磷脂酰丝氨酸

摘要： 为解决磷脂酶D酶活测定试验重复性差、成本高等问题,研究并改良测定磷脂酶D水解活性的方法。将反应体系分为解离和显色两个过程,通过对反应底物、反应条件的优化试验,确定最佳底物为蛋黄来源的卵磷脂,底物溶剂为80%乙醇,其中解离过程的最佳反应条件为温度37°C、pH5.5、时间10 min,金属离子助剂为10 mmol/L的CaCl2。

摘要： 磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)是一种新资源食品,在自然界中含量稀少,提取困难。磷脂酶D(Phospholipase D,PLD)是生物酶法制备磷脂酰丝氨酸的关键合成酶。本文主要介绍了PLD的分子结构特点、催化机理及酶活特性,并总结了目前PS的制备方法,重点对PLD酶催化制备磷脂酰丝氨酸的研究进展及反应体系进行了论述,并对催化制备PS反应体系的选择进行了分析和展望,以期为深化酶法技术制备PS的研究提供参考,以此推动新资源食品PS的工业化生产和应用。

摘要： 本文对水相法合成磷脂酰丝氨酸在工业生产中的关键变量进行了研究。结果表明,水相法合成磷脂酰丝氨酸最佳体系为水量∶大豆磷脂∶丝氨酸的比例为3.0∶1.0∶0.8(mL∶g∶g)、酶液添加量为磷脂酰胆碱的20%、温度45°C、时间6 h。最终磷脂酰丝氨酸含量为54.52%,转化率高达93.4%。本研究为磷脂酰丝氨酸在工业化生产中的应用提供了重要参考依据。

摘要： 微粒是细胞活化或凋亡时从细胞膜表面释放的直径为0.1～1μm的囊泡,其主要通过表面表达的磷脂酰丝氨酸和组织因子促进血栓形成,参与血栓性疾病(如急性冠状动脉综合征、静脉血栓栓塞、缺血性脑卒中以及抗磷脂综合征)的发生、发展.目前检测微粒的方法主要为流式细胞术和酶联免疫吸附实验,但其均存在一定的缺陷,不能完全满足临床需求,尚待进一步研究.随着人们对微粒在血栓性疾病中作用机制研究的深入以及新检测技术的出现,微粒有望成为血栓性疾病诊断的生物标志物.

摘要： 目的 探讨血小板参数及血小板聚集功能检测对2型糖尿病(T2DM)诊治的临床价值.方法 选择2020年4—9月于蚌埠医学院附属连云港市第二人民医院内分泌科进行住院治疗的非初诊T2DM患者60例纳入治疗组,选取同期门诊确诊、初发、未经治疗的T2DM患者60例纳入初发组,选取同期排除T2DM的健康体检者60例纳入对照组.采用全自动血液分析仪检测3组研究对象的血小板计数(PL T)、血小板分布宽度(PDW)、血小板平均体积(MPV)及血小板压积(PCT);采用血小板聚集仪分别以花生四烯酸(AA)、二磷酸腺苷(ADP)及胶原(COL)为诱导剂来检测3组研究对象的血小板最大聚集率(PAgTm);采用流式细胞仪检测血小板P-选择素和磷脂酰丝氨酸(PS)外翻的表达;比较3组间各项指标水平;绘制MPV、AA-PAgTm、ADP-PAgTm、COL-PAgTm、血小板P-选择素及PS外翻辅助诊断T2DM的ROC曲线,并分析其诊断价值.结果 治疗组MPV明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);初发组MPV、血小板P-选择素、PS外翻、AA-PAgTm、ADP-PAgTm、COL-PAgTm明显高于对照组和治疗组,差异有统计学意义(P0.05).结论 MPV、PAgTm及血小板P-选择素和PS可以作为T2MD患者治疗后血小板活性监测的有效指标来辅助T2MD的诊治.

