76.结论:该方法准确、快捷、重复性好、简单易行,可用于中成药金莲清热胶囊的质量控制.

摘要： 目的:从药用植物木豆中分离纯化特异性产荭草苷的内生真菌,扩大荭草苷的药源.方法:采用组织块分离法分离木豆根内生真菌,利用HPLC法和LC-ESI-MS法对内生真菌的发酵产物进行鉴定,并通过形态观察及ITS-rDNA法对特异性产红草苷的内生真菌进行种属鉴定.结果:内生真菌RFF可特异性产红草苷,菌落呈现白色,短绒毛状,分生孢子呈弯曲镰刀,孢子有2～3隔;ITS序列与Fusarium solani相应序列的相似性为100％.结论:从药用植物木豆中分离到一株特异性产荭草苷的内生真菌RFF,鉴定为腐皮镰孢菌(Fusarium solani).

摘要： 目的：建立同时测定复方西羚解毒丸中荭草苷、异荭草苷、牡荆苷和胡薄荷酮的方法,为完善现有质量标准提供科学依据. 方法：依利特Hypersil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);以甲醇(A)-0.1％冰醋酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱;体积流量1.2mL/min;检测波长分别为340、340、340、252nm. 结果：复方西羚解毒丸4个成分荭草苷、异荭草苷、牡荆苷和胡薄荷酮进样量分别在0.0328～0.6560μg(r=0.9996)、0.0262～0.5240μg(r=0.9997)、0.0206～0.4120μg(r=0.9992)、0.0370～0.7400μg(r=0.9998)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.7％、98.0％、96.9％、99.1％,RSD(n=6)分别为1.2％、1.1％、0.8％、0.7％. 结论：本方法简便、快捷,结果准确,重复性好,可应用于复方西羚解毒丸的质量控制.

摘要： 目的:建立金莲花中药效组分荭草苷和牡荆苷的色谱鉴定方法.方法:采用TLC 和HPLC 法进行定性和定量分析.结果:①TLC 鉴定法:聚酰胺薄膜;用氯仿-丙酮-冰乙酸-无水乙醇(4︰1︰3︰2)展开;喷1％三氯化铝乙醇试液显色后,在紫外光(365nm)灯下检视.②HPLC 含量测定法:色谱柱为C18 ODS2;流动相为0.35％磷酸水-乙腈(82︰18);检测波长为345nm.结论:通过对10 批金莲花的分析,可知本文建立的鉴定方法是可行的.

摘要： 本发明涉及一种分离制备碳苷黄酮类异构体的方法，特别涉及一种利用动态轴向压缩柱大规模分离制备荭草苷和异荭草苷的一种方法，该异构体由竹叶中提取获得。此方法解决了采用传统的分离制备碳苷黄酮类异构体所存在的成本高、收率低、生产周期长等问题。包括以下步骤：1）竹叶提取粗品溶解于水中，超声处理，滤膜过滤，取滤液待用；2）使用制备液相色谱系统对过滤后的粗品进行分离纯化；3）将对应谱带洗脱液中的溶剂蒸干，即可得到色谱纯为98.5%的荭草苷和异荭草苷单体。本发明所述的分离纯化方法适合于工业化分离制备碳苷黄酮类异构体。

摘要： 一种利用协同调控策略提高重组菌产异荭草苷产量的方法，以携带碳苷糖基转移酶Gt6CGT基因的重组菌为基础，通过导入基因调控UDP‑glucose的供应、优化诱导转化策略、控制乙酸积累来大幅提高重组菌产异荭草苷的产量。利用本发明的策略，重组菌BL21‑CGT‑III异荭草苷产量达到了1371 mg/L，底物的摩尔转化率达到97.4%，是目前最高产量的40倍，且本发明所述制备异荭草苷的工艺简单。

