纯度鉴定

摘要： 玉米杂交种纯度的优劣直接决定其产量,常规检测方法采用若干单引物进行若干次电泳检测,鉴定周期长,效率低,不能及时反映杂交种纯度,难以及时指导大田生产。为了提高玉米种子纯度检测的准确性,建立稳定高效的多重PCR检测技术,本研究以‘德美亚1号’、‘德美亚2号’、‘德美亚3号’及其父母本为试验材料,通过比较不同DNA提取方法,确定了适宜多重PCR检测的SDS法;同时针对‘德美亚’不同系列,从国标玉米核心40对引物中筛选多态性并适合组建多重PCR的引物,试验最终为‘德美亚1号’组建了两重PCR,‘德美亚2号’和‘德美亚3号’组建了3重PCR,并尝试了自交系4重和5重引物组合,采用适宜的琼脂糖凝胶电泳检测方法,都获得了很好的扩增效果,试验所采用的扩增体系和扩增程序适宜2~5重PCR反应,并能有效应用于玉米杂交种的种子纯度鉴定。为今后‘德美亚’系列玉米品种鉴定提供了便利,也为其它玉米品种鉴定提供了思路。

摘要： 目的:建立从秘鲁鱿鱼肌原纤维蛋白中分离纯化肌动蛋白的方法,实现肌动蛋白的批量制备。方法:使用磷酸盐缓冲液从秘鲁鱿鱼中提取肌原纤维混合蛋白,提取液首先经过阴离子交换层析分离出只有微小电荷差别的蛋白质,然后用凝胶过滤层析对混合组分中的小分子物质进行去除(如脱盐等操作),再使用大分子蛋白分离纯化系统纯化,得到纯度高的肌动蛋白(AC)。采用SDS-PAGE、HPLC、MALDI-TOF-MS 3种方法鉴定所分离的蛋白纯度和分子质量,采用光散射技术对肌动蛋白在溶液中的粒径分布进行表征。结果:本文从肌原纤维蛋白中提取出了纯度较高的肌动蛋白,且肌动蛋白的水力学半径(Rh)为3.46 nm。结论:初步建立一种分离纯化肌原纤维蛋白中AC的新方法,为实现肌动蛋白的批量制备提供技术支撑。

摘要： 为了确保种子遗传质量,准确高效地鉴定杂交黄瓜种子的品种纯度,用63对SSR引物对黄瓜(Cucumis sativus L.)品种京研绿翡翠及其亲本进行多态性筛选。结果表明,16对引物在亲本间具有多态性,并都表现出共显性,在杂交后代中表现为清晰、稳定的父母本互补的带型,特异性强,可以用来区别其中混杂的母本、父本及其他品种的种子。这16对SSR引物作为京研绿翡翠及其亲本的核心引物,构成京研绿翡翠的SSR指纹图谱,为京研绿翡翠杂交种的真伪鉴定、纯度检测及亲本提纯等工作提供准确的技术信息。其中10对引物扩增的条带可分辨程度高,利用这10对引物对京研绿翡翠黄瓜种子进行检测,其鉴定结果与田间鉴定结果一致。

摘要： 本研究利用SSR标记和田间种植观察对新创制的8份杂交组合水稻种子进行纯度鉴定,除杂交组合6026A/R4149采用1个标记之外,其余7个杂交组合均采用2个标记鉴定,分子标记和田间观察均鉴定200个单株。SSR标记检测结果与田间种植鉴定结果基本相同,因此,筛选出的共显性标记适用于这8个杂交组合的水稻种子纯度鉴定。

摘要： 以6份苦瓜自交系及其配组的3个苦瓜杂交一代组合为试验材料,对6份苦瓜自交系进行高深度重测序,鉴定获得覆盖苦瓜全基因组的InDel变异位点信息,并针对InDel变异位点设计引物进行PCR扩增验证,成功开发3个苦瓜杂交一代组合的各自特异多态性InDel分子标记,将多态InDel分子标记应用于苦瓜杂交一代种子纯度鉴定。结果表明,InDel分子标记纯度鉴定结果与田间种植鉴定结果一致,初步建立了苦瓜杂交一代种子纯度InDel分子标记鉴定技术体系。

