腺苷三磷酸酶

摘要： 为测定非洲猪瘟病毒(ASFV)编码的D1133L蛋白的腺苷三磷酸酶活性,首先原核表达和纯化了D1133L蛋白。然后,利用Kinase-Glo Plus Luminescent Kinase Assay Platform试剂盒优化了反应条件,建立了D1133L蛋白腺苷三磷酸酶活性的测定方法,测定了D1133L蛋白腺苷三磷酸酶活性。结果显示,在25μL的反应体系中,当蛋白浓度为1.8μmol/L,Cu^(2+)浓度为10 mmol/L,37°C反应70 min时D1133L蛋白具有最佳腺苷三磷酸酶活性,可水解体系中40.04%的腺苷三磷酸。本结果为进一步明确D1133L功能,揭示其解旋机制和靶向D1133L解旋活性的高通量化学药物筛选奠定了基础。

摘要： 据Scientia Horticulturae的一篇研究报道(https://doi.org/10.1016/j.scienta.2021.109906),来自伊朗伊玛目霍梅尼国际大学园艺科学系的研究人员研究了添加150 nM外源植物磺肽素α(PSKα)对冷藏期间(4°C条件下贮藏18天)草莓果实的衰老和腐烂的影响。结果表明,150 nM PSKα处理的草莓果实在4°C下贮藏6天的过程中,较低的腺苷三磷酸酶1(APY1)基因表达导致细胞外较高的三磷酸腺苷(ATP)积累,这可能是一个信号分子,可促进NADPH氧化酶活性,触发信号物质H2O2积累,导致在4°C下贮藏18天期间更高的SUMO E3连接酶(SIZ1)基因表达水平。

摘要： 目的 研究正己烷亚急性染毒对小鼠学习记忆及海马组织线粒体能量代谢的影响.方法 选择昆明种SPF级小鼠40只,采用简单随即分组方法根据不同染毒剂量分为低、中、高剂量染毒组和对照组,每组10只,采用灌胃方式进行正己烷染毒,低、中、高剂量染毒组每只小鼠分别给予浓度500、1 000、2 000 mg/kg正己烷0.2 ml/d灌胃;对照组给予食用油0.2 ml/d灌胃,1次/d,连续28 d.染毒结束后,各组进行Y型迷宫实验,以及海马组织ATP酶、线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ～Ⅳ活力、线粒体融合基因(Mfn1、Mfn2)与分裂基因(Fis1) mRNA的测定,并进行统计学分析.结果 与对照组比较,除第1次实验低剂量染毒组错误反应次数外,低、中、高剂量染毒组第1、2次Y型迷宫实验结果均有差异,差异有统计学意义(P＜0.05).低、中、高剂量染毒组Na+-K+-ATP酶活力分别为(8.27±2.65)、(5.38±1.55)、(3.55±1.69) μmol/gprot/h,Ca2+-Mg2+-ATP酶活力分别为(10.32±2.96)、(7.19±1.94)、(4.49±1.33) μmol/g prot/h.与对照组比较,中、高剂量染毒组海马组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活力均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,各剂量染毒组的复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ酶活力均降低,Mfn1 mRNA、Mfn2mRNA表达均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 正己烷亚急性染毒可导致小鼠海马组织线粒体呼吸链酶复合体活力的降低,并进而可能通过ATP酶活力下降及线粒体融合-分裂失衡而导致线粒体的能量代谢紊乱,可能导致小鼠学习记忆能力下降.

