聚合酶链式反应(PCR)
聚合酶链式反应(PCR)的相关文献在1993年到2022年内共计171篇,主要集中在畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂、药学、基础医学
等领域,其中期刊论文149篇、会议论文4篇、专利文献305861篇;相关期刊115种,包括微生物学杂志、药物分析杂志、世界最新医学信息文摘(电子版)等;
相关会议4种,包括第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会、中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会、2001年全国骨质疏松与骨关节病学术研讨会等;聚合酶链式反应(PCR)的相关文献由650位作者贡献,包括马双成、刘杰、过立农等。
聚合酶链式反应(PCR)—发文量
专利文献>
论文:305861篇
占比:99.95%
总计:306014篇
聚合酶链式反应(PCR)
-研究学者
- 马双成
- 刘杰
- 过立农
- 郑健
- 张治洲
- 昝珂
- C·博纳斯
- J·史蒂文斯
- M·刘
- 周洁华
- 李昀铮
- 王俊丽
- 王有志
- 肖礼祖
- 赵鹤翔
- 高妍
- 于凌云
- 付强
- 卢克焕
- 史贤明
- 叶星
- 吕志伟
- 周敏
- 姜大栋
- 宣锋
- 张伟
- 张崇淼
- 张明
- 张裕君
- 张黎颖
- 徐进良
- 徐金森
- 成军
- 朱灵
- 李琦
- 李胜杰
- 李蕴茹
- 李谦
- 李辉
- 杰夫·伯特兰
- 桑付明
- 熊玲媛
- 王春花
- 王晓昌
- 白俊杰
- 章春笋
- 罗晓腾
- 谢晶
- 邢怡铭
- 邵碧英
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刘雪;
宋菁景;
林小晖
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摘要:
食品安全事关人们的生命健康,受到人们的广泛关注,食品检验是保证人们饮食安全的重要环节。近年来,现代分子生物学技术发展迅速,因其快速、灵敏、高效等特点,在食品检验方面的应用广泛。本文主要对分子生物学技术在食品检验领域中的应用进行探讨,以期为食品检验技术的发展提供依据。
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易芳;
来鹏程;
郑希鳌;
胡帅;
高燕丽
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摘要:
Kod DNA聚合酶作为常见的高保真DNA聚合酶,具有较强的DNA延伸能力以及3'-5'外切核酸酶校正活性。本研究通过对重组Kod DNA聚合酶分离纯化条件的优化,以期提高其表达和纯化效率以及片段扩增能力。利用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG)对pET-30a-Kod进行诱导表达后,利用酶溶法和超声波破碎法对细胞破碎并提取粗酶液,然后利用Ni-NTA柱洗脱纯化获得较纯Kod DNA酶,再经透析得到高纯度Kod DNA酶,利用PCR反应和Sanger测序手段来检测自提纯化的Kod DNA聚合酶活性及保真性。同时,本研究对IPTG浓度和洗脱液中咪唑浓度等重要参数进行优化。结果表明,在28°C条件下0.1 mmol/L IPTG诱导16-18 h后,Kod DNA聚合酶高效表达;当咪唑浓度为200 mmol/L时蛋白洗脱效果最佳。PCR反应体系中Mg^(2+)浓度为1.5 mmol/L,Kod DNA聚合酶浓度为0.06125μg/μL时,Kod DNA聚合酶效率较高,能有效地扩增3194 bp的目的条带;通过序列比对,PCR产物序列中未引入任何突变。经优化制备后的Kod DNA聚合酶在酶活性和扩增保真性上均能达到商用高保真DNA聚合酶水平。本研究为节省实验室PCR成本,进一步开发和利用Kod DNA聚合酶奠定一定的基础。
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张艳艳
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摘要:
乳酸菌被视为一类重要的无芽孢革兰氏阳性菌,可以直接利用碳水化合物实现发酵产酸,在益生菌家族当中扮演着重要的角色,具备调节肠道菌群平衡状态、参与免疫应答以及抑制肠道病原菌生长繁殖等一系列的益生效果。从以往发酵食品当中分离出乳酸菌22株,主要涵盖植物乳杆菌7株、干酪乳杆菌3株、发酵乳杆菌3株、瑞士乳杆菌5株、鼠李糖乳杆菌2株以及保加利亚乳杆菌以及嗜热链球菌各1株等。从以上乳酸菌当中,筛选出6株不同类型的乳杆菌开展动物实验。借助于实时荧光定量PCR技术,探索不同阶段小鼠粪便当中各类乳杆菌的实际数量,分析其在小鼠肠道当中具有的定植能力。由此为工业应用菌株整体功能性的评价及筛选提供相应的参考借鉴依据。
