中国荷斯坦牛

摘要： 本实验旨在探究中国荷斯坦牛有无副乳头对产奶性能和血常规指标的影响。随机采集北京郊区某牛场218头荷斯坦牛(含20头副乳头牛)尾静脉血并检测血常规,同时收集研究群体当月奶牛生产性能测定(Dairy Herd Improvement,DHI)数据,使用SAS软件广义线性模型比较有无副乳头牛产奶性能及血常规指标间的差异。结果表明:副乳头牛在日产奶量、前奶量、高峰奶及血常规指标中的白细胞数、淋巴细胞绝对值、中性粒细胞绝对值均显著低于无副乳头牛。结果提示,副乳头会影响中国荷斯坦牛部分产奶性能和免疫细胞组成,进而对牧场经济效益造成负面影响。

摘要： 旨在估计山东省荷斯坦奶牛体型性状遗传参数,为育种方案制定提供参考。本研究收集了山东省2010—2020年间的144个牛场31963头头胎中国荷斯坦母牛的20个体型性状记录,其中性状评分由线性分转为功能分,将场、泌乳月、产犊月龄、鉴定员效应为固定效应,以个体的加性遗传效应作为随机效应,利用DMU软件,采用AI-REML结合EM算法并配合动物模型进行遗传参数估计。结果表明,体型性状的遗传力属于中等偏低水平,其估计值变化范围为0.049(后肢侧视)到0.282(棱角性),性状间的遗传相关范围为-0.558(前乳头位置与乳房深度)至0.717(蹄踵深度与蹄角度)。体躯容量各性状间的遗传相关范围为0.118(体深与体高)至0.461(胸宽与腰强度);尻角度与尻宽的遗传相关为-0.251;肢蹄各性状间的遗传相关范围为-0.035(蹄踵深度与后肢后视)到0.717(蹄踵深度与蹄角度);泌乳系统各性状间的遗传相关范围为-0.558(前乳头位置与乳房深度)至0.587(悬韧带与前乳房附着)。另外,体型性状的遗传力估计标准误在查找的系谱世代数为3的情况下为最小,这可能是由于系谱数据完整性的限制导致了该种情况,具体还需要进一步验证。加强对体型性状中遗传力较高且与泌乳系统遗传相关较强性状的选择,有利于奶牛生产性能的提高。另外,在本研究数据中,使用前3代系谱估计的遗传力标准误最小,因此,利用前3代系谱估算遗传参数可能较佳。

摘要： 【目的】研究饲粮中添加过瘤胃烟酸对南方中国荷斯坦牛热应激环境下采食量、生产性能和血液生理生化指标的影响。【方法】选择286头处于泌乳盛期中国荷斯坦牛作为试验对象,对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂添加每天20 g/头过瘤胃烟酸的基础日粮。试验预饲期7 d,正式试验期30 d。【结果】试验期内牛舍白天平均热应激指数为76.21,全程处于热应激环境下;南方中国荷斯坦牛采食量较对照组每天显著提高了3.83 kg/头(P0.05),乳脂率提高了0.06%(P>0.05),乳蛋白率提高了0.07%(P>0.05),体细胞评分极显著下降了1.26分(P<0.01);51项血液生理生化指标中,大型血小板比率、白蛋白和葡萄糖等3项指标发生了显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)变化。【结论】基础日粮中添加每天20 g/头的过瘤胃烟酸可以缓解南方中国荷斯坦牛的热应激症状,有助于其适应我国南方夏季潮湿炎热的环境。