摘要： 为了加快大白菜新品种陕秋白3号的推广,用分子标记技术进行种子纯度鉴定研究。从28对SSR引物中筛选出陕秋白3号的特异扩增引物SSRA 07-1和SSRA 07-2,这两对引物在两个亲本中扩增出不同带型,在杂交种中扩增出共显性产物,可以将杂交种和亲本有效区分开。鉴定结果为:正交杂交率96.7%,反交杂交率88.3%,与田间鉴定的正交杂交率96%,反交杂交率89%基本一致。进一步用这两对引物对陕秋白3号与秋白85、秦白二号、14杂1、27-2、金冠1号、改良青杂3号、秋早55等7个大白菜品种进行鉴定,结果显示,该引物可以将陕秋白3号与这7个品种有效区分开。研究表明,利用SSR鉴定可以快速鉴定新品种陕秋白3号,加快其在生产上的推广速度。

摘要： [目的]建立一种混合多个PCR产物的高效单色毛细管电泳技术。[方法]以杂交水稻丰两优3305和常规稻润稻118为试验材料,结合品种指纹数据和PCR产物片段大小之间的差异,筛选出适用于该品种纯度鉴定的SSR分子标记。通过单重和多重毛细管电泳结果比对,验证多重电泳技术应用于SSR分子标记检测水稻纯度的实用性。[结果]片段差异10 bp及以上不同分子标记的PCR产物可以进行多重电泳。多重毛细管电泳技术既能降低检测成本,又能提高试验效率,可进一步提升毛细管电泳仪使用效能。[结论]该研究可为高效检测水稻种子纯度提供技术参考。

摘要： [目的]为了快速、简便和准确地鉴定华南型黄瓜‘川绿15号’杂交种子的纯度,[方法]选用240个均匀分布在黄瓜基因组上的SSR分子标记对‘川绿15号’及其亲本进行多态性筛选及纯度鉴定。[结果]本研究从240个黄瓜SSR分子标记筛选到2对SSR标记(Cs100和Cs109)符合父母本间呈互补带型的要求,可用于川绿15号’杂交种子的纯度鉴定。准确性验证结果显示Cs100和Cs109的分子鉴定结果与田间形态的鉴定结果一致并且均能将掺入的其他品种黄瓜种子区分开来。[结论]本研究构建了以黄瓜特异性SSR分子标记Cs100和Cs109为核心引物的‘川绿15号’杂交种子纯度鉴定的技术方法,可快速、简便和准确地鉴定该品种的种子纯度,为该品种的制种和大面积推广提供技术支持。

摘要： 以南瓜高代自交系为研究对象,在湖北咸宁良种繁育基地进行南瓜品种杂交制种与种子纯度鉴定,分2茬种植,在1年内完成。制种茬要求制种基地方圆300 m以内没有南瓜以及其他近缘葫芦科作物种植,适宜播期为3月上旬,父、母本行比例为1∶6,父本比母本早播种8~10天,杂交种子按株编号留存。纯度鉴定时,将制种茬收获的杂交种子于8月上中旬播种,9月下旬至10月中旬嫩南瓜成熟;根据F1代植株和果实特征,鉴定杂交种子纯度。

摘要： 为研究SNP分子标记鉴定玉米杂交种纯度的方法,选用甘肃省推广的6份玉米杂交种为试验材料,通过应用SNP分子标记的KASP技术鉴定玉米杂交种的基因型和纯度,试验结果为95.83％-98.96％之间,说明SNP分子标记KASP技术结果可靠,实现了高效率、高灵活性、简便快捷、低成本的技术优势,可以作为玉米杂交种纯度检测的新方法,并在今后基于SNP标记的玉米品种分子鉴定中发挥越来越重要的作用,能够有效为我省乡村振兴战略背景下玉米制种品种质量监测技术研究提供技术参考.

摘要： 种子纯度在种子生产中的地位日益提高,以往的形态鉴定等方法难以满足种子强度鉴定的要求.分子标记技术越来越多地被应用到种子纯度鉴定中.本文介绍了SRAP分子标记技术的基木原理和特点,简要叙述了SRAP标记技术在农作物种子纯度鉴定上的研究进展,并就其在杂交种纯度方面的应用潜力进行了探讨.

