艰难梭菌

摘要： 目的:研究艰难梭菌感染(CDI)腹泻患者血清CXC趋化因子配体-10(CXCL-10)和白介素-27(IL-27)水平的变化及其与病情严重程度间的相关性。方法:将150例腹泻患者根据Cd培养结果是否阳性将其观察组(Cd培养阳性者,n=90)和对照组(Cd培养阴性者,n=60),观察组患者又根据CDI疾病严重程度(severity score index,SSI)评分将其分为轻度亚组(评分对照组>健康组(P<0.05);观察组中—重度亚组患者血清CXCL-10和IL-27水平明显高于轻度亚组(P<0.05)。观察组SSI评分为(4.68±1.73)分,其中轻度亚组SSI评分为(3.02±0.89)分,中—重度亚组SSI评分为(5.13±1.09)分。Spearman直线相关性分析发现观察组患者血清CXCL-10和IL-27水平与SSI评分间呈正相关性(r=0.317和0.368,P=0.002和0.000)。ROC曲线分析发现:血清CXCL-10、IL-27及二者联合对CDI腹泻的诊断曲线下面积(area under curve,AUC)分别为:0.846、0.853和0.874,诊断敏感性分别为85.25%、80.30%和82.75%,诊断特异性分别78.50%、82.55%和85.85%。结论:血清CXCL-10和IL-27有助于艰难梭菌感染腹泻患者病情严重程度的判断,具临床应用价值。

摘要： 为了了解我国猪源艰难梭菌(Clostridioides difficile,CD)的病原学及分子生物学特征,本研究收集湖北和广东地区疑似患有肠炎的病猪粪便样品,提取基因组DNA,利用已经报道的5重PCR方法对艰难梭菌的16S rDNA基因、毒素A的编码基因tcdA、毒素B的编码基因tcdB以及二元毒素编码基因cdtA和cdtB进行检测,同时采用厌氧培养法,对PCR检测毒素编码基因为阳性的粪便样品进行艰难梭菌的分离培养,并对所分离到的菌株进行药物敏感性测试和全基因组重测序。结果发现:本研究所采集到的97份粪便样品经PCR检测显示有80份样品为16S rDNA阳性,其中仅有2份样品为tcdA和tcdB阳性。从这两份样品中分离出一株tcdA和tcdB阳性的艰难梭菌,命名为HuB01。药敏试验发现,HuB01对头孢菌素(FOX)、氯霉素(CHL)、克林霉素(CLI)、氨苄西林(AMP)、头孢曲松钠(CRO)耐药,对莫西沙星(MXF)和万古霉素(VAN)表现出中度耐药,而对利福西明(RFX)、甲硝哒唑(MTZ)、非达霉素(FDX)敏感。全基因组重测序发现HuB01的全基因组大小为3.93 Mb,平均GC含量为28.31%,编码3691个蛋白基因及63个tRNA和10个rRNA;3691个基因中含有31个耐药基因和164个毒力相关基因。多序列位点分型(MLST)结果显示HuB01为ST11。由于目前国内对于艰难梭菌的研究大多集中在人医领域,因此本研究可为兽医领域艰难梭菌的相关研究奠定基础。

摘要： 目的:研究黄芩素等9种中药单体对艰难梭菌的体外抑菌活性。方法:采用滤纸片法测定9种中药单体对艰难梭菌的抑菌活性,筛选出其中活性较好的中药单体;采用琼脂稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC);微量肉汤稀释法测定最低杀菌浓度(MBC);滤纸片法测定pH稳定性以及棋盘法测定与万古霉素联合的抑菌作用。结果:黄芩素、槲皮素对艰难梭菌抑菌活性较好,MIC值分别为1.25、2.5 mg·mL^(-1),MBC值分别为1.25、5 mg·mL^(-1),在pH 3~8范围内具有良好稳定性,与万古霉素有协同抑菌作用。结论:黄芩素、槲皮素在体外对艰难梭菌有良好的抑菌活性,为治疗艰难梭菌感染提供了一种新思路。

