粗糙脉孢菌

摘要： 微生物发酵法生产番茄红素是直接提取和化学合成的有效替代策略。以油酸为外源脂肪酸,探究其对粗糙脉孢菌发酵产番茄红素的影响,通过响应面法优化确定最佳培养条件,并进一步探究油酸对番茄红素合成相关酶的影响。结果表明:在含油酸的培养基中,粗糙脉孢菌的番茄红素产量显著增加;在油酸质量浓度0.90 g/L、振荡速率100 r/min、振荡培养温度34°C、静置培养温度30°C条件下,番茄红素产量达到4.21 mg/L,是空白对照组的2.77倍。培养基中油酸的添加不仅促进了粗糙脉孢菌生物量的积累,菌体内乙酰辅酶A的水平也显著增加;同时,与番茄红素合成相关酶(HMG-CoA合成酶、HMG-CoA还原酶、香叶基香叶基焦磷酸合酶)的水平亦显著升高。结果表明油酸的添加可供利用更多的乙酰辅酶A进入甲羟戊酸途径,并进一步在上述酶的诱导作用下促进番茄红素的合成。

摘要： 为了研究驱动蛋白-1的基因(Kin-1)在菌丝极性生长中的功能,本文以粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)菌株为材料,利用同源重组技术尝试获得其敲除突变菌株Kin-1^(KO),并分析菌株87-3、Ku70^(RIP)和Kin-1^(KO)的菌丝生长情况.结果表明,与菌株87-3和Ku70^(RIP)相比,菌株Kin-1^(KO)的菌落生长缓慢、质地致密,菌丝生长速率下降,菌丝直径变粗、分枝增多.本研究成果获得了粗糙脉孢菌Kin-1敲除突变株Kin-1^(KO),证实Kin-1对于粗糙脉孢菌菌丝的生长至关重要.

摘要： 从多糖提取后的紫皮石斛(Dendrobium devonianum Paxt.)渣上分离到一株能够水解石斛多糖的菌株,为丰富寡糖食品新原料种类,对该菌株的发酵产酶活性进行分析。利用酶法制备紫皮石斛寡糖,并进行小试和中试,采用硅胶柱色谱对寡糖进行初步分离,PMP衍生化后通过HPLC分析单糖组成。结果表明,水解石斛多糖的菌株为粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)。该菌株液态发酵至第4天酶活最高,为0.1 U/μL,最佳酶解时间为24 h,粗酶液能够耐受30%的乙醇。通过粗酶液生物转化石斛多糖的小试和中试成功制备了大量的石斛寡糖,并对各组分进行了初步分离,单糖组成分析表明其主要由甘露糖组成,并含有少量的葡萄糖或果糖。通过粗糙脉孢菌酶法制备得到的紫皮石斛寡糖主要为甘露寡糖。

摘要： 为探讨粗糙脉孢菌丝切蛋白(NcCof)的生化功能,对其进行纯化和微丝解聚活性分析。序列比对结果表明,NcCof N端第4位丝氨酸(S4)高度保守,推测其是NcCof发挥活性的重要位点,三级结构预测结果表明,它含有5个α-螺旋和6个β-折叠,中间的4个β折叠片处于反平行状态,5个α-螺旋围绕在β折叠片周围,具有典型的丝切蛋白/肌动蛋白解聚因子家族结构特征。利用点突变、亲和层析纯化得到蛋白NcCof、NcCof(S4A)和NcCof(S4D),进一步通过高速共沉淀等技术对其微丝解聚活性进行研究,结果表明,NcCof具有经典的微丝解聚活性,并具有剂量效应,突变蛋白NcCof(S4A)和NcCof(S4D)也具有解聚微丝的能力,但是NcCof(S4D)的解聚活性明显减弱。结果为进一步探讨NcCof调控肌动蛋白动态特性的分子机制奠定基础。

摘要： 本试验于发霉变质的甘蔗渣中分离、筛选得到1株编号为NC2636的产色素菌株.采用分光光度法对该菌株固态发酵甘蔗渣所产的色素进行定性定量分析.并观察菌株NC2636的培养特征和显微特征,以及采用ITS序列对比的方法对其进行鉴定.结果表明:通过分光光度法确定菌株NC2636固态发酵甘蔗渣所产的色素为类胡萝卜素,最大吸收波长为469 nm,28°C固态发酵6 d,色素含量为95.63μg/g.菌株NC2636的ITS序列与Neurospora crassa(KR399979)的序列同源性为100％,结合其培养特征和微观形态特征,故将菌株NC2636鉴定为一株粗糙脉孢菌(Neurospora crassa).

