线粒体膜

摘要： 糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)为糖尿病常见的微血管并发症,蛋白尿是其特征性标志,而足细胞损伤是DKD蛋白尿发生发展的中心环节.线粒体内质网耦联(mitochondria-associated endoplasmic reticulum membranes,MAMs)指真核细胞内线粒体外膜与内质网膜之间"招募"一系列蛋白质形成的紧密物理连接,MAMs已被发现参与了多种病理生理过程.Ca2+稳态失调、内质网应激和线粒体功能障碍既是DKD发生发展的重要因素,同时也受MAMs的调控,影响足细胞的正常生理功能.近年相继有DKD足细胞中的MAMs发生了结构或功能改变的研究报道.本文旨在系统回顾本领域相关研究,综述MAMs在DKD足细胞损伤中可能的作用及其机制.

摘要： 目的 探讨异丙酚通过上调小窝蛋白-3(Caveolin-3)增加缺血心肌线粒体膜稳定性的机制.方法 筛选健康SD大鼠36只,体质量范围为250～300 g,采用随机数字表法分为3组,每组12只.①正常心肌细胞组:仅开胸不结扎;②心肌缺血再灌注组:单纯给予以5％葡萄糖稀释的脂肪乳,持续静脉滴注;③缺血心肌细胞+异丙酚预处理组:缺血前10 min开始持续静脉滴注异丙酚12 mg·kg-1·h-1,异丙酚用5％葡萄糖稀释.通过蛋白质免疫印迹检测Caveolin-3和细胞色素C;通过荧光探针DCFH-DA测定ROS产生;通过阳离子染料JC-1评估线粒体膜电位;caspase-3比色测定试剂盒测定心肌细胞caspase-3活性.结果 心肌缺血再灌注组Caveolin-3蛋白活性(0.57±0.09)低于正常心肌细胞组(2.24±0.25)和缺血心肌细胞+异丙酚预处理组(2.02±0.14),异丙酚改善心肌缺血诱导的Caveolin-3下调(P<0.05);心肌缺血再灌注组DCF荧光强度(2.79±0.21)高于正常心肌细胞组(1.00±0.12),缺血心肌细胞+异丙酚预处理组心肌细胞DCF荧光强度(1.23±0.14)低于心肌缺血再灌注组(P<0.05);与正常心肌细胞组(1.00±0.06)相比,经受心肌缺血的心肌细胞显示出线粒体去极化降低(0.13±0.02),缺血心肌细胞+异丙酚预处理组(0.83±0.11)稳定了线粒体膜电位(P<0.05).正常心肌细胞组线粒体细胞色素C为(1.00±0.08),心肌缺血再灌注组为(2.76±0.24),心肌缺血增加线粒体细胞色素C释放到胞质溶胶中,缺血心肌细胞+异丙酚预处理组(1.37±0.18)降低细胞色素C释放(P<0.05);心肌缺血再灌注组显示出caspase-3和caspase-9活性增加.与心肌缺血再灌注组相比,异丙酚降低了caspase-3和caspase-9活性(P<0.05).结论 异丙酚在心肌缺血下的保护作用取决于Caveolin-3的上调,后者降低活性氧产生、增加线粒体膜电位、减少细胞凋亡和细胞色素C释放.

摘要： 细胞的重要生理功能几乎都与生物膜有关,但是生物膜教学在生物学教学中常被淡化了。部分教师在生物膜结构与功能的教学方面还存在一些错误认识和不当做法,因此,生物学教学中教师一方面需要廓清有关基本概念,另一方面需要引导学生加强对膜生物学的学习。

摘要： 为明确菊酯类杀虫剂对昆虫线粒体膜流动性的影响,以1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene,DPH)为荧光探剂,采用荧光偏振法研究了4种菊酯类杀虫剂对枸杞蚜虫Aphis sp.线粒体膜流动性的影响.结果 表明,4种菊酯类杀虫剂对枸杞蚜虫线粒体膜流动性均有显著影响,其荧光偏振度显著增大,线粒体膜流动性显著减小.当药剂浓度为1 00μmol/L时,对照组枸杞蚜虫线粒体膜的荧光偏振度为0.239,高效氯氰菊酯的影响最大,线粒体膜的荧光偏振度为0.315,联苯菊酯的影响最小,线粒体膜的荧光偏振度为0.287.4种菊酯类杀虫剂对线粒体膜流动性的影响都存在一定的浓度效应,当药剂浓度在0～100 μmol/L范围内,浓度越大影响越大.4种菊酯类杀虫剂在不同温度下对枸杞蚜虫线粒体膜流动性的影响不同,高效氯氰菊酯、联苯菊酯和甲氰菊酯对线粒体膜流动性的影响基本不受温度影响,而氯菊酯在高温条件下产生的影响大,在低温条件下产生的影响小,表现为明显的正温度系数.表明DPH可以作为荧光探剂研究枸杞蚜虫线粒体膜的流动性.

