琼脂糖凝胶电泳

摘要： 对于咪唑喹啉衍生物(IQDs)与小牛胸腺脱氧核糖核酸(CT-DNA)的相互作用机理,采用荧光光谱法、黏度法、热变性研究和琼脂糖凝胶电泳法等实验技术进行研究。实验结果显示,咪唑喹啉衍生物Ⅰ以嵌插模式与CT-DNA作用,衍生物Ⅱ以沟槽模式与CT-DNA作用,且衍生物Ⅰ与CT-DNA的作用强于衍生物Ⅱ,而衍生物Ⅲ几乎不与CT-DNA发生作用。利用Gaussian 98量子化学程序包构建并优化3种衍生物分子模型,在HF/6-31G基组水平上进行计算,量子化学理论计算结果表明大环C9位上的取代基对结合模式和强度起着关键作用,与实验结果一致。

摘要： 甲醛溶液浸泡的人类组织样本很多情况下是可遇不可求的珍贵资源,而其DNA的提取是一大难题。本文分别使用改进的甲醛溶液浸泡样本基因组DNA提取方法以及通用型基因组DNA提取试剂盒,对四份不同时间固定的福尔马林浸泡的人类胚胎皮肤和肌肉的样本进行基因组DNA提取。使用紫外分光光度计鉴定所提取DNA的纯度和质量浓度,DNA溶液点样进行琼脂糖凝胶电泳及成像,结果显示,改进的提取方法所得基因组DNA的质量浓度和纯度均优于通用型基因组DNA提取方法。以提取所得的基因组DNA模板进行PCR扩增,电泳结果显示,改进的提取方法所提取的基因组DNA有更好的PCR扩增效果。本研究为甲醛溶液浸泡的珍贵样本的基因组DNA的提取提供了方法指导和改进方向的参考。

摘要： 核酸染料的高效安全性一直是高校生物类实验室关注重点。从染色效果、灵敏度、染色方式、安全性以及性价比等方面探讨了溴化乙锭(EB)和9种新型核酸染料在琼脂糖凝胶电泳中的应用。结果表明,采用胶染法0.2×GelRed可以检测到5 ng DL5000DNA Marker所有DNA片段,显示的DNA电泳条带平整、清晰易辨;GelRed具有高灵敏性、无毒性且性价比合理,可作为EB替代染料在琼脂糖凝胶电泳中推广应用。

摘要： "DNA的提取和鉴定"是高中生物学课程中的重要实验之一,基于学生提出的问题,笔者引导学生对DNA提取方法进行文献梳理和实验优化,探索出了一种快速、高效提取DNA的方法,该方法适用范围广,可以有效提取动物组织、植物组织、土壤微生物、粪便等材料的DNA,该探究活动激发了学生的学习兴趣,培养了学生总结归纳能力、创新思维和实验探究能力.

摘要： 通过紫外光谱、荧光光谱、共振散射光谱、圆二色谱、粘度实验、琼脂糖凝胶电泳和荧光显微镜研究了多环芳烃类化合物萘(NAP)与DNA之间的作用机理。紫外光谱结果表明,NAP通过嵌入结合与DNA形成了稳定的复合物。加入NAP后DNA的热熔温度增加了21.49°C,说明NAP的嵌入使DNA双螺旋结构的稳定性增加。粘度实验结果显示,随着NAP浓度的不断增加,DNA相对粘度逐渐增大,说明二者是通过嵌插方式发生相互作用。圆二色谱进一步证实NAP与DNA的作用模式是嵌入结合。荧光光谱结果表明,DNA能有效猝灭NAP的荧光,猝灭机制以静态猝灭过程为主,常温下结合常数和结合位点数分别是2.9×10^(6) L/mol和1.32。根据共振散射光谱数据计算得到NAP与DNA的结合饱和值为2.5。通过结合过程的热力学参数表明,NAP与DNA之间的主要作用力为氢键和范德华力。琼脂糖凝胶电泳和荧光显微镜结果直观地揭示了NAP与DNA是以嵌入模式相结合。此外,基于NAP嵌入结合DNA的原理,利用DNA与磁珠选择性捕获NAP,其去除率为99.35%。该研究为建立基于多环芳烃(PAHs)-DNA相互作用清除PAHs的方法提供了新思路。

摘要： 为培养医学院学生动手能力和创新能力,训练学生的科研思维以及严谨的科研素养,血管紧张素转化酶基因多态性分析综合性实验被引进课堂.学生通过提取自己口腔粘膜上皮细胞基因组核酸、 经多聚酶链式反应扩增血管紧张素转化酶基因中具有多态性的片段、 凝胶电泳检测分析这一系列实验,得到自己的基因诊断结果的同时,全面、 深入、 系统地学习了这些常用技术的原理和方法,了解了其在临床研究中的应用,加深和巩固了学习的知识,激发了学生的学习兴趣和主动性,为将来的学习和科研打下良好的基础.