摘要： 粗糙脉孢菌为子囊菌中的高效纤维素降解菌,可以直接以纤维素为营养源进行生长.本研究以粗糙脉孢菌为实验对象,利用基因工程技术构建甾醇还原酶基因erg24的高表达菌株,分别以蔗糖、麦麸、玉米秸秆、小麦秸秆、杨树木屑、水稻秸秆6种物质的粉末为碳源培养野生型粗糙脉孢菌和erg24高表达菌株,利用半定量RT-PCR测定在不同培养条件下erg2、erg24和erg6 3个麦角甾醇合成相关基因的表达水平,采用HPLC方法测定不同培养条件下麦角甾醇的积累量.研究结果表明,分别以玉米秸秆、杨树木屑、水稻秸秆这3种粉末为碳源时,培养物中的erg2、erg24和erg6 3个基因表达量较高.在不同培养条件下erg24高表达菌株合成麦角甾醇量显著高于野生型粗糙脉孢菌的合成量,且以杨树木屑粉末为碳源培养时,所获得的麦角甾醇产量最高,为30.53μg/mg.结果表明erg24基因是粗糙脉孢菌合成麦角甾醇的关键基因之一,利用玉米秸秆、小麦秸秆、杨树木屑或水稻秸秆粉末为碳源培养粗糙脉孢菌时,可获得较高产量的麦角甾醇.研究结果为以农业废弃物为营养源,利用真菌生产麦角甾醇奠定了基础.

摘要： 该试验以番茄红素产量及干质量为评价指标,通过单因素试验考察大豆蛋白胨对粗糙脉孢菌(Neurospora crassa) 3.1607产番茄红素的影响,并对其添加量、添加时间、菌种接种量进行优化.以单因素试验结果为基础,结合响应面法,对添加了大豆蛋白胨的粗糙脉孢菌发酵产番茄红素发酵条件进行优化.结果 表明,当添加大豆蛋白胨时,孢子干质量及番茄红素的产量都明显提高,最佳发酵条件为:大豆蛋白胨添加量11g/L、发酵55h时添加、菌种接种量6‰添加后继续发酵51h后孢子干质量达0.25g/L,番茄红素产量达9.64 mg/L.

摘要： 本研究发现转录因子nsdc基因缺失突变体表现出渗透压抗性表型，渗透压应答基因gcy-1和stl-1的表达水平都明显升高，而且在渗透压刺激下，NSDC蛋白磷酸化修饰水平升高，证明转录因子NSDC受上游激酶调控。进一步检测发现nsdc基因的缺失不影响OS-2蛋白的表达量和OS-2蛋白的磷酸化水平。为了进一步探究NSDC参与渗透压调控的具体机制，制备了NSDC的内源抗体，并对NSDC蛋白进行了纯化，质谱鉴定出NSDC蛋白上的五个磷酸化位点。上述结果证明NSDC独立于OS-2 MAPK信号通路而参与调控渗透压应答基因的表达。综上所述，发现在粗糙脉孢菌中存在不依赖于OS-2 MAPK的信号通路，也参与调控渗透压应答基因的转录，进一步鉴定转录因子NSDC和SUB-1的上游激酶，将揭示这一新途径的更多信息。

摘要： DNA甲基化和组蛋白H3K9甲基化修饰是两种广泛存在于真核生物钟的表观遗传修饰现象,通常与转录沉默和异染色质形成有关,对于真核生物正常发育十分重要.虽然主要模式生物钟DNA甲基转移酶及组蛋白H3K9甲基转移酶已被鉴定,然而它们的调控机制还有待深入研究.粗糙脉孢菌是研究DNA甲基化和组蛋白H3K9三甲基化修饰的好材料.通过生化方法证明:Cu14与DDB1组成的E3泛素连接酶与组蛋白甲基转移酶DIM-5互作,形成复合体,介导DIM-5对组蛋白H3K9进行三甲基化修饰,进而引发DNA的甲基化修饰.还发现一个能与Cu14和DDB1互作的蛋白-DCAF26的基因缺失突变体中DNA甲基化修饰也丧失,该基因也参与到脉抱菌DNA甲基化的调控。深入的生化分析证明其调控的分子机制是帮助Cu14和DDB1与DIM-5形成复合体,从而介导组蛋白的甲基化和DNA的甲基化.本研究对真核生物表观遗传学修饰的建成机制进行了较深入的探索,为研究高等真核生物中复杂的表观遗传学调控机制提供了重要参考信息。

摘要： 本发明属于发酵粕类饲料及生产低值原料来源的单细胞蛋白应用技术领域，涉及一株粗糙脉孢菌及其混合应用。本发明采用粗糙脉孢菌是腐木微生物中分离得到的野生菌株，通过ARTP诱变方式，提升其降解生物质材料的能力，获得一株粗糙脉孢菌W3，粗糙脉孢菌W3在液态摇瓶发酵5d，其纤维素酶酶活力可以达到9.5IU/ml，木聚糖酶活力可以达到186.4IU/ml。本发明还提供粗糙脉孢菌W3和黑曲霉60B‑3DW混合固态发酵生产单细胞蛋白的方法，大大提高了粕类饲料的品质和营养价值。因此本发明可产业化应用，具有较好的产业化前景。