摘要： 建立检测保健食品软胶囊中磷脂酰丝氨酸含量的高效液相色谱-蒸发光散射分析方法.取软胶囊样品,以甲醇/氯仿(1/9,V/V)溶液进行超声提取,以溶剂定容、过滤.采用高效液相色谱-蒸发光散射法进行测定,柱温45°C,流速1.5mL/min,流动相为正己烷/异丙醇/水/乙酸/三乙胺(36/55/8/1.5/0.08,V/V/V/V/V),等度洗脱.蒸发光散射检测器喷雾气流量1.6mL/min,蒸发器温度30°C,雾化器温度30°C.以外标法定量.磷脂酰丝氨酸在0.3～1.5mg/mL浓度范围内呈良好线性关系,相关系数R2为0.990,加标回收率在94.1％～108.1％之间,精密度实验中磷脂酰丝氨酸含量的RSD为1.9％.此方法操作简单,准确性好,重复性好,适用于保健食品软件囊中磷脂酰丝氨酸的含量测定.

摘要： 运用固相萃取-高效液相色谱法测定乳及乳制品中磷脂酰丝氨酸.样品经酶解后,用氯仿-甲醇溶液萃取,经氨基固相萃取柱净化后,采用二醇基色谱柱分离、梯度洗脱,利用高效液相色谱仪蒸发光散射检测器检测,以外标法定量.结果表明:该方法的磷脂酰丝氨酸检出限为3mg/100g,线性范围为10～100μg/mL,相关系数R2=0.9998,回收率为85.6％～96.6％,相关标准偏差(RSD)<5％.该方法准确方便,灵敏度高,可实现乳及乳制品中磷脂酰丝氨酸的测定.

摘要： 记忆不仅是人们学习、工作和生活的生理基础,也是大脑的基本认知功能。随着年龄的增长,大脑的记忆功能逐渐衰退。同时,不健康的生活方式和持续的压力也在加速人们记忆力的衰退,若其急剧恶化,将导致病理性不可逆的神经系统退行性病变。目前,最大程度发挥辅助改善记忆力保健功效的是复合补充剂或营养丰富的补充剂。由此,我们对L-苏糖酸镁、磷脂酰丝氨酸和维生素B6复合的保健食品开展动物试验研究,旨在研究和评估该复合物在辅助改善记忆功能方面的功效。

摘要： 目的：考察磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)修饰的姜黄素纳米粒(PS modified curcumin-loaded nanoparticles,Cur-mNLCs)在模型大鼠体内的抗肝纤维化作用. 方法：构建CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型,预防性给药后,采用常见药效学指标评价Cur-mNLCs的抗肝纤维化疗效. 结果：与其他对照组相比,Cur-mNLCs能显著减轻肝脏损伤和纤维化,其能够保护肝细胞、降低炎症因子表达、抑制胶原纤维沉积、促进肝细胞生长因子(Hepatic growth factor,HGF)表达及金属基质蛋白酶2(Matrix metalloproteinase2,MMP2)分泌. 结论：PS修饰的纳米粒能增强姜黄素抗肝纤维化作用,两者具有协同药效.

摘要： 在提高和恢复认知能力和记忆力方面，磷脂酰丝氨酸(Ps)是一种基本的、最有效和最安全的大脑功能营养补充剂。

摘要： 磷脂酰丝氨酸由亲水性的甘油骨架为头部，2个较长链烃的亲油基团为尾部组成。头部由3个基团组成:磷酸残基与丝氨酸残基结合后与C-3位甘油的经基相连;尾部由甘油的另外两个轻基分别与脂肪酸成酷后组成。甘油C-1位的脂肪酸与C-2位的脂肪酸相比，碳链一般更短，而且不饱和键更少。正是磷脂酞丝氨酸这种独特的结构决定了其特有的性质:亲水性和亲油性。PS的来源广泛，其制备方法包括提取法与人工合成法。由于磷脂酞丝氨酸对人的神经元很重要，因此文章也研究了牛大脑皮质层的磷脂酰丝氨酸、大豆来源的磷脂酰丝氨酸、PS-DHA在临床上的应用。最后介绍了其在食品、保健品、医药以及饲料行业中的法规进展。