摘要： 目的 利用CRISPR/Cas9技术构建血管紧张素Ⅱ2型受体(AngiotensinⅡtype 2 receptors,Agtr2)基因敲除(Agtr2-/-)小鼠,分析Agtr2-/-小鼠的繁育和基因型.方法 与江苏集萃药康公司联合设计执行CRISPR/Cas9技术,获得Agtr2-/-F0代小鼠,通过聚合酶链式反应(PCR)对鼠尾基因型进行鉴定.F1代Agtr2-/-小鼠由F0代Agtr2--小鼠性成熟后与同窝野生型小鼠交配而得.PCR鉴定结果的可靠性则通过Western blot从蛋白水平上加以验证.结果 利用CRISPR/Cas9技术成功构建了Agtr2-/-小鼠并对所获小鼠进行繁育和基因型鉴定,得到了Agtr2+/+、Agtr+/-、Agtr2-/-3种基因型稳定的Agtr2基因小鼠.Western blot检测结果证实Agtr2-/-小鼠心脏、脾脏、胸腺、肝脏及肾脏组织中几乎不表达Agtr2蛋白.结论 成功构建了Agtr2-/-小鼠模型,并通过可靠的鉴定方法和合适的繁育手段得到纯合Agtr2-/-小鼠.

摘要： 目的:繁殖及鉴定可调控前脑特异性胆囊收缩素受体2 (Cholecystokinin receptor-2,CCKR-2)双转基因小鼠(tTA/tetO-CCKR-2 double transgenic,简称dtg),为进一步研究CCKR-2在焦虑相关疾病,如焦虑症、恐惧行为、创伤后应激障碍等发病过程中的作用及分子机制提供实验模型.方法:(1)利用α-CaMKII/tTA单转基因小鼠与tetO/CCKR-2单转基因小鼠杂交,所得子代尽可能远亲繁殖获得dtg小鼠,提取子代鼠尾基因组DNA,采用PCR法及琼脂糖凝胶电泳法鉴定PCR产物以确定其基因型;(2)采用原位杂交方法验证CCKR-2双转基因前脑特异性表达,筛选CCKR-2双转基因型及前脑特异性表达者作为继代种鼠和实验用鼠.结果:(1)PCR凝胶电泳图显示清晰的tTA(350 bp)和CCKR-2(550 bp)条带,野生型无条带显示,表明琼脂糖凝胶电泳结果与dtg模型预期基因片段大小相符;(2)原位杂交结果显示dtg小鼠前脑区域有强烈的CCKR-2表达而野生型小鼠不明显.此结果表明dtg双转基因小鼠在本实验室的成功建立与繁殖及继代,同时繁殖出更多的dtg小鼠.结论:通过正确的饲养繁育和基因鉴定方法能成功获得dtg双转基因小鼠,为本实验室进行后续相关研究奠定了基础.

摘要： 高质量DNA的提取是乳及乳制品真实性分析的先决条件.本研究对3种提取方法进行比较研究,采用传统十六烷基三甲基溴化铵法(Cetyltrimethylammonium Bromide,CTAB)、TaKaRa试剂盒法和MagAttract试剂盒法分别提取牛奶和蒙古族传统发酵乳制品(嚼克)2种样品的脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,DNA),使用核酸蛋白分析仪测定其浓度和纯度,并通过琼脂糖凝胶电泳评价DNA的完整性;利用牛源性特异的实时荧光聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法检测模板DNA的检出限(Limit of detection,LOD)和标准曲线的扩增效率,对所提取的DNA的质量进行评价.结果表明:MagAttract试剂盒法提取的DNA条带单一清晰、无明显拖尾及降解的现象;相同浓度模板DNA的循环(Cycle threshold,Ct)值最小且扩增效率最高,表明此方法提取的DNA质量最好、完整性最高.目前关于乳及乳制品高质量DNA提取的方法研究较少,MagAttract试剂盒法将为乳制品DNA的提取以及乳制品真实性分析提供方法依据.

摘要： 实验室常规的核酸琼脂糖凝胶电泳的染色剂主要是溴化乙锭(EB),染色方法主要有两种:一是EB加入到琼脂糖凝胶中;二是在电泳结束后在含EB的缓冲液中显色.本文对EB染色方法进行了改进,即在上样缓冲液中加入EB,电泳前将带EB的缓冲液与DNA混合,形成EB-DNA复合物,然后再进行电泳.本文同时对改进前后的电泳速度、条带亮度做了详细的比较,并探讨了缓冲液中EB的最佳浓度,找到了一种较好的琼脂糖凝胶电泳染色方法.