摘要： 【目的】探究磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚单位β(PIK3CB)基因多态性及其与中国荷斯坦牛繁殖和产奶性状的关系。【方法】通过混池测序对中国荷斯坦牛PIK3CB基因进行单核苷酸多态性(SNP)位点筛选,采用竞争性等位基因特异性PCR(KASP)技术在1 160头健康泌乳中国荷斯坦牛中进行SNP分型并进行群体遗传学分析,采用线性模型进行SNP与11个繁殖和产奶性状基于单位点和单倍型组合的关联分析。【结果】在PIK3CB基因中共检测到了17个SNPs,筛选出7个SNPs用于后续分析。关联分析发现,7个SNPs与多个目标性状存在显著或极显著的关联(PG位点AA基因型个体和位于可变剪接区域的g.130448069 G>A位点GG基因型个体,其经产牛首末次配种间隔、产奶量、乳蛋白量和乳脂量最低,体细胞评分最高,上述基因型个体具有较短的首末次配种间隔,而产奶性能相对较差;g.130387717 G>A位点AA基因型个体,其初配日龄和青年牛首末次配种间隔最低,产奶量、乳蛋白量和乳脂量最高,该基因型个体的繁殖和产奶性能均较好,上述3个SNPs位点可作为中国荷斯坦牛繁殖和产奶性状的候选位点重点关注。单倍型分析发现,PIK3CB基因的g.130387717 G>A、g.130430832 A>-、g.130433743 A>G、g.130433982 C>T、g.130446073 C>T和g.130448069 G>A 6个SNPs紧密连锁形成一个单倍型块,且与多个目标性状存在显著或极显著关联(PG、g.130448069 G>A和g.130387717 G>A位点可作为潜在分子标记,为中国荷斯坦牛的平衡育种提供理论依据。

摘要： 旨在探究河北省中国荷斯坦牛产奶和体型性状的遗传参数,为育种提供参考.本研究收集了2012-2018年河北省133个牛场8 891头中国荷斯坦母牛第一胎次的3个产奶性状记录(产奶量、乳脂率和乳蛋白率)和26个体型性状记录,利用DMU软件,以场年季、产犊月龄、鉴定年季和鉴定员效应为固定效应,以个体的加性遗传效应为随机效应,采用AIREML结合EM算法并配合动物模型对产奶性状、体型性状进行了遗传参数估计.结果表明,产奶性状的遗传力估计值范围为0.15(产奶量)～0.32(乳脂率),体型性状遗传力估计值范围为0.01(体型总分)～0.28(后乳房附着宽度).产奶性状与体型性状间的遗传相关估计值范围分别是-0.43(产奶量与骨质地)～0.31(产奶量与尻部)、-0.59(乳脂率与尻部)～0.20(乳脂率与前乳头位置)以及-0.34(乳蛋白率与前乳头长度)～0.23(乳蛋白率与后乳头位置).大部分体型性状与产奶量之间为遗传正相关,而与乳脂率和乳蛋白率为遗传负相关.加强对产奶性状及体型性状中的中高遗传力性状的选择,尤其对后乳房性状以及体型总分的选择,有利于奶牛生产性能的提高.

摘要： 旨在探究青年牛繁殖性状遗传能力群体遗传参数,评估不同配种季节间青年牛繁殖性状基因型与环境的互作效应(G×E).本研究利用宁夏地区12个牧场2007-2019年荷斯坦牛繁殖事件信息记录,计算青年牛繁殖性状包括:首配日龄(AFS)、初产日龄(AFC)、首次配种后56天不返情率(NRR56)、首末次配种间隔(IFL)、妊娠期长短(GL)和首次配种受胎率(CR)共30 645～44 888条表型值数据.通过DMU软件的DMUAI模块使用单性状动物模型估计性状遗传力,使用双性状动物模型估计性状间遗传相关和不同配种季节间同一繁殖性状的基因型与环境互作程度(不同环境下同一性状间的遗传相关,r).结果表明,AFS遗传力为0.483±0.013,AFC遗传力为0.231±0.015,青年牛NRR56、IFL、GL、CR遗传力及标准误分别为0.031±0.007,0.038±0.008,0.216±0.017和0.031±0.007;青年牛IFL、GL与AFC 间有显著正相关(IFL-AFC:0.812±0.019,P＜0.05;GL-AFC:0.119±0.053,P＜0.05),NRR56和CR与AFC间有显著负相关(NRR56-AFC:-0.274±0.086,P＜0.05;CR-AFC:-0.532±0.065,P＜0.05).除IFL在夏季与秋季间和CR、NRR56、IFL在秋季与冬季间无基因型与环境互作效应外(r＞0.8),CR、NRR56、IFL在其他季节间均存在基因型与环境互作效应(r＜0.8).在CR中,春季配种与冬季配种间的遗传相关最低,在NRR56、IFL中则是春季配种与秋季配种的遗传相关最低.结果显示,青年牛生长发育能力和妊娠维持能力具有较大遗传选育潜力,而受胎能力易受环境影响.青年牛繁殖性状的遗传表现存在基因型与环境互作效应.因此,在进行遗传评定时需要考虑配种时的气候环境差异,优化评估模型以提高育种实践中遗传选育的准确性.