摘要： 抗生素拯救了无数人的生命,它对一些特定疾病能产生一定的疗效。然而,如果在养殖业过度地使用抗生素,会引起令人担忧的问题。它会对动物和人类的健康产生负面影响,因为它会增强抗生素耐药性。近日,一项关于超级细菌艰难梭菌(Clostridioides difficile)的研究表明,有抗生素耐药性的细菌可以通过猪传播给人类。在研究了多重和共享耐药基因后,研究人员发现,艰难梭菌是抗菌耐药基因的储存库,其可以在动物和人类之间传播。

摘要： 为快速检测厌氧菌引起的细菌性腹泻,建立一种产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)、艰难梭菌(Clostridium difficile)和脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)的多重PCR检测方法,本试验参照GenBank中产气荚膜梭菌Cpa基因序列、艰难梭菌Glud基因序列和脆弱拟杆菌Leu基因序列上设计合成了3对特异性引物(目的片段分别为326、750 bp和448 bp),通过对PCR反应条件的优化建立多重PCR检测方法。结果显示,多重PCR能从试验的产气荚膜梭菌、艰难梭菌、脆弱拟杆菌扩增出其目的条带,而其他细菌均不能扩增出目的条带;多重PCR对产气荚膜梭菌、艰难梭菌和脆弱拟杆菌的最低检出量分别为1.6×10^(-2)、0.7pg/μL和2.8pg/μL。结果表明本试验建立的多重PCR方法具有良好的稳定性与特异性,为鉴别诊断这3种致病厌氧细菌所导致的腹泻提供一种快速、准确的检测方法。

摘要： 儿童抗生素相关性腹泻(antibiotic-associated diarrhea,AAD)是指抗生素应用后引发的无明确病因的腹泻,指抗生素通过改变患者肠道微生态菌群平衡及其代谢功能而引起腹泻,尤其是艰难梭菌感染(CDI)。由于广谱抗生素广泛使用,AAD的发病率显著升高,医治不及时,严重者可导致死亡。AAD发病机制复杂,临床表现多样,近年来AAD的检测方法不断提高,危险因素更加明确,不断的研发出新的药物,益生菌的预防和治疗效果更加明确,发展前景广阔。文章将从以上几个方面就AAD做一综述,为临床儿科医师在预防和治疗AAD提供更加充足的依据,指导临床医生更加合理规范的使用抗生素,以减少儿童AAD的发病率,保护儿童健康。

摘要： 炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一种病因和发病机制尚未明确的慢性非特异性肠道炎症性疾病,包括溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn’s disease,CD)[1]。炎症性肠病患者治疗中由于免疫抑制剂的广泛使用造成机体免疫功能的下降,加之患者自身肠道吸收功能障碍导致营养状况不佳,使得IBD患者机会性感染的风险明显升高。艰难梭菌是一种广泛分布于人类肠道的革兰阳性厌氧芽孢杆菌。

摘要： 艰难梭菌是抗菌药物相关性腹泻的主要原因,虽然抗菌药治疗是艰难梭菌感染的首选治疗方法,但目前有效的抗菌药种类相对较少。一些新型抗菌药,如卡达唑胺、苏洛霉素、利地尼唑已证明对艰难梭菌具有活性,其中一些已经被批准用于临床,或正在进行临床试验。在这篇综述中,将讨论艰难梭菌感染的当前和新兴临床抗菌药物治疗进展。

