灰葡萄孢

摘要： 【背景】灰葡萄孢(Botrytis cinerea)引起的灰霉病是危害番茄(Solanum lycopersicum)的重要病害之一,防治不及时可造成30%—40%减产。目前生产上多以化学防治为主,但存在农产品安全及环境污染的风险。N-酰基乙醇胺(NAE)是植物体内天然存在的一类脂质生物活性化合物,其在哺乳动物中具有多种免疫功能,但其在植物免疫中的作用和机制尚不清楚。【目的】探讨N-酰基乙醇胺在诱导番茄对灰葡萄孢防御中的作用,为研发番茄灰霉病绿色防控技术提供依据。【方法】将灰葡萄孢分别接种在含有硬脂酰乙醇胺(NAE 18:0)、亚油酸乙醇胺(NAE 18:2)、廿二碳五烯酸乙醇胺(NAE 22:5)的培养基上,观察灰葡萄孢的生长情况。在此基础上,以番茄‘Moneymaker’植株为材料,硬脂酰乙醇胺、亚油酸乙醇胺、廿二碳五烯酸乙醇胺外源处理番茄叶片后接种灰葡萄孢,统计病情指数,测定荧光参数。采用qRT-PCR技术明确亚油酸乙酰胺处理后番茄叶片灰葡萄孢Actin的相对表达量,进一步测定番茄叶片中主要抗病基因PI I、PR-1、NPR1、Nr、ACO1、PYR1a等的相对表达量及茉莉酸(jasmonic acid,JA)、水杨酸(salicylic acid,SA)、乙烯(ethylene,ETH)、脱落酸(abscisic acid,ABA)、生长素(indoleacetic acid,IAA)含量。并以乙烯信号转导突变体植株never ripe(nr)及对照植株Pearson(PB)为材料,在外源亚油酸乙酰胺处理后接种灰葡萄孢,测定番茄叶片叶绿素荧光参数和灰葡萄孢Actin的相对表达量。【结果】体外培养试验结果表明灰葡萄孢生长并不受外源N-酰基乙醇胺的影响,外源施用N-酰基乙醇胺能显著提高番茄植株对灰霉病的抗性,缓解由灰葡萄孢侵染导致的番茄叶片光系统II实际光化学效率(ΦPSII)的下降。3种N-酰基乙醇胺中,亚油酸乙醇胺施用后番茄叶片灰霉病病情指数下降最为明显,灰葡萄孢Actin的相对表达量下调60%,其诱导灰霉病抗性效果最佳。番茄植株接种灰葡萄孢后抗性基因PI I、PR-1、NPR1、Nr、ACO1的表达水平均有不同程度上调。外源亚油酸乙醇胺处理使得番茄响应灰葡萄孢接种后PI I、Nr、ACO1的表达进一步增强,其中乙烯合成基因ACO1的表达水平最高。番茄植株接种灰葡萄孢后叶片水杨酸、茉莉酸、生长素和乙烯含量增加,但外源亚油酸乙醇胺处理并接种灰葡萄孢后只有乙烯含量显著增加。进一步研究发现,番茄乙烯突变体nr植株中,外源亚油酸乙醇胺对灰葡萄孢的抗性诱导作用显著受到抑制。【结论】外源施用亚油酸乙醇胺能够提高番茄内源光合效率和抗病基因的表达及内源激素乙烯的含量,增强番茄植株对灰霉病的抗性,推测其诱导抗性作用可能与乙烯信号路径相关。

摘要： 橄榄果渣中生物活性成分丰富。本文主要研究橄榄果渣提取物成分及其对灰葡萄孢的抑菌性能。首先以橄榄果渣为原料,采用加热回流法,分别以H_(2)O、50%乙醇、70%乙醇和90%乙醇为提取剂,得到四种提取物并采用HPLC和GC-MS对提取物进行成分分析。其次测定了提取物的总酚含量、抗氧化性和对灰葡萄孢的抑菌性能。研究表明,90%乙醇提取物的酚类含量较高,抗氧化水平优良,并且对灰葡萄孢有明显的抑制作用。该研究为橄榄果渣活性成分在抑菌性能方面的研究提供了一定的理论依据。

摘要： 据《Scientia Horticulturae》的一篇研究报道(https://doi.org/10.1016/j.scienta.2022.111075),来自意大利乌迪内大学农业、食品、环境和动物科学系的研究人员研究了有机精油作为解决苹果采后病害的替代方案。燕麦镰刀菌(Fusarium avenaceum)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、扩展青霉(Penicillium expansum)和Neofabraea vagabunda是导致苹果采后灰霉病、青霉病及苹果牛眼果腐病等病害的病原体。本研究的目的是评估有机精油(百里香、薰衣草、迷迭香)在离体及生物体内对苹果采后病原菌的影响。

