福氏志贺氏菌

摘要： 对某养殖户送检的腹泻病死鹅进行病原分离鉴定、耐药性和致病性分析。结果分离到1株革兰氏阴性细小杆菌,该菌16S rRNA的序列与GenBank上登录号为NR-026331.1福氏志贺氏菌的同源性为99.38%,确定该菌为福氏志贺氏菌。该菌对头孢西丁、头孢曲松、头孢噻呋钠等敏感。该菌含有卡那霉素类耐药基因aadA1、β-内酰胺酶类耐药基因blatem-1以及磺胺类耐药基因Sul1,并含有编码调控蛋白的基因vira、编码黏附与侵入肠黏膜细胞肠毒性因子基因Ia1以及编码志贺氏菌肠毒素1基因set1B。

摘要： [背景]志贺氏菌是一类能引起人和动物腹泻的致病菌,由于抗生素滥用导致其耐药问题日益严重,寻找新的抗菌药物和治疗方法成为目前亟待解决的问题.[目的]检测志贺氏菌对肉鸡的致病性,分离纯化出一株可裂解强致病性志贺氏菌的噬菌体,并对其生物学特性进行研究.[方法]从病鸡肠道黏膜分离志贺氏菌;以健康肉鸡为动物模型进行攻毒,测定强致病性菌株的耐药性;并以此为宿主菌分离噬菌体,聚乙二醇(Polyethylene Glycol,PEG)沉淀法纯化浓缩噬菌体后,用透射电子显微镜观察其形态特征.利用双层平板法测定噬菌体的宿主谱、最佳感染复数、一步生长曲线、pH和热稳定性对噬菌体活性的影响.[结果]分离得到26株志贺氏菌,分别命名为BDS1-BDS26,其中BDS8致病性最强,经鉴定属于福氏志贺氏菌,而且存在多重耐药性,灌喂后的肉鸡出现严重腹泻和血便;解剖病症主要表现为心脏肥大、肠系膜出血明显等.以BDS8为宿主菌,分离得到噬菌体ΦDS8.透射电镜结果显示噬菌体ΦDS8的头部呈二十面体形状,直径61±2 nm,尾长165±2 nm,属长尾噬菌体科.噬菌体ΦDS8在pH 4.0-10.0、50°C以下范围内能保持较高活性,感染周期约为120 min,其中包括75 min的潜伏期和45 min的暴发期,暴发量为52 PFU/cell.[结论]噬菌体ΦDS8具有宿主特异性,在常规环境下具有较好的耐受能力,为噬菌体治疗福氏志贺氏菌病提供理论依据.

摘要： 为了探究孜然精油的抑菌作用,本文以大肠杆菌等常见致病菌为研究对象,通过牛津杯实验、最小抑制浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)的测定、微生物生长曲线和杀菌曲线的绘制等对其抑菌活性进行定性分析,然后采用电子显微镜法和相对电导率测定法对其抑菌机理进行探讨.结果 表明:孜然精油对大肠杆菌和福氏志贺氏菌作用最为明显(MIC均为25 μg/mL,MBC均为50 μg,/mL),推测其作用机理是改变了微生物细胞膜的渗透性,从而使细胞形态发生收缩、局部变形、细胞壁和细胞膜的破坏、细胞质的损耗等异常改变,进而导致细胞死亡.以上研究结果表明,孜然精油对细菌生长具有一定的抑制作用.

摘要： 目的:研究武汉大学人民医院院内制剂消炎抗菌片对14种不同菌株的抑菌活性,并初步探讨其对福氏志贺菌(Shigella flexner)的抑菌机制.方法:采用K-B法和液体二倍稀释法,测定消炎抗菌片对14种常见致病菌株的抑菌活性,并以药物敏感性较强且与药物主要临床疗效相关的福氏志贺菌为受试菌,从药物对该细菌生长特性的影响、电导率变化,以及SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)谱带,考察给药后菌体变化情况.结果:消炎抗菌片对福氏志贺菌、铜绿假单胞杆菌、藤黄微球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等14个菌种及菌株具有不同程度的抑制作用,总体对革兰阴性菌抑菌效果比革兰阳性菌强;药物作用福氏志贺菌后,菌悬液电导率与对照组相比显著升高,SDS-PAGE结果显示经消炎抗菌片处理的菌体无明显蛋白条带形成.结论:本院院内制剂消炎抗菌片对14种菌株具有不同程度的抗菌活性,能够显著影响福氏志贺菌的细胞膜通透性,且对菌体蛋白具有一定抑制作用.

