荧光偏振

摘要： 目的汉防己甲素衍生物是一类双苄基异喹啉类化合物,具有明显的抗肿瘤活性。研究汉防己甲素衍生物HL-49对Bloom DNA解旋酶(bloom DNA helicase,BLM)构象和生物学活性的影响对于探索其抗肿瘤作用机制具有重要意义。方法采用紫外光谱扫描研究药物HL-49对BLM DNA解旋酶构象的影响,荧光偏振技术和孔雀绿-磷钼酸铵比色法分析HL-49对BLM解旋酶的DNA结合活性、DNA解链活性、ATPase活性。结果紫外光谱扫描结果显示,HL-49对BLM DNA解旋酶的三维构象影响不明显。荧光偏振法结果显示,HL-49对BLM解旋酶的DNA(dsDNA/ssDNA)结合活性的影响不明显,但随浓度的增加,与DNA相互结合的能力越强(P<0.01)。随着HL-49浓度的增加,BLM DNA解旋酶的DNA解链能力下降,K_(obs)值逐渐降低。孔雀绿-磷钼酸铵比色结果说明,随着HL-49浓度的增加或作用时间延长,HL-49能明显抑制BLM DNA解旋酶的ATPase活性。结论汉防己甲素衍生物HL-49通过与DNA的可逆性结合,抑制BLM DNA解旋酶的ATPase活性和DNA解链活性。

摘要： 目的探讨布鲁氏菌病(布病)血清学检测对布鲁氏菌病的诊断价值。方法123例疑似布鲁氏菌病患者,对所有患者进行虎红平板凝集试验、荧光偏振检测、试管凝集试验、半胱氨酸检测,比较不同检测方法对布鲁氏菌病的检出率,分析不同检测方法对布鲁氏菌病的诊断效能(阳性预测值、阴性预测值、敏感度、特异度、准确度、约登指数、误诊率和漏诊率)。结果123例疑似布鲁氏菌病患者血清学检测结果最终确诊105例(85.37%)。虎红平板凝集试验、荧光偏振检测、试管凝集试验、半胱氨酸检测对布鲁氏菌病的检出率分别为83.74%、82.93%、83.74%、82.11%,比较差异无统计学意义(P>0.05)。虎红平板凝集试验对布鲁氏菌病的阳性预测值、阴性预测值、敏感度、特异度、准确度、约登指数、误诊率和漏诊率分别为94.17%(97/103)、60.00%(12/20)、92.38%(97/105)、66.67%(12/18)、88.62%(109/123)、0.5905、33.33%(6/18)、7.62%(8/105)。荧光偏振检测对布鲁氏菌病的阳性预测值、阴性预测值、敏感度、特异度、准确度、约登指数、误诊率和漏诊率分别为97.06%(99/102)、71.43%(15/21)、94.29%(99/105)、83.33%(15/18)、92.68%(114/123)、0.7762、16.67%(3/18)、5.71%(6/105)。试管凝集试验对布鲁氏菌病的阳性预测值、阴性预测值、敏感度、特异度、准确度、约登指数、误诊率和漏诊率分别为92.23%(95/103)、50.00%(10/20)、90.48%(95/105)、55.56%(10/18)、85.37%(105/123)、0.4604、44.44%(8/18)、9.52%(10/105)。半胱氨酸检测对布鲁氏菌病的阳性预测值、阴性预测值、敏感度、特异度、准确度、约登指数、误诊率和漏诊率分别为98.02%(99/101)、72.73%(16/22)、94.29%(99/105)、88.89%(16/18)、93.50%(115/123)、0.8318、11.11%(2/18)、5.71%(6/105)。结论布鲁氏菌病血清学检测在布鲁氏菌病的诊断中具有重要的意义,不同血清学检测方法存在各自的诊断特点,可联合多方法综合性进行布鲁氏菌病血清学检测,对提高布鲁氏杆菌的确诊率具有重要意义。

