脱细胞

摘要： 背景:十二烷基硫酸钠是一种常用于同种异体组织脱细胞处理的脱细胞试剂,然而其难以从组织内去除,少量残留即可产生细胞毒性。目的:提出一种高效去除异体组织中脱细胞试剂十二烷基硫酸钠的清洗方法。方法:选择纯水、钾盐溶液和乙醇作为清洗介质,并通过不同介质的排列组合进行清洗,对十二烷基硫酸钠残留量、异体真皮和异体肌腱的组成、结构、力学性能和细胞毒性等方面进行检测,评价清洗效果。结果与结论:总体上,乙醇+氯化钾、体积分数75%乙醇+氯化钾对样品的成分和结构无大影响。首先,十二烷基硫酸钠浸泡处理将异体真皮和异体肌腱的DNA残留控制在50 ng/mg以下之后再进行清洗,异体真皮、异体肌腱中的十二烷基硫酸钠含量分别降低了96.7%和97%;其次,异体真皮、异体肌腱的糖胺聚糖和胶原蛋白含量均无较大变化;此外,异体肌腱在清洗后,其最大拉力、强度和模量高于脱细胞后,与原材料相比无显著性差异;最后,细胞毒性结果显示异体真皮和异体肌腱清洗后的细胞存活率高于80%,细胞毒性分级不大于1级。

摘要： 背景:心脏瓣膜病是心脏外科中的常见病,而人工心脏瓣膜置换手术是症状性瓣膜疾病的规范治疗。近年来,生物瓣膜作为人工心脏瓣膜的重要组成部分,在材料和处理方式上取得了一些突破,但仍存在一定缺点。目的:总结部分现有人工生物瓣膜的相关研究并对其未来进行展望。方法:第一作者于2022年3月应用计算机在中国知网和PubMed数据库检索2012年1月至2022年3月人工生物瓣膜的相关文献,以“生物瓣膜、生物材料、脱细胞、交联剂、内皮化、TAVR”为中文检索词,以“bioprosthetic valves,biomaterials,decellularization,cross-linking agents,endothelialization,TAVR”为英文检索词,最终纳入79篇文献进行综述。结果与结论:①生物瓣膜具有优越的生物相容性和血液动力学性能,血栓形成较少,患者无需终身抗凝,但生物瓣膜易钙化,导致结构性瓣膜退化,使其耐久性降低。②牛和猪是传统异种瓣膜的主要生物材料来源,目前新型材料主要来源于转基因猪和鱼鳔。③脱细胞技术可以降低生物瓣膜的免疫原性,而脱细胞联合方法可以在保护细胞外基质的基础上提高脱细胞效率。④化学交联剂具有细胞毒性,会导致瓣膜钙化,可通过替代交联剂或修改交联方法降低不良反应;天然交联剂人体相容性好,可一定程度缓解钙化。⑤生物瓣膜内皮化具有抗凝血和抗炎作用,多种涂层技术可以促进生物瓣膜表面内皮化。⑥多种新型介入瓣膜正在研发或投入临床,发展迅速。

摘要： 背景:脱细胞、去抗原、病毒灭活与终端灭菌工艺的组合优化是制备符合临床要求组织再生材料的关键技术。目的:系统比较分析两种脱细胞、去抗原、病毒灭活与灭菌组合工艺对猪真皮基质理化性能的影响。方法:取新鲜猪皮,分两组工艺制备猪真皮基质:①方法A:采用1%Triton X-100、DNase和RNase、1%磷酸三丁脂进行脱细胞处理,1%过氧乙酸+25%乙醇病毒灭活,伽马射线辐照终端灭菌;②方法B:采用中性蛋白酶、0.5%Triton X-100和DNase进行脱细胞处理,α-半乳糖苷酶去除抗原,0.1%过氧乙酸病毒灭活,伽马射线辐照终端灭菌。对两种方法制备的猪真皮基质进行表征。结果与结论:①A组胶原蛋白含量低于B组,弹性蛋白、糖含量高于B组,材料硬度值高于B组;A组基质材料的悬垂性较差,B组基质材料的柔韧性较好;②A组脱细胞处理不影响基质材料的热稳定性,B组脱细胞略降低基质材料的热稳定性;伽马射线灭菌后,A组基质材料的热稳定性大幅度下降,B组基质材料的热稳定性下降很小;③与B组相比,A组基质材料的拉伸强度和弹性较小;体外酶降解实验显示,A组基质材料对胶原酶降解具有很强的抗性,对胰蛋白酶敏感、易降解,B组基质材料则相反;④扫描电镜显示,伽马射线灭菌后,A组基质材料基本看不到胶原三维结构,胶原纤维排列致密,胶原纤维之间存在非纤维结构性凝胶样物质;B组基质材料胶原纤维结构清晰,胶原纤维之间不存在非纤维结构性胶样物质。苏木精-伊红和三色染色显示,伽马射线灭菌后,A组基质材料可见少量细胞核,胶原纤维排列紧密,材料致密;B组基质材料无细胞核,保留了较好的胶原纤维三维空间结构;⑤结果表明,不同组合的制备工艺对脱细胞基质材料的理化性能影响极大,方法B在有效脱细胞和去抗原的同时较完整地保留了天然组织结构,方法A对材料的破坏性较大,制备的基质材料胶原成分含量、柔软度、热稳定性和力学性能均不如方法B。