摘要： 目的 研究利用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)结合核酸试纸条技术建立艰难梭菌(Clostridium difficile,CD)的快速检测方法,为艰难梭菌检测提供一种快速检测的方法。方法 收集2016年1月至2017年12月杭州市临安区第一人民医院临床感染性腹泻患者的粪便标本201份。根据艰难梭菌毒素A基因特异序列设计引物,选择6条最佳引物,用LAMP环介导等温扩增曲线、钙黄绿素目视法和核酸试纸条测试实验结果,再优选反应体系,最后检测粪便中的艰难梭菌。结果 LAMP法能在60°C条件下扩增1h检出艰难梭菌,对1株艰难梭菌和7株非艰难梭菌检测,只有艰难梭菌能检出阳性扩增,设计的引物具有良好的特异性。脱氧核糖核酸(deoxyribo nucleic acid,DNA)检出限为0.8pg/μl。结论 LAMP结合核酸试纸条技术快速检测粪便艰难梭菌具有敏感度高、操作简便、特异性强、可视化、方便快捷的特点,适用于艰难梭菌的快速检测。

摘要： 艰难梭菌(Clostridium difficile,C.difficile)为厌氧芽孢梭菌,是医院内感染性腹泻的主要病原菌之一。临床上,由于抗生素的大量使用,肠道微生态平衡被打乱,艰难梭菌乘机大量繁殖产毒,导致艰难梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDI)。目前发现艰难梭菌也可在多种动物体内定殖或感染,动物源性分离株与人体所分离的艰难梭菌菌株具有一致性,动物直接或间接接触、食用污染的肉制品可能是传播途径之一。本文对艰难梭菌在家畜(猪、马、牛、羊)、家禽、宠物等动物中定殖或感染的临床表现、传播途径、菌株基因型、药物敏感性等流行病学特征予以介绍,旨在为艰难梭菌感染的防控提供理论参考。

摘要： 本文对四种用于粪便提取基因组的试剂在艰难梭菌提取效果进行比较,以针对艰难梭菌毒素基因tcdA和tcdB检测的荧光定量PCR实验结果为依据,从中找出适用于艰难梭菌快速检测的核酸提取试剂.结果发现四种试剂的敏感度、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为:BIOBASE 85.7％、100％、100％、97.7％;MK 100％、 98.8％、 93.3％、 100％;QIAGEN 85.7％、 100％、 96.5％、 97.7％;TIANGEN 85.7％、 97.7％、85.7％、97.7％;灵敏度为:105CFU/mL、104CFU/mL、103CFU/mL、104CFU/mL;10份标本的操作用时分别为90min、30 min、70 min、115 min.综合所有实验结果,MK核酸提取试剂提取快捷、结果准确,最适合临床标本处理.

摘要： 本文选取了3种艰难梭菌显色培养基,进行培养对比验证,对培养后阳性结果进行菌落鉴定.结果发现:三种培养基的敏感度、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为:CDIF90.3％、98.9％、96.6％、96.7％;CDSA: 80.6％、100.0％、100.0％、93.7％;CDCA: 85.4％、100.0％、100.0％、92.7％.灵敏度分别为:8.0× 101CFU/mL、2.0× 105CFU/mL、4.0× 102 CFU/mL.综合所有实验结果,三种显色培养基都可以用于艰难梭菌的分离鉴定,其中梅里埃公司的CDIF效果最好.

摘要： 目的：通过对江苏地区两家不同规模医院的高危人群进行艰难梭菌筛查,以了解目前医院内艰难梭菌的感染和定植的基本情况,从而为预防艰难梭菌的流行提供参考数据. 方法：2015年11月对A医院和B医院的高危科室的所有住院患者进行肛门拭子采样,共采集122份标本.所有的标本经厌氧培养,VIDAS荧光酶联免疫技术检测艰难梭菌毒素A/B,同时利用多重PCR检测技术测定其毒素基因. 结果：A医院接受检测的104位患者中艰难梭菌的阳性率为27.88％,其中感染10例,定植9例.B医院的18位患者中艰难梭菌的阳性率为50.00％,其中感染1例,定植8例.38株艰难梭菌中有25株艰难梭菌A/B毒素检测阳性.多重PCR结果显示25株为tcdA和tcdB双阳性,4株tcdA阳性tcdB阴性,9株tcdA和tcdB双阴性,38株艰难梭菌均未检测到二元毒素基因. 结论：江苏地区不同规模医院的高危科室均存在艰难梭菌感染和传播的风险,对高危人群的腹泻患者进行艰难梭菌的检测有利于病情的确诊和尽快采取有效的治疗.

