猪圆环病毒Ⅱ型

摘要： [目的]探究山豆根多糖(SSP)对猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)感染RAW264.7细胞增殖活性及炎症相关因子的影响,揭示SSP对PCV2感染免疫细胞炎症相关因子的调控作用.[方法]PCV2体外感染RAW264.7细胞建立炎症模型,以不同浓度(25、50、100、200、400、800和1600 μg/mL)SSP进行培养处理,然后采用CCK-8和ELISA分别测定SSP对PCV2体外感染RAW264.7细胞增殖活性及炎症相关因子(IL-1β、IL-8和MCP-1)分泌水平和胞内环氧合酶-1(COX-1)活性的影响.[结果]与细胞对照组相比,SSP浓度≤400 μg/mL对RAW264.7细胞增殖活性无显著影响(P＞0.05),但SSP浓度达800和1600 μg/mL时RAW264.7细胞增殖活性极显著降低(P＜0.01,下同),且随培养时间的延长,细胞增殖活性呈先降低后升高的变化趋势,于培养48 h时达最低值.PCV2感染RAW264.7细胞后其增殖活性极显著降低,炎症相关因子IL-1β、IL-8和MCP-1分泌水平及胞内COX-1活性极显著升高;100～400 μg/mL SSP能极显著提高PCV2感染RAW264.7细胞增殖活性,且能有效降低RAW264.7细胞的IL-1β、IL-8和MCP-1分泌水平及胞内COX-1活性.具体表现为:与PCV2模型组相比,100μg/mL SSP能显著降低PCV2感染RAW264.7细胞的IL-1β和MCP-1分泌水平(P＜0.05,下同);200 μg/mL SSP能极显著降低PCV2感染RAW264.7细胞的MCP-1分泌水平,同时显著降低细胞IL-1β和IL-8的分泌水平及胞内COX-1活性;400μg/mL SSP能极显著降低PCV2感染RAW264.7细胞的IL-1β、IL-8和MCP-1分泌水平及胞内COX-1活性.[结论]SSP对RAW264.7细胞增殖活性无显著影响,也未表现出细胞毒性作用,且100～400 μg/mL SSP能极显著提高PCV2感染RAW264.7细胞增殖活性,并通过调节PCV2感染免疫细胞的炎症相关因子水平而发挥抗炎作用.

摘要： 【目的】探究山豆根多糖(SSP)对猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)感染RAW264.7细胞增殖活性及炎症相关因子的影响,揭示SSP对PCV2感染免疫细胞炎症相关因子的调控作用。【方法】PCV2体外感染RAW264.7细胞建立炎症模型,以不同浓度(25、50、100、200、400、800和1600μg/mL)SSP进行培养处理,然后采用CCK-8和ELISA分别测定SSP对PCV2体外感染RAW264.7细胞增殖活性及炎症相关因子(IL-1β、IL-8和MCP-1)分泌水平和胞内环氧合酶-1(COX-1)活性的影响。【结果】与细胞对照组相比,SSP浓度≤400μg/mL对RAW264.7细胞增殖活性无显著影响(P>0.05),但SSP浓度达800和1600μg/mL时RAW264.7细胞增殖活性极显著降低(P<0.01,下同),且随培养时间的延长,细胞增殖活性呈先降低后升高的变化趋势,于培养48 h时达最低值。PCV2感染RAW264.7细胞后其增殖活性极显著降低,炎症相关因子IL-1β、IL-8和MCP-1分泌水平及胞内COX-1活性极显著升高;100~400μg/mL SSP能极显著提高PCV2感染RAW264.7细胞增殖活性,且能有效降低RAW264.7细胞的IL-1β、IL-8和MCP-1分泌水平及胞内COX-1活性。具体表现为:与PCV2模型组相比,100μg/mL SSP能显著降低PCV2感染RAW264.7细胞的IL-1β和MCP-1分泌水平(P<0.05,下同);200μg/mL SSP能极显著降低PCV2感染RAW264.7细胞的MCP-1分泌水平,同时显著降低细胞IL-1β和IL-8的分泌水平及胞内COX-1活性;400μg/mL SSP能极显著降低PCV2感染RAW264.7细胞的IL-1β、IL-8和MCP-1分泌水平及胞内COX-1活性。【结论】SSP对RAW264.7细胞增殖活性无显著影响,也未表现出细胞毒性作用,且100~400μg/mL SSP能极显著提高PCV2感染RAW264.7细胞增殖活性,并通过调节PCV2感染免疫细胞的炎症相关因子水平而发挥抗炎作用。

