肠道上皮细胞

摘要： 鸡球虫病是由一种或多种寄生于鸡肠道上皮细胞引起的寄生虫病,具有分布广泛、发生普遍、危害严重等特点。10~60日龄的雏鸡和青年鸡易感染发病且死亡率较高,成年鸡不发病,但是会成为病原的携带者。鸡球虫病给中国乃至全世界鸡养殖业造成巨大的经济损失,因此,笔者就球虫病的流行病学、临床及剖检症状和预防措施进行阐述,以期为球虫病的防控提供参考。

摘要： 本研究旨在建立黄姑鱼(Nibea albiflora)肠道上皮细胞的体外分离培养及鉴定方法,为海水鱼类肠道功能及其发病机制相关研究提供细胞模型。以黄姑鱼肠道组织为研究对象,采用胰蛋白酶(0.25%)、胶原蛋白酶(1 mg/mL)和透明质酸酶(0.16 mg/mL)联合消化法对肠道组织进行不同时间(0、20、40、60和80 min)的消化,并对消化后的肠道细胞及残留肠道组织分别进行台盼蓝和苏木精-伊红(HE)染色,再通过显微镜观察确定终止细胞消化的最佳时间。在此基础上,对肠道上皮细胞进行原代培养并传代。在传代培养过程中,通过分析细胞形态、细胞生长曲线和肠道上皮细胞标志性蛋白表达等对培养细胞进行鉴定。结果表明:黄姑鱼肠道组织在消化40 min时便可以得到较多的肠道上皮细胞,在消化60 min时可以得到更多的细胞团,至80 min时肠道上皮细胞基本从基膜上全部消化下来,因此,本研究建议在40~60 min终止细胞消化为宜。所培养的传代肠道细胞呈"铺路石"形态,生长曲线呈明显的"S"形,经角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色呈阳性。进一步的实时荧光定量PCR分析表明上皮细胞标志性蛋白封闭蛋白(Claudin)、闭合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、碱性磷酸酶(AKP)和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)在培养的传代细胞中均有表达。综合上述结果表明,本研究所分离培养的细胞即为黄姑鱼肠道上皮细胞。综上所述,本研究成功建立了黄姑鱼肠道上皮细胞的体外分离培养及鉴定方法,为海水鱼类肠道功能及其相关机制研究提供了技术支撑。

摘要： 通过分析影响肠道干细胞衰老的因素,探讨针灸与肠道干细胞衰老的关系,指出针灸在延缓衰老方面具有独特的优势,思考针灸在该领域的作用与前景。

摘要： 为研究八宝景天水提物对致炎因子十二烷基硫酸钠(SDS)造成的果蝇肠道干细胞过度增殖分化的抑制作用,该文将在普通培养基中培养出的果蝇放置在不同环境下诱导培养,利用SDS诱导果蝇肠道产生损伤,分析不同条件下果蝇的生存率、肠道上皮细胞死亡数量、肠道上皮细胞内活性氧自由基(ROS)水平、肠道前体细胞数量及果蝇肠道形态变化。结果表明,喂食八宝景天水提物能够显著提高致炎因子诱导下肠道受到损伤的果蝇生存率,明显降低肠道上皮死亡细胞数量与细胞内ROS水平,抑制肠道前体细胞过度增殖分化与肠道形态学的变化,通过缓解果蝇肠道损伤,延长果蝇寿命。

摘要： 四川大学华西医院糖尿病和代谢研究中心与美国洛杉矶西达赛奈医学中心的最新研究发现,食用绿色蔬菜或膳食补充剂叶绿酸,能够缓解炎症性肠病,包括克罗恩病和溃疡性结肠炎等。此外,叶绿酸还能有效降低炎症性肠病的死亡率,减少腹泻、便血、肠道上皮细胞损伤以及炎症。相关研究成果发表在《美国生理学杂志:胃肠与肝生理学》上。