摘要： 本发明涉及医药技术领域，尤其涉及荭草苷的用途。本发明公开了荭草苷、前药及其可药用盐或含荭草苷的植物提取物在制备预防或治疗溃疡性结肠炎药物或保健品中的用途。本发明首次发现荭草苷可以明显改善实验性溃疡性结肠炎小鼠的血便、结肠缩短以及组织病理损伤等症状，为临床治疗溃疡性结肠炎提供新的选择，具有良好的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种化合物荭草苷在制备抑制血管生成药物中的应用，该抑制血管生成药物包括荭草苷和药学上可接受的载体。本发明提供的荭草苷应用于抑制血管生成药物具有很强的抑制血管生成的作用，是治疗恶性肿瘤的新型有效方法，且细胞毒性小，是一种高效、低毒的抑制血管生成进而治疗癌症的药物资源，它是具有天然来源的单体化合物，存在于多种中草药之中，提取纯化十分方便，亦可合成，具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明涉及一种分离制备碳苷黄酮类异构体的方法，特别涉及一种利用动态轴向压缩柱大规模分离制备荭草苷和异荭草苷的一种方法，该异构体由竹叶中提取获得。此方法解决了采用传统的分离制备碳苷黄酮类异构体所存在的成本高、收率低、生产周期长等问题。包括以下步骤：1）竹叶提取粗品溶解于水中，超声处理，滤膜过滤，取滤液待用；2）使用制备液相色谱系统对过滤后的粗品进行分离纯化；3）将对应谱带洗脱液中的溶剂蒸干，即可得到色谱纯为98.5%的荭草苷和异荭草苷单体。本发明所述的分离纯化方法适合于工业化分离制备碳苷黄酮类异构体。

摘要： 本发明公开了荭草苷在调控植物化感作用中的应用。本发明提供了荭草苷在如下任一中的应用：调控植物化感作用；调控植物对杂草抗性；抑制杂草生长。实验证明，荭草苷(orientin)能够调控植物的化感作用，可用于抑制杂草生长。本发明对于黄酮类化合物在植物化感作用中的发掘，以及开发环境友好型的绿色农药具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种合成牡荆素和荭草苷的方法，属于生物工程技术领域。本发明将来自金莲花的8位C糖基转移酶TcCGT1与来自大豆的蔗糖合成酶GMSUS进行偶联反应，开发出一种经济效益高的合成牡荆素和荭草苷的方法。在本发明的反应体系中偶联反应13h，荭草苷和牡荆素的浓度分别达到2324.4mg/L和5524.1mg/L，对应底物木犀草素和芹菜素的摩尔转化率分别为91.4％和89.3％，UDP的循环数分别为17.3和42.3次。该方法能有效降低反应成本，具有较高的经济价值。

摘要： 一种利用协同调控策略提高重组菌产异荭草苷产量的方法，以携带碳苷糖基转移酶Gt6CGT基因的重组菌为基础，通过导入基因调控UDP‑glucose的供应、优化诱导转化策略、控制乙酸积累来大幅提高重组菌产异荭草苷的产量。利用本发明的策略，重组菌BL21‑CGT‑III异荭草苷产量达到了1371 mg/L，底物的摩尔转化率达到97.4%，是目前最高产量的40倍，且本发明所述制备异荭草苷的工艺简单。

摘要： 本发明涉及植物总黄酮提取和应用技术领域，是一种油莎草总黄酮提取物、活性单体荭草苷及其提取方法和应用，该油莎草总黄酮提取物，先将油莎草地上茎叶采用乙醇溶液回流提取，合并提取液，减压浓缩至得到浸膏，浸膏采用预处理后的大孔树脂柱层析进行后，在分离过程中，依次采用水和30％的乙醇溶液洗脱后得到30％乙醇洗脱部位，将30％乙醇洗脱部位依序经过减压浓缩和冷冻干燥后得到油莎草总黄酮提取物。本发明首次公开油莎草总黄酮提取物和活性单体荭草苷在制备治疗缺血性脑中风药物中的应用，药理实验说明，油莎草总黄酮提取物和活性单体荭草苷两者对I/R损伤均具有保护作用。

摘要： 本发明公开了一种中药活性成分满天星异荭草苷在制备治疗免疫性肝纤维化药物中的应用研究。首次对满天星异荭草苷治疗免疫性肝纤维化进行了研究，通过动物实验表明，满天星异荭草苷可作用于免疫性肝损伤的多个环节或多个靶点，主要通过NF-κB信号转导通路达到作用。可有效的抑制脂质过氧化反应、减轻肝组织病理损伤、抑制胶原沉积、抑制基质金属蛋白酶、阻断NF-κB信号转导通路，使肝损伤明显减轻，对防治肝损伤具有独特优势。满天星异荭草苷对猪血清引起的肝损伤具有明显抑制作用，是治疗免疫性肝纤维化的一种非常有潜在价值的新药。