胰岛素原

摘要： 目的 在社区慢病筛查中,检测社区门诊2型糖尿病患者的血清胰岛素原水平,并讨论其临床意义.方法 研究对象分为:①对照组:门诊健康体检人群中非糖尿病者55例.②糖尿病组:40例,记录性别,年龄,体重,身高,腰围,血压.清晨空腹采血4ml,检测空腹血糖、血脂、肝功能、肾功能、C反应蛋白、尿常规等,ELISA方法检测胰岛素原.结果 ①糖尿病组患者收缩压,体重指数和腰围明显增加,合并高血压及脂肪肝的人数增加.②糖尿病组患者的空腹血糖、尿素氮和尿蛋白阳性的患者数明显高于对照组,甘油三酯有升高的趋势,但差异未达到统计学意义.③糖尿病组患者的胰岛素原比对照组升高.结论 2型糖尿病患者的血清胰岛素原水平升高,与心血管并发症的危险因素相关,有望作为社区慢病筛查的指标.

摘要： 目的 研究T2DM患者胰岛素原(PI)、真Ins(TI)与IR的相关性,分析其对IR的影响.方法 选取2018年12月至2019年2月于徐州医科大学附属医院内分泌科住院治疗的107例T2DM住院患者,根据BMI分为体重正常组(NW,n=36)、超重组(OW,n=39)及肥胖组(OB,n=32).检测FPG、血脂各项、免疫反应性Ins(IRI)、PI、TI等.结果 与NW、OW组比较,OB组PI、TI、胰岛素抵抗指数(HOMA?IR)升高(P<0.05);各组HOMA?IR与PI(r=0.576、0.486、0.538)、TI(r=0.905、0.867、0.908)呈正相关(P<0.05).多元逐步回归分析显示,TI、PI、IRI、FPG、HDL?C是HOMA?IR的影响因素(P<0.05);偏相关分析结果显示,HOMA?IR与TI、PI呈正相关(r=0.930、0.612,P<0.01).结论 T2DM患者PI、TI均参与IR,可能是IR的影响因素.

摘要： [目的]观察舒正颗粒对初发2型糖尿病脾虚痰湿型患者胰岛素原的影响.[方法]将60例患者随机分为试验组和对照组,每组各30例.对照组给予常规胰岛素泵强化治疗,试验组在对照组基础上加服舒正颗粒,疗程为2周.观察2组患者治疗前后空腹血糖(FPG)、餐后30 min血糖(1/2hPG)、餐后2 h血糖(2hPG)、胰岛素原(PI)、胰岛素原/胰岛素比值(PI/I)和中医证候总积分的变化情况,并评价2组患者的安全性.[结果](1)与治疗前相比,治疗后,2组患者的FPG、1/2hPG、2hPG、PI水平和PI/I比值及中医证候总积分均较治疗前明显改善(P<0.05),且试验组的改善作用均明显优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).(2)治疗期间,2组患者均未见明显不良反应情况发生.[结论]与单纯使用胰岛素泵强化治疗的对照组相比,舒正颗粒联合胰岛素强化治疗具有更加良好的降低血糖、改善胰岛功能和减轻胰岛素抵抗程度的作用.

摘要： 目的 探讨胰岛素原对于体外培养的大鼠肝脏细胞胰岛素其敏感性的影响以及相应的作用机制.方法 取2只雄性健康SD大鼠进行原代肝细胞分离并培养,随机分为PI组;胰岛素组;对照组. PI组采用使用3×108 mol/L PI培养液进行分离培养.胰岛素组则主要使用5×107 mol/L真胰岛素培养液进行分离培养.对照组采用不含有任何胰岛素的培养液.采用14 C-2-脱氧葡萄糖掺入率作为观察指标对胰岛素敏感性进行评测.采用放射酶分析法测定胰岛素降解酶活性.结果 PI组大鼠肝细胞14 C-2-脱氧葡萄糖掺入率较胰岛素组、对照组结果 更低,对照组大鼠肝细胞14 C-2-脱氧葡萄糖掺入率较胰岛素组更低,差异均有统计学意义( P<0. 05);PI组大鼠的肝细胞IDE活性高于胰岛素组和对照组,差异有统计学意义(P<0. 05).结论 PI作用于体外培养大鼠原代肝细胞,可有效降低细胞胰岛素敏感性,使细胞形成胰岛素抵抗.