摘要： 作为有益于人类和动物健康的生物活性分子,许多研究探讨了绿藻所含水溶性硫酸多糖(石莼聚糖)的生物活性。利用从法国布列塔尼(Brittany)收获的石莼绿藻(ulva armoricana)制备了纯化的绿藻,并利用猪肠道上皮细胞的体外模型(invitrosystem ofporcineintestinalepithelialcells,IPEC-1)测试了其刺激肠道免疫反应的能力。RT-qPCR和ELISA分析显示,纯化的绿藻可以明显增加趋化因子配体20(CCL20)、IL8和TNF-α等细胞因子的mRNA和蛋白质的表达。利用人胚肾(humanembryonickidney,HEK)293报告细胞系的模式识别受体发现,石莼聚糖主要刺激Toll样受体(Toll-like receptors,TLR),如TLR4。该试验还研究了石莼聚糖馏分对参与激活细胞因子基因表达的不同信号通路的影响。对用石莼聚糖处理过的HEK293-TLR4细胞进行的免疫印迹表明,Akt和核因子-κB的p65亚单位的磷酸化作用增强。用特异性抑制剂抑制Akt的磷酸化,可以消除石莼聚糖介导的增加IL-8分泌的作用。总体结果表明,石莼聚糖本身是一种免疫刺激化合物,此外,在疫苗接种策略中,它可以有效复合Toll样受体配体并将其传递给相关免疫细胞。

摘要： 为了研究不同剂量的鸡脾转移因子对肠道上皮细胞更新和肠黏膜屏障的影响,本研究采用1日龄蛋鸡为试验对象。随机分为转移因子高、中、低剂量组及正常对照组,自5日龄开始灌服转移因子,一次用药7d。利用HE染色、PAS染色、转录组高通量测序、ELISA、Western blotting、细胞培养、流式细胞术等实验技术,检测不同剂量鸡脾转移因子对蛋鸡肠道黏膜上皮屏障相关指标,以及体外肠道上皮细胞系增殖凋亡的影响。

摘要： 目的 探讨ACY1215对急性肝衰竭过程中人正常结肠上皮细胞NCM460损伤的保护作用及相关机制研究.方法 体外培养人正常结肠上皮细胞NCM460细胞,脂多糖(LPS)模拟急性肝衰竭过程中产生的肠毒性物质,对NCM460细胞进行造模为LPS组.在完成造模前予以ACY1215处理NCM460细胞为ACY1215组.而不予以任何药物干预的为正常组.使用CCK8方法检测三组细胞的活性.在荧光显微镜下观察三组细胞线粒体膜电位变化情况,其中红色荧光越强,绿色荧光越低,表明线粒体膜电位越高.同时检测三组细胞的Bcl-2和Bax的mRNA和蛋白表达量.结果 与正常组相比,LPS组NCM460细胞活性显著降低(P＜0.05).而与LPS组相比,ACY1215组NCM460细胞活性则显著升高(P＜0.05).与正常组相比,LPS组NCM460细胞的红色荧光明显减少,而绿色荧光显著增强.与LPS组相比,ACY1215组红色荧光显著增加,而绿色荧光显著减少.与正常组相比,LPS组NCM460细胞的Bcl-2蛋白及mRNA表达量显著降低,而Bax蛋白和mRNA表达量则显著升高(P＜0.05).与LPS组相比,ACY1215组Bcl-2蛋白和mRNA表达量显著升高,而Bax蛋白和mRNA表达量则显著降低(P＜0.05).结论 组蛋白去乙酰化酶抑制剂ACY1215对急性肝衰竭过程中损伤的NCM460细胞具有一定的保护作用,其机制可能是通过抑制NCM460细胞的线粒体凋亡途径来达到保护作用.

摘要： 仔猪早期断奶是现代集约化养猪业的关键技术之一,从传统的28~35断奶日龄提前到21~23日龄.断奶过程由液体母乳变成颗粒饲料,对肠道上皮细胞有直接损伤,同时颗粒饲料中不可消化的碳水化合物含量高、脂肪含量低、氨基酸组成变化较大,进一步造成不同程度的生理应激;其次,断奶仔猪面临与母猪分离、合群和打架等社会因素,均能够诱发仔猪产生一系列应激反应.在猪生产上,断奶应激是仔猪腹泻的主要原因.