摘要： 目的：掌握金银花基因组DNA的提取方法，比较RAPD分析前后DNA图谱的变化。方法：采用改良CTAB法提取金银花基因组DNA并进行RAPD分析。结论：金银花基因组DNA扩增后，经琼脂糖凝胶电泳后在紫外凝胶成像系统下观察，扩增前后基因谱带分布有变化。

摘要： 以猪圆环2型病毒为材料,设计了3对引物,构建了猪圆环2型病毒环介导等温扩增(LAMP)检测方法,并进行敏感性和特异性确定.建立的猪圆环2型病毒的LAMP检测方法,可以采用琼脂糖凝胶电泳、颜色变化、生成的沉淀等现象判定反应结果,为猪圆环2型病毒的现场快速检测提供了一种更加简便快速的方法,可以满足现场检疫的需要。

摘要： 目的：建立药用淫羊藿品种的位点特异性PCR鉴定方法，为药材质量控制提供帮助。rn 方法：对Gen-Bank上淫羊藿点Epimedium brevicornu Maxim 、箭叶淫羊藿E.sagittatum(Sieb.et Zucc.)Maxim.、柔毛淫羊藿E. pu-bescens Maxim、朝鲜淫羊藿E.koreanum Nakai和巫山淫羊藿E.wushanense T.S.Ying.、粗毛淫羊藿E.acumina-turn Franth.、天平山淫羊藿E.myrianthum Steam、黔岭淫羊藿E.leptorrhizum.Steam 等8个药用淫羊藿种的核糖体基因组ITS序列、5S rDNA间隔区序列以及线粒体nadl第2内含子序列进行比对分析寻找能够相互区别的变异位点，并根据这些变异位点设计专属性的PCR鉴定引物对样本进行扩增，并用琼脂糖凝胶电泳进行检测。rn 结果：序列比对后找到箭叶淫羊藿、朝鲜淫羊藿、粗毛淫羊藿和柔毛淫羊藿的变异位点，但只有朝鲜淫羊藿的变异位点为种特异性鉴定位点。根据朝鲜淫羊藿的特异性位点建立了该种淫羊藿的位点特异性PCR鉴定方法，能够可靠的将朝鲜淫羊藿与其他药用淫羊藿品种鉴别开。

摘要： 本文对琼脂糖凝胶电泳(电泳时须同时做质控血清以资对照)、柱层析法、超速离心法、酶活化能测定、热失活试验、免疫学方法和电泳法结合这几种常见的巨分子酶鉴定方法及临床意义进行了研究。

摘要： 本文利用自由基猝灭和脱水丙二醛分析等化学分析实验对3-羟基-1,5,8-三氮杂环癸烷(L)的Co(Ⅱ),Ni(Ⅱ),Cu(Ⅱ)配合物断裂DNA机制进行了初步研究,发现Ni(Ⅱ)配合物主要以水解机制催化DNA的断裂;而Cu(Ⅱ)配合物主要以氧化还原机制断裂DNA;Co(Ⅱ)配合物断裂DNA时可能同时存在水解和氧化还原两种机制.

摘要： 本文利用自由基猝灭和脱水丙二醛分析等化学分析实验对3-羟基-1,5,8-三氮杂环癸烷(L)的Co(Ⅱ),Ni(Ⅱ),Cu(Ⅱ)配合物断裂DNA机制进行了初步研究,发现Ni(Ⅱ)配合物主要以水解机制催化DNA的断裂;而Cu(Ⅱ)配合物主要以氧化还原机制断裂DNA;Co(Ⅱ)配合物断裂DNA时可能同时存在水解和氧化还原两种机制.

摘要： 本文利用自由基猝灭和脱水丙二醛分析等化学分析实验对3-羟基-1,5,8-三氮杂环癸烷(L)的Co(Ⅱ),Ni(Ⅱ),Cu(Ⅱ)配合物断裂DNA机制进行了初步研究,发现Ni(Ⅱ)配合物主要以水解机制催化DNA的断裂;而Cu(Ⅱ)配合物主要以氧化还原机制断裂DNA;Co(Ⅱ)配合物断裂DNA时可能同时存在水解和氧化还原两种机制.