摘要： 线粒体不仅在能量代谢中有重要的作用,对其它细胞功能的调控也至关重要,随着对线粒体认知的不断深入,对线粒体膜脂质的研究也越来越受关注.心磷脂(cardiolipin,CL)作为线粒体膜中的特征性脂质,是所有真核生物线粒体的共同组分,其代谢和转运有助于线粒体功能的正常发挥.近年来,心磷脂的转运一直是研究的重点.本文中,我们综述了线粒体心磷脂的合成过程、转运机制和其在细胞功能调控中的作用,同时讨论了心磷脂与相关疾病的关系.

摘要： Objective:To investigate the regulation effect of Wnt5a on the apoptosis of lung adenocarcinoma A549 cells,and to clarify its mechanism.Methods:The human lung adenocarcinoma cells were selected.The A549 cells treated with Wnt5a were used as treatment group,and the A549 cells treated with C culture solution were used as control group.The apoptotic body induced by Wnt5a was assessed with TUNEL assay;the apoptotic rates of the A549 cells in various groups were detected by Annexin V-FITC/PI double staining;the reactive oxygen species (ROS)levels in the A549 cells in various groups were determined with DCFH-DA fluorescence probe,and the mitochondria membrane potential was assessed with JC-1 staining method.Western blotting was used to analyze the expression levels of apoptosis-related proteins in the A549 cells in various groups.Results:Compared with control group,the apoptotic rates of the A549 cells in treatment group 12,24,and 48 h after treatment were significantly increased(P<0.01);the ROS levels were increased(P<0.05);the mitochondria membrane potentials were decreased(P<0.05),the expressing amount of BAX was up-regulated and the expression amount of AIF was down-regulated.Conclusion:Wnt5a has regulation on the apoptosis of human lung adenocarcinoma cells and can promote the apoptosis of A549 cells through mitochondrial pathway.%目的:探讨 Wnt5a对人肺腺癌 A549细胞株凋亡的调控作用,并阐明其机制.方法:选择人肺腺癌A549细胞,采用Wnt5a处理的A549细胞作为处理组,以C培养液处理的A549细胞作为对照组,采用TUNEL染色法检测 Wnt5a诱导的 A549细胞凋亡小体,Annexin V-FITC/PI双标法检测2组 A549细胞凋亡率,采用DCFH-DA荧光探针法检测2组 A549细胞活性氧(ROS)水平,采用JC-1染色法检测2组 A549细胞线粒体跨膜电位水平,蛋白免疫印迹法检测2组 A549细胞中凋亡相关蛋白表达水平.结果:与对照组比较,处理组A549细胞在处理12、24和48 h后细胞凋亡率明显升高(P<0.01),ROS水平升高(P<0.05),线粒体膜电位水平下降(P<0.05),促凋亡蛋白BAX的表达量上调,AIF蛋白表达量下调.结论:Wnt5a对人肺腺癌细胞凋亡具有调控作用,其通过线粒体凋亡途径发挥诱导细胞凋亡作用.

摘要： 目的：探究胡芦巴碱（T RG ）对缺氧／复氧乳鼠心肌细胞的保护作用及其机制。方法原代培养SD乳鼠心肌细胞，随机分成3组：正常对照（Control组）、缺氧／复氧组（H／R组）和TRG加缺氧／复氧组（TRG＋ H／R组）；采用流式细胞术分别检测TRG对缺氧／复氧乳鼠心肌细胞凋亡和线粒体膜电位的影响；采用超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）试剂盒检测SOD活性和MDA水平，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测procaspase‐9、cleaved caspase‐9、procaspase‐3和cleaved caspase‐3蛋白水平。结果 TRG能够显著降低缺氧／复氧乳鼠心肌细胞凋亡率（P＜0．05），增强SOD活性（P＜0．05），减少MDA的生成（P＜0．05），稳定线粒体膜电位（ P＜0．05），促进caspase‐9和caspase‐3的活化。结论 T RG可减轻缺氧／复氧对乳鼠心肌细胞的损伤，其机制可能与抗脂质过氧化和稳定线粒体膜电位有关。%Objective To investigate the protective effects of trigonelline in neonatal rat cardiomyocytes during hypoxia /reoxygenation and its mechanism .Methods The neonatal rat cardiomyocytes was randomly divided into the normal control group , the hypoxia/reoxygenation group and the trigonelline group .Flow cytometry was used to determine the apoptosis and mitochondrial membrane potential .The levels of SOD and MDA were measured in different groups .Western blot method was used to measure the procaspase‐9 ,cleaved caspase‐9 ,procaspase‐3 and cleaved caspase‐3 protein level .Results Trigonelline could inhibit apoptosis (P<0 .05) ,enhanced activity of SOD (P<0 .05) ,reduce production of MDA (P<0 .05) ,stabilize the mitochondrial membrane potential (P<0 .05) and activate caspase‐9 and caspase‐3 in neonatal rat cardiomyocytes during hypoxia/reoxygenation .Conclusion Trigo‐nelline could protect myocardial cells from injury caused by hypoxia and reoxygenation ,and the mechanism may be associated with anti‐lipid peroxidation and stabilizing mitochondria membrane potential .

