耐万古霉素肠球菌

摘要： 目的了解耐万古霉素屎肠球菌EFM277的耐药基因分布特点及机制。方法用Illumina Hiseq平台对EFM277进行高通量测序,用生物信息学技术对数据进行拼接和分析。结果对耐万古霉素屎肠球菌测序数据进行分析,发现编码氨基糖苷类耐药基因包括aac(6′)-Ii、aph(3′)-Ⅲ、aac(6′)-aph(2″);四环素耐药基因tetM;大环内酯类耐药基因包括msrC、ermB;同时检出糖肽类耐药基因vanA、vanM,较为罕见。多位点序列分型(MLST)分析发现其可能是一种新的ST型,与ST17型最相近。毒力基因分析中发现其携带acm、esp、hyl 3种毒力基因。结论利用高通量测序技术阐明EFM277耐药机制,为临床用药提供更为有力的依据。

摘要： 本文通过临床药师参与1例神经外科术后中枢神经系统感染病例治疗,对中枢神经系统感染治疗药物进行了分析.临床药师在建议留取相关标本后,首先给予经验性抗感染治疗,并根据脑脊液相关检查及细菌培养结果及时、多次调整用药方案,同时给予药学监护及处理药物不良反应.经治疗后,患者脑脊液、影像学指标和临床表现好转.患者药物治疗时间长,调整用药次数多,临床药师给予药物治疗建议并进行全程药学监护,与临床医护密切合作,最终使患者病情好转出院.

摘要： 目的 探讨肾移植患者病原菌分布及临床主要病原菌对常用抗感染药物的敏感性和耐药性.方法 选取北京医院/国家老年医学中心/中国医学科学院老年医学研究院2020年1月1日至2020年12月31日收治的46例肾移植患者,记录患者标本送检结果;分析患者病原菌分布情况;分析患者对常用抗感染药物的敏感性和耐药性.结果 共送检各类标本1013份,主要为引流液、尿液、血液.共检出病原菌204株,分离率为20.1％.共分离出非重复菌株82株,其中细菌(革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌)74株(90.2％)、真菌8株(9.8％).尿液标本中革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的检出比例相同,均为44.8％,真菌占10.4％,最常见的菌种为屎肠球菌(27.6％);引流液标本中革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌及真菌检出率分别为62.8％、25.8％和11.4％,最常见的菌种为凝固酶阴性葡萄球菌(45.6％);血液标本中革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌及真菌的检出率分别为76.9％、15.4％和7.7％,最常见的菌种为凝固酶阴性葡萄球菌(53.8％).肠杆菌科中肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的检出率分别为77.3％和76.1％.检出耐碳青霉烯类(厄他培南、亚胺培南、美罗培南)肠杆菌2株,包括阴沟肠杆菌及肺炎克雷伯菌各1株.屎肠球菌对青霉素、左氧氟沙星、环丙沙星和红霉素耐药率均为100.0％;对氨苄西林和呋喃妥因耐药率分别为92.3％和58.3％;检出耐万古霉素屎肠球菌1株.粪肠球菌对多数测试抗感染药物的耐药率低于屎肠球菌,未检出万古霉素耐药菌株.表皮葡萄球菌对青霉素、苯唑西林、氨苄西林、左氧氟沙星、环丙沙星和莫西沙星耐药率分别为100.0％、85.7％、80.0％、100.0％、100.0％和100.0％,未检出万古霉素耐药菌株.结论 肾移植患者标来源以引流液、尿液和血液为主,所有送检标本的分离菌中细菌和真菌占比分别为90.2％和9.8％,且不同标本类型的分离菌分布有差异,严重多重耐药菌检出率较高.

摘要： 目的 探讨2019年中国医科大学附属第一医院临床分离菌株对常用抗菌药物的耐药率,为临床经验性抗感染治疗提供依据.方法 收集2019年1月至12月我院检验科分离的非重复细菌,按统一方案进行菌株鉴定及药敏检测,应用Whonet?5.6软件对数据进行分析.结果 ?2019年共收集5?061株非重复菌株,其中,革兰阳性菌占31.4％,革兰阴性菌占68.6％.葡萄球菌属中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌?(MRSA)?和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌?(MRCNS)?的检出率分别为32.3％和82.3％,粪肠球菌对多数抗菌药物的耐药率均低于屎肠球菌.肠杆菌科细菌对碳青霉烯类的耐药率分别为:肺炎克雷伯菌18.9％、阴沟肠杆菌7.0％、大肠埃希菌?1.3％、奇异变形杆菌1.0％.鲍曼不动杆菌对美罗培南和亚胺培南的耐药率分别为81.2％和82.0％.结论 我院临床分离的常见细菌对不同抗菌药物呈不同耐药率,应充分了解细菌耐药监测结果 ,合理使用抗菌药物并加强医院感染管理.