摘要： 为了解吉林地区猪细环病毒(TTSuVs)与Ⅱ型猪圆环病毒(PCV2)混合感染情况,分析TTSuVs感染与仔猪多系统衰竭征(PMWS)的相关性.试验通过PCR技术对2019年收集到的吉林部分地区的10家规模化猪场130份血清样本进行检测;并应用本实验已建立的PCV2、TTSuVs实时荧光定量PCR检测方法,对PCV2阳性样品进行病毒载量的分析,区分PMWS病猪与PCV2亚临床感染猪,比较PMWS病猪与PCV2亚临床感染猪中TTSuVs的载量.结果显示:TTSuV1感染率为38.46％;TTSuV2感染率为57.69％;PCV2感染率为46.15％;TTSuV1与TTSuV2的混合感染率为31.54％;TTSuV1与PCV2的混合感染率为32.30％;TTSuV2与PCV2的混合感染率为44.62％;三种病毒的混合感染率为22.30％.且PMWS病猪血清中TTSuV2载量明显高于PCV2亚临床感染猪(P＜0.01).结果表明,TTSuV2载量与PMWS病的发生存在一定程度的相关性.

摘要： 试验旨在研究山豆根多糖(SSP)对猪肺泡巨噬细胞3D4/2感染猪圆环病毒Ⅱ型(Porcine circovirus virus Ⅱ type,PCV2)后炎性因子水平的影响.本试验设空白对照组、PCV2感染组、脂多糖(LPS)对照组和3种浓度(100、200和400 μg/mL)的山豆根多糖组,采用PCV2体外感染猪肺泡巨噬细胞,在培养液中分别加入100、200和400 μg/mL山豆根多糖培养24 h后收集样品,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞分泌单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-8(IL-8)水平和胞内环氧合酶-1(COX-1)、环氧合酶-2(COX-2)的酶活性,实时荧光定量PCR和Western blotting法分别检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、COX-2基因及其蛋白表达.结果显示,PCV2感染猪肺泡巨噬细胞后极显著提高了 MCP-1、IL-8分泌水平和细胞内COX-1、COX-2 酶活性(P＜0.01),iNOS、COX-2 mRNA和蛋白表达水平均极显著提升(P＜0.01);100、200、400 μg/mL山豆根多糖处理后,3D4/2细胞MCP-1、IL-8分泌水平和细胞内COX-1、COX-2酶活性均显著或极显著降低(P＜0.05;P＜0.01),其中400 μg/mL山豆根多糖处理后效果最显著,细胞内iNOS、COX-2基因mRNA表达水平同样显著或极显著降低(P＜0.05;P＜0.01);100、200、400 μg/mL山豆根多糖处理后,显著或极显著抑制了由PCV2诱导的iNOS蛋白表达量的增加(P＜0.05;P＜0.01),经200,400 μg/mL山豆根多糖处理后显著抑制COX-2蛋白表达量的增加,400 μg/mL山豆根多糖处理效果最佳.综上所述,山豆根多糖可在一定程度上抑制PCV2感染所引起的促炎症因子mRNA表达的升高及其蛋白的表达,起到一定的缓解炎症的作用.

摘要： 将猪圆环病毒Ⅱ型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染性克隆分别转染到猪肾上皮细胞(PK15)和猪小肠上皮细胞(J2)中获得拯救病毒PCV2,比较病毒在2个细胞系中的复制动力学差异.设计特异性引物,通过PCR法和Over-lap PCR技术获得含1.1个拷贝PCV2基因组的DNA片段,克隆于pSP72载体获得PCV2感染性克隆.用PCV2感染性克隆分别转染PK15和J2细胞,Real-time PCR和间接免疫荧光试验(IFA)检测结果表明:拯救病毒可在PK15和J2细胞系中分别连续盲传10代以上,且PK15培养的PCV2基因组的拷贝数极显著高于J2培养的(P＜0.01),提示获得的PCV2拯救病毒在PK15的增殖性能优于J2,为进一步探索PCV2基因组的功能及PCV2相关发病机制奠定了基础.