摘要： 背景:最近脱细胞真皮基质水凝胶因其可注射性和能填充不规则空间,在组织填充与修复中有着广阔的应用前景,而细胞相容性和生物相容性是组织修复的关键,探究脱细胞真皮基质水凝胶的相容性具有重要意义。目的:构建一种脱细胞真皮基质水凝胶,用于组织填充和修复。方法:制备可注射型脱细胞真皮基质水凝胶,扫描电镜下观察其微观形貌。将质量浓度8,10 g/L的脱细胞真皮基质水凝胶分别与骨髓间充质干细胞共培养,检测细胞增殖与细胞相容性。将蛋白质量浓度0.25,0.5 g/L的脱细胞真皮基质水凝胶分别注射至同一SD大鼠背部皮下不同部位,术后2,4周,观察水凝胶降解情况。将蛋白质量浓度1,1.5,2 g/L的脱细胞真皮基质水凝胶分别注射至同一SD大鼠背部皮下不同部位,术后8,16周,观察水凝胶降解情况,并进行组织学分析。结果与结论:①扫描电镜下可见,脱细胞真皮基质水凝胶呈现一种不规则随机走向的多孔纤维结构,孔径大小不一。②共培养1,3,5 d后,两种浓度的水凝胶对骨髓间充质干细胞的增殖无影响;共培养1,2,3 d后的Live/Dead染色显示,两种浓度的水凝胶对骨髓间充质干细胞的增殖无影响,但水凝胶上的细胞形态发生了一定变化。③蛋白质量浓度0.25 g/L的水凝胶皮下注射2周后降解,0.5 g/L的水凝胶皮下注射4周后降解,1,1.5,2 g/L的水凝胶皮下注射16周均未降解,甚至可能保留更长时间。苏木精-伊红染色显示,皮下注射8周后,3种蛋白质量浓度水凝胶组织较为致密,出现少量的炎症浸润,2 g/L组有微血管生成;16周后,水凝胶组织变得松散,以1 g/L组较明显,炎症浸润减轻。免疫组化染色显示,随着注射时间的延长,水凝胶中的微血管数量增加;并且随着蛋白质量浓度的增加,水凝胶中的微血管数量增加。④结果表明,可注射脱细胞真皮基质水凝胶具有良好的细胞相容性和生物相容性。

摘要： 背景:脱细胞真皮基质作为皮肤替代物具有广阔的前景和市场.目的:综述脱细胞真皮基质在临床上的应用进展.方法:应用计算机检索2000-2021年CNKI、PubMed数据库、万方数据知识服务平台,英文检索词为"Acellular dermal matrix,reconstruction/repair/plastic/clinical study",中文检索词为"脱细胞真皮基质,修复/重建/整形/临床研究",最终共纳入64篇文献进行综述.结果与结论:脱细胞真皮基质具有快速血管化、低抗原性、良好的组织相容性和稳定的理化性质等特点,是头颈外科、乳腺外科、烧伤整形外科、妇科、泌尿外科等手术中的常用生物材料.脱细胞真皮基质在临床上应用的主要问题在于其产出少、达到医用标准的生产过程复杂,因此价格高昂,增加了患者的医疗经济负担.脱细胞真皮基质虽然经过脱细胞处理去除了大部分异体抗原物质,但仍有排异、感染等手术并发症的风险.未来对于脱细胞真皮基质,首先应该从生产工艺等根源上进行优化,改良生产工艺,降低生产成本、增加商品化规格;其次,改进脱细胞过程,在保留真皮基质的前提下更深一步去除脱细胞真皮基质中蛋白质等过敏原,进一步降低脱细胞真皮基质免疫原性、增强其相容性,减少感染、排异等不良事件的发生.