摘要： 该研究旨在检测与中国荷斯坦牛体型性状(肢蹄结构和乳房形态)相关的显著位点和候选基因.在300头中国荷斯坦牛群体中,利用GeneSeek Genomic Profiler Bovine 50 K SNP chip芯片进行基于混合线性模型全基因组关联分析.分析结果经过Bonferroni校正后,共检测到25个显著SNPs(P＜1/40501)位点,其中8个与肢蹄结构相关,17个与乳房形态相关.基于显著SNP位点寻找候选基因,鉴定到与乳腺癌相关候选基因ZMYND8、PTK2及与调节多种代谢通路相关的基因LEP、OSTF1等基因.该研究为解析中国荷斯坦牛肢蹄结构和乳房形态性状提供可能的候选基因,同时为奶牛的分子育种提供重要理论支持.

摘要： 本研究基于我国荷斯坦奶牛基因组遗传评估和生产性能测定(DHI)结果,旨在分析我国荷斯坦公牛基因组选择的效果.选择1686头既有基因组遗传评估成绩又有后裔测定成绩的荷斯坦公牛,利用2019年12月基因组遗传评估结果及其女儿的产奶和体型性状数据,通过R软件与Excel计算公牛基因组评估结果与公牛女儿表型数据间的相关性,对我国荷斯坦青年公牛基因组选择效果进行分析.相关性分析结果表明,荷斯坦公牛的基因组性能指数(GCPI)与后裔测定性能指数(CPI)呈正相关(rs＞0.3),其中产奶量和体细胞评分的基因组育种值(GE-BV)与估计育种值(EBV)呈较强的正相关(0.4＜rs＜0.8).对公牛女儿表型数据分析结果表明,女儿产奶量、乳蛋白率、乳脂率与肢蹄评分的表型值与公牛GEBV分组趋势一致,且公牛不同产奶性状GEBV组间的女儿性状表型值大部分达到极显著差异(P＜0.01);北京及上海地区公牛产奶性状、体细胞评分和肢蹄评分的GEBV分组与女儿表型值趋势较其他省市(地区)更一致,且GEBV高组与低组之间差值均高于其他省市(地区).基于1686头荷斯坦公牛基因组选择及其女儿表型数据的分析结果表明,我国荷斯坦公牛的基因组遗传评估准确性较好,其中产奶量、乳蛋白率、体细胞评分和肢蹄评分的表型数据更好地反映了基因组选择的效果;北京及上海地区较其他省市(地区)更能反映我国荷斯坦公牛基因组选择的效果.