摘要： 封面上展示的是活性降解26S蛋白酶体的结构,显示出腺苷三磷酸酶(ATP酶)马达的连续状态与守恒的酪氨酸桨(图中蓝色、绿色和黄色集群)以螺旋阶梯式排列,并将蛋白质基质(图中黄色块状物)拉进一个降解室。原始构象态是透明的,而后续的构象态是不透明的。这些数据为我们提供了一个机会深入了解这一AAA+家族成员是如何结合ATP水解与构象变化从而产生机械功的。

摘要： [背景]腺苷三磷酸酶(ATPase,ATP酶)是控制DNA复制起始及宿主对病原微生物的应答开关.近期关于水生动物虹彩病毒基因组学的研究表明,它们共享编码ATPase的基因.[目的]大鲵蛙病毒(Andrias davidianus ranavirus,ADRV)属于虹彩病毒科,是世界现存最大两栖动物——中国大鲵的致死性病毒病原体.为了鉴定病毒基因及其表达产物对病毒复制和宿主细胞的影响,对ADRV编码ATPase的基因ADRV-96L进行了克隆、表达及功能分析,阐明这个虹彩病毒核心基因的功能.[方法]采用PredicProtein软件分析序列,构建重组原核表达质粒pET32a/His ADRV-96L,经IPTG (Isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside)诱导在大肠杆菌DE3中表达蛋白,用镍树脂纯化和咪唑液洗脱.钼蓝分光光度法检测产生的无机磷(Pi)以确定纯化ADRV-96L的ATPase活性.建立表达蛋白的稳定转染细胞系并进行鉴定,再分别通过绘制病毒的一步生长曲线和评估转染细胞的生长速率来测定该蛋白对病毒复制及细胞生长的影响.[结果]多重序列比对显示ADRV-96L存在含Walker A和Walker B基序的AAA-ATPase (ATPases associated with a variety of cellular activities,与各种细胞活性相关的ATPase)结构域(20-159位氨基酸)及两个高度保守的精氨酸.重组原核质粒表达了含ADRV-96L的52 kD融合蛋白,该蛋白质具有ATPase活性(酶的比活性平均为4.68 U/mg).结果未检出ADRV-96L对病毒的复制影响,但显示该蛋白可促细胞生长.[结论]大鲵蛙病毒96L基因(ADRV-96L)编码一个促细胞增殖和生长的ATPase.

摘要： 目的：研究纳米二氧化钛（nano －TiO2）暴露对斑马鱼氧化应激的影响。方法64尾 AB 型斑马鱼随机分成对照组和低、中、高剂量 nano －TiO2暴露组各16尾，分别在0、2、8和32 mg／L nano －TiO2试液中连续暴露30 d，各组取10尾分别测定鱼鳃、肝脏、背部肌肉中的超氧化物歧化酶（SOD）、腺苷三磷酸酶（ATPase）活性及丙二醛（MDA）含量，余下的斑马鱼观察鱼鳃、肝脏、肌肉的组织病理学变化。结果中、高剂量 nano－TiO2暴露组斑马鱼鱼鳃 MDA 值为（68.53±17.04）和（86.83±22.03） nmol／mg Prot，较对照组（49.49±7.97）nmol／mg Prot 高（P ＜0.05）。高剂量组鱼鳃 SOD 值为（457.08±132.55）U ／mg Prot，较对照组（328.95±63.42）U ／mg Prot 增高（P ＜0.05）。中、高剂量组鱼鳃 ATPase 值（8.8±2.7）和（3.5±2.5）U ／mg Prot 较对照组（17.3±3.8）U ／mg Prot 明显下降（P ＜0.05）。各剂量组斑马鱼肝脏 MDA 含量、SOD 活性变化与鱼鳃含量变化相似，但 ATPase 活性和斑马鱼肌肉 MDA、SOD、ATPase 值均无明显变化。组织病理学显示，nano －TiO2暴露组斑马鱼鳃及肝脏出现了不同程度的炎性浸润、肿胀变性、溶解坏死等病理性变化。结论nano －TiO2暴露可导致斑马鱼鱼鳃及肝脏的氧化应激反应，引起鱼鳃、肝脏的病理改变。%Objective To know the effect of nanometer titanium dioxide (nano -TiO2 )on the oxidative stress in zebrafish. Methods A total of 64 zebrafishes were randomly divided into 4 groups with different concentrations of nano -TiO2 exposure,which including control group,low dose group (2 mg/L),moderate dose group (8 mg/L)and high dose group (32 mg/L).The content of MDA,the activities of SOD and ATPase in gill,liver and muscle were measured in 1 0 zebrafishes in each group after 30 d exposure.Histopathological changes of gill,liver and muscle in the remainder fishes were observed.Results The content of Malondialdehyde (MDA)in the fish gill of the moderate and high dose group were significantly higher than that of the control group (P 0.05 ). Histopathological observation showed infiltration by inflammatory cells, swelling and degeneration, vacuolation and necrosis in zebrafish gill and liver with different degrees.Conclusion Nano -TiO2 exposure could induce the oxidative stress in zebrafish,causing pathological changes in the fish gill and liver.