摘要： 放射线被普遍用于医疗诊断中,在应用的过程中,应该防止其对人体带来的危害.本文为了总结放射线对人体的影响和防护对策,首先分析了放射线对人体的影响、产生害处的生理基础和限制剂量,认为采用屏蔽保护、距离保护、时间防护、污染控制、定期检查设备、定期体检和饮食防护,可以在一定程度上减轻放射线对人体的损害.

摘要： 铜是动物机体的必需微量元素之一,对生命体的正常生长发育起到关键性作用.为进一步了解铜对生物体的生物学效应,我们从亚细胞结构层次的设计了本次实验.选用硫酸铜作为铜源,向即时分离的肉鸡肝脏线粒体内加入终浓度分别为:5 μmol/l、10 μmol/l、20 μmol/l的铜(以铜计),孵育10分钟后,观察肝脏线粒体膜通透性及呼吸的变化.结果 显示:铜对线粒体膜通透性转换孔都有较显著的影响,造成线粒体不同程度的肿胀,表现为线粒体悬液在540 nm处吸光值下降,且浓度越高,吸光值下降越明显,在6 min之后的吸光值下降百分比三者差异显著(p＜0.05).同样,随着铜浓度的升高,线粒体呼吸逐渐减弱,RCR、P/O、OPR均显著降低(p＜0.05).

摘要： 高强度电场脉冲从微/纳秒级进入皮秒级，将使得电场脉冲对生物体结构和功能的影响研究进入新的领域。由于细胞线粒体膜的充电时间常数远小于细胞核膜与细胞膜的充电时间常数，在皮秒脉冲作用下，线粒体膜将先于细胞核膜与细胞膜受到脉冲的影响。文章提出，通过冲激脉冲辐射天线将皮秒脉冲聚焦于肿瘤组织，使肿瘤细胞线粒体跨膜电位发生变化而崩溃，启动线粒体途径的凋亡靶向诱导，实现肿瘤的无创治疗，初步实验与仿真结果表明该理论提出的正确性。根据时域天线设计理论，设计了一种用于辐射皮秒电场脉冲的冲激脉冲辐射天线，并对天线结构进行了初步优化设计。

摘要： 采用微量滴定法测定正常对照组(Ⅰ组)、内毒素组(Ⅱ组)和阳离子A拮抗组(Ⅲ组)中兔红细胞膜和肝线粒体膜上磷脂酶A2活性.结果显示,Ⅱ组中红细胞膜在试验第0.5、1、3、5、7小时,线粒体膜在第3、7小时的磷脂酶A2活性均高于Ⅰ组(P＜0.01),而Ⅲ组中两者磷脂酶A2活性在整个试验进程中均低于Ⅱ组(P＜0.05,P＜0.01).据此推断,内毒素可使兔生物膜磷脂酶A2活性升高,而阳离子A则能减轻内毒素对生物膜膜磷脂酶A2活性的破坏,对内毒素具有一定的拮抗效应.

摘要： 本实验以鸡红细胞膜和肝线粒体膜为研究对象,膜上的ATPase为观测指标,从膜泵角度来阐述喹乙醇对生物膜的损伤作用.采用定磷法分别测定对照组(Ⅰ组)和喹乙醇处理组(Ⅱ组)的3种ATPase活性.结果表明喹乙醇引起红细胞膜上的ATPase活性表现为先升高后降低(1～4W活性逐渐升高,5W以后降低),线粒体膜上的ATPase活性则表现为持续降低.结果提示喹乙醇通过影响生物膜上的ATPase活性来诱导生物膜的损伤.