摘要： 为快速检测布鲁氏菌S2株、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157∶H7和福氏志贺氏菌,利用表面增强拉曼(SERS)光谱技术,以原位包覆纳米银为基底,获得5种细菌的SERS谱.结果表明:在400～2 000 cm-1光谱内,布鲁氏菌S2株有10处明显的拉曼谱峰,鼠伤寒沙门氏菌有9处明显的拉曼谱峰,金黄色葡萄球菌有5处明显的拉曼谱峰,大肠杆菌O 157∶H7有9处明显的拉曼谱峰,福氏志贺氏菌有7处明显的拉曼谱峰.5种食源性致病菌的拉曼谱峰位置以及强度区别明显.利用SERS技术可以实现在10 min内识别5种食源性致病菌,达到增强细菌拉曼信号、快速检测食源性致病菌的目的.%Surface enhanced Raman spectroscopy(SERS) was applied to quickly detect Brucellasuis vaccine strain 2(B.suis S2),Salmonella typhimurium (S.typhimurium),Staphylococcus aureus (S.aureus),Escherichia coli O157∶H7 (E.coli O157∶H7) and Shigellaflexneri (S.flexneri),respectively.According to the enhancement effect of SERS,the method of in Situ Coating with Ag Nanoparticles was used to enhance the bacteria Raman signal.Within the range of 400-2000 cm-1,B.suis S2 had 10 distinct Raman peaks,S.typhimurium had 9 distinct Raman peaks,S.aureus had 5 distinct Raman peaks,E.coli O157∶H7 had 9 distinct Raman peaks,and S.flexneri had 7 distinct Raman peaks.And the position and intensity of Raman spectra of the five foodborne bacteria were different.We can rapidly detect five foodborne pathogens within 10 minutes using SERS technique,which provides a basis for clinical diagnosis,and the purpose of detecting bacteria by SERS was achieved quickly.

摘要： 采用牛津杯法和倍比稀释法,对不同年份生产的白茶抑制两种肠道致病菌——金黄色葡萄球菌和福氏志贺氏菌的活性进行测定,探讨其主要生化成分与其抑菌活性的相关性.结果表明:白茶生产年份和其抑菌活性的相关性达到显著性水平(p＜0.05),当年生产的白茶抑菌效果最佳,随着贮藏时间的延长,抑菌效果呈减弱趋势;通过通径分析,获得主要生化成分与金黄色葡萄球菌抑菌圈直径的线性回归方程为Y1=30.121+ 0.818X3(茶多酚)-6.798X4(咖啡碱)+0.753X5(黄酮)+0.296X6(有机酸),主要生化成分与福氏志贺氏菌抑菌圈直径的线性回归方程为Y2=1.996-0.173X1(水浸出物)+ 0.384X5(黄酮)+0.831X7(色度L*值),表明白茶中主要生化成分在抑菌效果中发挥着重要作用.%Oxford cup and double dilution methods were used to study the anti-bacterial activities of old white tea on Staphylococcus aureus and Shigella.To discuss the correlation between biochemical components and antibacterial circle diameter.Results showed that the correlation between year and anti-bacterial activities reached significant level,the anti-bacterial effect of white tea produced lately was the best.The antibacterial ability showed a trend of decrease with the extension of storage time,through path analysis,the linear regression equation of main biochemical components and Staphylococcus aureus antibacterial circle the diameter was got,Y1 =30.121 +0.818 X3 (tea polyphenols)-6.798 X4 (caffeine) + 0.753 X5 (flavones) + 0.296 X6 (organic acids).The linear regression equation of main biochemical components and Shigella antibacterial circle the diameter was got,Y2 =1.996-0.173 X1 (water extract) + 0.384 X5 (flavones) + 0.831 X7 (color L*).The equations show that main biochemical components play important roles in anti-bacterial activities of white tea.