摘要： 目的探讨灯盏乙素对L-甲状腺素(L-Thy)诱导的实验性心肌肥厚大鼠的作用以及对钠、钾-三磷酸腺苷酶(Na+-K+-ATPase)活性、钙-三磷酸腺苷酶(Ca2+-ATPase)活性、钙调神经磷酸酶(CaN)活性和一氧化氮(NO)含量的影响。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、卡托普利组(25 mg.kg-1)、灯盏乙素高、中、低剂量组(100,50,25 mg.kg-1)共6组。除正常组外,其余各组连续10 dip L-Thy诱导心肌肥厚性损伤,造模的同时ig相应的药物进行治疗。观察并检测灯盏乙素对损伤大鼠的心脏重量指数、左心室匀浆中Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase、CaN活性以及NO含量的影响。结果 L-Thy损伤模型组心脏重量指数明显升高,Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase、CaN活性明显升高,而NO含量明显降低。灯盏乙素能明显降低心脏重量指数,抑制Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase、CaN活性的升高,对NO含量无明显影响。结论灯盏乙素可通过抑制ATPase和CaN的活性起到抗L-Thy诱导的心肌肥厚作用。

摘要： 目的:探讨Na+-K+-ATP酶α亚单位表达对人结直肠癌细胞增殖及侵袭力的影响,及哇巴因治疗结直肠癌的可能机制.方法:以SW480和SW620细胞为研究对象,予生理浓度的哇巴因(1 nM)干预,应用MTT法、Transwell侵袭小室、生化酶学、实时定量PCR及蛋白免疫印迹等方法检测细胞的增殖及侵袭力,Na+-K+-ATP酶活性及其亚单位(α1、α2及α3)表达水平.结果:与SW480细胞比较,SW620细胞增殖及侵袭力明显增加(P 均 0.05 ). In addition, the protein expression of the Nα+ -K+-ATPase α1-,α2-, and a 3-subunits were in line with the accompanying mRNA expression. A physiological concentration of 1 nM of ouabain, a Na+, K+-ATPase inhibitor, could significantly downregulate the protein-level expression of Nα+-K+-ATPase α1-subunits in SW620 and SW480 cells within 48 h, thus inhibiting the growth and decreasing the invasion capacity of SW620 and SW480 cells. Ouabain could increase Nα+-K+-ATPase activity in SW620 cells. The Nα+-K+-ATPase α2- and α3-subunit expression in the SW620 and SW480 cells treated with ouabain for 48 h were not significantly different. Conclusion: The aberrant activity of Nα+-K+-ATPase might involve tumor metastasis in human colorectal cancer, which is partly ascribed to the abnormal expression of the Nα+-K+-ATPase α1- and α3-subunits. However, ouabain could effectively decrease the proliferation and invasion of SW480 and SW620 cells by downregulating the Nα+-K+-ATPase a 1-subunits.