摘要： 为了鉴定引起浙贝母Fritillaria thunbergii Miq.灰霉病的病原真菌,于2015年-2019年收集浙贝母灰霉病样品,采用常规组织分离法在PDA培养基上分离纯化获得10株葡萄孢属Botrytis真菌。进一步以内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)、RNA聚合酶亚基Ⅱ(the second largest subunit of the nuclear RNA polymerase enzymeⅡ,RPB2)、热激蛋白60(heat shock protein 60,HSP60)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase,G3PDH)为DNA条形码,用特异性引物进行PCR扩增并测序,运用CodonCode Aligner拼接序列及BLAST分析,这10个菌株序列相同,为同一菌株,在GenBank中进行同源性比对,用MEGA 10.1构建系统发育树,确定此菌株与灰葡萄孢Botrytis cinerea相应序列的一致性为100%。盆栽接种法检测表明此菌株可引起浙贝母灰霉病。据此认为浙贝母灰霉病的病原真菌是灰葡萄孢而非普遍认为的椭圆葡萄孢Botrytis elliptica。

摘要： 该研究采用水蒸气蒸馏法和有机试剂浸提法提取温州特早熟蜜橘橘皮精油,利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析橘皮精油组成成分。以从福州周边果园收集草莓病果分离所得灰葡萄孢为研究对象,研究两种精油抑菌性能。结果显示:蒸馏油共鉴定出39种成分,醛类6种,烯萜类20种,醇类9种,酯类2种,酮类1种,有机酸1种;浸提法精油共鉴定出25种成分,烯萜类20种,醇类3种,烷烃类2种。柠檬烯为精油主要成分,水蒸气蒸馏法含量为82.37%,浸提法含量为85.25%。其次为γ-松油烯(7.78%,6.08%)、β-月桂烯(2.56%,2.06%)、α-蒎烯(1.35%,1.04%)。两种精油对灰葡萄孢最低抑菌体积分数分别为2.5%和5%。体外抑菌实验表明,精油能够通过对灰葡萄孢的菌丝、生长量、孢子萌发率、细胞透过性,诱导细胞死亡。草莓抑菌实验表明柑橘精油能够抑制灰葡萄孢在草莓果实上的生长,减缓果实的腐烂进程。其中,蒸馏油优于浸提油的抑菌效果。

摘要： 灰葡萄孢是引起作物灰霉病的病原菌,分生孢子是其传播的主要载体。本文采用代谢技术分析了灰葡萄孢对Biolog FF板碳源的利用及其产孢情况,并测定了在多菌灵、丙环唑、嘧霉胺、异菌脲和咪鲜胺5种杀菌剂胁迫下灰葡萄孢产孢所需碳源种类。结果表明:糖类、氨基酸类等92种碳源均能被灰葡萄孢代谢,其中,杏仁苷、L-阿拉伯糖等35种碳源能促进其分生孢子的形成;吐温80、D-阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等57种碳源能被其代谢,但不能促进其分生孢子形成。用多菌灵1 mg/L、咪鲜胺5 mg/L或丙环唑1和10 mg/L处理,均可减少灰葡萄孢产孢所需碳源种类;而用嘧霉胺0.08和1 mg/L、异菌脲0.1和5 mg/L处理,对灰葡萄孢产孢所需碳源种类均无明显影响。相关研究结果揭示了在杀菌剂胁迫下灰葡萄产孢所需碳源种类,可为灰霉病化学防控药剂的选择提供参考。

摘要： 灰霉病是日光温室彩椒冬季的主要病害,对彩椒灰霉病菌生长发育环境进行调控,通过调控温度、湿度等灰霉病菌生长的主要影响因子,配合适当的化学防控,可抑制灰霉病的发展和为害,实现彩椒灰霉病的绿色防控。彩椒灰霉病的病原菌是灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pers.ex Fr.),属真菌子囊菌门锤舌菌纲柔膜菌目核盘菌科孢盘菌属。适宜发病温度2~31°C。