摘要： 目的分析一起细菌性疫情暴发的原因，为疫情处理提供依据。方法《感染性腹泻诊断标准》（WS271‐2007）方法检验[1]，分析疫情暴发的原因。结果通过对5份粪便的培养检出2例福氏志贺氏菌，对15例现症患者肛拭标本 PCR 的检测阳性为13份，根据病原菌的菌落形态，分离培养，生化反应特点，志贺氏菌‐DNA 检测均符合福氏志贺氏菌的特征。结论根据病原菌结果证实本起疫情暴发是由福氏志贺氏菌引起。

摘要： 志贺氏菌是一类具有高度传染性的肠道致病菌.文中基于GB 4789.5-2012《志贺氏菌检验》标准,比较了4种分离培养基检测志贺氏菌的效果.通过4种分离培养基对福氏志贺氏菌、宋内氏志贺氏菌的回收率、最低检出限及对不同样品检测效果的比较,对不同培养基的检测效果进行评价.结果显示4种分离培养基最低检出限相近,显色培养基01检测特异性优于其他3种;针对实际检测样品,应灵活选择培养条件,以提高检测的准确性及效率.

摘要： 研究基于抗原抗体反应捕获目标菌,结合生物素与亲和素间的特异性相互作用,联合免疫纳米磁珠磁性分离、免疫量子点荧光标记技术,运用荧光检测系统,建立了福氏志贺氏菌的定量检测模型.结果表明,福氏志贺氏菌菌浓度为102CFU/mL～ 10°CFU/mL,相对荧光强度与菌浓度关系为FI=1 2.781gN+15.941,呈良好的线性关系,决定系数R2=0.9761.进一步对模型的准确度和精确度进行验证,得到菌落浓度预测值与真实值差异小,检测相对标准偏差为1.8％,表明模型的准确度好,精密度高.该方法可简单、快速(2h)、高效地检测福氏志贺氏菌.

摘要： 利用纳米磁珠的超顺磁性,结合传统平板计数的方法,通过捕获效率,研究免疫纳米磁珠制备过程中抗体加入量以及免疫纳米磁珠捕获目标细菌时的加入量,并利用免疫纳米磁珠对纯菌液以及羊肉洗水中100、101、102、103 CFU/mL的福氏志贺氏菌进行捕获.结果表明,志贺氏菌多克隆抗体(4～5mg/mL)结合1mL链酶亲和素纳米磁珠((180±20) nm,2mg/mL)的最佳量为70μL,免疫纳米磁珠捕获高浓度目标细菌(102 ～ 104 CFU/mL)时的最佳加入量为60μL.对于纯菌液和羊肉洗水,其捕获限可分别达到100CFU/mL和101CFU/mL,并且捕获时间在1h之内.本研究优化了实验条件,为免疫磁珠快速富集目标菌提供了理论依据.

摘要： 目的:研究萘啶酸耐药的福氏志贺氏菌喹诺酮类耐药基因qnrA、qnrB、qnrS、qepA、aac(6’)-Ib-cr的分布状况.方法:收集我院2002-2007年腹泻患者大便标本分离出的722例福氏志贺氏菌,用纸片扩散法筛选出78例萘啶酸耐药的野生株,然后测定13种抗菌药物的敏感性.采用PCR方法检测菌株的qnrA、qnrB、qnrS、qepA、aac(6’)-Ib-cr的耐药基因.结果:722例福氏志贺氏菌中,对萘啶酸耐药的福氏志贺菌阳性78株,占10.80％.男性52例,女性26例,男女比为2∶1,年龄分布老年组偏低.萘啶酸耐药的福氏志贺氏菌呈上升趋势,以F2a最为常见占47.43％,其次为F4、F2b.PCR扩增后检测出携带qnrB 3株均为qnrB6型.qnrS 6株为qnrS1型.aac(6’)-Ib-cr共检测出4株,qnrA、qepA未检出.其中3株同时携带qnrB、aac(6’)-Ib-cr.结论:耐药基因介导喹诺酮类耐药性在福氏志贺氏菌临床分离株中存在,应加强对萘啶酸耐药的福氏志贺菌耐药性,耐药基因携带情况的监测.