摘要： 采用猪肠道上皮细胞株IPEC-J2体外培养模型,考察9株猪源乳酸杆菌对IPEC-J2细胞的粘附特性,以及对鼠伤寒沙门氏菌DT104粘附的竞争、排斥、置换和抗侵袭作用.结果显示,9株乳酸杆菌均能粘附IPEC-J2细胞,粘附率在0.1%-10%之间,具有菌株特异性和浓度效应.乳酸杆菌和沙门氏菌同时加入细胞培养,能竞争性抑制沙门氏菌的粘附,并具有浓度效应,高浓度(109cfu/mL)添加K30、K67和K16时,抑制率可达80%以上.乳酸杆菌预处理细胞后再加入沙门氏菌,高浓度乳酸杆菌可降低沙门氏菌粘附率40%-70%,而中浓度(108cfu/mL)乳酸杆菌能抑制23%-33%沙门氏菌对细胞的侵入.但是,只有高浓度添加乳酸杆菌才能有效置换已经粘附的沙门氏菌,置换率在12%-84%之间.该结果为临床上筛选乳酸杆菌,有效防治猪沙门氏菌病提供了一条新的途径.

摘要： 母乳喂养是新生儿健康成长的关键因素,与新生儿的肠道发育密切相关.乳exosome是母体与婴儿间传递遗传与调控物质的一种新机制,但在新生儿肠道组织中的功能未见报道.因此,本试验旨在体内和体外水平上分别验证乳exosome对肠道的调控功能.MTT、CCK8、Edu荧光和Edu流式细胞结果显示,猪乳exosome(27±3ng和55±5ng总RNA)显著促进IPEC-J2细胞增殖.q-PCR和Western blot结果显示,猪乳exosome(0.27±0.03μg总RNA)显著促进IPEC-J2细胞内与增殖相关的CDX2、IGF-1R及PCNA基因及其蛋白表达,同时抑制负调控因子P53基因及其蛋白水平(p＜0.05).细胞吸收试验表明,乳exosome miR-7134和miR-1343能显著被IPEC-J2细胞吸收,且进入细胞内的miR-2320、miR-181a、miR-769-3p和miR-128可下调其相应靶基因的表达水平(p＜0.05).体内试验结果显示,乳exosome(0.125g和0.25g总RNA)能显著增加小鼠小肠的肠绒毛高度、隐窝深度和肠绒毛高度与隐窝深度的比值,基因和蛋白结果显示,肠道组织内CDX2、IGF-1R及PCNA表达水平显著上升,P53表达水平下调.本试验证明猪乳exosome能促进肠上皮细胞增殖进而影响肠道发育,为乳营养对新生儿的健康发育提供了依据.

摘要： 近年来经济类甲壳动物的健康高效养殖备受关注,水产动物的消化生理对其健康养殖有着极其重要的意义.肠道的主要功能为消化和吸收营养物质,而行使此功能的主要结构为肠道黏膜层的肠上皮细胞.目前针对甲壳动物肠上皮细胞类型及功能的研究较少,弄清其肠上皮细胞的种类及功能对深入了解肠道的功能具有重要的意义.本研究采用在哺乳动物中对小肠上皮细胞进行鉴别的组织学方法,如用PAS法着染肠上皮杯状细胞,用突触素和溶菌酶抗体的免疫组织化学方法分别识别肠上皮内分泌细胞和肠腺的潘氏细胞等来研究中华绒螯蟹中肠和后肠肠上皮细胞类型.结果发现:①中华绒螯蟹中肠和后肠肠上皮细胞中均不含有杯状细胞;②中华绒螯蟹中肠和后肠肠上皮细胞中均含有肠内分泌细胞,这些内分泌细胞经免疫组化染色后为细胞胞核着色,呈深褐色,分布于高柱状上皮细胞之间;③中华绒螯蟹肠道仅在后肠黏膜下层中有成群分布的肠腺.在肠腺中有呈圆锥形成堆分布的潘氏细胞,这些细胞经溶菌酶抗体染色呈深褐色,而在中华绒螯蟹中肠上皮细胞中不合潘氏细胞.目前针对于中华绒螯蟹肠上皮细胞类型的研究较少,本研究仅对中华绒螯蟹肠道上皮中杯状细胞,肠内分泌细胞、潘氏细胞3种类型的细胞进行了定位研究,初步确定中华绒螯蟹中肠上皮细胞中分布有肠内分泌细胞,后肠上皮细胞中分布有肠内分泌细胞和潘氏细胞,均未发现杯状细胞.此研究结果为进一步研究中华绒鳌蟹肠道功能提供了理论依据.