摘要： 目的:探讨结直肠癌耐药细胞增殖及侵袭力与Na+,K+-ATP酶活性及其β1亚单位和P糖蛋白(P-gp)表达的关系,及哇巴因增加化疗敏感性的可能机制.方法:以人结直肠癌亲本细胞(SW480)和耐奥沙利铂细胞(SW480/OxR)为研究对象,采用MTS法、Transwell小室、生化酶学、实时定量PCR(Real time quantitative,RT-PCR)及流式细胞技术等方法比较SW480细胞与SW480/OxR细胞的增殖及侵袭力、Na+,K+-ATP酶活性及其β1亚单位和P-gp表达的差异,观察哇巴因对SW480/OxR细胞上述指标的影响.结果:与SW480细胞比较,SW480/OxR细胞增殖活力无明显变化(P>0.05),而细胞侵袭力却显著增加,Na+,K+-ATP酶活性下降,β1亚单位表达下调,P-gp表达上调(P 均 0.05). The Na+/K+-ATPase activity significantly decreased in SW480/OxR cells compared with SW480 cells ( P < 0.01 ). The expression of the Na7K+-ATPase β1-subunit in mRNA and protein levels was lower in SW480/OxR cells than in SW480 cells ( P < 0.01 ). However, the expression of P-gp in mRNA and protein levels was higher in SW480/OxR cells than in SW480 cells ( P < 0.01 ). Interestingly, ouabain at the physiological concentration of 1 nM significantly enhanced the activity of Na+/K+-ATPase in SW480/OxR cells (P< 0.05). The expression of the pi-subunit was also upregulated and that of P-gp was downregulated at the protein level, thereby inducing a decrease in the capacity of SW480/OxR cell growth inhibition and invasion. Nevertheless, after ouabain treatment for 48 h, the Na+/K+-ATPase activity and β1-subunit protein expression level in SW480/OxR cells were still lower than those in SW480 cells (P < 0.01). Conclnsion: Decreased Na+/K+-ATPase activity can be attributed to the downregulation of Na+/K+-ATPase β 1-subunit expression and may cause the MDR of human colorectal cancer cells. Ouabain could partly reverse the MDR of such cells,which can be attributed to increased Na+/7K+- ATPase activity and P-gp expression downregulation.

摘要： 目的观察氨氯地平单用及联用依那普利对肾血管性高血压大鼠(RHR)主动脉重塑及主动脉平滑肌细胞膜钠泵、钙泵活性和钠泵а1亚单位及细胞质膜钙泵亚型1(PMCA1)mRNA表达的影响,探讨氨氯地平单用及联用依那普利改善动脉重塑的可能机制。方法建立"两肾一夹(2K1C)"肾性高血压大鼠模型,设立假手术组、模型组、氨氯地平组[5 mg/(kg.d)]、依那普利组[10 mg/(kg.d)]、氨氯地平+依那普利组[2.5 mg/(kg.d)+5 mg/(kg.d)],每组6只,药物连续干预6周。采用HE染色、免疫组织化学染色、Masson染色法检测主动脉中膜形态及结构变化并测量中膜厚度与腔径比(ML/LD)、中膜面积与管腔面积比(MA/LA),放射免疫法检测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量,酶学比色法检测细胞膜钠泵及钙泵活性,实时PCR法检测钠泵α1亚单位、PMCA1 mRNA表达水平。结果 RHR血压显著升高,主动脉ML/LD、MA/LA明显增加,中膜组织钠泵、钙泵活性及钠泵α1亚单位、PMCA1 mRNA表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。氨氯地平及依那普利均能减小RHR主动脉ML/LD、MA/LA,改善平滑肌肥大和胶原沉积,且均能降低主动脉中膜AngⅡ水平并升高主动脉中膜钠泵、钙泵活性(均P<0.01)。氨氯地平可显著升高PMCA1 mRNA表达水平,依那普利上调钠泵α1亚单位、PMCA1 mRNA表达水平(均P<0.01)。氨氯地平及依那普利联合应用减小主动脉ML/LD、MA/LA,降低主动脉组织AngⅡ水平和升高钠泵、钙泵活性及PMCA1 mRNA表达水平存在协同作用(均P<0.01)。结论氨氯地平联用依那普利改善主动脉重塑优于两药单用,其机制可能与它们更有效阻断主动脉组织RAS,升高主动脉平滑肌细胞膜钠泵及钙泵活性有关。氨氯地平可能通过上调PMCA1 mRNA表达水平改善钙泵活性。