摘要： 基于黄瓜线粒体父系遗传特性,研究线粒体基因组SSR(mitochondria genome simple sequence repeat,mtSSR)标记技术在黄瓜杂交种纯度鉴定上的可行性.根据黄瓜线粒体基因组序列开发特异性标记,选用不同生态型的黄瓜品种对标记进行筛选,利用多态性的引物对人为掺假的黄瓜F1种子进行纯度检测.从72对标记中,共筛选出4对在30份黄瓜品种呈现出多态性的引物,其中mtSSR4引物扩增出102和107 bp的多态性片段;mtSSR10引物扩增出196、224和242 bp的多态性片段;mtSSR29引物扩增出226、239和280 bp的多态性片段;mtSSR44引物扩增出184和194 bp的多态性片段.利用引物mtSSR4和mtSSR10对4份黄瓜F1种子纯度鉴定,显示黄瓜F1种子的带型与父本的一致,可将掺入杂交组合中的假种子区分开.经田间试验数据表明,分子标记检测与田间鉴定结果基本一致,可用于黄瓜杂交种种子纯度的鉴定.线粒体基因组特异序列SSR标记能够准确地鉴定黄瓜杂种一代种子,对保证黄瓜种子生产质量具有广泛的应用前景.

摘要： 本试验运用SSR分子标记技术结合田间形态学鉴定方法对国内大面推广的三个嫩早南瓜品种嫩早2号、嫩早佳美和嫩早黑妞的种子纯度进行鉴定.电泳结果发现:引物NG05、NG74和NG88均能在嫩早2号双亲本间扩增出差异互补的条带,引物NG05、NG26、NG74、NG80和NG04均能在嫩早佳美双亲本间扩增出差异互补条带,引物NG05能在嫩早黑妞双亲本间扩增出差异互补条带.基于引物筛选结果,利用引物NG05对嫩早2号和嫩早黑妞进行品种鉴定,引物NG26对嫩早佳美进行品种鉴定.嫩早2号、嫩早佳美和嫩早黑妞F1代纯度分别为95.7％、99.4％和96.6％,与田间检测结果(分别为96.5％、99.4％和97.0％)无显著差异.表明,SSR分子标记是一种简单、有效且准确的鉴定嫩早南瓜杂交种纯度的方法.

摘要： 种子真实性和品种纯度是棉花种子质量的2个重要方面,是棉花生产中的重要元素.品种混杂和纯度降低对棉花产量和纤维品质造成的不利影响非常严重.本文综述了棉花种子真实性和纯度的鉴定方法,重点阐述了RAPD、AFLP和SSR分子标记技术在棉花种子鉴定中的应用,并分析了各种分子标记技术在棉花种子真实性和纯度鉴定中的应用潜力及存在的问题.

摘要： 目的：本研究主要讨论了符合美国药典2014附录的重组胰蛋白酶的活性、纯度和稳定性.方法：按照附录的方法对重组胰蛋白酶进行了活性检测,纯度鉴定,并对其稳定性进行了研究.结果：重组胰蛋白酶样品的比活性为4500USPUnit/mg，胰蛋白酶出峰时间为13.lmin，在p-trypsin之前有两个小峰为a-trypsin。结论：该重组胰蛋白酶使用BAEE作为底物时比活性为4500USP单位,HPLC检测结果发现β-trypsin不少于70％,α-trypsin不多于20％,纯度好,符合美国药典要求.

摘要： 研究了离子液体(ILs)催化合成二苯甲烷双马来酰亚胺的反应,分别考察了反应物料比、助溶剂用量、ILs用量、吸附剂用量对反应的影响,结果表明,当4,4-二氨基二苯甲烷(DDM)与顺丁烯二酸酐(MA)的摩尔比为1∶2.2,助溶剂用量为甲苯用量的5％、Ils及吸附剂用量分别为反应物料总重量的5％和2％时,产品的收率为94.5％,纯度可达92.6％.同时,本文对产品的应用做了初步探索,研究表明,产品纯度与改性聚合物的软化点没有线性规律.