摘要： 目的：探讨艰难梭菌无症状携带者的危险因素,为制定针对性的防控策略提供一定理论依据. 方法：收集河南省某医院住院的128例患者肛拭标本,经艰难梭菌厌氧培养和毒素基因检测,以艰难梭菌培养阳性且无症状患者为病例组,培养阴性患者作为对照,比较2组临床病理特征,并进行艰难梭菌无症状携带者危险因素的多因素分析. 结果：培养阳性艰难梭菌检出率为17.19％(22/128),均为无症状携带者;与对照组相比,艰难梭菌无症状携带者在年龄、糖尿病史、使用抗菌药物、抗菌药物使用天数、使用氟喹诺酮类药物等方面存在显著差异(P<0.05);Logistic回归分析结果显示,近期使用抗菌药物和有糖尿病史可能为患者无症状携带艰难梭菌的独立危险因素,OR值分别为5.70(95％CI：1.69-19.21)和3.86(95％CI：1.21-12.26). 结论：医院艰难梭菌分离阳性率较高,应加强对其监测和筛查,特别是对使用抗菌药物或患有糖尿病的患者更应密切关注.

摘要： 目的：研究本院老年医学科患者大便中艰难梭菌的检出情况,并分析危险因素,为制定有效的预防与控制措施提供理论依据.rn 方法：2014年12月14日开展横断面调查,留取老年医学科78例住院患者的粪便标本,用选择性培养基进行厌氧培养,并利用多重PCR技术进行艰难梭菌毒素基因检测.同时收集所有患者的临床资料,进行艰难梭菌的高危因素分析.rn 结果：78例患者中艰难梭菌培养阳性36例,阳性率46.15％,均为无症状携带患者;36株艰难梭菌中有tcdA+/tcdB+14株(38.89％),tcdA-/tcdB-18株(50.00％),tcdA-/tcdB+4株(11.11％).年龄、住院日、1月内鼻饲管及抗生素的使用为其高危因素.rn 结论：本院老年医学科住院患者艰难梭菌定植率高,年龄、住院日、1月内鼻饲管及抗生素的使用为其高危因素.

摘要： 目的：探讨来源于我国不同地区不同宿主人群的艰难梭菌之间是否存在遗传多态性及各遗传谱系之间的关系,并进一步研究我国艰难梭菌的起源与进化.方法：收集来自北京、山东、广州共104株艰难梭菌,提取DNA进行管家基因(adk,atpA,dxr,gty,recA,soda和tpi)的扩增,采用Mega 5进行菌株遗传多态性的研究及进化树的绘制,然后再采用eburst软件进行burst分析. 结果：104株艰难梭菌共产生22个序列型(ST),其中ST-117,118,119和129是新提交数据库并命名的型别;没有发现地理位置特异的遗传分支,也没有发现宿主人群特异的遗传分支;ST型与地理来源及宿主人群来源之间不具有明显的相关性;ST37为我国的优势菌株;同数据库中的欧美菌株相比较,我国的菌株具有特有的基因多态性.