摘要： 目的 探究正常糖代谢人群血尿酸(SUA)水平与胰岛素原(PI)的关系,评估SUA对早期胰岛β细胞功能的影响.方法 收集2018年4至12月于海南省海口市和万宁市经75 g 口服葡萄糖耐量试验确认的999例糖代谢正常的成年人,其中男337例,女662例,平均年龄(44.45±12.97)岁.所有受试者均接受问卷调查,并检测SUA、空腹血糖、空腹胰岛素等生化指标.采用空腹PI(FPI)、FPI/胰岛素比值(FPI/I)评估胰岛β细胞功能,稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)评估胰岛素抵抗程度.将受试者根据SUA水平四分位分为4组:组1(SUA＜283 μmol/L,246例),组2(283 μmol/L≤SUA＜336 μmol/L,249例),组3 (336 μmol/L≤SUA＜400 μmol/L,253例)和组4 (SUA≥400 μmol/L,251例),各组间临床指标的差异采用方差分析和秩和检验进行比较.运用多重线性回归模型分析SUA对胰岛β细胞功能指标的影响.结果 共有190例被诊断为高尿酸血症,其中男性159例,女性31例.高尿酸水平组(组4)FPI、FPI/I明显高于低尿酸水平组(组1)[13.43(13.34)和9.26(7.96)pmol/L;0.25(0.20)和0.19(0.20),均P＜0.01].校正年龄、性别、体质指数、腰围、空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR等干扰因素后,多重线性回归分析显示,SUA仍与FPI水平呈正相关(β=0.013,P＜0.01).SUA每升高100 μmol/L,总体受试者FPI平均升高1.3 pmol/L.性别分层后,无论男女亚组在校正各类混杂因素后,SUA仍与FPI呈正相关(男性β=0.014,P＜0.05;女性β=0.010,P＜0.01),而和FP1/1无明显相关性(P＞0.05).结论 糖代谢正常人群SUA和FPI呈线性正相关,应及早关注高尿酸血症患者早期胰岛β细胞功能变化.

摘要： 目的 观察抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对氧化应激(OS)所致胰岛素原成熟及胰岛β细胞分泌胰岛素功能的影响,探讨减轻OS对改善胰岛β细胞的作用及机制.方法 体外培养小鼠胰岛细胞系MIN6细胞,分为对照组、H2O2处理组、H2O2+ NAC处理组.对照组在培养基中不加入H2O2及NAC;H2O2处理组在培养基中加入10 μmol/L H2O2处理;H2O2+ NAC处理组培养基中加入10 μmol/L H2O2刺激4h后,再加入250 μmol/L NAC处理.各组细胞培养24 h后,采用台盼蓝染色法检测细胞死亡率,采用H2DCFDA荧光探针法检测细胞中活性氧簇(ROS)表达水平,采用Western blotting法检测细胞胰岛素原、构象未成熟胰岛素原复合物(CIPC)蛋白表达并计算胰岛素原/CIPC,采用放免法检测细胞上清胰岛素相对含量.结果 H2O2处理组细胞死亡率高于对照组,H2O2+NAC处理组细胞死亡率低于H2O2处理组(P均＜0.05).H2O2处理组细胞ROS表达水平高于对照组,H2O2+NAC处理组细胞ROS表达水平低于H2O2处理组(P均＜0.05).H2O2处理组细胞胰岛素原/CIPC比例低于对照组,H2O2+ NAG处理组细胞胰岛素原/CIPC高于H2O2处理组(P均＜0.05).H2O2处理组细胞上清胰岛素相对含量低于对照组,H2O2+ NAC处理组细胞上清胰岛素相对含量高于H2O2处理组(P均＜0.05).结论 NAC可以改善OS引起的胰岛β细胞损伤、胰岛素原成熟障碍及胰岛素的释放异常,有效地保护胰岛β细胞功能.