摘要： 背景:用组织或器官脱细胞制成的生物支架已被成功应用于各种组织工程和再生医学.目的:综述脱细胞支架的制备方法及其在组织工程和再生医学中的作用和应用.方法:在PubMed、CNKI数据库中进行相关文献检索,以"decellularization,scaffold,extracellular matrix,tissue regeneration and repair"为英文检索词,以"脱细胞,支架,细胞外基质,组织再生修复"为中文检索词,通过阅读题目和摘要进行初步筛选,排除与文章主题不相关的文献,最终纳入66篇文献进行结果分析.结果 与结论:通过物理、化学、生物方法对组织器官进行脱细胞后获得的脱细胞支架,可有效保留细胞外基质成分,无免疫原性,具有良好的生物相容性和机械性能,可促进细胞的黏附、增殖、迁移、分化,诱导组织修复,重建血管化、功能化的组织与器官.脱细胞支架在许多组织与器官(如心脏、肝脏、肾脏、肺、气管、皮肤和骨组织)的体外实验和短期体内实验中取得了理想的效果,提示脱细胞支架在组织再生与修复中发挥重要作用,具有较好的应用前景,但要投入临床使用还需更多的深入研究和探索.

摘要： 背景:用组织或器官脱细胞制成的生物支架已被成功应用于各种组织工程和再生医学。目的:综述脱细胞支架的制备方法及其在组织工程和再生医学中的作用和应用。方法:在PubMed、CNKI数据库中进行相关文献检索,以"decellularization,scaffold,extracellular matrix,tissue regeneration and repair"为英文检索词,以"脱细胞,支架,细胞外基质,组织再生修复"为中文检索词,通过阅读题目和摘要进行初步筛选,排除与文章主题不相关的文献,最终纳入66篇文献进行结果分析。结果与结论:通过物理、化学、生物方法对组织器官进行脱细胞后获得的脱细胞支架,可有效保留细胞外基质成分,无免疫原性,具有良好的生物相容性和机械性能,可促进细胞的黏附、增殖、迁移、分化,诱导组织修复,重建血管化、功能化的组织与器官。脱细胞支架在许多组织与器官(如心脏、肝脏、肾脏、肺、气管、皮肤和骨组织)的体外实验和短期体内实验中取得了理想的效果,提示脱细胞支架在组织再生与修复中发挥重要作用,具有较好的应用前景,但要投入临床使用还需更多的深入研究和探索。

摘要： 目的探讨液氮冻融联合胰蛋白酶消化脱细胞法构建猪心脏瓣膜支架的效果。方法将新鲜的猪心脏瓣膜剪成约1 cm×1 cm的小块,按随机数字表法分为实验组、对照组和未处理组,每组设5个重复标本。3组标本经液氮冻融后,实验组采用0.6%胰蛋白酶和5%十二烷基硫酸钠(SDS)各处理3 d;对照组采用5%SDS处理6 d;未处理组置于无菌0.9%氯化钠溶液中常温静置6 d。通过HE染色和丽春红-苦味酸染色、残留DNA定量及α-Gal抗原检测确定脱细胞效率。将脱细胞的猪心脏瓣膜在大鼠皮下包埋2周,通过茜素红染色观察其抗钙化潜能。结果实验组的猪心脏瓣膜标本细胞成分基本去除,细胞外基质结构完整;残留DNA含量、α-Gal抗原分别为(55.6±16.8)μg/g、0.02±0.01,明显低于对照组的(750.4±178.1)μg/g、0.14±0.02(均P<0.01)。大鼠皮下包埋2周后,实验组钙化结节明显少于对照组(P<0.01)。结论应用液氮冻融联合胰蛋白酶消化构建的脱细胞猪心脏瓣膜基质可能是组织工程瓣膜的良好支架。