摘要： 为明确灰葡萄孢对氟唑菌酰羟胺不同敏感型菌株的生物学特性差异,将9个不同敏感型菌株在无药PDA平板上继代培养10代后,测定其对氟唑菌酰羟胺的敏感性。采用菌丝生长速率法分别在PDA平板和离体叶片上测定了其菌丝生长速率、产孢量、孢子萌发率和致病性,以及其对温度、pH值和葡萄糖的敏感性,并对其编码琥珀酸脱氢酶的SdhA、SdhB、SdhC和SdhD 4个亚基基因进行了克隆与测序。结果显示:从田间获得的2个低抗菌株、2个中抗菌株和2个高抗菌株对氟唑菌酰羟胺的敏感性变异指数在0.60~1.15之间,而通过室内药剂驯化获得的高抗菌株BLH5F对氟唑菌酰羟胺的敏感性变异指数为0.23;除低抗菌株WP8的菌丝生长速率显著低于2个敏感菌株,以及中抗菌株WP6和高抗菌株WPE9的产孢量显著低于2个敏感菌株外,其余各抗性菌株在菌丝生长速率、产孢量、孢子萌发率和致病性方面均无显著差异。整体而言,7个抗性菌株在对温度、pH值和葡萄糖的敏感性方面与敏感菌株无显著差异。基因克隆及测序结果表明,室内药剂驯化获得的高抗菌株BLH5F SdhB基因的272位由组氨酸变为了精氨酸(H272R),田间获得的低抗、中抗和高抗各2个菌株均为SdhB基因的225位由脯氨酸变为了亮氨酸(P225L)。综合分析表明,灰葡萄孢对氟唑菌酰羟胺不同敏感型菌株具有相似的适合度。因此,推测在药剂的选择压下,抗氟唑菌酰羟胺的灰葡萄孢菌株在田间容易形成优势种群。

摘要： 为探究腐霉利和咯菌腈混用对黄瓜灰霉病病原菌灰葡萄孢的联合毒力,进而通过减少用药量及施药后残留动态分析,提升黄瓜中这两种农药的风险防控水平。采用菌丝生长速率法,测得腐霉利和咯菌腈对灰霉病菌菌丝生长的有效抑制中浓度(EC50)分别为0.069 mg/L和0.103 mg/L;而将两种农药以质量比1∶1混用时,EC_(50)值为0.016 mg/L,增效系数(synergistic ratio,SR)达到5.0,表现为强增效作用。腐霉利和咯菌腈单独处理3 d后的灰霉病菌菌丝经电镜扫描观察,分别表现为菌丝干瘪和胞内物质溢出;而经两种农药以质量比1∶1混合处理后,灰霉病菌同时出现了菌丝干瘪和胞内物质溢出现象,混用对菌丝的损伤符合叠加增强特征。为进一步分析腐霉利和咯菌腈混配施用后的动态残留情况,对可同时检测这两种农药残留的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法进行了优化。所用方法下,腐霉利和咯菌腈的添加回收率分别为100%~102%和94%~96%,相对标准偏差(R S D)为1.7%~5.3%和2.8%~3.4%,定量限(LOQ)为0.01 mg/kg,符合残留检测要求。两种农药以质量比1∶1混配用于田间试验,施药21 d后在黄瓜上的最终残留量比单独使用腐霉利和咯菌腈分别降低了59%和86%;混配施药后腐霉利和咯菌腈的消解半衰期分别从5.38 d和6.93 d缩短至4.39 d和4.33 d。研究表明,腐霉利和咯菌腈混用切实增强了对黄瓜灰霉病菌的联合毒力,为农药合理减量增效应用提供了依据,同时还可有效降低黄瓜中的农药残留风险。

摘要： 为了探究灰葡萄孢致病基因BcPDR1与病菌G蛋白α亚基基因之间的关系,利用qRT-PCR技术分析BcPDR1基因突变对Gα亚基基因BcBCG2和BcBCG3表达的影响以及BcBCG2、BcBCG3基因突变对BcPDR1基因表达的影响;在敲除突变体ΔBcpdr1的基础上,构建BcBCG2、BcBCG3基因过表达菌株ΔBcpdr1/BcBCG2-OE、ΔBcpdr1/BcBCG3-OE,对过表达菌株的表型和致病力进行分析。结果发现,BcPDR1基因的缺失突变体中BcBCG2、BcBCG3基因的表达水平显著升高,BcBCG2、BcBCG3基因沉默突变体中的BcPDR1基因的表达水平显著降低;BcBCG2、BcBCG3基因的过表达菌株的菌落形态、菌丝形态、生长速率、产孢量和致病力均与野生型BC22菌株基本一致,而与ΔBcpdr1突变体存在显著差异。结果表明,灰葡萄孢BcPDR1与Gα亚基基因BcBCG2、BcBCG3之间密切相关,BcPDR1负调控BcBCG2、BcBCG3基因的表达,BcBCG2、BcBCG3正调控BcPDR1基因的表达。研究结果为阐明灰葡萄孢致病基因BcPDR1调控病菌生长发育和致病力的机制奠定了基础。

摘要： 实验旨在获得适于"人工贵腐葡萄酒"酿造的灰葡萄孢菌株.本研究采集感染灰霉菌的植物组织,经分离纯化获得灰葡萄孢(Botrytis cinerea)类似菌,在形态学观察的基础上,对菌株rDNA-ITS序列及RAPD扩增片段进行分析,确定其真菌分类地位.实验筛选获得3株灰葡萄孢菌株,为下一步菌株糖苷酶活性分析和"人工贵腐"作用评价奠定了基础.