摘要： 研究表明,磷脂酰丝氨酸具有预防老年痴呆症、改善记忆力等功能.但是天然存在的磷脂酰丝氨酸很少,并且提取工艺繁杂、产品安全性受到人们质疑.生物酶法制备磷脂酰丝氨酸具有反应条件温和、环境友好、产品质量好等优点,故近年来利用酶法合成磷脂酰丝氨酸受到越来越多的关注.本文从生物酶法制备磷脂酰丝氨酸中使用的酶和反应体系这两方面阐述了国内外的相关研究,并指出开发稳定高效的酶制剂和探寻绿色安全的新工艺有助于促进生物酶法工业化生产磷脂酰丝氨酸.

摘要： 近年来的研究表明,磷脂酰丝氨酸具有预防老年痴呆症、改善记忆力等功能.但是天然存在的磷脂酰丝氨酸很少,所以提取制备工艺繁杂且产品安全性存在隐患.生物酶法制备磷脂酰丝氨酸具有反应条件温和、环境友好、产品质量好等优点,故近年来利用酶法合成磷脂酰丝氨酸越来越受到关注.本文提出了均相体系中生物酶法制备磷脂酰丝氨酸的新工艺,与已报道的液液双相体系和纯水体系相比,反应效率得到显著提高.

摘要： 近年来的研究表明,磷脂酰丝氨酸具有预防老年痴呆症、改善记忆力等功能,但是天然存在的磷脂酰丝氨酸很少,而提取制备工艺繁杂且产品安全性存在隐患。生物酶法制备磷脂酰丝氨酸具有反应条件温和、环境友好、产品质量好等优点,故近年来利用酶法合成磷脂酰丝氨酸越来越受到关注。提出了均相体系中生物酶法制备磷脂酰丝氨酸的新工艺,与已报道的液液双相体系和纯水体系相比,反应效率得到显著提高。

摘要： 磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine，简称PS)是一种具备独特生理功能的稀有磷脂，自然界中含量稀少，分离提取难度大。利用磷脂酶D(PLD)催化大豆磷脂进行磷脂酰基转移反应合成PS具有条件温和、产品收率高等显著优点，受到广泛重视。本文研究采用固定化磷脂酶D催化合成PS的工艺。磷脂酶D催化大豆磷脂合成PS是油-水两相界面反应，通过采用吸附-交联法将PLD固定化于硅藻土载体上，取得了PS收率达57%的结果。采用硅胶柱色谱对粗产品进行分离纯化，PS纯度高达85%。

摘要： 本研究旨在探讨补充PS对MG53敲除的老年鼠骨骼肌运动性损伤修复的影响。研究阐明，力竭运动会导致小鼠出现运动性肌肉损伤，其CK及MYO指标较安静时显著的升高；补充PS能够显著延长wt小鼠的力竭时间，同时降低其运动后即刻的CK水平，同时相较ko小鼠，补充PS后，wt小鼠的MYO水平显著下降。而补充PS对ko组未见显著性差异。提示：PS与MG53蛋白可能存在协同作用，当小鼠体内存在MG53蛋白时，补充PS能够有效增强其骨骼肌损伤的恢复能力，并提高小鼠的运动能力。同时MG53敲除老年鼠，其肌肉损伤指标在安静时相较wt小鼠存在升高的趋势，提示：MG53蛋白作为一种重要的膜修复蛋，可能在老年鼠肌肉退行性化变化中发挥一定的保护作用，可能对防治肌肉退化具有一定的作用，还需要进一步实验加以证明。

摘要： 磷脂酶D可催化转酯反应,具备催化磷酸二酯键水解和碱基交换反应的能力,能够定向催化卵磷脂和L-丝氨酸生成磷脂酰丝氨酸.本研究利用实验室已构建的可表达PLD的大肠杆菌工程菌株BL21/pET22b-pld,对PLD催化L-丝氨酸和卵磷脂生成PS的体系进行优化,以期获得较高产量的磷脂酰丝氨酸,优化后PS产率为12.5％,是优化前的2.19倍.