摘要： 目的：评价黄连素单用或联合万古霉素对艰难梭菌的体外抗菌活性。方法：采用琼脂稀释法测定黄连索及万古霉素对2008至2009年复旦大学附属华山医院临床分离的50株艰难梭菌的体外抗菌活性；采用棋盘法对该50株菌株进行体外联合药敏测定。选取2株临床株、1株标准株、1株瑞典临床株(核糖核酸型027)进行黄连素(64 mg/L和128 mg/L)和万古霉索单药(1/4～4MIC)及联合用药的体外杀菌曲线研究,应用相差显微镜计算黄连素或万古霉素单药及联合用药后艰难梭菌产芽孢率。结果：黄连素单药对艰难梭菌的MIC50为512 mg/L,MIC90为＞512 mg/L；万古霉索单药对艰难梭菌的MIC50为0.5 mg/L,MIC90为1 mg/L；黄连素和万古霉索联用对50株艰难梭菌呈协同、相加、无关作用的菌株分别为12％、80％、8％,未发现有拮抗作用菌株。体外杀菌曲线结果示两药联合在特定浓度组合下对临床株027、SH9及SHI78菌株呈相加作用,对标准菌株艰难梭菌ATCC43596c呈无关作用。128mg/L黄连素单用或与万古霉素联合用药可降低SH9菌株产芽孢量。结论：黄连素单用对艰难梭菌抗菌活性较弱,与万古霉素联合对艰难梭菌多呈相加作用；128mg/L黄连素单用或与万古霉素联合用药可降低SH9菌株产芽孢量。

摘要： 本文详细分析了艰难梭菌的致病机制，介绍了艰难梭菌相关性腹泻的国际公认诊断“金标准”：传统的粪便标本培养和细胞毒素测定，及其他生物学技术。

摘要： 本研究对我国石家庄地区近期艰难梭菌的流行情况进行调查，针对性的对该菌进行分离培养及鉴定，培养得到的菌株分别进行毒素分型、PCR-核糖体分型、药敏试验等。以了解我国石家庄地区流行的艰难梭菌的产毒素型别、分型以及耐药情况，尤其是高产毒克隆株的流行情况，为CDAD的防治和快速诊断提供依据。

摘要： 伪膜性肠炎(PMC)通常由艰难梭菌感染引起的主要发生于结肠和小肠的急性纤维素渗出性炎症.艰难梭菌(CD)是一种革兰氏阳性厌氧菌,它是引起医院获得性疾病的重要致病菌.本文报道1例伪膜性肠炎女性患者在治疗中的药学监护过程.在整个治疗过程中,临床药师通过查阅伪膜性肠炎治疗指南及相关资料以积极的态度参与治疗并与临床医师商讨,调整最终采取最合理的治疗方案.这个成功的病例表明在药物治疗过程中药学监护的作用至关重要,临床药师在药学监护中发挥着不可替代的作用,同时也为临床药学的发展奠定坚实的基础.

摘要： 本发明属于细菌检测技术领域，具体公开了一种检测艰难梭菌菌属基因及毒素基因的多重荧光PCR试剂盒和方法，其既能鉴定艰难梭菌菌属又能检测毒素B基因。本发明的试剂盒主要包括特异性引物组和探针，所述引物组和探针由检测艰难梭菌的引物对和探针、检测毒素B的引物对和探针、内标引物对和探针组成。本发明通过设计特异性引物组和探针，能从成分复杂的样本中检测出艰难梭菌菌属基因及毒素基因，具有操作简单、报告时间短，特异性强、灵敏度高、准确性好的优点，引入内标准品避免PCR假阴性，降低了由于扩增产物污染而导致的假阳性，适用于临床不明原因腹泻病人的病因筛查。

摘要： 本发明提供了式A所示化合物在制备抑制艰难梭菌菌体和/或抑制艰难梭菌芽孢萌发的药物中的用途，其中，R

摘要： 一种用于检测艰难梭菌(Clostridium difficile)的组合物和试剂盒，该组合物包括用于检测艰难梭菌菌株的引物套组，和一种通过使用该组合物和试剂盒来检测艰难梭菌的方法。依照该方法，可以在短时间内以高准确度和灵敏度自样品检测出艰难梭菌菌株。