摘要： 我国自开展奶牛生产性能测定(DHI)以来,积累了大量DHI数据,这为奶牛群体遗传参数估计和遗传评定奠定了良好的基础.本研究收集了北京地区1998—2018年间131个牛场的99823头中国荷斯坦奶牛的头胎测定日数据,共计817208条,以及全部牛只的系谱记录信息,采用了单性状随机回归模型配合4阶Legendre多项式分析中国荷斯坦牛产奶性状的遗传参数以及育种值估计,计算过程采用DMU软件的AI模块.结果表明:北京地区荷斯坦牛产奶量、乳脂率、乳蛋白率、乳脂量、乳蛋白量5个性状的305 d泌乳期遗传力分别为0.28、0.53、0.63、0.25、0.24,1990—2016年间各产奶性状的平均年遗传进展分别为10.52 kg、-0.00046％、-0.00011％、0.30 kg、0.32 kg.该研究结果为进一步提高选种准确性和遗传进展提供了依据,为北京地区制定合理的育种目标和进行遗传评估提供了理论参考.

摘要： 为筛选中国荷斯坦牛热应激耐受力相关遗传标记,本研究从细胞水平探究了HSPB8基因的表达变化及其多态与热应激反应性状的相关性.奶牛外周血单核细胞和牛肾细胞经42°C热处理后,HSPB8基因的表达水平极显著上调;采用DNA混池测序在1665头中国荷斯坦牛中筛查到HSPB8基因的2个SNPs,通过竞争性等位基因特异性PCR对这2个位点进行分型,与3个热应激反应性状(直肠温度、呼吸评分和流涎指数)的估计育种值(EBVs)进行关联分析,并对2个位点的连锁不平衡情况进行分析.结果显示:位于内含子2的位点g.58406728G>A与流涎指数显著相关,其中AA型和AG型个体的EBVs显著低于GG型;而位于3'UTR区的位点g.58406042A>G则与直肠温度显著相关,AA型个体的EBVs极显著低于GG型.此外,2个位点具有较紧密的连锁关系,选取优势单倍型组合(H1H1、H1H2、H2H2)与各性状EBVs进行关联分析,3种单倍型组合与各性状EBVs均无显著相关.本研究证明了奶牛HSPB8基因的表达受热应激诱导,g.58406728G>A和g.58406042A>G位点可作为重要的遗传标记用于中国荷斯坦牛耐热性能的选育.

摘要： 生长激素(GH)在组织和细胞水平发挥作用的第一步是和靶细胞膜表面的生长激素受体(GHR)结合，由GHR介导将信号传人细胞内从而产生一系列的生理效应。组织中GHR量的多少、功能的正常与否将影响GH生理效应的发挥，如果GHR基因碱基序列发生突变就可能影响到GH正常功能的发挥，从而影响到许多性状。本文采用PCR-RFLP方法，分析了CHR基因外显子10的遗传多态性并与草原红牛及中国荷斯坦牛的泌乳性状进行了关联分析，旨在探讨该基因与草原红牛和中国荷斯坦牛泌乳性状相关性，从而利用分子标记辅助选择方法，为草原红牛及中国和斯坦牛的早期选种选育提供分子生物学依据。

摘要： 连锁不平衡(linkage disequilibrium，LD)在基因定位、基因组选择、进化等研究中扮演着重要角色。随着牛基因组测序的完成，连锁不平衡在基因组上的分布及强度正成为目前基因组学的研究热点之一。随着覆盖全基因组SNP芯片的推出，构建高密度连锁不平衡图谱将有助于更高效利用群体的连锁不平衡信息。本研究以2093头中国荷斯坦牛为研究对象，利用Illumina公司开发的牛50K SNP芯片(Illumina BovineSt50，含54001 SNPs)，根据连锁不平衡程度x2分别构建以Btau4.2和UMD3.0为基因组参考序列的中国荷斯坦牛高密度连锁不平衡图谱，并对其影响因素加以探讨。质量控制标准设定为SNP检出率0.95，最小等位基因频率＞rn 0.05，样本检出率0.95，哈代温伯格平衡检验显著性水平0.0001。经过质量控制，共1968个样本和38796(Btau4.2)和39961(UMD3.0)个SNPs用于分析。结果表明，中国荷斯坦牛相邻标记问的连锁不平衡程度x2为0.25左右，比利用同样芯片分析的德园荷斯坦牛低(0.3±0.32)。随着物理距离的增加，LD呈衰减趋势，但是某些距离较远的SNP间也存在强LD。本研究同时表明，根据Btau4.2和UMD3.0两种牛基因组版本绘制的连锁不平衡图谱差异不大。