摘要： 本发明涉及发酵工程领域，具体涉及一种粗糙脉孢菌发酵秸秆高产麦角甾醇的方法。该方法利用小麦秸秆或水稻秸秆作为营养来源，该方法是粗糙脉孢菌以小麦秸秆、水稻秸秆为唯一营养源生产麦角甾醇，该方法包括：粗糙脉孢菌菌种的富集、粗糙脉孢菌的大量培养、麦角甾醇的提取、麦角甾醇的纯化四个步骤。该方法直接利用成本低廉的秸秆作为营养源，快速培养粗糙脉孢菌，获得大量的、高纯度的化合物麦角甾醇。

摘要： 本发明属于发酵粕类饲料及生产低值原料来源的单细胞蛋白应用技术领域，涉及一株粗糙脉孢菌及其混合应用。本发明采用粗糙脉孢菌是腐木微生物中分离得到的野生菌株，通过ARTP诱变方式，提升其降解生物质材料的能力，获得一株粗糙脉孢菌W3，粗糙脉孢菌W3在液态摇瓶发酵5d，其纤维素酶酶活力可以达到9.5IU/ml，木聚糖酶活力可以达到186.4IU/ml。本发明还提供粗糙脉孢菌W3和黑曲霉60B‑3DW混合固态发酵生产单细胞蛋白的方法，大大提高了粕类饲料的品质和营养价值。因此本发明可产业化应用，具有较好的产业化前景。

摘要： 本发明公开了一种粗糙脉孢菌发酵提取物的制备方法及应用。属于微生物加工技术领域。利用粗糙脉孢菌孢子悬液对黑色谷物进行固态发酵，得到粗糙脉孢菌发酵提取物。本发明利用粗糙脉孢菌发酵黑色谷物，并优化控制发酵工艺，制备了富含膳食纤维、花色苷、β‑胡萝卜素、番茄红素、总酚和黄酮等多种活性成分的粗糙脉孢菌发酵提取物。其中，可溶性膳食纤维和β‑胡萝卜素的含量显著提升，并且降低了黑色谷物中淀粉的含量，使得到的粗糙脉孢菌发酵提取物具有良好的降血脂、降血糖和抗氧化的作用，适合作为降血脂、抗氧化原料进行生产应用，为降脂、降糖产品提供了一种生产工艺简单，成本低廉的生产原料。

摘要： 本发明公开一株粗糙脉孢菌WC2022菌株及其应用。本发明分离得到一株可介导结合型大豆异黄酮糖苷转化产生游离型大豆异黄酮苷元的粗糙脉胞菌(Neurosporasp.)WC2022，该菌株已于2022年6月7日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，其保藏编号为GDMCC NO:62523。该菌株能在120h内将结合型大豆异黄酮糖苷完全转化为游离型大豆异黄酮苷元，转化后的黄豆苷元、金雀异黄酮、黄豆黄素的含量分别上升23.15倍、38.09倍、12.08倍；同时，转化后产物的抗氧化能力显著提高。本发明为生产游离型大豆异黄酮苷元提供了优良的菌种资源。

摘要： 本发明公开了采用粗糙脉孢菌利用罗汉果皮渣固体发酵产纤维素内切酶的方法，包括产酶曲线绘制，单因素条件优化，分别考察碳源、氮源、碳氮比、金属离子、诱导剂、温度对内切酶活的影响，选取C/N比、Mg

摘要： 本发明属于酶发酵技术领域，具体涉及一种控制粗糙脉孢菌的菌丝形态及提高纤维素酶产量的方法，通过控制粗糙脉孢菌孢子接种量和添加滑石粉来控制粗糙脉孢菌发酵的菌丝形态，其中，所述粗糙脉孢菌孢子接种量为2.4×10

摘要： 本发明涉及发酵工程领域，具体涉及一种粗糙脉孢菌发酵秸秆高产麦角甾醇的方法。该方法利用小麦秸秆或水稻秸秆作为营养来源，该方法是粗糙脉孢菌以小麦秸秆、水稻秸秆为唯一营养源生产麦角甾醇，该方法包括：粗糙脉孢菌菌种的富集、粗糙脉孢菌的大量培养、麦角甾醇的提取、麦角甾醇的纯化四个步骤。该方法直接利用成本低廉的秸秆作为营养源，快速培养粗糙脉孢菌，获得大量的、高纯度的化合物麦角甾醇。

摘要： 本发明公开了一种利用粗糙脉孢菌的微生物转化方法。具体地该方法，包括步骤将粗糙脉孢菌接种于培养基中进行液态发酵；粗糙脉孢菌发酵2‑3天后，在发酵液中加入绿原酸和咖啡酸，继续发酵进行生物转化；生物转化完成后，对转化产物进行分离纯化。本发明还公开了一种绿原酸衍生物及其用途。本发明的利用粗糙脉孢菌的微生物转化方法具有底物转化率高，工艺环保，操作简便等优点，非常适合进行工业化生产。

摘要： 本发明组合物和方法涉及源自粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)的β-葡糖苷酶、编码所述β-葡糖苷酶的多核苷酸、以及其制备和/或使用方法。包含所述β-葡糖苷酶的制剂适用于水解木素纤维素生物质底物。