摘要： 以MDCC-MSB1为研究对象,在体外经终浓度分别为0 μmol/L、2 μmol/L、4 μmol/L和8 μmol/L As2O3作用24,48和72 h后,用MTT法检测As2O3对MDCC-MSB1的抑制作用、采用荧光显微镜观察细胞形态学变化、Rhodamine123染色流式细胞术检测△ψm变化.结果 显示,As2O3能抑制细胞生长,引起典型的形态学变化以及凋亡指数逐渐增高,同时伴有△ψm下降,且均呈现时间剂量依赖性.表明As2O3诱导MDCC-MSB1细胞凋亡的途径可能是通过△ψm降低来实现的.

摘要： 大量动物实验和临床实验的研究表明,治疗剂量的对乙酰氨基酚(acetaminophen，AP)较安全,但中毒剂量的AP则会引起向心性肝细胞坏死。过去一直认为引起肝细胞坏死的原因是由于中毒剂量的AP在CYP酶的作用下产生正-乙酰-对-苯醌亚胺(NAPQI),后者可以和肝脏还原型谷胱甘肽(GSH)结合,使之耗竭,然后与一些肝脏蛋白质共价结合,导致肝脏损伤。随着研究的发展和深入,许多学者对早期的研究结果提出了异议,并加以补充完善。本文拟对到目前为止的大量研究做一概括性的综述。

摘要： 大量动物实验和临床实验的研究表明,治疗剂量的对乙酰氨基酚(acetaminophen，AP)较安全,但中毒剂量的AP则会引起向心性肝细胞坏死。过去一直认为引起肝细胞坏死的原因是由于中毒剂量的AP在CYP酶的作用下产生正-乙酰-对-苯醌亚胺(NAPQI),后者可以和肝脏还原型谷胱甘肽(GSH)结合,使之耗竭,然后与一些肝脏蛋白质共价结合,导致肝脏损伤。随着研究的发展和深入,许多学者对早期的研究结果提出了异议,并加以补充完善。本文拟对到目前为止的大量研究做一概括性的综述。

摘要： 大量动物实验和临床实验的研究表明,治疗剂量的对乙酰氨基酚(acetaminophen，AP)较安全,但中毒剂量的AP则会引起向心性肝细胞坏死。过去一直认为引起肝细胞坏死的原因是由于中毒剂量的AP在CYP酶的作用下产生正-乙酰-对-苯醌亚胺(NAPQI),后者可以和肝脏还原型谷胱甘肽(GSH)结合,使之耗竭,然后与一些肝脏蛋白质共价结合,导致肝脏损伤。随着研究的发展和深入,许多学者对早期的研究结果提出了异议,并加以补充完善。本文拟对到目前为止的大量研究做一概括性的综述。

摘要： 大量动物实验和临床实验的研究表明,治疗剂量的对乙酰氨基酚(acetaminophen，AP)较安全,但中毒剂量的AP则会引起向心性肝细胞坏死。过去一直认为引起肝细胞坏死的原因是由于中毒剂量的AP在CYP酶的作用下产生正-乙酰-对-苯醌亚胺(NAPQI),后者可以和肝脏还原型谷胱甘肽(GSH)结合,使之耗竭,然后与一些肝脏蛋白质共价结合,导致肝脏损伤。随着研究的发展和深入,许多学者对早期的研究结果提出了异议,并加以补充完善。本文拟对到目前为止的大量研究做一概括性的综述。

摘要： 本发明公开了一种检测线粒体糖尿病45个基因位点膜芯片，其步骤首先是以尼龙膜为载体，其次是设计引物和探针，第三是芯片点阵布控，最后是芯片点样和固定。该芯片监控系统由碱基突变位点的阴性对照、阳性对照和平行对照组成；检测系统为待检的mtDNA 45个位点的野生型和突变型探针。每张芯片包含90条探针、196个样点，布控合理、规整度高。实验操作流程简单，省时，成本低，仅需1次不对称PCR扩增、1次生物素标记、1次杂交反应，即可检测mtDNA45个位点。检测结果准确、快速、效率高，可满足不同层次医院的要求，适用于糖尿病患者和高危人群的检测，有助于临床特殊类型糖尿病的正确诊断和分类，早发现病人，早预防，早治疗。

摘要： 本发明提供了近红外硅基罗丹明荧光染料、制备方法及其在线粒体脊膜原位免洗成像中的应用，近红外硅基罗丹明荧光染料结构式如式（I）所示。本发明近红外硅基罗丹明荧光染料合成步骤少，制备方法简单，产率高，所得近红外硅基罗丹明荧光染料紫外吸收强度好和荧光量子产率高，受生物自发荧光干扰小，生物毒性低，具有较好的生物相容性，抗光漂白能力强，能够长时间连续成像，可用于线粒体脊膜原位免洗荧光成像。