摘要： 目的 利用荧光偏振方法建立体外低密度脂蛋白受体的诱导型降解因子(IDOL)/低密度脂蛋白受体(LDLR)的蛋白相互作用评价体系。方法 通过PCR扩增获得人IDOL蛋白全长cDNA,并与pET-30a(+)原核表达质粒进行重组,转化至大肠杆菌系统进行表达并纯化。将FITC荧光标记的LDLR多肽片段与His-IDOL共同孵育,利用荧光偏振方法,分别对多肽浓度、蛋白浓度以及反应时间进行优化,建立体外IDOL/LDLR的蛋白相互作用评价体系。结果 将pET-30a-IDOL重组质粒进行大肠杆菌原核表达,获得人全长IDOL蛋白。将His-IDOL重组蛋白进行His Trap柱亲和纯化,并与FITC-LDLR进行反应,最终确定500 nmol/L FITC-LDLR和2μmol/L His-IDOL于25°C、100 r/min振荡、避光孵育1 h为IDOL/LDLR相互作用最适反应体系。结论 利用荧光偏振方法成功构建了IDOL/LDLR蛋白相互作用评价体系,该体系为基于IDOL/LDLR相互作用的抗动脉粥样硬化的小分子抑制剂的开发和评价提供了实验基础。

摘要： 荧光偏振技术是根据体系中荧光基团与检测分子结合前后的偏振信号变化,对分子间相互作用进行研究或定量检测目标分子的一种分析方法,具有灵敏度高、分析快速、操作简便和易实现高通量测定等多种优势,同时可与其他分析检测技术联用,在生化分析和疾病诊断等领域得到广泛应用。近年来,随着现代分析技术的发展,核酸和材料科学等领域的技术进步,许多具有更高分析检测性能的荧光偏振技术相继被报道。深入探究稳定性强、成本低廉以及功能多样的荧光偏振检测技术是未来研究的发展趋势。本文主要介绍近年来荧光偏振技术检测生物小分子、核酸、蛋白质、生物酶、金属离子、农药以及生化相关物质等方面的应用,并对荧光偏振技术的前景进行展望。

摘要： 目的:研究荧光偏振测定法(FPA)对牦牛血清中布鲁氏菌病抗体检测的适用性。方法:利用FPA测定法对129份牦牛血清进行布鲁氏菌病抗体检测,并与试管凝集试验法(SAT)数据进行比对,从而分析评价FPA测定法的检测性能。结果:FPA试验筛选出41份抗体阴性样品和88份抗体阳性样品;数据比对显示FPA试验敏感性(100.00%)、特异性(80.39%)、符合率(92.25%)和约登指数(80.39%)较高,且阴性似然比值(0.00)和阴性预测值(100.00%)较好。结论:FPA测定法适用于牦牛血清的布鲁氏菌病抗体检测,且诊断准确性较高。

摘要： 根据《兽药管理条例》和《兽药注册办法》规定,经审查,批准中联瑞(北京)生物科技有限责任公司等15家单位申报的布鲁氏菌荧光偏振抗体检测试剂盒等4种兽药产品为新兽药,核发《新兽药注册证书》,发布产品试行规程、质量标准、说明书和内包装标签,自发布之日起执行。

摘要： 布鲁氏菌病是危害养牛业发展,威胁公共卫生的重要疾病.在疫病净化过程中,诊断技术起到举足轻重的作用.大缸奶监测具有经济有效的特点,能够整体评估牛群的疫病状态,欧美等奶业发达国家已将其整合到国家兽医防控体系中.荧光偏振检测技术是监测、筛查传染病的新方法,操作简便、易于自动化.本文主要对国际上荧光偏振监测方法在大缸奶监测上应用情况进行介绍,同时对该方法应用于大缸奶布病监测面临的挑战进行探讨.

摘要： 根据《兽药管理条例》和《兽药注册办法》规定,经审查,批准中联瑞(北京)生物科技有限责任公司等15家单位申报的布鲁氏菌荧光偏振抗体检测试剂盒等4种兽药产品为新兽药,核发《新兽药注册证书》,发布产品试行规程、质量标准、说明书和内包装标签,自发布之日起执行。批准洛阳普泰生物技术有限公司等5家单位申报的犬腺病毒(血清1、2型)胶体金检测试纸条等2种兽药产品变更注册。

