猪繁殖与呼吸综合症病毒

摘要： 为研制猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)质粒核酸标准物质,建立数字PCR方法,并联合多家实验室利用数字PCR方法对标准物质进行合作定值,探讨了合作定值过程中影响质粒定值准确性的因素,并评定了标准物质不确定度.研制的两种质粒核酸标准物质已获得国家二级标准物质证书(编号GBW(E)091038及GBW(E)091039),可为检测方法提供定量标准,用于方法评价、产品质量控制等诸多方面.

摘要： To detect the antibody in pigs after PRRSV infection and PRRS vaccine immunization,the indirect ELISA antibody detection assay was established based on GP5 prokaryotic expression protein of PRRSV as coating antigen in this study.PRRSV GP5 gene was amplified by RT-PCR and cloned into pGEX-6p-1 to construct pEGX-6P-GP5,pEGX-6P-GP5 was transformed into BL21 (DE3) and induced,then the recombinant GP5 protein was expressed.The indirect ELISA was established with the punfied GP5 protein as the coating antigen,and was optimized by square test.The optimization results showed the coating concentration of GP5 protein was 150ng/cell and the detected serum was diluted by 80 times.The specificity,sensitivity and reproducibility of the assay were very high.203 serum samples collected from Shandong province were detected by the indirect ELISA assay,the coincidence was 96.5％ between the indirect ELISA this study and the ELISA detection Kit (France LSI).The indirect ELISA method established in this study was an important detection assay for PRRSV antibody levels in pig groups and would have been widely used in detection of vaccine immune effect.%为建立检测感染猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒(PRRSV)或PRRSV弱毒疫苗免疫后猪群体内抗体水平的方法,本研究以PRRSV GP5基因的原核表达蛋白为包被抗原,建立了间接ELISA抗体检测方法.利用RT-PCR扩增PRRSV GP5基因,将其克隆于pGEX-6p-1中构建原核重组表达载体pGEX-6P-GP5,转入大肠杆菌BL21 (DE3)中进行诱导表达,以梯度尿素法对表达蛋白纯化后,以其为包被抗原,利用方阵试验对间接ELISA方法进行优化,最终确定了GP5蛋白的最佳包被浓度是150 ng/孔,被检血清的最佳稀释倍数为80倍.试验结果显示,该检测方法的特异性、敏感性、重复性很强.从山东各地采集203份猪血清样品进行检测,结果显示该检测方法与商品化PRRSV抗体检测试剂盒(法国LSI)检测结果的符合率为96.5％.本研究建立的间接ELISA方法,为猪群体内PRRSV抗体水平的检测提供了重要的检测手段,在疫苗免疫效果的评价方面有着广泛的应用.

摘要： PRRSV在空气中能够传播现在已经被证实。随着新的高致病性猪繁殖与呼吸综合症病毒（HP—PRRSV）分离株的出现，如MN-184和1-18—2，通过空气进行长距离传播的能力与早期分离株对比有所增长。最新的研究表明PRRSV能够通过气雾传播的距离超过120m。然而，以前的结果显示，在田问通过空气进行传播的距离至少能够达到3.3km。

摘要： To obtain specific antibodies against nsp4 protein of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV),nsp4 gene was amplified by RT-PCR and cloned into pET-28a(+) vector,designated pET28a-nsp4,pET28a-nsp4 was transformed into Escherichia coli Trasseta (DE3) cells and expressed after induction of IPTG.SDS-PAGE analysis showed that the recombinant protein was expressed in soluble form with the molecular weight of 26 kDa.The soluble fusion protein in the supernatant was purified using Ni+-NTA affinity chromatography.New Zealand rabbits were immunized by the purified nsp4 and anti-sera against nsp4 were obtained.The titer of polyclonal antibodies was about 106 and showed good specificity and sensitivity in the immunofluorescence assay and Western blotting analysis.The polyclonal antibodies also recognized native nsp4 form PRRSV infected Marc-145 cells,providing a useful tool in PRRSV replication mechanism study.%为了获得猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) nsp4的抗体,根据HP-PRRSV TA-12株(GenBank Accession No.HQ416720)的nsp4基因序列,设计并合成一对引物.用RT-PCR扩增后克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET28a-nsp4,转化至Trasseta(DE3),经IPTG诱导重组蛋白获得了高效可溶性表达,大小约为26 kDa.经镍离子亲和柱(Ni+-NTA)纯化获得了高纯度重组蛋白,将纯化的nsp4蛋白免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体.ELISA检测抗体效价可达106,Western blotting和IFA检测结果表明所制备的多克隆抗体具有良好的免疫反应特异性,能够识别PRRSV感染宿主细胞中的nsp4蛋白.本研究成功制备了针对nsp4的多克隆抗体,为进一步研究nsp4的功能及PRRSV致病机制奠定了基础.