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王凯;
屈玮;
姚帮本;
徐建国;
姚丽
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摘要:
文章运用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和侧向流试纸条(lateral flow strip,LFS)相结合方法,以豌豆特异性基因为参照对绿豆食品中掺入豌豆成分进行定性分析。实验对退火温度、修饰引物浓度和镁离子浓度进行优化,并在最优PCR条件下进行特异性和灵敏度检测。结果表明,在退火温度为59°C,修饰引物加入量为0.20μmol/L,镁离子加入量为1.75 mmol/L条件下,PCR扩增效果最好,掺假检测限为0.5%,最低可检测豌豆DNA量为0.12 ng。该方法特异性高、操作简单快速,依靠视觉观察就能得出定性结果。
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张皖静;
张琪;
张晓霞;
吴文静;
杨丹;
袁文天;
许燕;
赵凯
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摘要:
非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起的一种具有急性、烈性、高度接触性的传染病,致死率高达100%,传播范围十分广泛,由于目前尚无有效的疫苗对这种病毒进行免疫预防,必须进行检测、扑杀和隔离,才能阻断病毒的传播,因此亟需建立简便、快速、有效的核酸检测方法.通过介绍当前使用的非洲猪瘟病毒的检测方法,归纳出各种方法的优缺点,并对非洲猪瘟病毒检测技术的发展方向进行阐述.
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刘杰;
过立农;
马双成;
高妍;
郑健;
王俊丽
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摘要:
目的:基于DNA条形码技术及高分辨率熔解曲线(HRM)方法鉴定肉苁蓉药材的基原.方法:通过聚合酶链式反应(PCR)对肉苁蓉样品的ITS2序列进行扩增;将待鉴定肉苁蓉样品的ITS2序列与Genbank数据库进行BLAST比对;利用MEGA 6.06软件通过建树法进行NJ树聚类分析;通过HRM方法快速鉴定肉苁蓉药材基原.结果:21份待鉴定肉苁蓉样品ITS2序列的BLAST比对结果中,11份样品与沙苁蓉高度一致,其余10份样品与《中华人民共和国药典》2015年版一部收载品种肉苁蓉(Cistanche deserticola)或管花肉苁蓉(C istanchetubulosa)高度一致;通过ITS2序列的NJ聚类分析,将21份待鉴定肉苁蓉样品分别聚类到沙苁蓉、管花肉苁蓉、盐生肉苁蓉、肉苁蓉4个种;通过HRM方法鉴定肉苁蓉药材样品,鉴定结果与NJ聚类分析结果一致.结论:通过DNA条形码和HRM技术均能有效鉴定不同种的肉苁蓉药材样品,且结果一致,起到互相验证的作用,为肉苁蓉及其他中药民族药品种的快速鉴定提供了参考依据.
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刘杰;
过立农;
马双成;
高妍;
郑健;
王俊丽
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摘要:
目的:基于DNA条形码技术鉴定重楼药材疑似伪品的基原.方法:通过聚合酶链式反应(PCR)对重楼的内部转录间隔区2(ITS2)序列进行扩增;通过与GenBank数据库进行Blast比对,以及利用建树法推断重楼药材疑似伪品的基原.结果:重楼药材疑似伪品经Blast比对,结果显示为狭叶重楼(变种)和黑籽重楼(原变种),一致率均达到99%;通过与前期研究的重楼ITS2序列进行NJ聚类分析,可以判定待鉴定样品的基原与西藏延龄草较为接近;通过将重楼药材疑似伪品与收集的吉林延龄草标本、西藏延龄草标本、宽瓣重楼标本、华重楼标本的ITS2序列进行NJ聚类分析,推断重楼药材疑似伪品的基原为吉林延龄草.结论:确定重楼药材疑似伪品为非2015年版《中华人民共和国药典》收载物种,并推断其基原为吉林延龄草,通过DNA条形码技术为鉴别药材正伪品开辟了一条新途径.