摘要： 湖南某猪场发生了一起以仔猪消瘦并大量死亡为特征的传染病,为查明病因,对4头发病仔猪进行检测。根据荧光定量PCR检测结果,结合临床症状和病理剖检变化,以及细菌分离培养结果,确诊该猪场发病原因为猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪圆环病毒Ⅱ型混合感染。

摘要： 湖南某猪场发生了一起以仔猪消瘦并大量死亡为特征的传染病,为查明病因,对4头发病仔猪进行检测.根据荧光定量PCR检测结果,结合临床症状和病理剖检变化,以及细菌分离培养结果,确诊该猪场发病原因为猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪圆环病毒Ⅱ型混合感染.

摘要： 猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)衣壳蛋白(Capsid protein,Cap)是病毒主要的抗原蛋白,在病毒感染和宿主免疫应答中起重要作用.为了制备抗PCV2b Cap蛋白的高效价多克隆抗体,利用大肠杆菌表达系统对不含核定位信号肽的PCV2b Cap进行了原核表达,获得了可溶性重组蛋白.将纯化后的重组蛋白免疫新西兰白兔,制备抗血清,并进一步以辛酸-硫酸铵沉淀法提纯IgG.ELISA检测显示所制备抗体效价可达到1:107,表明抗体具有较高效价.应用该抗体对人工感染PCV2b的PK-15细胞、小鼠组织进行了免疫印迹、间接免疫荧光和免疫组织化学检测,结果表明该抗体在多种检测方法中均能与目的抗原发生特异性结合.该研究制备的高效价抗体为PCV2b的临床检测及科学研究提供了候选工具.

摘要： 断奶仔猪多系统衰竭综合征是猪常见传染病,尤其是在规模化养猪场出现的概率比较大。8~12周龄的仔猪易发生该病,治疗后存活的仔猪发育明显受到限制,变成僵猪,同时会对仔猪的生长产生较大影响。该病的病原是猪圆环病毒Ⅱ型,猪圆环病毒Ⅱ型会对断奶猪的免疫系统产生较为直接的影响,使病猪免疫受到抑制,机体能力下降,易引发其他疾病。

摘要： 本研究根据猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Rep基因的保守序列,设计一套特异性环介导等温扩增引物,经过各种条件的优化,建立了PCV2的可视化LAMP检测方法.所建立的方法敏感性高达1fg;无需昂贵仪器,只要在常规水浴锅63°C50min就可以通过肉眼观察颜色直接判定;特异性强,与其他病原无交叉反应.结果表明本研究建立的PCV2LAMP方法简便、特异、快速、灵敏,适合养殖场或县级及以下基层兽医用于猪圆环病毒Ⅱ型感染的快速检测与诊断.

摘要： 本研究根据猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Rep基因的保守序列,设计一套特异性环介导等温扩增引物,经过各种条件的优化,建立了PCV2的可视化LAMP检测方法.所建立的方法敏感性高达1fg;无需昂贵仪器,只要在常规水浴锅63°C50min就可以通过肉眼观察颜色直接判定;特异性强,与其他病原无交叉反应.结果表明本研究建立的PCV2LAMP方法简便、特异、快速、灵敏,适合养殖场或县级及以下基层兽医用于猪圆环病毒Ⅱ型感染的快速检测与诊断.

摘要： 本研究根据猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Rep基因的保守序列,设计一套特异性环介导等温扩增引物,经过各种条件的优化,建立了PCV2的可视化LAMP检测方法.所建立的方法敏感性高达1fg;无需昂贵仪器,只要在常规水浴锅63°C50min就可以通过肉眼观察颜色直接判定;特异性强,与其他病原无交叉反应.结果表明本研究建立的PCV2LAMP方法简便、特异、快速、灵敏,适合养殖场或县级及以下基层兽医用于猪圆环病毒Ⅱ型感染的快速检测与诊断.

摘要： 本研究根据猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Rep基因的保守序列,设计一套特异性环介导等温扩增引物,经过各种条件的优化,建立了PCV2的可视化LAMP检测方法.所建立的方法敏感性高达1fg;无需昂贵仪器,只要在常规水浴锅63°C50min就可以通过肉眼观察颜色直接判定;特异性强,与其他病原无交叉反应.结果表明本研究建立的PCV2LAMP方法简便、特异、快速、灵敏,适合养殖场或县级及以下基层兽医用于猪圆环病毒Ⅱ型感染的快速检测与诊断.