摘要： 猪繁殖与呼吸综合征（porcine reproductive and respiratory syndrome ，PRRS）是一种遍布于全世界的高度传染性疾病，其病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus ，PRRSV ）。感染PRRSV后，最先在机体内进行表达的是非结构蛋白（nonstructural proteins ，NSPs），PRRSV基因组编码区经翻译后至少产生14种 NSPs （NSP1α、NSP1β、NSP2、NSP3、NSP4、NSP5、NSP6、NSP7a、NSP7b、NSP8、NSP9、NSP10、NSP11、NSP12），这些NSPs在病毒增殖、病毒毒力、免疫学特性等方面都发挥着重要作用。作者就NSPs的研究进展进行简要概述，以期为PRRS疫苗研发及技术防控奠定基础。%Porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS ) is a highly contagious disease that spreads all over the world .It is caused by porcine reproductive and respiratory syndrome vi‐rus (PRRSV) .Once infected with PRRSV ,NSPs (nonstructural proteins) were expressed firstly . At least 14 kinds of NSPs ,including NSP1α,NSP1β,NSP2 ,NSP3 ,NSP4 ,NSP5 ,NSP6 ,NSP7a , NSP7b ,NSP8 ,NSP9 ,NSP10 ,NSP11 and NSP12 ,were produced during PRRSV life ,which plays an important role in virus proliferation ,virus virulence ,immunological characteristics and so on .In this paper ,we make a brief overview in terms of the research progress on NSPs to make a basis for the prevention of PRRS .

摘要： 为建立一种快速准确检测猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)的基于TaqMan实时荧光定量PCR方法,根据猪繁殖与呼吸综合症病毒的ORF7保守序列分别设计引物和TaqMan探针,在常规PCR的基础上,设计并优化基于TaqMan探针的荧光定量PCR检测PRRSV的方法.结果表明本研究建立的基于TaqMan探针的实时荧光定量PCR体系相关系数大于99％,扩增效率为97％,具有良好的线性关系.利用建立的方法检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)、日本脑炎病毒(JEV),结果均为阴性,说明此方法具有较好的特异性.灵敏度试验表明该方法检测极限为5 copies/μL;应用建立的方法对58份血清样本和60份组织样本进行检测,共检测出14份阳性血清和10份阳性组织.这些结果表明本研究建立的基于TaqMan探针的PRRSV实时荧光定量PCR方法具有良好的特异性、灵敏度、重复性,可为临床检测PRRSV提供更高效的技术平台.

摘要： 为构建稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)受体CD163的HEK293细胞系,本研究采用RT-PCR方法从猪肺泡巨噬细胞(PAM)总RNA中扩增CD163基因并将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组质粒pcDNA-CD163.将该重组质粒转染HEK293细胞,并利用G418筛选、纯化,获得了稳定表达CD163受体蛋白的HEK293CD163细胞系.RT-PCR、流式细胞术及western blot检测结果表明,该细胞系在传代至15代后,CD163在HEK293细胞中仍然能够稳定表达.在该细胞系中接种PRRSV后进行间接免疫荧光及噬斑试验检测表明,病毒能够通过CD163感染HEK293CD 163细胞并在其中增殖.该细胞系的建立为进一步研究PRRSV的侵入细胞和致病机制提供了病毒在体外增殖的易感细胞系.

摘要： 高致病性猪蓝耳病又称猪繁殖与呼吸综合征，是一种有动脉炎病毒科中的猪繁殖与呼吸综合症病毒引起的，以成年母猪发热、流产、早产、死胎和繁殖障碍，仔猪及育成猪异常呼吸症状为主要特征的传染病。它是一种免疫抑制病，常常继发其他病原感染。1发病情况本镇一规模养猪场发生高致病性猪蓝耳病，经调查了解病猪以仔猪居多，其次是保育猪，再次是育肥猪和母猪。病猪体温普遍升高，用药后短暂下降，留热。该病传播速度较快，发病率在50％－80％，病死率在30％－60％，病程7－15d。

摘要： Genus是全球动物基因技术行业的先锋企业。该公司与密苏里大学合作，日前，宣布了首例猪繁殖与呼吸综合症病毒（PRRSv）抗病猪研发成功。

摘要： 猪繁殖与呼吸综合症病毒是引起猪繁殖与呼吸综合症的病原,本文就猪繁殖与呼吸综合症病毒的分子生物学特征、先天性免疫反应以及获得性免疫反应对猪繁殖与呼吸综合症病毒的作用进行了简要的综述.