摘要： 自耐万古霉素肠球菌(VRE)被发现后,由VRE引发的耐多药感染率和持续定植率明显升高,而VRE基因操纵子具有独特的遗传变异性并持续进化,使VRE具有多种抗菌药物耐药表型,被世界卫生组织列入"急需新抗生素治疗的细菌"名单,极高的死亡率给临床治疗带来巨大挑战.论文从VRE的起源、耐药机制、传播、流行现状以及VRE治疗的局限性和新型治疗方法探索等方面进行综述,为深入研究VRE传播和提高临床治疗效果提供参考.

摘要： 目的 分析耐万古霉素肠球菌(VRE)耐药基因和多位点序列分型(MLST)情况.方法 收集三亚中心医院临床分离的耐万古霉素的80株屎肠球菌和12株粪肠球菌,采用VITEK MS微生物鉴定系统进行菌种鉴定.采用VITEK 2 Compact自动化鉴定药敏仪测定VRE对14种常用抗菌药物的敏感性.采用微量肉汤稀释法测定VRE对万古霉素和替考拉宁的最小抑菌浓度(MIC),并确定耐药表型;采用聚合酶链反应(PCR)筛选VRE的毒力基因(esp、hyl、gelE、asal、cy1A、efaA、ace)和转座子结构;对VRE进行MLST.结果 质谱鉴定结果为80株屎肠球菌和12株粪肠球菌.体外药物敏感性试验结果表明,屎肠球菌和粪肠球菌对万方霉素的耐药率均为100％,对氨苄西林的耐药率分别为97.5％和50.0％,但对呋喃妥因的耐药率较低.92株VRE对万古霉素和替考拉宁的MIC分别为192～256和32～256μg/mL,均为VanA表型;92株VRE基因型均为vanA,以esp毒力基因所占比例最高(82.5％);屎肠球菌以esp-hyl基因组合最常见,粪肠球菌以多基因组合为主;通过Tn1546基因转座子结构分析可分为A～E 5个型别;92株VRE的MLST包括7个ST型别,分别为ST17(43.5％)、ST78(32.6％)、ST203(6.5％)、ST363(5.4％)、ST555(4.3％)、ST1392(4.3％)和ST1394(3.4％),其中ST17和ST78均属于CC17克隆复合体.结论 92株VRE均为多重耐药株、vanA基因型和CC17克隆复合体,耐药基因和毒力基因携带率均较高,临床应引起重视.

摘要： 目的 探讨肝移植术后耐万古霉素肠球菌感染的病原学和耐药性特点.方法 回顾性分析我科2015年1月～2019年12月524例同种异体肝移植病人的临床资料,分析其术后发生耐万古霉素肠球菌感染的发病率、病原学特点、分布情况和耐药性特点.结果 524例肝移植病人中共109例病人术后发生腹腔感染,发病率为20.80％(109/524),其中肠球菌感染46例,全为屎肠球菌;肠球菌感染发病率为8.78％(46/524),肠球菌感染占腹腔感染病人的42.2％(46/109),占革兰阳性球菌感染的64.79％(46/71);46例病人中15例为耐万古霉素肠球菌感染,万古霉素耐药率为32.61％(15/46);药敏结果显示,耐万古霉素肠球菌对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左旋氧氟沙星及红霉素类抗生素完全耐药;对四环素类、高浓度链霉素、高浓度庆大霉素等抗生素也广泛耐药,耐药率分别为71.43％(15/21)、85.71％(18/21)和71.43％(15/21);对替考拉宁耐药率为38.10％(8/21);对利奈唑胺亦出现耐药株,耐药率为9.52％(2/21);替加环素最为敏感,尚未检出耐药菌.结论 耐万古霉素肠球菌是肝移植病人术后常见的病原菌之一.常规预防性抗生素对耐万古霉素肠球菌治疗无效,临床上可根据药敏结果选择抗生素,替加环素和利奈唑胺可作为治疗的首选.