摘要： Proinsulin is the precursor of mature insulin.Proinsulin to insulin ratio reflects the degree of pancreatic β-cell dysfunction and the progression of type 2 diabetes, and may predict the risk of diabetes development.Some variants in susceptibility genes of diabetes are associated with the elevation of proinsulin to insulin ratio.Moreover, several antidiabetic drugs are able to decrease the proinsulin to insulin ratio in patients with type 2 diabetes.Therefore, the proinsulin to insulin ratio may act as a simple and useful indicator in the etiological study, risk prediction, disease progression and therapeutical evaluation in type 2 diabetes.%胰岛素原是胰岛素的前体,胰岛素原/胰岛素比值可反映胰岛β细胞功能障碍的程度和2型糖尿病的进展,并可预测糖尿病的发生风险.某些糖尿病易感基因的变异与胰岛素原/胰岛素比值升高存在一定的相关性.此外,许多降糖药物可降低2型糖尿病患者的胰岛素原/胰岛素比值.因此,胰岛素原/胰岛素比值可作为糖尿病的病因学研究、风险评估、疾病进展及治疗评价的一个重要指标.

摘要： 胰岛素原(Proinsulin,Pins)是胰岛素的合成前体.在大肠杆菌表达系统中,其一般以包涵体的形式存在,需要经过变性复性等后续加工过程才能得到有活性的胰岛素.而无细胞蛋白合成体系(Cell-free protein synthesis,CFPS)作为一种新型体外蛋白合成手段,突破了细胞的生理限制,已成功应用于多种重组蛋白药物的生产.为了探索胰岛素合成的新方法以满足其在新型给药途径研发中的需求,本研究运用CFPS体系进行胰岛素原的可溶性表达.通过将胰岛素原与荧光蛋白进行融合来增加其可溶性,成功在CFPS体系中表达了胰岛素原融合蛋白.最后使用Western blotting对融合红色荧光蛋白的胰岛素原(Pins-mCherry)进行鉴定,利用酶标仪对融合绿色荧光蛋白的胰岛素原(Pins-eGFP)在上清中的表达进行定量分析,结果表明Pins-eGFP部分可溶,其表达量为(12.28±3.45) μg/mL.本研究首次实现了融合胰岛素原在CFPS系统中的可溶性表达,其融合荧光蛋白的策略显著提升了胰岛素原的可溶性,该结果为探究胰岛素合成新方法及开发基于CFPS系统的新型胰岛素给药途径奠定了基础.%Proinsulin (Pins) is the precursor of insulin.The expression of proinsulin in Escherichia coli forms inclusion body,so that the recombinant protein should be processed with multiple steps to form active insulin.With the development in biotechnology,cell-free protein synthesis (CFPS) system is becoming a valuable tool in protein expression by decoupling the cell growth with protein production,which allows it to express proteins that would interfere with cell physiology.In this study,we synthesized soluble proinsulin in CFPS system in order to establish a new approach for both insulin expression and delivery.The soluble proinsulin was successfully expressed in CFPS system by fusing proinsulin with two types of fluorescent protein.The expression of Pins-mCherry was confirmed by Western blotting analysis,and the Pins-eGFP titer was (12.28±3.45) μg/mL in CFPS system.These results implicated that the proinsulin was expressed partially in soluble form.Here,for the first time,we successfully expressed soluble proinsulin in CFPS system by fluorescent protein fusion.These results provide useful information in developing new insulin expression and delivery method.