摘要： 本文对河北某猪场爆发急性死亡的断奶仔猪进行了病理解剖诊断和病理组织学观察，并结合病原学检测结果对其死亡原因进行了分析。病理学诊断结果显示，病死猪多器官出现明显的出血性坏死性病理变化。以肝脏、肺脏和肠道病变最为严重，且伴有大量淋巴细胞浸润;淋巴器官主要表现为发育不良，淋巴细胞坏死或淋巴滤泡排空。病原学诊断戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus，HEV)和猪繁殖与呼吸综合症病毒(porcinc reproductivc and respiratory syndromevirus，PRRSV)阳性。最后确诊为HEV和PRRSV混合感染引起的断奶仔猪急性死亡。

摘要： 从广东省不同地区呼吸道症状明显的组织样品中分离到11株引起MARC-145细胞病变的病毒,经RT-PCR和序列分析鉴定为美洲型猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV),其ORF5全基因均为603bp,不存在核苷酸的插入或缺失,但存在多个位点的点突变,推导的氨基酸序列相似性在97.0%-99.5%,与国内外参考株推导的氨基酸序列的相似性在85.1%-99.0%,11个毒株处于同一个大分支下,又分属不同的小分支,与XH-GD、JXA1等遗传距离较近,与YN01、CC-1、MLV、VR-2332的遗传距离较远,与HL的遗传距离最远。11个毒株ORF5氨基酸序列在两端的高变区和中间的较保守区均有不同程度的突变,均存在位置和序列均一致的4个潜在糖基化位点;抗原表位分析结果显示,在不同的表位分别有不同位点的点突变,但这些位点的突变,可能不会改变该区域的疏水性能,不会引起抗原表位的变化。

摘要： 从2006年猪高热病料中分离到一株猪繁殖与呼吸综合症病毒(HuN株)，经过RT-PCR、序列测定，获得该病毒的基因全长，全长为15，328nt，GENBANK登录号为EF517962；经过与标准毒株VR-2332的比较发现在非结构蛋白中，最保守的区域为NSP9，变异最大区域是NSP2；在结构蛋白中最保守的区域为ORF6，变异最大的为ORF5。同时对同时期分离自高热病的其它毒株5’UTR比较发现，该区存在文献报道的12nt，8-11-9的串状保守区域以及CACC的保守区域。病毒基因全长的扩增丰富了猪繁殖与呼吸综合症病毒的基因数据库，为深入研究该毒株的遗传与变异及其与生物学特性的关系奠定了基础。

摘要： 猪繁殖与呼吸综合征病毒于20世纪早期在欧洲最先发现,现在已在全球范围内传播.PRRSV主要引起患猪持续性呼吸障碍、体重减轻、生长迟缓,以及妊娠振母猪的流产.病毒基因组的变异、持续的继发感染和PRRS的流行性给防治本病带来了困难.本文研究了非结构蛋白、主要囊膜蛋白M和GP5、次要囊膜蛋白、核衣壳蛋白。PRRSV囊膜蛋白的结构仍然没有解决，除了知道其在病毒感染过程中与宿主细胞结合，并刺激免疫系统，起到非常大的作用。目前，对囊膜与宿主之间的天然作用形式还没有了解，更不知道PRRSV逃避免疫机制的机械融合和结构基础。更好的理解PRRSV的免疫学机制，病毒融合和入侵的机械原理，需要得到病毒囊膜蛋白的详细结构，核衣壳的组装和基因组的包装方式。也需要得到非结构蛋白在病毒复制过程中的作用。