摘要： 缺血心肌恢复血供时,再灌注区心肌细胞及血管网会发生显著的病理变化,被称为心肌再灌注损伤,该变化常使患者再灌注治疗后病情反而加重.本实验建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,通过检测各项指标,探讨金香丹对大鼠心肌缺血再灌注损伤的防治作用及其机制。

摘要： 缺血心肌恢复血供时,再灌注区心肌细胞及血管网会发生显著的病理变化,被称为心肌再灌注损伤,该变化常使患者再灌注治疗后病情反而加重.本实验建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,通过检测各项指标,探讨金香丹对大鼠心肌缺血再灌注损伤的防治作用及其机制。

摘要： 缺血心肌恢复血供时,再灌注区心肌细胞及血管网会发生显著的病理变化,被称为心肌再灌注损伤,该变化常使患者再灌注治疗后病情反而加重.本实验建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,通过检测各项指标,探讨金香丹对大鼠心肌缺血再灌注损伤的防治作用及其机制。

摘要： 缺血心肌恢复血供时,再灌注区心肌细胞及血管网会发生显著的病理变化,被称为心肌再灌注损伤,该变化常使患者再灌注治疗后病情反而加重.本实验建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,通过检测各项指标,探讨金香丹对大鼠心肌缺血再灌注损伤的防治作用及其机制。

摘要： 缺血心肌恢复血供时,再灌注区心肌细胞及血管网会发生显著的病理变化,被称为心肌再灌注损伤,该变化常使患者再灌注治疗后病情反而加重.本实验建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,通过检测各项指标,探讨金香丹对大鼠心肌缺血再灌注损伤的防治作用及其机制。

摘要： 缺血心肌恢复血供时,再灌注区心肌细胞及血管网会发生显著的病理变化,被称为心肌再灌注损伤,该变化常使患者再灌注治疗后病情反而加重.本实验建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,通过检测各项指标,探讨金香丹对大鼠心肌缺血再灌注损伤的防治作用及其机制。

摘要： 本公开涉及含有三磷酸腺苷双磷酸酶基因的组合的修饰植物细胞、植物组织、小植物、植物部分、植物及其后代，所述三磷酸腺苷双磷酸酶基因的组合包括至少一个修饰的基因和/或至少一个额外的三磷酸腺苷双磷酸酶基因。所述公开还涉及一种制备具有修饰的三磷酸腺苷双磷酸酶基因和/或额外的三磷酸腺苷双磷酸酶基因的改良植物的方法。所述改良植物通常呈现出至少一个优于该植物由其衍生的植物系的改进特征。所述公开还涉及包含编码所公开的三磷酸腺苷双磷酸酶的核苷酸序列的重组DNA分子。

摘要： 本发明涉及突变获得的一种腺苷三磷酸/双磷酸酶及其编码基因与应用。腺苷三磷酸/双磷酸酶的编码基因YND1‑502F‑518H/GSGSGS‑gene，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。腺苷三磷酸/双磷酸酶YND1‑502F‑518H/GSGSGS，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明首次通过将Genebank中GeneID:856722的突变体第1504‑1554位的疏水性跨膜区进行替换的方法，在大肠杆菌表达系统可溶性表达了YND1‑502F‑518H/GSGSGS。