摘要： 目的：本实验研究了κ-酪蛋向基因第四和五外显子多态性与中国荷斯坦牛泌乳性状的关联性,为未来培育高乳蛋白及高乳脂率奶牛提供参考依据.rn 方法：采用DNA测序技术、PCR-RFLP和CRS-PCR,对544头中国荷斯坦牛的κ-酪蛋白基因的外显子4和5序列进行了研究.通过SHEsis软件和PHASE软件进行配对连锁不平衡分析和单倍型分析。rn 结果：发现6个新的SNPs,包括外显子5上A12907G、G12950A、C12989T、A13028G、T12980c 5个SNP位点,首次证实前4个位点紧密连锁:外显子4上1个sNP位点A10996T.单位点基因型与泌乳性状的关联分析表明:A10996T突变位点的TT和AT基因型个体乳脂率显著高于AA基因型个体(p<0.05);T12980C突变位点的TC和CC基因型个体乳脂率、乳蛋白率分别极显著、显著高于TT基因型个体(p<0.01)(p<0.05);紧密连锁的4个突变位点的DE因型个体乳脂率极显著高于DD基因型个体(p<0.01).与泌乳性状的关联分析表明:共构建出7种单倍型,发现了16种单倍型组合;其中H6H6单倍型组合个体乳脂率最高,HlH4次之;H1H4单倍型组合个体乳蛋白率最高;H5H6单倍犁组合个体乳蛋白率及乳脂率最低.rn 结论：兼顾单倍型组合的分布频率,我们认为H1H4单倍型组合在乳蛋白率和乳脂率方面为有利单倍型组合,可作为朱来选择高乳蛋白高乳脂率牛群的分子标记.

摘要： 通过饲喂中国荷斯坦牛等能量不同蛋白质水平以及等蛋白质水平不同蛋白质降解率的日粮，收集乳牛的血样和乳样，测定血浆和乳液中乳尿素氮的浓度，来研究二者之间的关系。结果表明，血浆尿素氮浓度均高于乳液尿素氮浓度，并且二者间存在显著的线性相关关系，其回归方程为：乳尿素氮(mg/dL)=血浆尿素氮浓度(mg/dL)xO.83+o.88(R2=0.90，P

摘要： 采用单因子随机分组试验设计,将16头体重、产奶量相近的2胎次乳中期中国荷斯坦牛随机分为4组(对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组与试验Ⅲ组),每组4头,进行为期21d的饲养试验.对照组的精饲料为基础精饲料,试验1组用5％的功能大豆寡肽蛋白饲料(FSOPF)替代基础精饲料中5％的鱼粉,试验Ⅱ组用10％的FSOPF替代基础精饲料中5％的鱼粉与5％的豆粕,试验Ⅲ组用15％的FSOPF替代基础精饲料中5％的鱼粉与10％的豆粕,3个试验组的其它精饲料组分与基础精饲料相同,各组的粗饲料相同.分别在试验前3d与正试期的最后3d测定试验牛的产奶量、乳常规指标(乳蛋白、乳脂肪、乳糖、全脂乳固体与非脂乳固体)以及体细胞数.结果表明,FSOPF能减缓泌乳中期奶牛产奶量的下降,改善乳常规指标,降低乳体细胞数.本研究结论表明:FSOPF可以替代泌乳中期中国荷斯坦奶牛日粮中的进口鱼粉,其适宜用量为在精粗比为(40～45):(60～55)时,占精饲料的10％.