摘要： 目的通过体外巨噬细胞极化诱导的实验方法,客观评价异种血管组织进行除垢剂脱细胞处理后的纯度和免疫原性。方法对新鲜牛主动脉采用3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸内盐[3-(3-Chol⁃amidopropyl)dimethylammonium)-1-propanesulfonate,CHAPS]和十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)的双除垢剂脱细胞方法进行脱细胞处理,其中SDS脱细胞时间设置为24 h和36 h两组,定量检测脱细胞处理后组织材料DNA浓度。进一步将脱细胞血管基质材料消化为溶液状态,在体外对SD大鼠来源的巨噬细胞进行刺激诱导。采用定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)分析巨噬细胞表面标记物诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、CD80、CD206和CD163,以及分泌的细胞因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-10和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)的基因表达量。结果脱细胞时间为36 h的一组基质材料DNA浓度50 ng/mg,诱导巨噬细胞向M1型极化,促炎症因子表达增加。结论体外诱导巨噬细胞极化的方法,明显区别出血管组织除垢剂脱细胞处理残存DNA是否存在免疫刺激作用,可以考虑作为评价洗脱效果的客观指标之一。

摘要： 目的探讨在不使用免疫抑制剂的情况下,十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)脱细胞方法用于气管异种移植的可行性。方法采用健康家猪9只,体质量50~60 kg,雌雄不限。健康成年比格犬9只,体质量11~14.5 kg,雌雄不限。将获取的9段家猪气管随机分为3组:1%SDS处理组(气管管腔内浸泡1%SDS去黏膜),3%SDS处理组(气管管腔内浸泡3%SDS去黏膜)和3%SDS内外处理组(整个气管管腔内外均浸泡于3%SDS去黏膜)。3组处理后的气管,在不使用任何免疫抑制剂的情况下,分别在9只犬背部进行异种异位埋植实验,通过组织学检查和大体观察了解脱细胞程度和埋植后气管的排斥反应情况。结果苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)染色证实两组3%SDS脱细胞的效果较好,但3种脱细胞处理后气管的异种埋植实验均出现排斥反应。结论不使用免疫抑制剂的情况下,单一使用SDS脱细胞方法在气管异种移植中是不适用的。

摘要： 脱细胞技术是近年来发展较快的组织工程技术,目前已广泛应用于心脏、肾脏、肝脏等组织的再生,具有广阔的发展前景.而在口腔领域中该技术也是方兴未艾,本研究团队成功构建了脱细胞牙本质及脱细胞牙髓支架材料,其结果均提示相同类别的脱细胞支架是其相应组织再生较为理想的支架材料.因此,本实验尝试进行脱细胞牙周组织支架的制备,并探索其应用于牙周再生的可行性.

摘要： 长段气管缺损的修复一直是临床难以克服的顽疾.近年来组织工程技术的快速发展为解决这一难题提供了新的思路.然而由于缺乏一种理想的生物支架材料从而限制了其临床应用.通过引入激光打孔技术并且优化传统的脱细胞参数，从而制备出理想的激光打孔脱细胞基质支架，然后构建出具有足够力学强度的组织工程气管并最终实现对兔气管进行原位修复。

摘要： 目的:使用脱细胞粘膜基质是快速有效修复各类软组织缺损的有效方法,而动物模型的材料修复有效性试验是临床前研究的关键.尝试使用脱细胞粘膜基质材料进行犬肛瘘模型的修复试验,为临床肛瘘修复提供有效性支持.rn 方法:利用脱细胞粘膜基质材料对犬肛瘘模型进行修复试验,使用荧光素钠标记材料,材料降解及组织新生状况使用荧光显微镜、扫描电镜观测.并且检测炎细胞增殖情况来评价材料的免疫原性及安全性.rn 结果:在犬肛痰修复中，脱细胞粘膜基质能够快速有效达到修复效果，无免疫原性反应，并且表现出很好的安全性。rn 结论:利用脱细胞粘膜基质进行犬肛瘘修复，是有效的肛瘘修复方法，可为临床肛瘘修复提供依据。