摘要： 本公开内容提供通过检测Na

摘要： 本公开涉及含有三磷酸腺苷双磷酸酶基因的组合的修饰植物细胞、植物组织、小植物、植物部分、植物及其后代，所述三磷酸腺苷双磷酸酶基因的组合包括至少一个修饰的基因和/或至少一个额外的三磷酸腺苷双磷酸酶基因。所述公开还涉及一种制备具有修饰的三磷酸腺苷双磷酸酶基因和/或额外的三磷酸腺苷双磷酸酶基因的改良植物的方法。所述改良植物通常呈现出至少一个优于该植物由其衍生的植物系的改进特征。所述公开还涉及包含编码所公开的三磷酸腺苷双磷酸酶的核苷酸序列的重组DNA分子。

摘要： 本发明公开了一种多肽－二磷酸腺苷核糖二磷酸酶－38.5,和具有这个二磷酸腺苷核糖二磷酸酶的药学化合物。本发明还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法,如原发性高血压、消化性溃疡、肾病综合征、支气管哮喘、震颤麻痹等。本发明还公开了编码这种新的二磷酸腺苷核糖二磷酸酶－38.5的多核苷酸的用途。

摘要： 本公开涉及含有三磷酸腺苷双磷酸酶基因的组合的修饰植物细胞、植物组织、小植物、植物部分、植物及其后代，所述三磷酸腺苷双磷酸酶基因的组合包括至少一个修饰的基因和/或至少一个额外的三磷酸腺苷双磷酸酶基因。所述公开还涉及一种制备具有修饰的三磷酸腺苷双磷酸酶基因和/或额外的三磷酸腺苷双磷酸酶基因的改良植物的方法。所述改良植物通常呈现出至少一个优于该植物由其衍生的植物系的改进特征。所述公开还涉及包含编码所公开的三磷酸腺苷双磷酸酶的核苷酸序列的重组DNA分子。

摘要： 一种方法，包括以下步骤：提供含有污染性核苷二磷酸和/或核苷三磷酸的样品，例如包括脱氧核糖核苷三磷酸的ATP和/或ATP类似物；用腺苷三磷酸双磷酸酶减少样品中污染性核苷二磷酸和/或核苷三磷酸的量，其中所述腺苷三磷酸双磷酸酶是弗氏志贺菌腺苷三磷酸双磷酸酶；对所述样品进行分析，其中所述分析包括如果污染性核苷二磷酸和/或核苷三磷酸在步骤b中没有减少将会受其影响的分析。

摘要： 描述了一种改进形式的EN-腺苷三磷酸双磷酸酶，其具有比现有技术中描述的更复杂的糖基化和更长的生物学半衰期。

摘要： 本发明涉及突变获得的一种腺苷三磷酸/双磷酸酶及其编码基因与应用。腺苷三磷酸/双磷酸酶的编码基因YND1-502F-518H/GSGSGS-gene，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。腺苷三磷酸/双磷酸酶YND1-502F-518H/GSGSGS，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明首次通过将Genebank中GeneID:856722的突变体第1504-1554位的疏水性跨膜区进行替换的方法，在大肠杆菌表达系统可溶性表达了YND1-502F-518H/GSGSGS。

摘要： 一种烟草腺苷三磷酸酶的单克隆抗体，所述的单克隆抗体的重链可变区序列包含SEQ ID NO.2所示的CDR1的氨基酸序列GYSITSGYY，SEQ ID NO.4所示的CDR2的氨基酸序列ISYDGSN和SEQ ID NO.6所示的CDR3的氨基酸序列FGKGY；轻链可变区序列包含SEQ ID NO.9所示的CDR1的氨基酸序列QSIVHSNGNTY，SEQ ID NO.11所示的CDR2的氨基酸序列KVS和SEQ ID NO.13所示的CDR3的氨基酸序列FQGSHVPWT。本发明提供一种烟草腺苷三磷酸酶(Apyrases，APY)的单克隆抗体及其应用，以解决现有技术存在的缺陷，本发明通过提供一个靶向蛋白研究的工具，使得对烟草和其它植物不同组织，不同生理条件下APY蛋白表达变化检测得以实现。