摘要： 本发明公开了一种线粒体靶向透膜环肽及其制备方法和用途，其中线粒体靶向肽的结构如下：

摘要： 本实用新型公开了一种跨膜线粒体融合素的模式结构模型教具，包括第一本体、第二本体、嵌设在第一本体内的第一嵌体、嵌设在第二本体内的第二嵌体、设置在第一嵌体顶端的连接体、设置在连接体顶端的连接球，第一嵌体与第二嵌体通过第一连接杆连接，第一嵌体与连接体通过第二连接杆连接，连接体与连接球通过第三连接杆连接，连接体顶端设置有第一伸出杆，连接球一端设置有第二伸出杆。本实用新型结构简单、拆装灵活、能生动形象地展示跨膜线粒体融合素的模式结构。

摘要： 本发明公开了一种检测线粒体膜电势的可遗传荧光探针及其应用，该荧光探针是由PINK1基因截短片段和荧光蛋白基因融合所得，最为优选的PINK1基因截短片段为SEQ IDNO.1所示的野生型PINK1基因序列的1‑390bp。本发明所提供的荧光探针具有制备方法简单，易储存，生物毒性低等优点；基于可遗传的特点，该线粒体膜电势探针应用面广泛，结合现代成像技术，可以快速灵敏的对目标细胞、组织、器官甚至是生命体的线粒体膜电势进行准确测量。

摘要： 本发明涉及鱼肝脏线粒体膜流动性的测试，具体涉及一种麦穗鱼肝脏线粒体膜流动性的活体测试方法，该方法包括S1.鱼体暴露实验；S2.麦穗鱼活体肝脏线粒体膜的制备；S3.DPH溶液的制备；S4.线粒体膜DPH荧光探针的标记；S5.膜流动性测定；S6.线粒体的蛋白质含量测定。本发明麦穗鱼肝脏线粒体膜流动性的活体测试方法，方便准确的测定药剂对鱼线粒体膜流动性的影响。

摘要： 本发明公开了一种线粒体膜囊泡的制备方法，涉及膜囊泡制备技术领域，其技术方案要点是：制备线粒体膜囊泡具体包括以下步骤：S1：从小鼠胚胎成纤维细胞系3T3中提取线粒体；S2：提取线粒体外膜；S3：将线粒体外膜进行超声处理，然后在聚碳酸酯多孔膜中挤压多次后得到线粒体膜空囊泡；S4：通过线粒体膜囊泡对CuS进行包裹。该方法不仅能够高效制备线粒体膜囊泡，还为探索新的可替代的低免疫原性生物膜用于纳米材料的包裹和药物递送提供技术支撑。

摘要： 本发明公开了一种检测线粒体膜电势的可遗传荧光探针及其应用，该荧光探针是由PINK1基因截短片段和荧光蛋白基因融合所得，最为优选的PINK1基因截短片段为SEQ IDNO.1所示的野生型PINK1基因序列的1‑390bp。本发明所提供的荧光探针具有制备方法简单，易储存，生物毒性低等优点；基于可遗传的特点，该线粒体膜电势探针应用面广泛，结合现代成像技术，可以快速灵敏的对目标细胞、组织、器官甚至是生命体的线粒体膜电势进行准确测量。

摘要： 本发明涉及鱼肝脏线粒体膜流动性的测试，具体涉及一种麦穗鱼肝脏线粒体膜流动性的活体测试方法，该方法包括S1.鱼体暴露实验；S2.麦穗鱼活体肝脏线粒体膜的制备；S3.DPH溶液的制备；S4.线粒体膜DPH荧光探针的标记；S5.膜流动性测定；S6.线粒体的蛋白质含量测定。本发明麦穗鱼肝脏线粒体膜流动性的活体测试方法，方便准确的测定药剂对鱼线粒体膜流动性的影响。

摘要： 本发明公开了一种利用量子点荧光检测凋亡过程中线粒体膜透化改变的方法。本发明所述的量子点为巯基乙酸或巯基丁二酸等羧基修饰的低毒水溶性量子点，包括CdS、CdSe、CdTe、CdTe/ZnSe、CdTe/ZnS、CdSe/ZnTe，配制量子点检测试剂所用的储存缓冲液含225mmol/L甘露醇、70mmol/L蔗糖，且pH在7.5~8.5范围的D-Hank’s缓冲液、HEPES缓冲液、柠檬酸钠缓冲液、PBS缓冲液。检测过程基本步骤包括：（1）制备线粒体悬液；（2）加入量子点检测试剂，冰浴10分钟；（3）荧光读数。本发明能灵敏、稳定检测出凋亡过程中线粒体膜透化的改变。