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王卓莹
- 《第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会》
| 2007年
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摘要:
目的:建立快速、灵敏、定量检测巨细胞病毒的方法,并形成检测试剂盒。方法 使用TaqMan探针技术,选择保守序列CMV-pp65设计引物,荧光定量病毒载量。对该检测系统进行灵敏度、重复性和特异性等测试,并检测31份临床阳性标本和106份正常献血者标本。结果 检测灵敏度为358copies/ml,CV﹪值在1﹪左右,特异性好,临床标本符合率为100﹪。结论 表明本检测系统特异性好,准确性高,适用于病毒检测,可与临床治疗相结合。
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王卓莹
- 《第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会》
| 2007年
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摘要:
目的:建立快速、灵敏、定量检测巨细胞病毒的方法,并形成检测试剂盒。方法 使用TaqMan探针技术,选择保守序列CMV-pp65设计引物,荧光定量病毒载量。对该检测系统进行灵敏度、重复性和特异性等测试,并检测31份临床阳性标本和106份正常献血者标本。结果 检测灵敏度为358copies/ml,CV﹪值在1﹪左右,特异性好,临床标本符合率为100﹪。结论 表明本检测系统特异性好,准确性高,适用于病毒检测,可与临床治疗相结合。
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王卓莹
- 《第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会》
| 2007年
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摘要:
目的:建立快速、灵敏、定量检测巨细胞病毒的方法,并形成检测试剂盒。方法 使用TaqMan探针技术,选择保守序列CMV-pp65设计引物,荧光定量病毒载量。对该检测系统进行灵敏度、重复性和特异性等测试,并检测31份临床阳性标本和106份正常献血者标本。结果 检测灵敏度为358copies/ml,CV﹪值在1﹪左右,特异性好,临床标本符合率为100﹪。结论 表明本检测系统特异性好,准确性高,适用于病毒检测,可与临床治疗相结合。
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王卓莹
- 《第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会》
| 2007年
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摘要:
目的:建立快速、灵敏、定量检测巨细胞病毒的方法,并形成检测试剂盒。方法 使用TaqMan探针技术,选择保守序列CMV-pp65设计引物,荧光定量病毒载量。对该检测系统进行灵敏度、重复性和特异性等测试,并检测31份临床阳性标本和106份正常献血者标本。结果 检测灵敏度为358copies/ml,CV﹪值在1﹪左右,特异性好,临床标本符合率为100﹪。结论 表明本检测系统特异性好,准确性高,适用于病毒检测,可与临床治疗相结合。
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王洪海;
胡薛英;
苏敬良;
何双辉;
程永友;
郭玉璞
- 《中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会》
| 2004年
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摘要:
采用鸭胚成纤维细胞培养从山东和北京两地暴发的鸭瘟临床病例中分离到两株鸭肠炎病毒(DEV),分别命名为SD和BJ.利用细胞滴片技术,以制备的单抗2G为基础,建立单抗介导的间接免疫荧光(IFA)检测方法,对SD株感染细胞进行间接IFA检测,可见明显的蓝绿色荧光.试验感染7日龄雏鸭可引起鸭肠炎的典型临床症状,死亡率为100﹪(3/3),取试验感染死亡鸭肝脏、胰脏、法氏囊和脑组织等制备石蜡包埋切片,利用单抗进行免疫组化检测,除脑组织外均得到阳性结果.根据在GenBank上已发表的DEV两段序列设计两对引物,采用聚合酶链式反应(PCR)对野毒SD株和BJ株肝脏病料核酸提取物进行扩增,均得到预期大小为765bp和1954bp的目的片段片段,长片段进行测序,与发表序列进行比较,不同毒株间的碱基序列同源性达到99.73﹪.