摘要： 为了制备特异性针对PRRSV Nap9的并且可以抑制病毒感染的纳米抗体，构建了针对Nsp9的双峰驼重链抗体可变区抗体文库。rn 首先利用pET28a载体构建了Nsp9全长的原核表达载体，并将其导入BL21表达菌中。表达并纯化Nsp9重组蛋白，利用His单抗和PRRSV阳性猪血清鉴定重组蛋白免疫反应性。将重组蛋白与弗氏佐剂充分混匀免疫4岁健康雄性阿拉善双峰驼，经过5轮免疫后采集实验动物血液，分离外周血淋巴细胞，提取总RNA并反转录cDNA，根据骆驼重链抗体可变区上下游保守序列设计引物，利用PCR扩增VHH基因，将其连入pCANTAB SE噬菌体载体，转化TG1感受态细胞制备双峰驼重链抗体可变区抗体文库。表达并纯化了具有较强免疫反应性的可溶性Nsp9重组蛋白，ELISA结果显示猪体在攻毒后14d左右可以检测到Nsp9的抗体，抗体滴度在功毒后28 d可以达到较高的水平。双峰驼经过5轮免疫后抗体效价达到1:50 000，采集血液后，从350 mL全血中分离得到3×108个外周血淋巴细胞。提取RNA并反转录后，利用PCR扩增得到400 by左右的VHH条带，将其连入pCANTAB 5E噬菌体展示载体中，电转化TGI感受态细胞，得到了库容量为2×108的双峰驼重链抗体文库。rn 猪体感染PRRSV后可产生针对Nsp9的抗体。可溶性Nsp9重组蛋白有望用于针对PRRS的血清学检测。本文构建的抗体库库容大且丰度较高，可用于Nsp9纳米抗体的筛选。

摘要： 目的：构建了携带猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)ORF5基因的减毒沙门氏菌重组菌，从而探讨PRRS活载体疫苗的可行性。方法：在△crpC78-1缺失株的基础上筛选猪霍乱沙门氏菌C78-1株△crp△asd双缺失株；将ORF5转化为大肠杆菌X6097，命名为PYA-ORF5，将PYA-ORF5电转化入△crp△asd C78-1中，命名为△crp△asd C78-1 ( PYA-ORF5)，并对其活性进行初步检测。结论：本研究以减毒沙门氏菌作为活载体成功表达了PRRSV GP5蛋白，为PRRS新型疫苗的研发提供了理论依据。

摘要： 猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)，俗称猪蓝耳病毒不仅可以垂直传播，也可水平传播，是威胁养猪业健康发展的主要传染病之一。本文以Marc-145 作为宿主细胞，研究了中性电解水对猪蓝耳病毒的体外抑制作用。结果表明，中性电解水对猪蓝耳病毒具有较好的杀灭效果，且随着有效氯浓度和处理时间的增加杀灭效果增强。当中性电解水的有效氯浓度大于或等于50 mg/l，处理时间为10 min，即可将半数细胞感染量(TCID50)为106.0/0.1 ml 的猪蓝耳病毒完全杀灭，杀灭率达100%。

摘要： 猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)俗称蓝耳病毒，既可在同猪群间水平传播，也可垂直传播，且传染无季节性。伪狂犬病毒(PRV)具有感染动物种类多和致病性强的特点。两种病毒可致母猪繁殖障碍，引起仔猪急性致死，给养猪业带来严重危害。中性电解水(NEW)是稀食盐水或稀盐酸溶液在电场作用下电解而成的水溶液。其生产成本低，无腐蚀性，物理化学性质稳定，具有与强酸性电解水同等的瞬时高效杀菌特性。本文主要研究中性电解水对猪蓝耳病毒和伪狂犬病毒的杀灭效果，确定中性电解水杀灭此两种病毒的适宜技术指标。

摘要： [目的]对来自“猪高热综合症”爆发地的组织样品进行多种病毒的检测，确定引起“猪高热综合症”的致病病原及PRRSV的分子流行病学特征。rn [方法]利用(RT-)PCR对采集的样品进行PRRSV北美型和欧洲型、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪血凝性脑脊髓炎病毒(PHEV)、日本乙型脑炎病毒(JEV)以及瘟病毒的检测，对PRRSV阳性的进行ORF5的序列测定并分析。rn [结果]检测到16份PRRSV北美型阳性样品，PCV2阳性样品2份，其他病毒未检测均为阴性。PRRSV ORF5序列分析表明分离到的PRRSV株可分为2个群。rn [结论]rn 1)PRRSV与肆虐我国养猪业的“猪高热综合症”有直接关系；rn 2)2006年PRRSV流行株主要是以JX0612株为代表，但不同遗传特征的PRRSV也在流行。