摘要： 福氏志贺氏菌(Shigella flexneri, S.flexneri)是引起急性感染性腹泻最主要的病原体之一，该菌毒素毒性强烈，可引起脓血粘液便、发热、神志障碍、中毒性休克等一系列毒血症症状，甚至危及生命。自1991年IijimaJ发现多壁碳纳米管(MWCNT)以来，MWCNT因其优良的电学、力学性能以及潜在的应用前景而引起广泛关注，已被广泛应用于生物传感器的研究领域。本文采用具有诸多优点的四通道的丝网印刷电极(4-SPCE)作为支持电极，一步法直接将MWCNT/chitosan/HRP-anti-S.flexneri复合物修饰在4-SPCE表面，首次构建了快速检测S.flexneri的酶免疫传感器。

摘要： 本文利用临床分离产ESBLs的鸡福氏志贺氏菌5株及头孢噻呋诱导产ESBLs的标准福氏志贺氏菌1株,分别用TEM、SHV、CTX-M三种通用引物进行PCR扩增、基因克隆及测序分析,确定鸡福氏志贺氏菌ESBLs的基因型和基因亚型.结果表明:5株临床福氏志贺氏菌质粒上具有相同的TEM序列和相同的SHV序列,TEM型序列与NCBI数据库中已注册的AY903309(TEM-116)序列相比发生了2个位点基因突变即G157A、C409T,其中409位点碱基突变为沉默突变,157位点碱基突变导致相应氨基酸序列53位发生突变G～53Ser,此氨基酸突变在已发表的TEM型ESBLs的氨基酸序列上未曾出现,所以该TEM型ESBLs是一种新的TEM亚型,暂命名为TEM-1V型;SHV型与NCBI数据库中已注册的AY826418(SHV-12)序列完全相同,所以该序列是SHV-12型.头孢噻呋诱导标准福氏志贺氏菌,诱导10代时产生了TEM-1型β-内酰胺酶,诱导50代时产生了TEM-1V型ESBLs,产TEM-1V型ESBLs是鸡志贺氏菌对三代头孢耐药的分子机制.

摘要： 目的：检测一名海员患者大便中的细菌。方法：取肛拭子接种于SS培养基和麦康凯培养基，经379024h培养，挑取氧化酶阴性的可疑菌落接种干KIA培养基上359C24h，同时作初步血清凝集试验，若有凝集，进一步接种到半固体培养基及肉汤中以观察动力。用微量生化反应管及全自动微生物鉴定仪2种方法同时对结果进行验证。结果：从形态上和生化反应上看均认为志贺氏菌的可能性大。因此送该细菌到本系统内相关实验室检测复核，结果为福氏志贺氏3型菌，与手工鉴定结果一致。结论：本次微生物鉴定中，我中心全自动微生物鉴定仪检测结果与手工法一致，我们用福氏志贺氏菌和伤寒沙门氏菌标准菌株对仪器做检定，最终鉴定结果与标准菌株一致。再将海员肛拭子中福氏志贺氏菌上机鉴定，结果与手工方法相同。

摘要： 目的：对5株临床分离产ESBLs的鸡福氏志贺氏菌及1株头孢噻呋诱导产ESBLs的标准福氏志贺氏菌进行基因型鉴定，研究鸡福氏志贺氏菌ESBLs的分子进化机制。rn 方法：对标准福氏志贺氏菌用0.5MIC的头孢噻呋诱导，每10代榆测β内酰胺酶及ESBLs，当诱导菌产生ESBLs后，对1株诱导和5株临床分离产ESBLs细菌分别用TEM、SHV、CTX-M三种通用引物进行PCR扩增、基因克隆及测序分析，确定鸡福氏志贺氏菌ESBLs的基因型和基因亚型。rn 结果：5株临床福氏志贺氏菌质粒上具有相吲的TEM序列和相同的SHV序列，TEM型序列与NCBI数据库中己注册的AY903309(TEM-116)序列相比发生了2个位点基因突变即G157A、C409T，其中409位点碱基突变为沉默突变，157位点碱基突变导致相戍氨基酸序列53位发生突变Gly53Ser，此氮基酸突变在已发表的TEM型ESBLs的氨基酸序列上未曾出现，所以该TEM型ESBLs是一种新的TEM亚型，暂命名为TEM-1V型;SHV型与NCBI数据库中已注册AY826418(SHV-12)序列完全相同，为SHV-12型。头孢噻呋诱导标准福氏志资氏菌，诱导10代时产生了TEM-1型β-内酰胺酶，诱导50代时产生TTEM-1V型ESBLs。rn 结论：临床分离鸡福氏志贺氏菌ESBLs的基因型为TEM-1V型和SHV-12型，头饱噻呋诱导标准福氏志贺氏菌至10代时，产生的B内酰胺酶基因型为TEM-1型，诱导至50代时，产生的ESBLs基因型为TEM-IV型。鸡福氏志贺氏菌TEM-IV型ESBLs是由TEM-1型β内酰胺酶直接进化而来。