摘要： 本发明提供了一种阴道上皮细胞培养基，其包括基础培养基和添加剂；其中，所述基础培养基为无血清培养基；所述添加剂包括表皮生长因子、牛垂体提取物、胰岛素-转铁蛋白-硒、胎牛血清、青霉素-链霉素和霍乱菌素。本发明还提供了一种阴道上皮细胞培养方法。本发明的阴道上皮细胞培养基成分明确，通过该培养基培养得到的上皮细胞数量多、成纤维细胞数量少、细胞融合状态好。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及黄芪多糖在提高乳杆菌黏附肠道上皮细胞能力中的应用。该应用是在培养乳杆菌的培养基中添加黄芪多糖，获得黏附能力提高的乳杆菌，所述培养基为MRS肉汤培养基，所述MRS肉汤培养基中黄芪多糖的浓度为20‑200μg/mL。本发明研究结果表明，黄芪多糖能够显著提高乳杆菌对人或动物肠道上皮细胞的黏附性能，为提高益生菌黏附能力提供了新方法。

摘要： 本发明公开一种人体肠道上皮细胞模型的构建方法，涉及细胞模型构建技术领域。所述人体肠道上皮细胞模型，以Caco‑2细胞为模型细胞，并使用含有20％FBS的DMEM培养基在微流控芯片中对所述Caco‑2细胞进行3D培养，从而构建人体肠道上皮细胞的体外模型。一方面，采用人源性细胞培养，避免了采用动物细胞培养导致试验结果不准确的问题，另一方面，3D细胞培养使得肠道细胞拥有了更加类似人体生理学的机械微环境，能够促进肠道细胞分化。因此，本发明构建的人体肠道上皮细胞模型，更清楚、准确地反应了小肠上皮屏障的特性。

摘要： 本发明公开一种调节肠道上皮细胞更新和促进肠道发育的仔猪教槽料，由下列物质按重量份数配比而成：玉米35.0‑37.0份，膨化玉米20.0‑22.0份，43％豆粕7.0‑9.0份，大豆浓缩蛋白粉4.0‑6.0份，乳清粉8.0‑12.0份，63％鱼粉4.0‑6.0份，血浆蛋白粉4.0‑5.0份，赖氨酸0.4‑0.5份，DL‑蛋氨酸0.2‑0.24份，苏氨酸0.07‑0.1份，色氨酸0.07‑0.08份，葡萄糖2.0‑3.0份，豆油1.0‑3.0份，石粉0.8‑1.1份，磷酸氢钙0.4‑0.6份，氧化锌0.12‑0.16份，柠檬酸1.0‑1.5份，浓缩纤维1.0‑1.5份，烟酸预混剂0.08‑0.1份，细胞因子预混剂0.1‑0.15份，乳猪预混料1.0份，合计100份。本教槽料根据仔猪肠道上皮细胞更新的营养代谢特点，科学选取原料和设置原料配比，能够有效调节仔猪肠道上皮细胞更新，促进仔猪肠道发育。