摘要： 荧光偏振是一种较为简单的检测技术，在特定的环境中，荧光团的荧光偏振值与荧光分子的体积相关，分子体积越大，分子转动越慢，荧光偏振值越大。本研究基于纳米材料和核酸适体的独特性质，建立了一系列信号放大的高灵敏荧光偏振分析新方法：基于核酸适体构型转换触发纳米粒子信号放大的原理，利用三磷酸腺苷(ATP)作为模型分析物，构建了一种检测生物分子的荧光偏振适体传感器；基于AuNPs能够增强荧光偏振的原理，以EcoRI酶为模型分析物，发展了一种超灵敏检测核酸内切酶的荧光偏振生物传感器；基于多壁碳纳米管能够增强荧光偏振的原理，以DNA甲基转移酶为模型分析物，发展了一种超灵敏检测DNA甲基转移酶活性和抑制剂的荧光偏振生物传感器；基于核酸适体-目标自扩展复合物能够增强荧光偏振的原理，以血小板生长因子-BB(PDGF-BB)为模型分析物，发展了一种超灵敏检测PDGF-BB的荧光偏振生物传感器。

摘要： 采用荧光偏振免疫方法测定了鸡肉、鸡脂肪和鸡蛋中马杜霉素的残留.马杜霉素的荧光标记物以活性酯法合成,并用薄层色谱分离.获得的方法检测范围为0.01 to 5.60 μg/mL,半数抑制量(IC50)为0.16 μg/mL,检测限(LOD)为0.002 μg/mL.在2.5、5和100 μg/mL三个添加浓度,鸡肉、鸡蛋和鸡脂肪的回收率为82-130％.

摘要： 利用罗丹明Ｂ（ＲＢ）的荧光偏振现象作为探针，研究了ＳｉＯ〈，２〉凝胶形成及热处理过程中的微结构及化学环境变化，为建立一种凝胶玻璃微结构及其化学环境的理想研究手段提供了依据和可能。

摘要： 目的：建立生物碱类中药组分的荧光标记方法，并对标记效果进行评价。方法：以异硫氰酸荧光素和盐酸麻黄碱组成研究体系。使用带有偏振镜的荧光分光光度计测量出荧光各向异性值，以：FITC荧光各项异性值对麻黄碱浓度的对数作图，得到荧光偏振曲线，计算出样品的标记比，进行标记效果的评价。结果：在100 mmol·L-1，pH 9.0的碳酸盐缓冲溶液中，盐酸麻黄碱溶液浓度在1×10 -6mol/L～1×10 -3mol/L，FITC浓度0.5mmol/L，室温避光反应、过夜，绘制荧光偏振曲线，计算得到rB=0.327。通过测量计算可得盐酸麻黄碱浓度为2.0×10 -5mol/L、FITC浓度为3×10 -5mol/L时标记液的标记比为1.23，与理论符合。结论：建立了生物碱类中药组分的荧光标记方法，基于荧光各向异性测量标记比的新方法具有简便快速和灵敏度高的特点，可用于标记效果的评价。

摘要： 本发明公开了属于核酸检测技术领域的一种结合荧光强度和荧光偏振检测DNA的纳米探针。所述的纳米探针包括荧光蛋白、捕捉探针、报告探针和纳米金颗粒；其中，荧光蛋白作为供体与捕捉探针相连，纳米金颗粒作为受体与报告探针相连；捕捉探针与报告探针通过部分碱基互补配对形成能量转移供受体对；所述的捕捉探针与目标DNA完全互补配对。所述纳米探针结合了高灵敏度的荧光强度参数和荧光偏振参数，实现了非扩增式的DNA高灵敏度检测；同时利用共振荧光能量转移形成和消失过程中，荧光强度和荧光偏振相反的变化趋势，引入荧光强度/荧光偏振的比值，放大了DNA的检测信号。

摘要： 本发明涉及传感器敏感元件及其制备方法，具体涉及一种荧光偏振荧光磁性分子印迹传感器的制备方法，该方法具体包括以下步骤：步骤一、Fe3O4纳米颗粒的制备；步骤二、Fe3O4@SiO2的制备；步骤三、荧光Fe3O4@SiO2的制备；步骤四、荧光MIP‑Fe3O4@SiO2的制备；步骤五、非印迹荧光磁性聚合物（NIP‑Fe3O4@SiO2）的制备。本发明方法制备了一种同时具有荧光和磁性的分子印迹聚合物，并采用荧光偏振技术对该聚合物和被测物质进行检测，得到荧光偏振荧光磁性分子印迹传感器。该方法克服传统荧光分子印迹传感器检测存在的只能检测具有荧光性质的被测物的问题；同时，该方法简化制备工艺流程，增加了检测灵敏性，将检测限可降低至ng/L。

摘要： 本发明涉及基于小分子荧光探针的新型荧光偏振传感器构建及其应用，具体涉及式I的化合物及其制备方法、含有所述化合物的检测组合物和检测试剂盒。本发明还涉及使用式I的化合物检测生物体系中CD44蛋白含量的方法。