摘要： 本发明提供一种对鲍氏志贺氏菌15型、痢疾志贺氏菌2型和大肠杆菌O112的O-抗原特异的核苷酸，它是鲍氏志贺氏菌15型(Shigella boydii 15)中控制O-抗原合成的基因簇的核苷酸全序列；还包括O-抗原基因簇的结构以及源于鲍氏志贺氏菌15型的O-抗原基因簇中的糖基转移酶基因和寡糖单位处理基因(包括wzx基因或与wzx有相似功能的基因、wzy基因或与wzy有相似功能的基因)的寡核苷酸，并且包括获得细菌O-抗原基因簇的方法；本发明通过PCR证实它们对鲍氏志贺氏菌15型、痢疾志贺氏菌2型和大肠杆菌O112的O-抗原都有高度的特异性；本发明还公开了用本发明的寡核苷酸检测和鉴定人体及环境中的鲍氏志贺氏菌15型，痢疾志贺氏菌2型和大肠杆菌O112的方法。

摘要： 本发明提供一种对鲍氏志贺氏菌15型、痢疾志贺氏菌2型和大肠杆菌0112的O－抗原特异的核苷酸，它是鲍氏志贺氏菌15型(Shigella boydii 15)中控制O－抗原合成的基因簇的核苷酸全序列；还包括O－抗原基因簇的结构以及源于鲍氏志贺氏菌15型的O－抗原基因簇中的糖基转移酶基因和寡糖单位处理基因(包括wzx基因或与wzx有相似功能的基因、wzy基因或与wzy有相似功能的基因)的寡核苷酸，并且包括获得细菌O－抗原基因簇的方法；本发明通过PCR证实它们对鲍氏志贺氏菌15型、痢疾志贺氏菌2型和大肠杆菌0112的O－抗原都有高度的特异性；本发明还公开了用本发明的寡核苷酸检测和鉴定人体及环境中的鲍氏志贺氏菌15型，痢疾志贺氏菌2型和大肠杆菌0112的方法。

摘要： 本发明公开了检测志贺氏菌的引物以及志贺氏菌LAMP检测试剂盒，检测志贺氏菌的引物，由SEQ ID No.1所示的外引物上游引物、SEQ ID No.2所示的外引物下游引物、SEQ ID No.3所示的环引物上游引物、SEQ ID No.4所示的环引物下游引物、SEQ ID No.5所示的内引物上游引物以及SEQ ID No.6所示的内引物下游引物组成。实验证明，本发明的试剂盒特异性好，灵敏度高；操作简单，可重复性好；检测成本低，可进行多个样品的同时检测。

摘要： 本发明涉及一种用于福氏志贺氏菌检测的悬浮芯片及其检测方法，该悬浮芯片包括微球载体和固定在载体上的寡聚核苷酸探针，其中该寡聚核苷酸探针是从志贺氏菌O-抗原基因簇筛选的福氏志贺氏菌特异性基因rfc中的一段DNA序列。利用设计的引物将待检样品基因组DNA扩增并标记后，利用上述悬浮芯片进行杂交，根据杂交荧光强度，可判断待检样品中是否含有福氏志贺氏菌。悬浮芯片检测灵敏度高，可达到fg级基因组DNA水平，可满足临床样本和环境样本检测需要，并具特异性高、操作简单、成本低等特点，易于推广。并采用UNG-Taq酶PCR反应体系，大大降低了PCR假阳性结果。