摘要： 目的:研究反复冻融结合核酸酶处理对小牛跟腱脱细胞效果以及肌腱组织形态、结构、生化成分和力学特性的影响.rn 方法:取新鲜新生小牛跟腱48根,随机分为3组(n=16):新鲜正常肌腱作为对照组1(A组),反复冻融5次(液氮冷冻/37°C复温)作为对照组2(B组),反复冻融结合核酸酶处理24h作为实验组(C组).每组4根用于形态学、组织学以及免疫组化观察,其余12根用于DNA含量和生物力学特性检测.rn 结果:SEM观察结果显示A,B组胶原纤维排列致密有序，形态完整，未见断裂或缺损;C组的胶原纤维排列松散，几乎没有断裂或缺损。阿利新蓝、天狼星红染色以及免疫组化结果显示C组糖胺聚糖、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白大部分被保留。H&E和DAPI染色结果显示A,B组胶原纤维之间较多完整的细胞核清晰可见，而C组胶原纤维之间未见完整细胞核，但腱内膜上仍有部分细胞核残留。DNA定量检测结果证实C组DNA含量明显低于A,B组(P＜0.05)。生物力学测定结果显示，各组拉伸强度、断裂应变、刚度和弹性模量数值均有差异，但差异均无统计学意义(P＞0.05)。rn 结论:反复冻融结合核酸酶处理完整的小牛跟腱，可有效地去除细胞成分，同时基本保留跟腱原始的胶原纤维结构、形态、大部分胞外基质成分和力学特性，可望用于肌腱/韧带缺损的修复材料。

摘要： 探索京尼平交联脱细胞猪角膜基质(Gc-APCS)使之染色进而用作美容性角膜镜片的可行性.在适宜的交联反应条件(37°C,pH值为5.5)下,使用1.0％京尼平水溶液处理脱细胞猪角膜基质(APCS)4 h,并行-10°C冷冻干燥以制备美容性角膜镜片,并对制备所得Gc-APCS的理化性能和生物学特性进行评价.京尼平交联脱细胞猪角膜基质制备了美容性角膜镜片。京尼平是良好的天然交联剂，交联APCS后:未影响孔隙结构和微环境，提升了稳定的力学性能保持了较好的溶胀性能，具备了良好的抗降解性能Gc-APCS植入体内后:生物相容性良好，染色稳定，基质愈合良好，可用于移植治疗角膜白斑。

摘要： 目的:探讨利用异种脱细胞血管基质和间充质干细胞在体外构建小口径血管移植物。rn 材料和方法:采用非离子型去垢剂和胰蛋白酶去除猪髂动脉血管壁结构细胞,对脱细胞基质进行组织学、力学检测及孔隙率评估。采用密度梯度离心和贴壁培养的方法从犬骨髓中分离出间充质干细胞并体外培养扩增。在生物反应器内采用旋转种植的方法将犬骨髓间充质干细胞种植到脱细胞基质在,并进一步在搏动性生物反应器内进行培养。采用逐渐增加剪切力的方法使种植的间充质干细胞最终能够耐受体内动脉条件下的剪切力:剪切力在2天内由1dyne/cm2逐渐增加15 dyne/cm2,然后在5dyne/cm2的剪切力下继续培养2天。rn 结果:经过脱细胞处理后,光镜和电镜观察证实血管壁的细胞成分完全去除。自然血管的爆破强度为2975±680.53mmHg(n=6),脱细胞处理后,爆破强度为1675±283.95 mmHg(n=6),t=3.054,P=0.038。自然血管和脱细胞基质的孔隙率分别为72.51%和94.93%。间充质干细胞能够种植到脱细胞基质的管腔面上,细胞在剪切力的作用下成为基本融合。细胞呈高度伸长状态并且其排列与流体的方向一致。rn 结论:小口径血管移植物可以通过将间充质干细胞种植到异种脱细胞血管基质并在搏动性生物反应器内培养的方法进行构建。

摘要： 目的：探讨基于犬骨髓源内皮祖细胞和猪脱细胞动脉基质体外构建组织工程静脉及其植入体内的可行性。方法 实验犬(n=8)骨髓单个核细胞体外扩增获取足够数量内皮祖细胞,荧光标记后将其种植于酶法脱细胞猪动脉管状基质,观察不同预衬基质、不同转速、不同状态下体外构建组织工程静脉血管的差别。以未种植细胞的脱细胞管状基质为对照(n=4),将其置换采髓犬自体下腔静脉,术后10d、4周、12周造影后取材,大体形态、组织学和超微结构检测。结果 实验(对照)组在第10d、4周、12周的通畅率分别为7/7(2/4)、6/6(2/2)和4/4(1/2)。相关检测提示实验组移植血管腔面覆盖汇合的内皮细胞,部分为种植的细胞,部分为新形成的内皮细胞,中层有成纤维细胞和α-actin阳性细胞出现。通畅的对照组腔面由假内膜覆盖。结论 基于自体内皮祖细胞和脱细胞动脉基质体外构建组织工程静脉是可行的,但需要进一步改进和观察。

摘要： 通过3D打印技术结合脱细胞技术,制备既仿生半月板取向性结构又仿生半月板纤维软骨细胞微环境的组织工程半月板双相支架,通过复合半月板纤维软骨细胞体外实验及裸鼠皮下异位成纤维软骨实验,证实双向支架可构建组织工程半月板.