摘要： 为了解广西地区猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的毒株的遗传变异情况,本研究运用PCR技术对来源于不同地区、不同猪场且PCV2检测为阳性的样品进行全基因组序列的扩增和测序,共检测出34份阳性病料,共获得17株PCV2全基因序列,用Editseq软件进行拼接,全基因序列均为1767bp.本研究参考NCBI上发表的22株PCV2毒株和1株PCV1毒株的全基因序列,用MEGA5.0软件进行全基因进化树分析,在PCV2基因群中明显分为PCV2a、PCV2b、PCV2c三个基因型,其中16株毒株位于PCV2b上,和我国当前主要流行的毒株相同,说明PCV2b仍是广西主要流行的毒株.另外一株位于PCV2a上.所获的17株PCV2全基因核苷酸的同源性达94.4％～99.9％,与参考序列之间的同源性为94.2％～99.8％;17株PCV2ORF2核苷酸之间的同源性为89.3％～99.9％,与参考序列之间的同源性在88.0％～99.9％之间.17株PCV2ORF2推导的氨基酸之间的同源性在85.5％～99.6％之间,ORF2序列和参考毒株的ORF2推导的氨基酸同源性在83.8％～99.6％之间.说明广西区内流行的PCV2与国内外毒株间有较高的同源性.

摘要： 为了解广西地区猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的毒株的遗传变异情况,本研究运用PCR技术对来源于不同地区、不同猪场且PCV2检测为阳性的样品进行全基因组序列的扩增和测序,共检测出34份阳性病料,共获得17株PCV2全基因序列,用Editseq软件进行拼接,全基因序列均为1767bp.本研究参考NCBI上发表的22株PCV2毒株和1株PCV1毒株的全基因序列,用MEGA5.0软件进行全基因进化树分析,在PCV2基因群中明显分为PCV2a、PCV2b、PCV2c三个基因型,其中16株毒株位于PCV2b上,和我国当前主要流行的毒株相同,说明PCV2b仍是广西主要流行的毒株.另外一株位于PCV2a上.所获的17株PCV2全基因核苷酸的同源性达94.4％～99.9％,与参考序列之间的同源性为94.2％～99.8％;17株PCV2ORF2核苷酸之间的同源性为89.3％～99.9％,与参考序列之间的同源性在88.0％～99.9％之间.17株PCV2ORF2推导的氨基酸之间的同源性在85.5％～99.6％之间,ORF2序列和参考毒株的ORF2推导的氨基酸同源性在83.8％～99.6％之间.说明广西区内流行的PCV2与国内外毒株间有较高的同源性.

摘要： 为了解广西地区猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的毒株的遗传变异情况,本研究运用PCR技术对来源于不同地区、不同猪场且PCV2检测为阳性的样品进行全基因组序列的扩增和测序,共检测出34份阳性病料,共获得17株PCV2全基因序列,用Editseq软件进行拼接,全基因序列均为1767bp.本研究参考NCBI上发表的22株PCV2毒株和1株PCV1毒株的全基因序列,用MEGA5.0软件进行全基因进化树分析,在PCV2基因群中明显分为PCV2a、PCV2b、PCV2c三个基因型,其中16株毒株位于PCV2b上,和我国当前主要流行的毒株相同,说明PCV2b仍是广西主要流行的毒株.另外一株位于PCV2a上.所获的17株PCV2全基因核苷酸的同源性达94.4％～99.9％,与参考序列之间的同源性为94.2％～99.8％;17株PCV2ORF2核苷酸之间的同源性为89.3％～99.9％,与参考序列之间的同源性在88.0％～99.9％之间.17株PCV2ORF2推导的氨基酸之间的同源性在85.5％～99.6％之间,ORF2序列和参考毒株的ORF2推导的氨基酸同源性在83.8％～99.6％之间.说明广西区内流行的PCV2与国内外毒株间有较高的同源性.