摘要： 本发明属于细菌检测技术领域，具体公开了一种检测艰难梭菌菌属基因及毒素基因的多重荧光PCR试剂盒和方法，其既能鉴定艰难梭菌菌属又能检测毒素B基因。本发明的试剂盒主要包括特异性引物组和探针，所述引物组和探针由检测艰难梭菌的引物对和探针、检测毒素B的引物对和探针、内标引物对和探针组成。本发明通过设计特异性引物组和探针，能从成分复杂的样本中检测出艰难梭菌菌属基因及毒素基因，具有操作简单、报告时间短，特异性强、灵敏度高、准确性好的优点，引入内标准品避免PCR假阴性，降低了由于扩增产物污染而导致的假阳性，适用于临床不明原因腹泻病人的病因筛查。

摘要： Taq Man/MGB探针PCR技术可对粪便基因组中艰难梭菌进行菌属鉴定，同时检测毒素基因携带情况，并可判断A毒素是否存在缺失。粪便标本无需纯培养，在一个反应体系内完成菌株鉴定及毒素检测。本方法具有操作简单、重复性好、高通量检测标本、报告时间短等特点，适用临床不明原因腹泻病人病因筛查。本发明解决的技术问题是，粪便标本无需纯培养即可同时进行菌属鉴定及菌株毒素携带情况筛查，提供一种高敏感性的粪便基因组DNA中检测方法。由于传统厌氧培养不易开展，酶免方法存在方法学缺陷，该发明将明显提高艰难梭菌相关性腹泻的诊断率。同时也可用于上述疾病治疗过程中的用药监测。

摘要： 本发明公开了一种防治艰难梭菌毒素A阳性的艰难梭菌所致肠道感染的活菌疫苗，所述疫苗含有胸苷酸合成酶ThyA基因缺陷型重组乳酸链球菌；该疫苗经试验验证安全有效。还公开了上述活菌疫苗的制备方法及其在制备具有防治艰难梭菌毒素A阳性的艰难梭菌所致的肠道感染药物中的用途。

摘要： 本发明涉及对细菌细胞进行代谢工程化以产生胆盐水解酶以抑制艰难梭菌内生孢子的萌发和在人胃肠道内的定殖的方法。所述胆盐水解酶与唾液酸诱导型启动子pNanA可操作地连接，其中pNanA进而由阻遏子nanR控制。表达所述胆盐水解酶的重组细菌可以是待用于预防或治疗艰难梭菌感染的益生菌菌株。

摘要： 本发明提供了一种鉴定产毒型艰难梭菌及其毒素基因分型的方法。该方法使用特异性引物和探针的组合，利用实时荧光定量PCR技术快速鉴定艰难梭菌以及对艰难梭菌毒素分型进行甄别。本鉴定方法方便快捷、价格低廉，适于推广应用。

摘要： 一种艰难梭菌耐药进化分支SNP标记及菌株类别鉴定方法和应用，本发明的SNP标记是艰难梭菌（Clostridium difficile）clade2（主要为高毒型别核糖核酸型027）的三种类别特异性标记，能够快速准确鉴定耐多种治疗药物和相关药物的艰难梭菌的进化分支，精确区分耐药分支类别不但可以有效指导临床用药同时为耐药病原菌进化溯源提供依据。

摘要： 本发明提供了通过TcdB或TcdA全毒素治疗或预防艰难梭菌(C.difficile)感染(CDI)的方法和组合物。该组合物的特征在于基于TcdB或TcdA的中和表位中的一种或其组合的免疫原或结合剂，诸如抗体、纳米抗体(VHH)、单结构域抗体(sdAb)等。其中在胞内体pH条件下该免疫原抑制TcdB成孔所必需的构象变化。另外，该免疫原抑制易切键向CPD切割侧移动以及GTD相对于CPD正确定位，从而抑制激活毒素所需要的GTD切割。本发明还描述了用于治疗CDI的疫苗，例如靶向TcdB或TcdA的疫苗。