摘要： 本发明涉及一种检测荧光偏振的光学系统，包括：用于发射偏振光的偏振光束发射单元；样本架，包括用于容纳该样本的样本室；分光器，用于将穿过针孔的诱导荧光分成水平偏振诱导荧光和垂直偏振诱导荧光，以及两个光电检测器，用于接收该水平偏振诱导荧光和该垂直偏振诱导荧光，其中该分光器和该两个光电检测器集成于一紧实尺寸。本发明的光学系统能够用于现场检测样本荧光偏振，可以简单且准确进行荧光偏振测量。

摘要： 本发明公开了一种荧光光谱偏振度和偏振角的测量方法，用于解决传统的荧光各向异性测量中不同测量偏振角和误差随荧光偏振角度变化的问题，其特征在于：采用荧光测量中常用的L测量方式，通过旋转检偏偏振器，将检偏偏振器的偏振方向调整至与起偏偏振器的出射光线(完全偏振光)的偏振方向平行，然后将检偏偏振器顺时针旋转0度、45度、90度和135度时，分别用光谱仪测量并记录荧光光谱强度，并使用得到的荧光光谱强度计算得到偏振度和偏振角。与现有技术相比，本发明的有益效果是能同时得到荧光偏振度和偏振角，而且偏振度更加准确。

摘要： 一种使用荧光标记物质的荧光偏振免疫分析，其中用荧光染料标记单结构域抗体。使用通过用荧光染料标记对目标物质具有结合能力的单结构域抗体(如VHH抗体或vNAR抗体)而获得的荧光标记物质。所述荧光偏振免疫分析包括用于将荧光标记物质结合到目标物质的结合步骤；以及用于测量与目标物质结合的荧光标记物质的荧光偏振的变化的测量步骤。

摘要： 本发明涉及传感器敏感元件及其制备方法，具体涉及一种荧光偏振荧光磁性分子印迹传感器的制备方法，该方法具体包括以下步骤：步骤一、Fe3O4纳米颗粒的制备；步骤二、Fe3O4@SiO2的制备；步骤三、荧光Fe3O4@SiO2的制备；步骤四、荧光MIP‑ Fe3O4@SiO2的制备；步骤五、非印迹荧光磁性聚合物（NIP‑ Fe3O4@SiO2）的制备。本发明方法制备了一种同时具有荧光和磁性的分子印迹聚合物，并采用荧光偏振技术对该聚合物和被测物质进行检测，得到荧光偏振荧光磁性分子印迹传感器。该方法克服传统荧光分子印迹传感器检测存在的只能检测具有荧光性质的被测物的问题；同时，该方法简化制备工艺流程，增加了检测灵敏性，将检测限可降低至ng/L。

摘要： 本发明公开了一种基于AMF为荧光素标记物的双酚A荧光偏振免疫分析检测方法，旨在提供一种具有较好的特异性和灵敏度的检测方法，该方法是利用双酚酸BVA作为半抗原偶联AMF荧光素合成得到荧光标记物，并以双酚A为标准品，用双酚A单克隆抗体作为抗体，建立双酚A的荧光偏振免疫分析检测方法该方法；属于荧光偏振免疫检测技术领域。

摘要： 本发明公开了属于核酸检测技术领域的一种结合荧光强度和荧光偏振检测DNA的纳米探针。所述的纳米探针包括荧光蛋白、捕捉探针、报告探针和纳米金颗粒；其中，荧光蛋白作为供体与捕捉探针相连，纳米金颗粒作为受体与报告探针相连；捕捉探针与报告探针通过部分碱基互补配对形成能量转移供受体对；所述的捕捉探针与目标DNA完全互补配对。所述纳米探针结合了高灵敏度的荧光强度参数和荧光偏振参数，实现了非扩增式的DNA高灵敏度检测；同时利用共振荧光能量转移形成和消失过程中，荧光强度和荧光偏振相反的变化趋势，引入荧光强度/荧光偏振的比值，放大了DNA的检测信号。

摘要： 本发明涉及基于小分子荧光探针的新型荧光偏振传感器构建及其应用，具体涉及式I的化合物及其制备方法、含有所述化合物的检测组合物和检测试剂盒。本发明还涉及使用式I的化合物检测生物体系中CD44蛋白含量的方法。