摘要： 为了解广西地区猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的毒株的遗传变异情况,本研究运用PCR技术对来源于不同地区、不同猪场且PCV2检测为阳性的样品进行全基因组序列的扩增和测序,共检测出34份阳性病料,共获得17株PCV2全基因序列,用Editseq软件进行拼接,全基因序列均为1767bp.本研究参考NCBI上发表的22株PCV2毒株和1株PCV1毒株的全基因序列,用MEGA5.0软件进行全基因进化树分析,在PCV2基因群中明显分为PCV2a、PCV2b、PCV2c三个基因型,其中16株毒株位于PCV2b上,和我国当前主要流行的毒株相同,说明PCV2b仍是广西主要流行的毒株.另外一株位于PCV2a上.所获的17株PCV2全基因核苷酸的同源性达94.4％～99.9％,与参考序列之间的同源性为94.2％～99.8％;17株PCV2ORF2核苷酸之间的同源性为89.3％～99.9％,与参考序列之间的同源性在88.0％～99.9％之间.17株PCV2ORF2推导的氨基酸之间的同源性在85.5％～99.6％之间,ORF2序列和参考毒株的ORF2推导的氨基酸同源性在83.8％～99.6％之间.说明广西区内流行的PCV2与国内外毒株间有较高的同源性.

摘要： 本研究根据猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Rep基因的保守序列,设计一套特异性环介导等温扩增引物,经过各种条件的优化,建立了PCV2的可视化LAMP检测方法.所建立的方法敏感性高达1fg;无需昂贵仪器,只要在常规水浴锅63°C50min就可以通过肉眼观察颜色直接判定;特异性强,与其他病原无交叉反应.结果表明本研究建立的PCV2LAMP方法简便、特异、快速、灵敏,适合养殖场或县级及以下基层兽医用于猪圆环病毒Ⅱ型感染的快速检测与诊断.

摘要： 本研究根据猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Rep基因的保守序列,设计一套特异性环介导等温扩增引物,经过各种条件的优化,建立了PCV2的可视化LAMP检测方法.所建立的方法敏感性高达1fg;无需昂贵仪器,只要在常规水浴锅63°C50min就可以通过肉眼观察颜色直接判定;特异性强,与其他病原无交叉反应.结果表明本研究建立的PCV2LAMP方法简便、特异、快速、灵敏,适合养殖场或县级及以下基层兽医用于猪圆环病毒Ⅱ型感染的快速检测与诊断.

摘要： 本发明公开了一种可同时快速检测猪圆环病毒2型和3型病毒的实时荧光RAA引物和探针、包括所述引物和探针的试剂盒及用途。本发明方法敏感性为102拷贝/反应，每个反应可同时最低检测出102拷贝的猪圆环病毒2型和102拷贝的猪圆环病毒3型病毒。本发明能快捷、高效、灵敏的同时检测猪圆环病毒2型和猪圆环病毒3型病毒，为两者的混合感染的快速鉴别检测提供了有效技术手段。

摘要： 本发明涉及一种含猪圆环病毒3型、猪圆环病毒2型抗原的免疫原性组合物，其中，该免疫原性组合物包括免疫量的猪圆环病毒3型抗原、免疫量的猪圆环病毒2型new基因亚型抗原以及药学上可接受的载体。该免疫原性组合物具有良好的免疫原性，一次免疫即能完全保护猪圆环病毒3型、猪圆环病毒2型的混合感染。

摘要： 本发明涉及猪圆环病毒4型特异的抗原在制备检测猪圆环病毒4型抗体的试剂盒中的应用及试剂盒，属于免疫检测技术领域。本发明提供了猪圆环病毒4型特异的抗原在制备检测猪圆环病毒4型抗体的试剂盒中的应用，所述猪圆环病毒4型特异的抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述应用制备得到的试剂盒检测特异性好，通量高，具有重要的临床使用价值，且检测快速，精准，能够实现猪场中PCV4的流行病学检测，也可以用于疫苗免疫后猪血清中PCV4抗体的评价。

摘要： 本发明涉及免疫检测技术领域，公开了一种猪圆环病毒II型抗原以及检测猪圆环病毒II型抗体的胶体金免疫层析试纸条。本发明所述抗原序列如SEQ ID NO:1‑3任意一项所示。本发明提供了一种新型的猪圆环病毒II型抗原，以其自组装的病毒样颗粒作为猪圆环病毒II型抗体的检测抗原时，具备极高的特异性、重复性和准确性，能够应用在相关的免疫层析检测产品中，结果直观可肉眼判断，可快速、特异地检出血清中猪圆环病毒II型抗体，具有较高的实用价值，便于基层推广使用。