摘要： 阐明藏黄牛、牦牛、中国荷斯坦牛β-乳球蛋白(β-Lg)遗传变异体在乳中表达差异的分子基础.采用聚丙烯酰胺凝胶电泳确定乳中β-Lg遗传变异体及其相对表达量,然后利用PCR方法扩增β-Lg启动子部分序列(375bp)并直接测序.在杂合型β-Lg个体中,中国荷斯坦牛乳中β-Lg A的相对表达量(63.7±2.9％)均一致性地高于β-Lg B,而藏黄牛乳中二者比例十分接近,但个体差异差异较大.16个测序样品中共检测到13处碱基突变,其中有5处为牦牛特异的.另外,在牦牛β-Lg启动子-452与-453之间,还存在一个插入碱基.β-Lg启动子-430碱基在中国荷斯坦牛中表现为等位基因特异的,而在藏黄牛中无等位基因特异性.

摘要： 奶牛乳房炎是引起现代奶业经济损失的一大原因。由于导致乳房炎的原因较复杂，目前对抗乳房炎的选育取得的进展缓慢。体细胞评分(SCS)是乳房炎育种的常用指标。随着全基因组SNP芯片的广泛使用，对SCS进行全基因组关联分析逐渐成为培育抗乳房炎奶牛品系的一个关键步骤。从统计学意义上说，全基因组关联分析可以检测到与SCS相关达全基因组显著水平的SNPs，但是因为全基因组关联分析使用比较保守的多重比较校正方法，而乳房炎及SCS遗传力较低，导致一些与乳房炎或SCS功能相关的基因不能被检测到。而生物体内，CD4+T细胞(即TH细胞)被激活后分化成三个亚群，TH1、TH2和TH17，其中TH1和TH17与促炎有关，而TH2与抗炎有关。本研究的目的是检测全基因组范围内与CD4+T细胞分化相关基因及炎症相关基因的SNPs与SCS的关联性。

摘要： 有效群体大小是群体遗传学研究的一个重要内容，有助于更清楚地了解群体的遗传变异、进化和复杂性状的遗传机制等。随着高密度SNP标记的出现，越来越多研究利用sNP标记间的连锁不平衡估计有效群体。

摘要： 催乳素(PRL)基因和垂体特异性转录因子(POU1F1)基因是与产奶性状相关的重要候选基因。PRL对哺乳动物乳腺发育与泌乳有一定的调节作用。PRL基因的多态性与产奶性状密切相关。POU1F1能激活催乳素和生长激素基因的表达。近年来，国内外开展了牛PRL基因、POU1F1基因的遗传变异及其与经济性状关联分析的研究，本研究试图发现PRL基因和POU1F1基因上的新的SNPs及其与产奶性状的关系并研究两个基因在产奶性状方面的聚合效应。

摘要： 在华南高湿高热环境下,本试验对中国荷斯坦牛、美国纯种娟姗牛及其美国娟姗同中国荷斯牛的杂交一代(JHF1)进行了同群比较试验。结果表明:疾病抵抗力上JHF1优于纯种娟姗、纯种娟姗又优于纯种荷斯坦牛,而在生产性能上纯种娟姗牛在第三胎和荷斯牛接近,而JHF1在第一胎已和荷斯牛不相伯仲,考虑纯种娟姗牛和JHF1代的奶质远远优于荷斯坦牛奶的因素,荷斯坦牛生产性能不及其它两个群体。三个群体的总体比较来看,除纯种娟姗奶牛的犊牛成活率较荷斯牛低外,基本呈现娟荷杂交一代优于纯种娟姗、纯种娟姗又优于纯种荷斯坦牛的趋势.