摘要： 本文利用自由基猝灭和脱水丙二醛分析等化学分析实验对3-羟基-1,5,8-三氮杂环癸烷(L)的Co(Ⅱ),Ni(Ⅱ),Cu(Ⅱ)配合物断裂DNA机制进行了初步研究,发现Ni(Ⅱ)配合物主要以水解机制催化DNA的断裂;而Cu(Ⅱ)配合物主要以氧化还原机制断裂DNA;Co(Ⅱ)配合物断裂DNA时可能同时存在水解和氧化还原两种机制.

摘要： 本文利用自由基猝灭和脱水丙二醛分析等化学分析实验对3-羟基-1,5,8-三氮杂环癸烷(L)的Co(Ⅱ),Ni(Ⅱ),Cu(Ⅱ)配合物断裂DNA机制进行了初步研究,发现Ni(Ⅱ)配合物主要以水解机制催化DNA的断裂;而Cu(Ⅱ)配合物主要以氧化还原机制断裂DNA;Co(Ⅱ)配合物断裂DNA时可能同时存在水解和氧化还原两种机制.

摘要： 一种多重点样、双层电泳检测微卫星DNA的琼脂糖凝胶电泳方法，它涉及一种检测微卫星DNA的琼脂糖凝胶电泳方法，本发明要解决现有微卫星DNA电泳检测时造成琼脂糖粉和电泳缓冲液大量浪费，以及EB的利用率低的问题。本发明的方法为：将同样面积的两块琼脂糖凝胶，平行放置在上下两层；依次对下层和上层凝胶点样、电泳，直至检测的扩增产物跑到凝胶底部时，停止电泳，然后进行凝胶成像检测。本发明的方法极大提高了琼脂糖凝胶和电泳缓冲液的利用率，节约了人力和成本。与单次点样比较，不需要重新制备凝胶，10cm长的一块凝胶可重复点样8次，节省成本8倍以上。从而实现了快速、高效检测植物SSR标记位点遗传变异。

摘要： 本发明提供了一种高通量琼脂糖凝胶电泳装置，涉及电泳仪器技术领域，该电泳装置包括电泳槽、胶槽、电泳正极、电泳负极以及槽盖，电泳正极设置在电泳槽底部，电泳负极设置在槽盖下方，电泳正极和电泳负极上下对应并处于同一竖直面内，电泳槽内装填有电泳液，槽盖扣合在电泳槽的顶部时电泳负极浸没在电泳液中，胶槽设置在电泳槽内并浸没在电泳液中，胶槽位于电泳正极和电泳负极之间。本电泳装置采用垂直电泳，垂直电泳横截面积比相同通量的卧式电泳小，由此提高电泳的通量，与本电泳装置相同通量的卧式电泳装置相比，本电泳装置的制作成本更低；可以直接从琼脂糖凝胶块的顶部进行上样，操作更加简单方便。

摘要： 本发明提供了一种用于制备琼脂糖凝胶的装置、琼脂糖凝胶电泳方法和应用，涉及电泳技术领域。该装置包括制胶平台、凝胶托盘、加样梳和储胶容器；制胶平台设置有至少一个用于放置凝胶托盘的凹槽A，两个加样梳分别靠近凹槽A相对的两个侧壁平行设置；储胶容器中设置有至少一个用于放置凝胶托盘的凹槽B和贮存缓冲液的空间，以使琼脂糖凝胶浸没于缓冲液中；该装置通过制备两端具有加样孔的琼脂糖凝胶配合储胶容器，以达到制备用于重复利用的琼脂糖凝胶的目的。该琼脂糖凝胶电泳利用上述用于制备琼脂糖凝胶的装置制备得到的可重复使用的琼脂糖凝胶进行电泳，可在电泳前免于制胶，简化了实验流程。

摘要： 一种多重点样、双层电泳检测微卫星DNA的琼脂糖凝胶电泳方法，它涉及一种检测微卫星DNA的琼脂糖凝胶电泳方法，本发明要解决现有微卫星DNA电泳检测时造成琼脂糖粉和电泳缓冲液大量浪费，以及EB的利用率低的问题。本发明的方法为：将同样面积的两块琼脂糖凝胶，平行放置在上下两层；依次对下层和上层凝胶点样、电泳，直至检测的扩增产物跑到凝胶底部时，停止电泳，然后进行凝胶成像检测。本发明的方法极大提高了琼脂糖凝胶和电泳缓冲液的利用率，节约了人力和成本。与单次点样比较，不需要重新制备凝胶，10cm长的一块凝胶可重复点样8次，节省成本8倍以上。从而实现了快速、高效检测植物SSR标记位点遗传变异。