摘要： 研究人员发明了针对脂质的脱细胞方法，利用磷脂酶A2选择性的消化细胞膜磷脂2-位脂键。由于细胞外基质成分中完全不含该脂键，因此该方法脱细胞具有特异性强、速度快、不损伤基质的优势。该方法不但能够有效的脱去所有的细胞成分，而没有对胶原成分产生明显影响，较好地保留了角膜基质的超微结构，制作的去细胞角膜基质具有良好的生物相容性、足够的生物力学强度、良好的稳定性、高度的透明性。针对角膜组织的生理学特点研究人员发明了连续灌注培养联合单面负压-气液界面培养的动态培养体系构建板层生物角膜，目前在构建组织工程产品时，提高细胞与支架的粘附，多采用对支架材料表面改性的方法，实际上，通过生物场及机械外力处理细胞及细胞外基质，也可以提高细胞与载体粘附力。近年来，日本学者利用温敏式专利技术用自体口腔豁膜上皮细胞、角膜缘上皮细胞等构建了上皮细胞片移植治疗角膜缘缺乏，取得了一定效果。此外，利用酶原-酶降解法和离心速构法体外快速构建复层组织工程角膜上皮，辅以眼表生物膜固定装置-羊膜制成接触镜也能重建兔角膜上皮。

摘要： 韧带严重损伤后不能自愈，临床上有多种替代物应用于韧带的修复重建。替代物主要包括自体、异体韧带/肌腱移植物和人工合成材料，但均因各自固有的缺陷而不能取得满意的疗效。理想的韧带替代物必须具备良好的力学特性，组织相容性，并且在机体内降解吸收的过程中形成与韧带相一致的生物活性组织，从而达到生理性修复创伤和重建功能目的。组织工程韧带(TEL)具备以上优点，是一种理想的韧带替代物。TEL由种子细胞和具有韧带性能的支架构成，韧带支架必须具备良好的细胞相容性、生物力学特性并且免疫原性小。

摘要： 本发明涉及抑制易脱分化的细胞的脱分化的方法，包括(1)将上述细胞应用于聚合物多孔质膜的工序、及(2)培养上述细胞，使增殖的工序，其中，上述聚合物多孔质膜是有具有多个孔的表面层A及表面层B和夹在上述表面层A及表面层B之间的大空隙层的三层结构的聚合物多孔质膜，其中存在于上述表面层A的孔的平均孔径比存在于上述表面层B的孔的平均孔径小，上述大空隙层有与上述表面层A及B结合的隔壁和被所述隔壁以及上述表面层A及B包围的多个大空隙，在上述表面层A及B中的孔与上述大空隙连通。

摘要： 本发明涉及用于诱导从体细胞到诱导性多能干细胞的脱分化的来源于胎盘的细胞条件培养基及利用其的脱分化诱导方法。当使用本发明的用于诱导脱分化的来源于胎盘的细胞条件培养基时，仅使用由来源于人的产物构成的培养基便可稳定确立个性化定制的脱分化干细胞，并通过提供来源于人胎盘的环境来再现成类似生物环境，从而可制备适用于临床的细胞治疗剂。

摘要： 一种猪角膜的脱细胞方法，采用如下步骤：S1干燥处理：将预处理后角膜干燥至含水量为5％‑20％；S2酶处理：采用DMEM配置Benzonase溶液；将角膜加入上述酶溶液，角膜表面气泡去除后，置于震荡培养箱中震荡处理时间不大于4h；S3清洗：角膜在清洗溶液中震荡洗涤处理不少于5次，每次震荡洗涤时间不大于1h。本发明对角膜的透明度影响降到最低。

摘要： 一种用于制造脱细胞化的组织的方法，其包括如下步骤：使用包含液化气体的液体将生物组织的细胞裂解，和使用溶核酶将所述生物组织的裂解的细胞中包含的核酸组分降解。