摘要： 研究了离子液体(ILs)催化合成二苯甲烷双马来酰亚胺的反应,分别考察了反应物料比、助溶剂用量、ILs用量、吸附剂用量对反应的影响,结果表明,当4,4-二氨基二苯甲烷(DDM)与顺丁烯二酸酐(MA)的摩尔比为1∶2.2,助溶剂用量为甲苯用量的5％、Ils及吸附剂用量分别为反应物料总重量的5％和2％时,产品的收率为94.5％,纯度可达92.6％.同时,本文对产品的应用做了初步探索,研究表明,产品纯度与改性聚合物的软化点没有线性规律.

摘要： 研究了离子液体(ILs)催化合成二苯甲烷双马来酰亚胺的反应,分别考察了反应物料比、助溶剂用量、ILs用量、吸附剂用量对反应的影响,结果表明,当4,4-二氨基二苯甲烷(DDM)与顺丁烯二酸酐(MA)的摩尔比为1∶2.2,助溶剂用量为甲苯用量的5％、Ils及吸附剂用量分别为反应物料总重量的5％和2％时,产品的收率为94.5％,纯度可达92.6％.同时,本文对产品的应用做了初步探索,研究表明,产品纯度与改性聚合物的软化点没有线性规律.

摘要： 研究了离子液体(ILs)催化合成二苯甲烷双马来酰亚胺的反应,分别考察了反应物料比、助溶剂用量、ILs用量、吸附剂用量对反应的影响,结果表明,当4,4-二氨基二苯甲烷(DDM)与顺丁烯二酸酐(MA)的摩尔比为1∶2.2,助溶剂用量为甲苯用量的5％、Ils及吸附剂用量分别为反应物料总重量的5％和2％时,产品的收率为94.5％,纯度可达92.6％.同时,本文对产品的应用做了初步探索,研究表明,产品纯度与改性聚合物的软化点没有线性规律.

摘要： 研究了离子液体(ILs)催化合成二苯甲烷双马来酰亚胺的反应,分别考察了反应物料比、助溶剂用量、ILs用量、吸附剂用量对反应的影响,结果表明,当4,4-二氨基二苯甲烷(DDM)与顺丁烯二酸酐(MA)的摩尔比为1∶2.2,助溶剂用量为甲苯用量的5％、Ils及吸附剂用量分别为反应物料总重量的5％和2％时,产品的收率为94.5％,纯度可达92.6％.同时,本文对产品的应用做了初步探索,研究表明,产品纯度与改性聚合物的软化点没有线性规律.

摘要： 本发明提供了一组鉴定玉米杂交种纯度的SNP核心位点、引物和高通量鉴定纯度的方法，属于基因工程技术领域，所述SNP核心位点包括玉米1号染色体第8974336位、1号染色体第289408285位等20个核心位点。采用本发明提供的SNP位点能够鉴定玉米杂交种的纯度。

摘要： 本申请公开了一种提高三系杂交水稻制种纯度及杂交种子纯度的鉴定方法，它利用由携带单隐性基因控制的颖壳、叶脉、茎秆具有红褐色标记性状的杂交水稻三系不育系作母本与不具有红褐色标记性状的恢复系进行制种，在母本不育系幼穗分化进入第6期后，其籽粒颖壳、叶脉、茎秆显现红褐色标记性状，在不育系抽穗前后去除不具有红褐色标记性状的水稻植株，获得具有红褐色标记性状的杂交种子，提高杂交种子纯度；种子收获后进行播种、移栽，待植株抽穗前统计叶脉、茎秆具有红褐色标记性状与不具有红褐色标记性状的植株比例，据此计算出杂交水稻种子的纯度；在水稻抽穗后再次统计颖壳具有红褐色标记性状与不具有标记性状的植株比例，验证杂交种子纯度。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，公开了用于快速鉴定生姜品种纯度的引物组组合，包括如下引物组中的任意一组或多组：引物组SJ1、引物组SJ2、引物组SJ3、引物组SJ4、引物组SJ5、引物组SJ6、引物组SJ7、引物组SJ8、引物组SJ9、引物组SJ10、引物组SJ11、引物组SJ12、引物组SJ13；还公开了鉴定方法和应用。本发明应用SRAP分子标记技术以更灵敏和高效的鉴定手段对生姜品种进行准确鉴定，与常规的形态检验相比，本发明的引物组和鉴定平台的检测结果更稳定、可靠，且具有快速简单、直观实用等特点，可应用于生姜品种纯度的快速鉴定、亲缘关系分析、品种知识产权保护和分子标记辅助育种等方面。