摘要： 本发明公开了一种水平式琼脂糖凝胶电泳点样显色板，涉及生物技术领域，包括电泳箱，所述电泳箱的顶侧设置有对接板，所述对接板的左侧前端和右侧后端均固定设置有安装套一。通过设置的点样显色板，点样显色板可利用自身的颜色，进而可清晰呈现点样孔位置，以此提高点样的效率，同时通过将点样显色板设置在电泳槽胶板的底侧，可完美地扣在电泳槽胶板所放位置底部，进而达到灵巧方便，不占空间的作用，通过硅胶对接头与卡接槽的卡接，可实现将对接板与盖板固定在一起，且后期可以很方便的将盖板从对接板上拆卸下来，进而在后期将使用过的凝胶去除时，可很方便的将盖板从电泳箱上取下。

摘要： 本发明涉及一种用于琼脂糖凝胶电泳DNA检测中核酸染色的方法，具体包括以下步骤：(1)琼脂糖溶液的制备；(2)加样：(3)电泳。本发明的有益效果是：与常规的琼脂糖凝胶电泳DNA检测方法相比，本方法减少了GelGreen和GelRed核酸染料的使用，不但降低了实验成本，而且还提高了实验的稳定性和安全性。

摘要： 一种玻璃管琼脂糖凝胶电泳架，包括玻璃管、玻璃管支架、上电泳液槽和下电泳液槽，玻璃管支架和上电泳液槽为一体结构，上电泳液槽位于玻璃管支架的上端，上电泳液槽的槽底设有上安装孔，玻璃管支架下端插设在下电泳液槽的插槽中，玻璃管支架下端还设有横梁，横梁上设有下安装孔，玻璃管两端设有开口并分别连接在上安装孔和下安装孔，以竖直连通上电泳液槽和下电泳液槽。本实用新型可以实现琼脂糖垂直电泳，避免操作者接触琼脂糖凝胶和电泳液，对操作者更安全，同时避免了实验室污染，减少了琼脂糖凝胶的用量。

摘要： 本实用新型公开了一种同工酶琼脂糖凝胶电泳制胶装置，包括底盘，所述底盘前表面的中心固定安装有盒体，所述盒体的一侧与前表面均开设有凹槽，所述盒体前表面一侧的靠顶部位置与靠底部位置均开设有卡槽，两个卡槽之间设置有抽板。该同工酶琼脂糖凝胶电泳制胶装置，通过卡条、卡槽和抽板的设计，在凝胶成型后，可将抽板两侧的卡从卡槽中抽出，从而使盒体一侧的凹槽打开，便于将凝胶从凹槽处拿出，外筒、内筒、螺纹筒、丝杆和限位板的配合使用，通过转动调节钮使丝杆带动螺纹筒向左右两侧移动，由于螺纹筒与内筒的内部固定连接，从而使内筒带动限位板在盒体的内部进行移动，可对限位板进行精准的调节。

摘要： 本实用新型公开了一种琼脂糖凝胶电泳定位装置，包括翻盖，还包括定位板；所述翻盖用于封闭电泳槽体的开口端，所述翻盖中部设有双开门，所述双开门包括两扇用透明材料制成的观测门，所述观测门可朝电泳槽体一侧旋转打开，两个所述观测门打开的角度小于90度；两个所述观测门的上侧均带有沿所述观测门旋转轴线方向设置的凸条，两个所述凸条上用于放置定位板；所述定位板上均布有多个和点样孔相对应的定位孔，每个所述定位孔处均带有和定位枪的枪头尺寸相匹配的放置槽，所述放置槽两端相互贯通，所述定位枪的枪头用于放入放置槽中并进行点样；采用本方案，通过定位板能精准找到定位孔，并能承载定位枪的枪头，防止点样枪的枪头过于深入琼脂糖凝胶。

摘要： 本实用新型提供了一种干式极速琼脂糖凝胶电泳设备。整套设备由三部分组成：电泳仪、预制胶、观察盖。预制胶板两侧带有电极线，将配制好的琼脂糖预先灌注到两层透明亚克力板中间，亚克力板周边用石蜡封闭。整个胶板提前预制，胶板外无EB污染，确保了实验人员不接触EB。预制胶板上带有上样孔，固态的上样孔更容易将样品加装入孔内，操作更方便快捷。电泳仪两侧带正负电极，将上样后的预制胶直接卡入两个电极中间，无需要加TAE/TBE缓冲液，直接进行电泳。电泳仪底部安装了紫外灯管，外部配置了带滤光片的观察盖。电泳过程中和实验结束后，都可以将观察盖放置到位，打开紫外灯实时观察电泳进程和结果。也可以用手机对结果进行拍照留存。