摘要： 本发明涉及阻断志贺氏菌侵入动物细胞从而提供对抗志贺氏菌感染的保护或降低其严重性的组合物和方法。更具体而言，本发明涉及从天然来源和/或通过合成或重组技术获取的IpaD蛋白及其共轭体的使用以诱导具有对抗几种血清型的志贺氏菌特别是福氏志贺氏菌的保护性活性的中和抗体。本发明的组合物可用于预防和/或治疗由志贺氏菌属细菌造成的志贺氏菌痢疾。

摘要： 本发明公开了一种基于IMB‑RPA‑CRISPR/Cas12a快速可视化检测福氏志贺氏菌的方法和试剂盒，通过免疫捕获磁珠(IMB)预富集样本，RPA扩增，与CRISPR/Cas12的检测方法结合成为IMB‑RPA‑CRISPR/Cas12a的分子检测试剂盒和检测方法。该分子检测方法具有良好的特异性、极高的灵敏度，操作简便快捷，成本低廉，不需要大型仪器设备，具有可视化的优势，更有利于对福式志贺氏菌的分子检测技术在基层中的推广和应用。

摘要： 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas12a‑LAMP快速可视化检测福氏志贺氏菌的方法和试剂盒，本发明通过对LAMP的扩增方法与CRISPR/Cas12的检测方法结合成为CRISPR/Cas12a‑LAMP的分子检测试剂盒和检测方法。该分子检测方法具有良好的特异性、敏感性、重复性，操作简便快捷，成本低廉，不需要大型仪器设备，具有可视化的优势，更有利于对福氏志贺氏菌的分子检测技术在基层中的推广和应用。

摘要： 本发明公开了一种植物乳杆菌Y12所产胞外多糖在制备缓解由福氏志贺氏菌引起痢疾病症的药物中的应用，属于微生物应用技术领域。本发明的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)Y12于2018年8月21日，保藏于中国典型培养物保藏中心，菌株保藏号为CCTCC NO：M 2018556。本发明提供的植物乳杆菌Y12胞外多糖抑制福氏志贺氏菌的生物膜形成；抑制福氏志贺氏菌对肠上皮细胞的黏附与侵袭；缓解由福氏志贺氏菌引起的肠上皮细胞的炎症反应；降低抗生素缓解福氏志贺氏菌引起的痢疾病症的剂量。

摘要： 本发明提供用于检测福氏志贺氏菌的特异性引物和探针，所述探针序列为：5’‑AGACGCCATCTCTTCTCG‑3’；所述特异性引物为下述序列或为下述序列的互补链序列：上游引物序列为5’‑TATAGTTTAGCTTGCCTTT‑3’；下游引物序列为5’‑CTATTTCTGATAAATTCAAGTTAT‑3’。本发明提供用于福氏志贺氏菌进行定性、定量检测的引物和探针，通过提取福氏志贺氏菌的基因组DNA，结合实时荧光定量PCR检测技术，可达到准确定量待测标本中福氏志贺氏菌含量的目的，具有高灵敏度和高特异性。本发明所提供的引物和探针对判断福氏志贺氏菌活性菌的含量以至于后续研究泌尿道感染具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种针对rfc基因鉴定福氏志贺氏菌的实时荧光PCR方法和试剂盒。该实时荧光PCR检测引物的核苷酸序列为SEQ？ID？No.1和SEQ？ID？No.2所示，探针的核苷酸序列为SEQ？ID？No.3所示。本发明还公开了一种针对rfc基因鉴定福氏志贺氏菌的实时荧光PCR方法，包括：(1)提取待测DNA；(2)以提取的细菌DNA为模板，利用所述的引物和探针进行实时荧光PCR检测；(3)如果扩增结果中出现S型扩增曲线，则判定待检测样品中含有福氏志贺氏菌。本发明福氏志贺氏菌实时荧光PCR方法敏感性高，省时、方便、快捷，可以用于样品中福氏志贺氏菌的检测。