摘要： 本申请公开了一种于污染条件下分离肠道上皮细胞的方法，污染条件包括肠道包含细菌数不低于105cfu/m3以及所述方法实施环境中浮游微生物不低于104cfu/L，该方法包括对肠道组织块进行消化、密度梯度离心得到纯化的上皮细胞步骤。本申请适用于不同年龄阶段和生理状态的不同种属动物(新生和已采食动物均可)肠道上皮细胞的分离纯化，且无需控制和使用无菌提取条件及细胞传代纯化技术，操作方法快速、简便、高效，所用仪器设备为实验常规仪器设备，成本低廉，在医学、动物学、营养学等领域的研究以及试剂盒的研发等具有重要的指导意义。

摘要： 本发明属于医药技术领域，涉及基因工程技术领域，特别是涉及一种防治胰岛素抵抗和肥胖相关疾病的新靶标肠道上皮细胞核受体抑制子NCoR的应用，公开了肠道上皮细胞核受体抑制子NCoR作为靶标在筛选药物中的应用。具体公开了一种以肠道上皮细胞核受体抑制子NCoR作为靶标在筛选或制备预防、缓解或治疗胰岛素抵抗、肥胖及相关疾病的药物或生物制剂中的应用。以及一种肠道上皮细胞核受体抑制子NCoR在制备胰岛素增敏或降脂小鼠模型中的应用。

摘要： 本发明涉及一种禽肠道上皮细胞及其制备方法和应用。一种禽肠道上皮细胞，来源于禽胚小肠段细胞，基因组中含有SV40的大T抗原基因。本发明研究人员发现，在禽胚小肠段细胞基因组中整合SV40的大T抗原基因能够使得禽肠道上皮细胞在体外能长期培养，能够连续培养超过6个月，传代超过30代，并且基因表达稳定，呈现肠道上皮细胞的特异性特征，表达肠道上皮细胞标志分子，适用于禽类肠道健康的相关研究和生物制品的开发。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及黄芪多糖在提高乳杆菌黏附肠道上皮细胞能力中的应用。该应用是在培养乳杆菌的培养基中添加黄芪多糖，获得黏附能力提高的乳杆菌，所述培养基为MRS肉汤培养基，所述MRS肉汤培养基中黄芪多糖的浓度为20‑200μg/mL。本发明研究结果表明，黄芪多糖能够显著提高乳杆菌对人或动物肠道上皮细胞的黏附性能，为提高益生菌黏附能力提供了新方法。

摘要： 本发明涉及细胞分离技术领域，针对现有肠壁上皮细胞分离过程中蛋白酶稳定性差的问题，公开了一种黄姑鱼肠道上皮细胞的有效分离方法，包括：将黄姑鱼浸泡在含有青霉素和链霉素的海水中禁食1‑2天；分离肠道并剪开肠壁，并放到PBS溶液中，去除肠道上脂肪和腹膜；将肠壁剪碎得到肠道组织块，再用DMEM/F12培养液清洗并离心，重复离心2‑4次；同时加入肠道组织块和固定化蛋白酶消化液，进行酶解消化；停止消化，处理后加入DMEM/F12培养液待用。引入具有负载能力强的蛋白酶载体，将消解蛋白酶固定在载体上，使得固定化蛋白酶具有较强的耐热性和更宽的pH值范围，保证固定化蛋白酶的性能稳定。

摘要： 本发明涉及细胞培养技术领域，针对现有肠壁上皮细胞分离过程中蛋白酶稳定性差的问题，公开了一种黄姑鱼肠道上皮细胞的培养方法，包括：将分离所得的细胞加入培养液中，调整细胞浓度，接种到细胞培养板孔中，接种后静止培养；再把培养液连同未贴壁的细胞转入新的细胞培养板继续培养，定期更换培养液，待细胞铺满底壁，再进行传代培养。培养过程中采用的是单层细胞培养法，因为所有组织中都含有一定量的细胞间质‑纤维和基质等，对细胞生长有妨碍作用，过程中用胰蛋白酶消化能够除去间质，使组织松散，细胞相互分离，细胞易于生长，且能够获得较多较纯的肠上皮细胞，最终极大提升了细胞的生长速率及生长效果。