摘要： 本发明描述了一种从罗非鱼(尼罗罗非鱼)的皮肤中获得细胞外基质的方法，该方法包括以下步骤：化学和酶促脱细胞、脱毒、化学消毒、交联、漂白、脱水和通过γ辐射灭菌，更具体地，每个所述程序包括的步骤以及所述细胞外基质在治疗组织破裂；皮炎；急性、慢性和创伤性损伤；战场伤口；坏死性伤口；撕裂伤；擦伤；挫伤；和其他病变和病状中的用途。本发明属于药学、医学和兽医学、牙医学、化学、组织工程学、分子生物学和生物技术领域。

摘要： 本发明公开一种SDS脱细胞溶液及其在脱细胞处理或细胞外基质不可溶组分鉴定中的应用。首先公开了一种SDS脱细胞溶液，由溶剂PBS溶液和溶质0.5M NaCl、1.5％SDS、0.1％Triton X‑100、0.1％Tween 20和1mM蛋白酶抑制剂混合物组成。进一步公开了其在脱细胞处理或细胞外基质不可溶组分鉴定中的应用。本发明脱细胞方法在SDS法脱细胞前，增加了冷冻/解冻三次循环以及针尖扎眼等步骤，另外利用优化的SDS脱细胞溶液，适用于小鼠整体器官或组织或小块组织的脱细胞，操作简便，且经济成本较低，脱细胞效果显著，最大限度提高了ECM组分的纯度，以后续蛋白质谱鉴定ECM不可溶组分。

摘要： 本发明涉及生物材料，该生物材料从脱细胞化的动物骨骼组织形成并且用凝胶形式的骨细胞外基质包被，其能够提供有效的机械和生物支持，此外在其它生物材料的处理、研究和开发中用作骨移植物、生物反应器或载体时允许富含细胞、纳米复合物或药物；也就是说，它已经从脱细胞化的、冻干的、多孔的且刚性的、可操作的、安全的且非免疫原性的骨材料形成，包被有并且富含特异刺激骨组织的物质，以颗粒或块形式呈现/使用，因此它具有当用作生物反应器时体外促进成熟细胞系或祖细胞系形成的能力，并且当用作体内移植物时具有得到证明的整合以及加快骨折愈合和骨缺损的填充的能力；该生物材料还允许基于骨组织有机细胞外基质的完整性得到维持的实情促进细胞形成，并且它能够改善愈合时间，降低成本并为基础研究做出科学贡献，证明了脱细胞化有机基质的生物技术重要性、研究性需要和对生物材料的适用性。

摘要： 本发明涉及一种脱细胞液、脱细胞基质水凝胶及其制备方法和应用，该脱细胞液包括以下终浓度的组分：NaCl或NH

摘要： 本发明公开了一种脱细胞反应釜装置，包括外箱、内箱、材料分层机构、旋转驱动机构、控温机构、烘干机构、灭菌机构、废液清除机构和控制器；内箱设置于外箱的内部，材料分层机构设置于内箱的内部，内箱的顶部为开放式结构；内箱均与用于提供脱细胞试剂的脱细胞试剂储液箱和用于提供清洗试剂的清洗试剂储液箱相连通，脱细胞试剂和清洗试剂能够通过内箱进入材料分层机构内，与材料分层机构内的膜类生物材料接触；旋转驱动机构与材料分层机构相连，旋转驱动机构能够带动材料分层机构旋转；旋转驱动机构、烘干机构、灭菌机构和废液清除机构均与控制器电连接。上述装置在降低了人工的成本，节省了脱细胞的时间，提高了工作效率。

摘要： 本发明涉及一种脱细胞神经的制备方法，所述制备方法先将神经在高渗溶液和低渗溶液中分别处理6‑12小时；再用Triton X‑100溶液和CHAPS溶液中交替处理神经2次；化学去污剂处理后的神经置入硅橡胶模具中，垂直放置于下半部浸入液氮中的金属块上冷冻1‑2小时，待冰晶形成后进行冷冻干燥；在冻干神经重新水化后，用核酸酶处理即可。通过上述制备方法得到的脱细胞神经之中可形成纵向平行排列的微通道结构并且孔隙率显著提升。这些微通道不仅具有更大的直径，而且大小更为均匀。同时，能够更好的保存各类细胞外基质成分和更多的NGF、VEGF和BDNF等生物活性因子，进而获得更加优异的神经修复效果。