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王洪海;
胡薛英;
苏敬良;
何双辉;
程永友;
郭玉璞
- 《中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会》
| 2004年
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摘要:
采用鸭胚成纤维细胞培养从山东和北京两地暴发的鸭瘟临床病例中分离到两株鸭肠炎病毒(DEV),分别命名为SD和BJ.利用细胞滴片技术,以制备的单抗2G为基础,建立单抗介导的间接免疫荧光(IFA)检测方法,对SD株感染细胞进行间接IFA检测,可见明显的蓝绿色荧光.试验感染7日龄雏鸭可引起鸭肠炎的典型临床症状,死亡率为100﹪(3/3),取试验感染死亡鸭肝脏、胰脏、法氏囊和脑组织等制备石蜡包埋切片,利用单抗进行免疫组化检测,除脑组织外均得到阳性结果.根据在GenBank上已发表的DEV两段序列设计两对引物,采用聚合酶链式反应(PCR)对野毒SD株和BJ株肝脏病料核酸提取物进行扩增,均得到预期大小为765bp和1954bp的目的片段片段,长片段进行测序,与发表序列进行比较,不同毒株间的碱基序列同源性达到99.73﹪.
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王洪海;
胡薛英;
苏敬良;
何双辉;
程永友;
郭玉璞
- 《中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会》
| 2004年
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摘要:
采用鸭胚成纤维细胞培养从山东和北京两地暴发的鸭瘟临床病例中分离到两株鸭肠炎病毒(DEV),分别命名为SD和BJ.利用细胞滴片技术,以制备的单抗2G为基础,建立单抗介导的间接免疫荧光(IFA)检测方法,对SD株感染细胞进行间接IFA检测,可见明显的蓝绿色荧光.试验感染7日龄雏鸭可引起鸭肠炎的典型临床症状,死亡率为100﹪(3/3),取试验感染死亡鸭肝脏、胰脏、法氏囊和脑组织等制备石蜡包埋切片,利用单抗进行免疫组化检测,除脑组织外均得到阳性结果.根据在GenBank上已发表的DEV两段序列设计两对引物,采用聚合酶链式反应(PCR)对野毒SD株和BJ株肝脏病料核酸提取物进行扩增,均得到预期大小为765bp和1954bp的目的片段片段,长片段进行测序,与发表序列进行比较,不同毒株间的碱基序列同源性达到99.73﹪.
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王洪海;
胡薛英;
苏敬良;
何双辉;
程永友;
郭玉璞
- 《中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会》
| 2004年
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摘要:
采用鸭胚成纤维细胞培养从山东和北京两地暴发的鸭瘟临床病例中分离到两株鸭肠炎病毒(DEV),分别命名为SD和BJ.利用细胞滴片技术,以制备的单抗2G为基础,建立单抗介导的间接免疫荧光(IFA)检测方法,对SD株感染细胞进行间接IFA检测,可见明显的蓝绿色荧光.试验感染7日龄雏鸭可引起鸭肠炎的典型临床症状,死亡率为100﹪(3/3),取试验感染死亡鸭肝脏、胰脏、法氏囊和脑组织等制备石蜡包埋切片,利用单抗进行免疫组化检测,除脑组织外均得到阳性结果.根据在GenBank上已发表的DEV两段序列设计两对引物,采用聚合酶链式反应(PCR)对野毒SD株和BJ株肝脏病料核酸提取物进行扩增,均得到预期大小为765bp和1954bp的目的片段片段,长片段进行测序,与发表序列进行比较,不同毒株间的碱基序列同源性达到99.73﹪.
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王洪海;
胡薛英;
苏敬良;
何双辉;
程永友;
郭玉璞
- 《中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会》
| 2004年
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摘要:
采用鸭胚成纤维细胞培养从山东和北京两地暴发的鸭瘟临床病例中分离到两株鸭肠炎病毒(DEV),分别命名为SD和BJ.利用细胞滴片技术,以制备的单抗2G为基础,建立单抗介导的间接免疫荧光(IFA)检测方法,对SD株感染细胞进行间接IFA检测,可见明显的蓝绿色荧光.试验感染7日龄雏鸭可引起鸭肠炎的典型临床症状,死亡率为100﹪(3/3),取试验感染死亡鸭肝脏、胰脏、法氏囊和脑组织等制备石蜡包埋切片,利用单抗进行免疫组化检测,除脑组织外均得到阳性结果.根据在GenBank上已发表的DEV两段序列设计两对引物,采用聚合酶链式反应(PCR)对野毒SD株和BJ株肝脏病料核酸提取物进行扩增,均得到预期大小为765bp和1954bp的目的片段片段,长片段进行测序,与发表序列进行比较,不同毒株间的碱基序列同源性达到99.73﹪.
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