摘要： 本文通过基因工程技术,利用Red同源重组系统中的三个质粒pKD46、pKD3、pCP20,将大肠杆菌的tdcG基因敲除,切断了L-丝氨酸的部分降解途径,初步获得L-丝氨酸积累量提高的菌株.将出发菌株和重组菌株进行摇瓶发酵,按不同的发酵阶段取样,经高效液相色谱测定L-丝氨酸的产量.实验结果表明tdcG基因缺失后,L-丝氨酸的产量提高了约10％.这为以后通过基因工程手段进一步减少L-丝氨酸的分解,最终构建磷脂酰丝氨酸高产菌株奠定了基础.

摘要： 提供了一种磷脂酰丝氨酸酶催化生产中抗黏性的方法，包括：向酶催化生产磷脂酰丝氨酸得到的反应粗品中加入pH7.5‑9.5的乙醇溶液，混合均匀后进行固液分离，收集固体物；该方法可显著降低酶反应液的黏性。同时提供了基于前述抗黏性的方法生产磷脂酰丝氨酸的方法，包括：将含有磷脂酰胆碱的天然磷脂与水、L‑丝氨酸、氯化钙、磷脂酶D混合，在39‑43°C下搅拌反应8‑10h；反应结束后收集固体物，然后加入pH 7.5‑9.5的乙醇溶液，混合均匀后收集固体物，干燥后即得磷脂酰丝氨酸产品；该方法提高了单批次产能，减少了L‑丝氨酸投料量，降低了生产成本。

摘要： 本发明提供一种南极磷虾来源的磷脂酰胆碱的提取工艺，包括下述步骤：收集南极磷虾头，加水煎煮，搅拌，将磷虾头煎煮液送至冷榨机中固液分离，获得富含磷脂的油状液体和磷虾头等固体；在磷虾头等固体中加入无水乙醇，高剪切萃取，离心分离、浓缩获得油状液体；合并油状液体、减压干燥，再经板框过滤机过滤去除不溶性物质，之后经膜分离浓缩、柱层析分离纯化，冷冻干燥，获得磷脂酰胆碱产品。本发明还提供了南极磷虾来源的磷脂酰丝氨酸的制备方法，提取到的磷脂酰胆碱经磷脂酶D水解，萃取，获得富含DHA和EPA的磷脂酰丝氨酸。本发明提取工艺和制备方法环保，成本低，获得的产品含量高，活性好，可以工业化生产。

摘要： 一种制备磷脂酰丝氨酸和磷脂酰胆碱的方法，属于食品保健品领域，以大豆粉末磷脂为原料，用有机溶剂萃取后蒸馏、干燥分别得磷脂酰胆碱粗品和磷脂酰丝氨酸粗品，磷脂酰胆碱粗品或磷脂酰丝氨酸粗品再经200-300目硅胶柱分离纯化、混合有机溶剂洗脱、洗脱液浓缩、干燥，即得。本发明中磷脂酰丝氨酸和磷脂酰胆碱纯度达到新资源食品要求，可作为新资源膳食补充剂使用，经济附加值高；将单纯的提取磷脂酰丝氨酸和单纯的提取磷脂酰胆碱有效结合，同时制备。缩短、降低了生产时间与成本，提高了产品率，且操作简单，产品具有安全性。