摘要： 本发明提供一种猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型和猪圆环病毒3型的多重PCR检测引物组及试剂盒，所述引物组包括三对引物。本发明还提供猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型和猪圆环病毒3型的多重PCR检测试剂盒及该试剂盒的使用方法。应用本发明所述的引物组通过多重PCR检测对猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型和猪圆环病毒3型进行检测，检测结果皆为阳性，其他猪相关病毒的检测结果为阴性，检测的特异性强。应用本发明的引物组进行多重PCR检测的灵敏度高，可同时用于猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型和猪圆环病毒3型的检测。

摘要： 本发明公开了一种可同时快速检测猪圆环病毒2型和3型病毒的实时荧光RAA引物和探针、包括所述引物和探针的试剂盒及用途。本发明方法敏感性为102拷贝/反应，每个反应可同时最低检测出102拷贝的猪圆环病毒2型和102拷贝的猪圆环病毒3型病毒。本发明能快捷、高效、灵敏的同时检测猪圆环病毒2型和猪圆环病毒3型病毒，为两者的混合感染的快速鉴别检测提供了有效技术手段。

摘要： 本发明提供了一种快速区分猪圆环病毒1型、2b型和嵌合型猪圆环病毒C1‑233株的引物及其应用，属于生物技术领域。本发明提供的引物能够确保PCR扩增的猪圆环病毒1型毒株基因组不含Ssp I酶切位点，扩增的猪圆环病毒2b型0233株基因组含有两个Ssp I酶切位点，扩增的嵌合型猪圆环病毒C1‑233株的基因组含有一个Ssp I酶切位点。进而根据酶切后的琼脂糖凝胶电泳条带便能快速、准确区分混合样品中猪圆环病毒1型、猪圆环病毒2b型0233株和嵌合型猪圆环病毒C1‑233株，在嵌合型猪圆环病毒活疫苗(C1‑233株)研制、生产过程中，为快速、精确区分疫苗株与其亲本株提供了一种简便方法，克服了普通PCR+基因测序无法区分混合样品中疫苗株与亲本株的缺陷，具有重要实用价值。

摘要： 本发明公开了一种脱除胚胎中猪Ⅱ型圆环病毒的培养液及其制备方法和脱除胚胎中猪Ⅱ型圆环病毒的方法，属于畜牧养殖技术领域，本发明目的是为了有效的脱除自然状态下侵染到胚胎内部的猪Ⅱ型圆环病毒。本发明培养液是由金刚烷胺、硒代蛋氨酸和PZM‑3组成，制备方法是向PZM‑3培养液中添加金刚烷胺和硒代蛋氨酸后混匀，经过过滤除菌，平衡处理。脱除胚胎中猪Ⅱ型圆环病毒的方法是用上述培养液对猪胚胎进行培养。本发明可以降低囊胚内的猪Ⅱ型圆环病毒核酸的拷贝数，在不影响囊胚的发育前提下，不仅能抑制发育中的胚胎内病毒核酸复制，同时还能抑制病毒衣壳蛋白的合成。

摘要： 本发明通过建立一种猪圆环病毒2型和猪圆环病毒4型双重实时荧光定量PCR引物组、探针及检测方法，该发明属于病毒分子生物学检测领域。该方法可快速检测猪圆环病毒2型和猪圆环病毒4型。该方法简单快速，对单个样本检测时间为60分钟，其灵敏度可达10拷贝数/ul，针对较大的样本量可做到同时检测，具有良好的灵敏性、重复性、特异性以及稳定性，可实现对猪圆环病毒2型和猪圆环病毒4型快速准确检测的目的。

摘要： 本发明提供了一种猪圆环病毒4型ELISA抗体检测试剂盒、应用及检测猪圆环病毒4型抗体的方法，涉及生物技术领域，本发明提供的猪圆环病毒4型ELISA抗原检测试剂盒，包括包被有猪圆环病毒4型Cap蛋白的酶标板，本发明使用圆环病毒4型Cap蛋白作为抗原建立ELISA抗体检测试剂盒，Cap蛋白作为圆环病毒保守蛋白具有良好的抗原性，其能够特异地结合血清样品中的圆环病毒4型抗体，从而保证本发明提供的试剂盒对圆环病毒4型具有很强的特异性及灵敏度。