摘要： 目的 了解三台县人民医院不同种类肠球菌的耐药状况和毒力基因分布特征.方法 采用微量肉汤稀释法检测分离自临床样本的485株屎肠球菌和404株粪肠球菌对20种临床常用抗菌药物的耐药性,采用聚合酶链反应(PCR)检测菌株携带esp、acm、ace、hyl、asa1、gelE、cylA、efaA和cpd 9种毒力基因的携带情况.结果 屎肠球菌和粪肠球菌耐药率和耐药谱不同,2种肠球菌均检出对万古霉素和利奈唑胺耐药菌株.耐万古霉素屎肠球菌(VREfm)和耐万古霉素粪肠球菌(VREfs)的检出率分别为9.7％(47/485)和1.2％(5/404),差异有统计学意义(χ2=28.597,P<0.001).与万古霉素敏感屎肠球菌比较,VREfm毒力基因esp、acm和hyl检出率明显增高,差异有统计学意义(χ2值分别为28.157、17.391、18.311,P<0.001).2种万古霉素耐药肠球菌(VRE)毒力基因携带率均较高,且均至少携带2种毒力基因,但两者毒力基因携带率、携带种类和模式差异不显著.结论 三台县人民医院肠球菌临床分离株对临床常用抗菌药物的耐药率均较高,且向高毒力进化,屎肠球菌毒力有所增强,应引起医院高度重视.

摘要： 据Kim等2019年8月报道,来源于微生物的羊毛硫细菌素能够恢复耐万古霉素肠球菌(VRE)的耐药性。据报道,对胃肠道定植VRE的患者使用抗生素,常常导致该菌相对于肠道其他菌群有一定的优势——增加患者VRE菌血症的风险。理论上,预防或逆转VRE的定植,有可能反过来预防菌血症。目前,粪便微生物菌群移植可降低小鼠肠道内定植的VRE菌群密度,正在研究正常粪便菌群的个别组成部分的潜力,看能否通过产生小分子或直接抵抗VRE的定植。

摘要： 目的 了解铜陵市人民医院2017年临床分离细菌对抗菌药物的耐药状况.方法 对2017年1-12月临床分离菌采用纸片扩散法(KB)进行药敏试验,按CLSI 2017年版标准判读药敏试验结果,采用WHONET 5.6软件进行数据分析.结果 临床分离细菌共3436株,其中革兰阳性菌719株,占20.9％;革兰阴性菌2717株,占79.1％.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为23.8％和72.3％,耐甲氧西林株对β-内酰胺类抗生素和其他测试抗菌药物的耐药率显著高于甲氧西林敏感株,未发现对万古霉素和替考拉宁耐药的葡萄球菌.粪肠球菌对青霉素、氨苄西林和呋喃妥因的耐药率较低,屎肠球菌对氯霉素的耐药率较低,5.3％屎肠球菌对万古霉素耐药.大肠埃希菌、克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)和奇异变形菌中ESBLs的检出率分别为41.4％、50.7％和19.4％.肠杆菌科细菌中克雷伯菌属和沙雷菌属对碳青霉烯类抗生素耐药率较高,分别为37.5％和36.0％,其他菌属的耐药率低于3％.鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别80.3％和79.1％;铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为29.7％和28.4％.肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中广泛耐药株的检出率分别为31.3％(171/546)、0.6％(3/508)和0.7％(3/416).结论 本院革兰阴性菌呈增多趋势,尤其广泛耐药的肺炎克雷伯菌应引起高度关注,做好细菌耐药性监测,加强临床抗菌药物的合理使用和医院感染控制.

摘要： 本发明提供一种可提高万古霉素产量的万古霉素的补料培养基及生产万古霉素的方法，所述补料培养基包括碳源、氮源和pH调节剂中的一种或几种，所述碳源包括甘油、淀粉、燕麦粉、葡萄糖、乳糖、淀粉中的一种或几种，所述氮源包括黄豆粉、棉籽精粉、玉米蛋白粉中的一种或几种，所述PH调节剂包括磷酸和氨水中的一种或两种；所述方法包括在发酵过程中向发酵培养基添加补料培养基，所述补料培养基包括碳源、氮源和pH调节剂中的一种或几种。本发明的有益效果在于，发酵过程中向发酵培养基中添加所述补料培养基，降低抑制产生万古霉素次生代谢途径的因素，可提高万古霉素发酵的产量。

摘要： 本发明提供同时检测血液样品中万古霉素与去甲万古霉素的方法、试剂盒及其应用，属于医药检测技术领域。本发明通过优化样本前处理方法并同高效液相色谱‑串联质谱方法相结合，从而成功建立一种同时检测血液样品中万古霉素与去甲万古霉素的方法，该方法具有样本处理简单、灵敏度高通量高、结果可靠等优点，可实现对人体相关抗生素血药水平的实时监测，因此具有良好的实际应用之价值。