摘要： 本公开涉及四种类型大白菜杂交种纯度鉴定核心引物及杂交种纯度InDel分子标记鉴定试剂盒，通过广泛筛选相关InDel分子标记，挖掘出一批在分别在不同类型大白菜杂交种中杂合度较高的引物组合，这些引物组合用于相应类型大白菜双亲鉴定，可以构建双亲的特征DNA指纹，用其中双亲间有多态性的引物或引物组合，又可以鉴定杂交种纯度。将这些引物组合构成一个试剂盒，大大降低了企业或育种单位自行开发标记的成本，具有广泛的应用前景。

摘要： 本发明涉及品种纯度鉴定领域，具体涉及用于小麦常规品种纯度鉴定的特异性SNP位点组合以及鉴定方法。确定了包含WSNP01～WSNP24的SNP位点组合。基于所述特异性SNP位点组合，可实现对小麦常规品种纯度的高通量检测，具有准确性高、稳定性好、成本低、操作简单、方便快速等优点，应用前景十分广阔。

摘要： 本发明公开了一种用于铁柱冬瓜杂交种子纯度鉴定的SSR引物SSR327，所述引物SSR327包括上游引物SSR327‑F和下游引物SSR327‑R，所述上游引物SSR327‑F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述下游引物SSR327‑R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。还公开了上述铁柱冬瓜杂交种子纯度的鉴定方法，该引物能产生184bp的母本特异性标记SSR327184和199bp的父本特异性标记SSR327199，重复性好、特异性强。该方法利用上述SSR引物，能准确、快速、便捷、有效的鉴定铁柱冬瓜杂交种子纯度。

摘要： 本发明公开了一种用于夏冠一号节瓜杂交种子纯度鉴定的SSR引物SSR81，所述引物SSR81包括上游引物SSR81‑F和下游引物SSR81‑R，所述上游引物SSR81‑F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述下游引物SSR81‑R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。还公开了一种夏冠一号节瓜杂交种子纯度的鉴定方法，该引物能产生母本特异性标记和父本特异性标记，重复性好、特异性强。该方法利用上述SSR引物，能准确、快速、便捷、有效的鉴定夏冠一号节瓜杂交种子纯度。

摘要： 本公开涉及四种类型大白菜杂交种纯度鉴定核心引物及杂交种纯度InDel分子标记鉴定试剂盒，通过广泛筛选相关InDel分子标记，挖掘出一批在分别在不同类型大白菜杂交种中杂合度较高的引物组合，这些引物组合用于相应类型大白菜双亲鉴定，可以构建双亲的特征DNA指纹，用其中双亲间有多态性的引物或引物组合，又可以鉴定杂交种纯度。将这些引物组合构成一个试剂盒，大大降低了企业或育种单位自行开发标记的成本，具有广泛的应用前景。

摘要： 本发明涉及品种纯度鉴定领域，具体涉及用于小麦常规品种纯度鉴定的特异性SNP位点组合以及鉴定方法。确定了包含WSNP01～WSNP24的SNP位点组合。基于所述特异性SNP位点组合，可实现对小麦常规品种纯度的高通量检测，具有准确性高、稳定性好、成本低、操作简单、方便快速等优点，应用前景十分广阔。

摘要： 本发明公开了一种用于紫色辣椒杂交品种纯度鉴定的SSR引物及鉴定方法。其中SSR引物命名为PZJ01，其正向序列为PZJ01‑F，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；反向序列为PZJ01‑R，其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。鉴定方法以紫色辣椒杂交品种的叶片基因组DNA为模板进行扩增，通过对扩增结果的特异谱带对待检测紫色辣椒杂交品种的纯度进行检测。本发明所采用SSR引物和鉴定方法可以在紫色辣椒杂交品种植株生长的任何时期进行鉴定，能够将杂交种与母本自交种、父本自交种区分开来；对DNA质量要求不高且需要量少；成本较低、操作简单；重复性和稳定性较好，快速高效；准确性高，应用推广前景广阔，为开展辣椒制种和良种的及时销售提供科学依据。