摘要： Objective To analyze the detection results of blood fat and proinsulin related indicators in the patients with type 2 diabetes mellitus(T2DM ) and to investigate the means for improving the patients′ clinical indicators .Methods 57 patients with T2DM in our hospital from February 2013 to February 2015 were divided into the research group ( ≥ 15 .6 mIU /L ,29 cases) and the control group (< 15 .6 mIU /L ,28 cases) according to the proinsulin level .All the cases took glucose ,at the same time the cor‐relation between the blood fat indexes with serum true insulin ,proinsulin and insulin resistance index of steady state insulin assess‐ment model was analyzed .Results Proinsulin ,serum true insulin ,2 h postprandial proinsulin ,2 h postprandial serum true insulin , insulin resistance index of steady state insulin assessment model all had correlation with and apolipoprotein B /apolipoprotein A1 . Conclusion The proinsulin level in the patients with T 2DM is increased ,thus the ratio of apolipoprotein B/apolipoprotein A1 will be accordingly increased .%目的：分析2型糖尿病患者血脂与胰岛素原等相关指标检测结果，同时讨论改善患者相关临床指标的手段。方法2013年2月至2015年2月该院57例2型糖尿病患者按照胰岛素原水平，分为研究组（≥15．6 mIU ／L ，29例）及对照组（＜15．6 mIU ／L ，28例），均予以口服葡萄糖治疗，同时分析血脂指标与血清真胰岛素、胰岛素原及稳态胰岛素评估模型胰岛素抵抗指数的相关性。结果胰岛素原、血清真胰岛素、餐后2 h 胰岛素原、餐后2 h 血清真胰岛素、稳态胰岛素评估模型胰岛素抵抗指数都与载脂蛋白 B／载脂蛋白 A1比值有相关关系。结论2型糖尿病患者的胰岛素原升高，载脂蛋白 B／载脂蛋白 A1比值也会随之升高。

摘要： 目的：探讨2型糖尿病(T2DM)患者心功能不全的临床表现特点及相关激素的改变,寻找针对糖尿病心衰干预靶点。方法 T2DM患者90例、健康对照组35例,将患者按病程和症状分为：新诊断及病程2年未发临床显性心衰症状和体征的T2DM患者32例、病程>2年且已发临床显性心衰症状和体征的T2DM患者28例、健康对照组35例。测空腹血糖( FPG)、胰岛素( FINS)、真胰岛素( TI)、胰岛素原( PI),注射胰岛素治疗患者测空腹C-肽,测定脑钠素( BNP)及采用心脏彩色多普勒测左室射血分数( LVEF)、二尖瓣口舒张早期流速峰值E峰/舒张晚期流速峰值A峰比值( E/A)、舒张早期波e峰/舒张晚期波a峰( e/a)、峰值肺静脉血流收缩期S波/峰值肺静脉舒张早、中期D波(S/D)以判定心脏功能。结果①随着T2DM的进展,BNP明显增高；临床显性心衰组TI及PI与其余各组比较有明显的降低,组间差异有统计学意义(P<0．05)；心脏彩超T2DM组较健康对照组E/A 、e/a 、S/D、LVEF有明显下降,差异有统计学意义(P<0．05)。结论随着T2DM的进展,真胰岛素、胰岛素原分泌水平减少与心肌舒张顺应性减低和收缩力下降成正相关,同时与心衰相关的激素：BNP分泌明显增加,提示胰岛素所介导的葡萄糖心脏低耗氧供能下降,使得心脏的泵功能发生因供能相关的代谢障碍,会影响和加重心衰。%Objective To investigate the clinical characteristics and related hormone changes of cardiac insufficiency in patients with type 2 diabetes mellitus(T2DM),and to seek intervention targets for the treatment of heart failure in patients with di-abetes. Methods 90 cases of T2DM patients and 35 cases in healthy control group were included. According to courses of dis-ease and symptoms,the patients were divided as follows:30 cases of T2DM patients with recent diagnosis or disease courses shorter than 2 years,32 cases of T2DM patients with disease courses longer than 2 years but without clinically overt heart failure symptoms or signs,28 cases of T2DM patients with disease courses longer than 2 years who already had clinically overt heart failure symptoms or signs and healthy control group(n=35). Fasting plasma glucose(FPG),fasting insulin(FINS),true insulin(TI) and proinsulin ( PI) were determined and as for patients receiving insulin injection treatment,fasting C-peptide was determined. Cardiac function was assessed by determination of brain natriuretic peptide( BNP) ,left ventricular ejection fraction( LVEF) ,ratio of mitral early di-astolic velocity peak E value and late diastolic velocity peak A value( E/A) ,ratio of mitral early diastolic wave peak e and late di-astolic wave peak a( e/a) and ratio of systolic S wave of peak pulmonary venous flow and early as well as mid diastolic D wave of peak pulmonary venous flow(S/D),determined by cardiac color Doppler. Results With the development of T2DM,BNP in-creased significantly. Compared with other groups,TI and PI of overt heart failure group decreased significantly,with statistically significant differences(P<0. 05). Echocardiography showed that compared with healthy control group,E/A,e/a,S/D and LVEF of T2DM group decreased obviously,with statistically significant differences(P<0. 05). Conclusion With the development of T2DM,decrease of true insulin and proinsulin secretion level and decrease of myocardial diastolic compliance and contractility fall into a positive correlation,and secretion of BNP,a kind of heart failure related hormone increases significantly,which indicates that insulin-mediated low oxygen and glucose consumption as well as low energy supply make metabolic disorders related to energy sup-ply occur to heart,affecting and worsening heart failure.