摘要： 本发明提供了一种重组磷脂酶D，是通过大肠杆菌表面展示技术高通量筛选技术和DNA基因重组技术筛选获得新型的PLD。本发明所提供的重组磷脂酶D，其氨基酸序列为SEQ ID NO:1。本发明提供的重组酶PLDr34的转酯活力提高了3.24倍，转化率为80.3％，选择性为86.8％，是磷脂酰丝氨酸(PS)、DHA‑磷脂酰丝氨酸(DHA‑PS)及其它稀有磷脂合成的理想催化剂。

摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D及其制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸的方法。其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/(g·细胞干重)。

摘要： 提供了一种磷脂酰丝氨酸酶催化生产中抗黏性的方法，包括：向酶催化生产磷脂酰丝氨酸得到的反应粗品中加入pH7.5‑9.5的乙醇溶液，混合均匀后进行固液分离，收集固体物；该方法可显著降低酶反应液的黏性。同时提供了基于前述抗黏性的方法生产磷脂酰丝氨酸的方法，包括：将含有磷脂酰胆碱的天然磷脂与水、L‑丝氨酸、氯化钙、磷脂酶D混合，在39‑43°C下搅拌反应8‑10h；反应结束后收集固体物，然后加入pH 7.5‑9.5的乙醇溶液，混合均匀后收集固体物，干燥后即得磷脂酰丝氨酸产品；该方法提高了单批次产能，减少了L‑丝氨酸投料量，降低了生产成本。

摘要： 本发明涉及一种磷脂酰丝氨酸合成酶催化合成磷脂酰丝氨酸的方法，其技术方案包括以下步骤：(1)将磷脂酰丝氨酸合成酶酶液加入含有丝氨酸、CaCl

摘要： 本发明公开了一种基于磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇胺的早期预警重症急性胰腺炎的模型与应用，属于生物检测技术领域。所述预测模型为血清中磷脂酰丝氨酸(38:3)和磷脂酰乙醇胺(16:0/20:3)，通过检测血清中磷脂酰丝氨酸(38:3)和磷脂酰乙醇胺(16:0/20:3)的含量变化，在患者患病48h内，区分中重症急性胰腺炎和重症急性胰腺炎，具有良好的临床意义和应用价值。

摘要： 本发明提供一种南极磷虾来源的磷脂酰胆碱的提取工艺，包括下述步骤：收集南极磷虾头，加水煎煮，搅拌，将磷虾头煎煮液送至冷榨机中固液分离，获得富含磷脂的油状液体和磷虾头等固体；在磷虾头等固体中加入无水乙醇，高剪切萃取，离心分离、浓缩获得油状液体；合并油状液体、减压干燥，再经板框过滤机过滤去除不溶性物质，之后经膜分离浓缩，、柱层析分离纯化，冷冻干燥，获得磷脂酰胆碱产品。本发明还提供了南极磷虾来源的磷脂酰丝氨酸的制备方法，提取到的磷脂酰胆碱经磷脂酶D水解，萃取，获得富含DHA和EPA的磷脂酰丝氨酸。本发明提取工艺和制备方法环保，成本低，获得的产品含量高，活性好，可以工业化生产。

摘要： 一种制备磷脂酰丝氨酸和磷脂酰胆碱的方法，属于食品保健品领域，以大豆粉末磷脂为原料，用有机溶剂萃取后蒸馏、干燥分别得磷脂酰胆碱粗品和磷脂酰丝氨酸粗品，磷脂酰胆碱粗品或磷脂酰丝氨酸粗品再经200-300目硅胶柱分离纯化、混合有机溶剂洗脱、洗脱液浓缩、干燥，即得。本发明中磷脂酰丝氨酸和磷脂酰胆碱纯度达到新资源食品要求，可作为新资源膳食补充剂使用，经济附加值高；将单纯的提取磷脂酰丝氨酸和单纯的提取磷脂酰胆碱有效结合，同时制备。缩短、降低了生产时间与成本，提高了产品率，且操作简单，产品具有安全性。