摘要： 本发明公开了一种基于二维高效液相色谱‑高分辨质谱的万古霉素组分结构分析方法及万古霉素B开环物一维液相色谱方法采用乙腈‑甲醇‑三羟甲基氨基甲烷溶液作为流动相，二维液相色谱方法选择含甲酸的水溶液‑含甲酸的乙腈溶液为流动相，将一维色谱中的组分切入到二维色谱柱中，去除非挥发流动相后，可实现万古霉素组分的在线高分辨质谱检测。基于一级质谱及二级质谱的高分辨数据，建立了万古霉素(主要组分为万古霉素B)的结构解析方法，通过该方法首次发现了万古霉素B开环物。本发明中2DHPLC‑HRMS方法及基于高分辨质谱的结构解析方法可以用于其他万古霉素同族化合物的结构确证，本方法为严格控制万古霉素的质量提供了研究基础。

摘要： 本发明公开了一种提高万古霉素产生菌生产万古霉素的方法，包括如下步骤：步骤一、克隆生物合成调节基因AORI_1475至载体，并转入感受态细胞培养富集；步骤二、构建包含AORI_1475基因序列的质粒，并转入大肠杆菌JM110去甲基化并过表达；步骤三、提取步骤二中所述过表达的质粒，转入万古霉素生产菌株，获得AORI_1475基因过表达的重组菌株。本发明还公开了一种生物合成调节基因AORI_1475用于生产万古霉素的应用、一种重组载体、以及一种AORI_1475基因过表达的重组菌株用于生产万古霉素的应用。采用本发明的方法，可以提高万古霉素的产量，具有良好的工业应用价值。

摘要： 抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的药剂(抗MRSA药剂)和抗耐万古霉素肠球菌的药剂(抗VRE药剂)含有作为活性成分的血桐提取物，该提取物用包括至少一种有机溶剂的提取溶剂从血桐提取而得。或者，所述抗MRSA药剂和抗VRE药剂含有作为活性成分的选自宁菲-A(nymphaeol-A)、宁菲-B(nymphaeol-B)、宁菲-C(nymphaeol-C)的至少一种物质。

摘要： 本发明涉及一种耐万古霉素肠球菌的多重荧光定量PCR检测试剂盒，所述试剂盒包括VanA特异性引物、VanB特异性引物、VanA荧光探针、VanB荧光探针、PCR缓冲液、脱氧三磷酸核苷混合物、DNA聚合酶、VanA基因标准品序列、VanB基因标准品序列。本发明的有益效果为：由于采用了PCR检测方法，能够做到准确、快速、定量的检测。

摘要： 抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的药剂(抗MRSA药剂)和抗耐万古霉素肠球菌的药剂(抗VRE药剂)含有作为活性成分的血桐提取物，该提取物用包括至少一种有机溶剂的提取溶剂从血桐提取而得。或者，所述抗MRSA药剂和抗VRE药剂含有作为活性成分的选自宁菲-A(nymphaeol-A)、宁菲-B(nymphaeol-B)、宁菲-C(nymphaeol-C)的至少一种物质。

摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，公开了一种检测耐万古霉素肠球菌基因的引物、探针、方法及试剂盒，采用Taqman探针实时荧光PCR法，分别针对16S rDNA、vanA、vanB核酸保守区设计引物和荧光标记探针，3个基因探针5’端均标记荧光报告基团FAM，3’端均标记荧光淬灭基团TAMRA。引物、探针配成PCR检测混合液后，加入酶与样本核酸，选用荧光PCR仪上的FAM通道进行扩增，通过荧光信号的变化实现目的基因的检测。本试剂盒具有准确率高、特异性强、灵敏度高的特点，能够对尿液样本中的肠球菌和VRE进行快速、准确检测。

摘要： 本发明涉及一种耐万古霉素肠球菌的多重荧光定量PCR检测试剂盒，所述试剂盒包括VanA特异性引物、VanB特异性引物、VanA荧光探针、VanB荧光探针、PCR缓冲液、脱氧三磷酸核苷混合物、DNA聚合酶、VanA基因标准品序列、VanB基因标准品序列。本发明的有益效果为：由于采用了PCR检测方法，能够做到准确、快速、定量的检测。

摘要： 本发明涉及耐万古霉素肠球菌双重实时荧光PCR检测方法以及试剂盒的组成，根据待测耐万古霉素肠球菌VanA、VanB两种抗性基因特异的核苷酸序列设计两对引物、两条不同荧光染料标记的探针，采用实时荧光PCR扩增待测两种万古霉素抗性基因的特异性核苷酸序列。本发明采用荧光双通道检测，检测用两种互不干扰检测波长，波长1检测探针FPVanA标记的荧光染料强度，波长2检测探针FPVanB标记的荧光染料强度，Ct值为0或大于37：阴性，Ct值小于36：阳性。本试剂盒针对耐万古霉素肠球菌而设计，具有特异性高、灵敏、快速等特点，可准确、快速、特异、方便的检出耐万古霉素肠球菌，并能够准确判断其耐药的遗传学机制。