摘要： 本文通过1196名农村居民随机抽样的调查,采用酶联免疫吸附试验方法检测空腹胰岛素原根据个体情况建立危险因素评分,研究人群中胰岛素原水平与心血管危险因素聚集的关系.

摘要： 本发明公开了一种短直链淀粉‑胰岛素或短直链淀粉‑胰岛素‑原花青素纳米复合物的制备方法，所述方法将短直链淀粉、胰岛素两者或短直链淀粉、胰岛素、原花青素三者混合后回生制得短直链淀粉‑胰岛素或短直链淀粉‑胰岛素‑原花青素纳米复合物。本发明短直链淀粉‑胰岛素或短直链淀粉‑胰岛素‑原花青素纳米复合物粒径较小，可以紧密的粘附在小肠的膜粘附层，延长在胃肠带停留时间，同时可以克服消化道系统中存在的粘液层屏障、酶屏障及上皮屏障，提高口服胰岛素的生物利用率。

摘要： 本发明公开了一种短直链淀粉‑胰岛素或短直链淀粉‑胰岛素‑原花青素纳米复合物的制备方法，所述方法将短直链淀粉、胰岛素两者或短直链淀粉、胰岛素、原花青素三者混合后回生制得短直链淀粉‑胰岛素或短直链淀粉‑胰岛素‑原花青素纳米复合物。本发明短直链淀粉‑胰岛素或短直链淀粉‑胰岛素‑原花青素纳米复合物粒径较小，可以紧密的粘附在小肠的膜粘附层，延长在胃肠带停留时间，同时可以克服消化道系统中存在的粘液层屏障、酶屏障及上皮屏障，提高口服胰岛素的生物利用率。

摘要： 本发明提供了一种胰岛素免疫原、其制备方法、胰岛素抗体及试剂盒。该胰岛素免疫原为胰岛素交联体，为多个胰岛素单体通过分子内交联和/或分子间交联而成，含一个或多个交联单元，①和②各自独立地选自A链或B链，R1为R2和R3为空，或R1和R3各自独立地选自或‑S‑，R2选自C2～C74的直链或支链亚烷基，C2～C74的直链或支链亚烷基中的部分‑CH2‑任意地被‑O‑、‑S‑、‑NH、‑COO‑、‑CO‑、亚芳基、杂亚芳基或亚环烃取代，或R1和R3各自独立地选自或‑S‑，R2选自亚芳基或取代的亚芳基，取代的亚芳基指苯环上的‑H被‑OH、卤族元素或烷烃取代的亚芳基。该胰岛素免疫原可获得高效价的胰岛素抗体。