摘要： [目的]对来自“猪高热综合症”爆发地的组织样品进行多种病毒的检测，确定引起“猪高热综合症”的致病病原及PRRSV的分子流行病学特征。rn [方法]利用(RT-)PCR对采集的样品进行PRRSV北美型和欧洲型、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪血凝性脑脊髓炎病毒(PHEV)、日本乙型脑炎病毒(JEV)以及瘟病毒的检测，对PRRSV阳性的进行ORF5的序列测定并分析。rn [结果]检测到16份PRRSV北美型阳性样品，PCV2阳性样品2份，其他病毒未检测均为阴性。PRRSV ORF5序列分析表明分离到的PRRSV株可分为2个群。rn [结论]rn 1)PRRSV与肆虐我国养猪业的“猪高热综合症”有直接关系；rn 2)2006年PRRSV流行株主要是以JX0612株为代表，但不同遗传特征的PRRSV也在流行。

摘要： 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体，所述的单克隆抗体3的的重链可变区序列如SEQ ID NO.2所示，轻链可变区序列如SEQ ID NO.3所示；所述的单克隆抗体8的的重链可变区序列如SEQ ID NO.4所示，轻链可变区序列如SEQ ID NO.5所示；所述的单克隆抗体3结合的抗原表位位于优化后的PRRSV GP5蛋白的aa34‑aa48位；所述的单克隆抗体8的抗原表位位于优化后的PRRSV GP5蛋白的aa96‑aa109位。本发明还公开了一种用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的试剂盒，所述试剂盒包括有效量的单克隆抗体3和单克隆抗体8以及配套的检测试剂。本发明制备的单克隆抗体具有良好的特异性和敏感性，适用于制备不同的猪繁殖与呼吸综合征病毒诊断试剂，如胶体金、ELISA、化学发光等检测试剂盒。

摘要： 本发明一方面公开了一种优化的PRRSV mRNA，所述的优化的PRRSV mRNA的序列如SEQ ID NO.1所示。所述的优化的PRRSV mRNA的序列由5’‑cap、5’‑UTR、PRRSV mRNA、3’‑UTR和3’‑聚腺苷酸序列组成；所述的5’‑UTR的序列如SEQ ID NO.2所示，所述的PRRSV mRNA的序列如SEQ ID NO.3所示，所述的3’‑UTR的序列如SEQ ID NO.4所示，所述的3’‑聚腺苷酸序列为101个A。再一方面，本发明还公开了一种繁殖与呼吸综合征病毒mRNA疫苗。本发明首次提出了一种针对猪繁殖与呼吸综合征病毒的优化的PRRSV mRNA，本发明的mRNA的免疫效果较现有的市场苗要好。由于本发明是mRNA疫苗，不存在培养病毒的过程，因此没有安全隐患，也不会造成免疫后猪场的PRRSV的阳性化，另外本发明的mRNA疫苗质量可控，容易规模化生产。

摘要： 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合症病毒‑猪流感病毒重构病毒体疫苗及其制备方法和用途。所述疫苗含有猪繁殖与呼吸综合症病毒‑猪流感病毒重构病毒体抗原和稳定佐剂复合物，所述猪繁殖与呼吸综合症病毒‑猪流感病毒重构病毒体是由猪繁殖与呼吸综合症病毒通过直接吸附或共价结合在猪流感病毒重构病毒体表面形成，其中，所述猪流感病毒重构病毒体是含有磷脂双分子层的微小囊泡，在磷脂双分子层表面结合有猪流感病毒血凝素和神经氨酸酶蛋白。本发明制备得到的疫苗具有安全、高效、使用方便、效期长等特点。通过滴鼻免疫即可达到降低及/或清除呼吸综合征病毒及/或猪流感病毒目的。

摘要： 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合症病毒的三重荧光RT‑PCR检测试剂及其制备方法与用途，设计合成了三套分别针对非洲猪瘟病毒CP530R基因、猪瘟病毒5’‑UTR基因和猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因的特异性引物及Taqman探针和阳性对照，并利用这三套引物及探针建立了一种快速简便、特异性强、灵敏度高的三重荧光RT‑PCR检测体系，可在3～4小时内从被检样本中快速、准确、特异、安全、简便地同时检出非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的核酸，可用于家猪及其相关样本中微量非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的核酸的同时检测。