摘要： 本发明提供了一种荷斯坦牛生产大理石纹牛肉的饲养方法，涉及牛育肥技术领域。本发明所述饲养方法从断奶后即开始饲喂高营养日粮，促进肌内脂肪沉积。2012年‑2016年的试验研究结果表明，从12月龄直线育肥至26月龄出栏的荷斯坦阉牛，37.5％可以达到2级，62.5％可以达到3级。从2月龄断奶后直线育肥至15.5月龄的荷斯坦阉牛，2级和3级各占50％。从试验结果可以看出，直线育肥饲养，饲喂高营养浓度日粮，可以有效增加荷斯坦阉牛肌内脂肪沉积，由于出栏月龄仅为15.5月龄，背膘厚度明显低于26月龄。利用本发明所述饲养方法，将荷斯坦阉牛生产大理石纹牛肉的出栏月龄提前了10个月，大幅度降低饲料成本。

摘要： 本发明公开了一种具有无角Pc位点纯合基因型的荷斯坦牛的制备方法。本发明针对牛无角Pc位点设计sgRNA并连接到pX458载体，并与含有Pc片段及靶位点两侧约800bp的同源序列左臂和右臂的同源重组片段载体共转染至荷斯坦种公牛的耳缘成纤维细胞中，将Pc片段定点插入到耳缘成纤维细胞基因组中，筛选获得发生双等位Pc位点定点整合的纯合无角基因型的体细胞。进一步以获得的无角Pc位点纯合基因型体细胞为核供体细胞，通过体细胞核移植技术培育具有无角Pc位点纯合基因型的荷斯坦牛。本发明通过实验筛选获得了定点插入效率最佳的sgRNA，并利用该sgRNA获得了双等位Pc位点插入的纯合无角基因型体细胞株，为培育无角牛提供育种材料。

摘要： 本发明公开了一种从玻璃化冷冻囊胚中衍生荷斯坦牛胚胎干细胞的方法。本发明采用冷冻囊胚与胚胎干细胞衍生阶段特定培养液相结合，建立一种稳定的奶牛胚胎干细胞衍生体系，其囊胚粘附生成outgrowth的概率≥80％，胚胎干细胞建系效率≥50％。利用本发明，解决了利用鲜胚衍生奶牛胚胎干细胞时效紧迫的问题，提高了奶牛胚胎干细胞建系效率及稳定性，有助于高效建立体外育种模型，加快育种进程，降低育种成本，对奶牛新品种(系)培育具有重要的实践价值。

摘要： 本发明提供了一种鉴别荷斯坦牛优质高产的分子标记及其制备方法，所述SNP分子标记位于荷斯坦牛基因组的13号染色体上，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述分子标记位于第33012位点，突变碱基为T或C，同时利用该分子标记设计引物进行PCR扩增检测。同时利用Sequenom MassARRAY对992头荷斯坦牛进行基于SNP的基因分型；采用最小二乘法分析SNP与泌乳性状和体细胞评分(SCS)之间的相关性。本发明发现了牛ACSS2对产奶性状的多效作用，针对SNP等位基因发现了不同的优势基因型，对后续荷斯坦奶牛泌乳性能的分子遗传学研究提供理论依据。