摘要： 本发明提供了一种新型门冬胰岛素原的结构设计和门冬胰岛素制备方法。其中主要步骤包括设计门冬胰岛素原的序列，构建重组门冬胰岛素工程菌，通过工程菌诱导以包涵体形式表达门冬胰岛素融合蛋白，再经过变性、复性、酶切和分离纯化得到成熟的门冬胰岛素原料药。发明通过改变重组前导肽和C‑肽序列，避免使用溴化氢切割这种危险而繁琐的步骤；缩短C‑肽为1个氨基酸，减少酶切转化的质量损失。

摘要： 本发明提供了一种重组人胰岛素原转肽方法及其在重组人胰岛素下游纯化中的应用，本发明的重组人胰岛素原转肽方法为将纯化的重组人胰岛素原经转肽反应生成重组人胰岛素，其中，转肽反应的反应体系包括：重组人胰岛素原10-30g/L、二甲基亚砜（DMSO）100-200ml/L、叔丁醚苏氨酸叔丁酯63-103g/L、1,4-丁二醇600-800ml/L、胰蛋白酶2-6g/L、Ca

摘要： 本发明公开了一种新甘精胰岛素原及其制备甘精胰岛素的方法，属于重组蛋白制备技术领域。本发明设计了包含定点突变的SOD融合肽和“0C肽”的甘精胰岛素原的序列，构建了表达甘精胰岛素的重组大肠杆菌工程菌，并通过诱导工程菌表达以包涵体形式甘精胰岛素融合蛋白，再经过变性、复性、修饰、酶切和分离纯化得到成熟的甘精胰岛素原料药。本发明通过突变SOD融合肽序列将甘精胰岛素的发酵产率提高了75％；通过采用“0C肽”策略，避免C‑肽残基的残留，减少酶切转化的质量损失和错切杂质。本发明制备的甘精胰岛素原料药的纯度高达99.9％，最大单杂控制在0.05％。

摘要： 本发明提供了一种重组人胰岛素原转肽方法及其在重组人胰岛素下游纯化中的应用，本发明的重组人胰岛素原转肽方法为将纯化的重组人胰岛素原经转肽反应生成重组人胰岛素，其中，转肽反应的反应体系包括：重组人胰岛素原10-30g/L、二甲基亚砜（DMSO）100-200ml/L、叔丁醚苏氨酸叔丁酯63-103g/L、1,4-丁二醇600-800ml/L、胰蛋白酶2-6g/L、Ca

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种人胰岛素原融合蛋白及人胰岛素的制备方法。一种人胰岛素原融合蛋白，从N端至C端由X-B-C-A四段肽链组成，其中所述X肽链为无或引导肽，所述B-C-A肽链为其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示或为至少与SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列90％同源性且其成熟体具有降糖活性的突变体，其特征在于所述C肽C端的Lys 64残基由非碱性氨基酸取代。本发明所述人胰岛素原融合蛋白避免了Arg-A0胰岛素副产物的产生，其中C肽能够促进胰岛素原的复性。所述方法所需步骤较少，产生副产物较少，获得较高产量的胰岛素。

摘要： 本发明涉及在29位带有保护氨基酸的胰岛素原和在B29位带有保护氨基酸的胰岛素，以及所述胰岛素原和胰岛素的基因。本发明还涉及本发明的在29位带有保护氨基酸的胰岛素原和在B29位带有保护氨基酸的胰岛素的制备方法和用途。

摘要： 本发明提供一种新的分子，它是用重组体DNA方法由胰岛素原成分衍生的。本发明提供化学式为A—C—B的分子，其中A是胰岛素类的A链，B是胰岛素类的B链，C是一种连接肽。这些分子具有类胰岛素活性，可用于治疗糖尿病症，特别是非—胰岛素依赖的糖尿病症。这些分子也可用于生产胰岛素，并构成重组体生产胰岛素的新途径。本发明提供了以本发明化合物作中间物而生产胰岛素的方法。本发明还提供编码本发明化合物的重组体DNA化合物。