摘要： 本发明目的在于公开一种猪圆环病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合症病毒三联病毒样颗粒疫苗及其制备方法。本发明所述的三联病毒样颗粒疫苗(Triple VLP疫苗)含有PCV-2的主要结构蛋白CAP蛋白、PPV VP2蛋白抗原表位、以及PRRSV Gp5蛋白抗原表位组成的VLP。经实验，该疫苗可以激发良好的双重的细胞及体液免疫应答。药效试验表明，经此形成的VLP抗原加入或不加佐剂，制备的注射剂型、滴鼻剂型、饮水剂型免疫不同动物群体后，可安全、有效的防治PCV-2、PPV、PRRSV感染，为不同种群的母猪、小猪、育肥猪安全、有效免疫防控PCV-2、PPV、PRRSV混合感染提供了理想的疫苗。

摘要： 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合症病毒‑猪流感病毒重构病毒体疫苗及其制备方法和用途。所述疫苗含有猪繁殖与呼吸综合症病毒‑猪流感病毒重构病毒体抗原和稳定佐剂复合物，所述猪繁殖与呼吸综合症病毒‑猪流感病毒重构病毒体是由猪繁殖与呼吸综合症病毒通过直接吸附或共价结合在猪流感病毒重构病毒体表面形成，其中，所述猪流感病毒重构病毒体是含有磷脂双分子层的微小囊泡，在磷脂双分子层表面结合有猪流感病毒血凝素和神经氨酸酶蛋白。本发明制备得到的疫苗具有安全、高效、使用方便、效期长等特点。通过滴鼻免疫即可达到降低及/或清除呼吸综合征病毒及/或猪流感病毒目的。

摘要： 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合症病毒的三重荧光RT-PCR检测试剂及其制备方法与用途，设计合成了三套分别针对非洲猪瘟病毒CP530R基因、猪瘟病毒5’-UTR基因和猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因的特异性引物及Taqman探针和阳性对照，并利用这三套引物及探针建立了一种快速简便、特异性强、灵敏度高的三重荧光RT-PCR检测体系，可在3～4小时内从被检样本中快速、准确、特异、安全、简便地同时检出非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的核酸，可用于家猪及其相关样本中微量非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的核酸的同时检测。

摘要： 本发明公开了一种尼帕病毒和猪繁殖与呼吸综合症病毒的二重荧光RT-PCR检测试剂及其制备方法与用途，设计合成了二套分别针对尼帕病毒M基因和猪繁殖与呼吸综合症病毒NSP2基因的特异性引物及Taqman探针和阳性对照，并利用这二套引物及探针建立了一种快速简便、特异性强、灵敏度高的二重荧光RT-PCR检测体系，可在3～4小时内从被检样本中快速、准确、特异、安全、简便地同时检出尼帕病毒和猪繁殖与呼吸综合症病毒的核酸，可用于同时检测猪及其相关样本中微量尼帕病毒和猪繁殖与呼吸综合症病毒的核酸。

摘要： 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合症病毒的二重荧光RT-PCR检测试剂及其制备方法与用途，设计合成了二套分别针对非洲猪瘟病毒CP530R基因和猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因的特异性引物及Taqman探针和阳性对照，并利用这二套引物及探针建立了一种快速简便、特异性强、灵敏度高的二重实时荧光定量RT-PCR检测体系，可在3～4小时内从被检样本中快速、准确、特异、安全、简便地同时检出非洲猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的核酸，可用于同时检测家猪及其相关样本中微量非洲猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒的核酸。

摘要： 本发明公开了一种抑制不同类型猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)感染的阻断剂，属于兽用生物制品技术领域。所述不同类型PRRSV感染的阻断剂是以内质网应激激活剂为二硫苏糖醇、衣霉素中的一种或二者的混合为活性成分。本发明在PRRSV感染诱导内质网应激的基础上，发现了内质网应激的激活剂二硫苏糖醇(DTT)、衣霉素(TU)及二者的联合应用能显著性的抑制高致病性PRRSV(HP‑PRRSV)、NADC30‑like与经典PRRSV(LP‑PRRSV)感染的阻断剂，可显著降低PRRSV感染，可开发成防治不同类型PRRSV感染的药物，从而为PRRS防治提供了一个全新的思路，扩大了研究范围，对于实际生产有着极为重要的意义。