摘要： 本发明公开了一种检测中国荷斯坦牛产奶性状的方法及一种试剂盒。本发明提供的检测中国荷斯坦牛产奶性状的方法是检测中国荷斯坦牛自GenBank AccessionNo.AJ318490中自5＇端第10433-10434位(即DGAT1外显子8的第15-16位)脱氧核糖核苷酸是AA还是GC，确定所述中国荷斯坦牛的基因型，然后通过基因型确定产奶性状。本发明提供的试剂盒包括用于PCR扩增含有自GenBank AccessionNo.AJ318490中自5＇端第10433-10434位(即DGAT1外显子8的第15-16位)核苷酸的基因组片段的引物、限制性核酸内切酶CfrI、PCR试剂和限制性核酸内切酶缓冲液。本发明方法及试剂盒操作简便、快速、灵敏，使用本方法及试剂盒检测到的结果可靠、稳定、准确。因此，本发明方法及试剂盒在牛的育种领域将有广阔的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种检测中国荷斯坦牛产奶性状的方法及一种试剂盒。本发明提供的检测中国荷斯坦牛产奶性状的方法是检测中国荷斯坦牛自GenBank AccessionNo.AJ318490中自5′端第10433－10434位(即DGAT1外显子8的第15－16位)脱氧核糖核苷酸是AA还是GC，确定所述中国荷斯坦牛的基因型，然后通过基因型确定产奶性状。本发明提供的试剂盒包括用于PCR扩增含有自GenBank AccessionNo.AJ318490中自5′端第10433－10434位(即DGAT1外显子8的第15－16位)核苷酸的基因组片段的引物、限制性核酸内切酶CfrI、PCR试剂和限制性核酸内切酶缓冲液。本发明方法及试剂盒操作简便、快速、灵敏，使用本方法及试剂盒检测到的结果可靠、稳定、准确。因此，本发明方法及试剂盒在牛的育种领域将有广阔的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种中国荷斯坦牛红毛基因的检测方法，包括牛血样品采集，提取基因组DNA，设计特异性引物，PCR扩增，限制性内切酶消化，凝胶电泳之步骤；其中：所述引物是：1：5’－CATCCCTGACGGGCTCTTTCTC－3’，2：5’－AGCACCTCTTGGAGCGTCTTCC－3’；所述PCR扩增的条件为：95°C预变性5min，然后94°C变性30s，62°C复性30s，72°C延伸30s，35个循环，最后72°C延伸7min；所述限制性内切酶消化用等量的限制性内切酶MspI和限制性内切酶MspAlI。本发明还同时公开了红毛基因快速检测试剂盒，包括PCR试剂盒、RFLP试剂盒两部分。本发明方法简便、快速，而且结果准确、可靠，为优质种公牛纯度鉴别及奶牛育种提供了有力的手段，对优化我国奶牛育种技术体系，保证牛群种质，保持奶业的可持续发展，具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种中国荷斯坦牛瓜氨酸血症基因的检测方法，包括牛血样品采集，基因组DNA提取，PCR扩增引物的设计，PCR扩增，限制性内切酶消化，凝胶电泳步骤；其中：所述引物序列是：1，GTGTTCATTGAGGACATC；2，CCGTGAGACACATACTTG；所述PCR扩增反应循环参数为：95°C5min，94°C1min，60°C1min，72°C 30 s，35个循环，72°C延伸10min，降温至4°C结束；所述限制性内切酶消化用Eco471酶切。本发明还同时公开了瓜氨酸血症基因的检测试剂盒，包括PCR试剂盒、RFLP试剂盒两部分。本发明对建立健全奶牛育种体系，剔除隐性缺陷基因，保证牛群种质，获得稳定的遗传进展，保持奶业的可持续发展，有着重要的意义。

摘要： 本发明涉及分子标记技术领域，具体涉及与荷斯坦牛HH2遗传缺陷相关的InDEL分子标记及其应用。本发明提供了与荷斯坦牛HH2遗传缺陷相关的InDEL分子标记，其为牛参考基因组GCF_002263795.1第1号染色体上第107172616位的碱基缺失。本发明针对该InDEL分子标记，设计了特异性引物，实现对荷斯坦牛HH2遗传缺陷野生型与突变型的快速准确分型。与传统方法相比，本发明方法具有成本低、快速高效、操作简便的特点，为今后在中国荷斯坦牛群中逐步淘汰HH2隐性有害基因提供技术手段，在牛的遗传疾病的筛查和育种进程中具有重要应用价值。

摘要： 本发明公开了一种用于荷斯坦牛热应激耐受力鉴定的SNP位点组合及芯片制备，所述SNP位点组合包括2264个SNP位点，所述的2264个SNP位点是基于337头中国荷斯坦奶牛的血液简化基因组测序结果筛选得到，每个SNP位点包含两个不同碱基变异位点，所述SNP位点的变异信息采用染色体编号_物理位置参考基因型/等位基因型的形式进行表示。本发明所采用的2264个SNP标记在中国荷斯坦牛基因组染色体上分布均匀，标记间最大距离为30.9Mb，最小距离为1bp，平均间距为1.1Mb，其应用于GWAS分析时，不会丢失位点。