摘要： 为了明确啶酰菌胺与嘧菌酯不同配比对灰葡萄孢的协同作用,采用黄瓜子叶喷雾法测定了啶酰菌胺、嘧菌酯及其不同配比对灰葡萄孢的毒力,以Wadley公式进行评价,并通过田间试验验证其对灰霉病的防效.结果表明,啶酰菌胺与嘧菌酯以7∶1、5∶1、3∶1、1∶1、1∶3、1∶5和1∶7进行混配均表现出增效作用,当二者的比例为1∶1时,增效作用最明显,增效系数为4.50;在田间药效试验中,在增效组合(1∶1)对番茄灰霉病表现出良好的防治效果.增效组合在200g(a.i.)/hm2的剂量下,对番茄灰霉病的防效为84.14％,与其单剂50％啶酰菌胺WG360g(a.i.)/hm2和250g/L嘧菌酯SC225g(a.i.)/hm2对番茄灰霉病的防治效果没有显著差异.啶酰菌胺与嘧菌酯以1∶1进行桶混,可以在田间推广使用.

摘要： 灰葡萄孢引起植物灰霉病，寄主达200多种植物，造成严重的经济损失。一般认为该菌的致病因子包括细胞壁降解酶、毒素及激素等。本文从分子水平上探究灰葡萄孢的致病性及其机理，从而为制定持久控制灰霉病的策略提供理论依据和实践基础。以灰葡萄孢菌株RosaBC-3为材料，采用农杆菌介导转化技术获得了1000多个插入突变体，采用离体油菜叶片接种技术筛选出了9个致病力增强的突变体和12个致病力完全丧失的突变体。分析其生物学特性，并用PCR方法对其T-DNA侧翼序列进行克隆，将获得的序列信息与NCBI及Broad Institute B.cinerea BO5.10 database中的序列比对进行分析。结果发现:突变体AT15的生长速度稍慢于出发菌株RosaBC-3;分生孢子产量与出发菌株无显著差异(P>0.05)，在1%的葡萄糖溶液中经8h培养后萌发率显著低于出发菌株;菌丝块在洋葱表皮接种12h后，形成的侵染结构数量与出发菌株无显著差异(P>0.05)。该菌株中T-DNA插入在B.cinerea BC1G-00493基因前17bp处，该基因全长594bp，编码198氨基酸的假定蛋白，含有一个内含子，分析后发现该假定蛋白没有己知功能的功能域。突变体AT239的生长速度、侵染结构数量与出发菌株均无显著差异(P>0.05);不产生分生孢子;产酸的平板试验表明其产酸量高于出发菌株;菌丝块在洋葱表皮接种12h后，洋葱表皮可以发病，发病率为19%。该菌株中T-DNA插入在BC1G-03701基因前653bp处，该基因全长1548bp，编码433aa的保守假定蛋白，含有2个内含子，该假定蛋白含有DUF2414 super family domain，该结构域在真菌和哺乳动物中都是保守的，但是功能未知。这两个基因在B.cinerea致病中的功能未见研究报道，需要通过敲除与互补等试验进一步验证其功能。

摘要： 本试验以黄顶菊为生测对象,对灰葡萄孢的最佳产毒条件进行摸索,并对其具有除草活性的组分进行分离纯化.通过对不同培养基、不同萃取溶剂进行筛选,确定了小米培养基作为毒素培养的最佳培养基,丙酮为毒素提取的最佳溶剂;采用薄层层析法(TLC)对毒素除草活性组分的分离纯化,获得了2个对黄顶菊的防除效果较强的毒素组分.为进一步开发防除黄顶菊、并对环境无为害的生物源除草剂奠定基础.

摘要： 从合肥、蚌埠、长丰、和县等市、县的番茄、辣椒、草莓、葡萄等发病寄主上分离鉴定获得23个灰葡萄孢菌株,采用菌丝块创伤接种法,分别测定了上述不同寄主来源的灰葡萄孢对草莓果实和叶片的致病力.结果表明,所有供试菌株接种草莓果实和叶片后均引起发病,但不同菌株所致病斑的平均直径有显著差异,并在不同草莓品种上表现也有差异,提示灰葡萄孢菌株间对草莓果实和叶片的致病力存在明显的分化.按照在草莓果实和叶片所致病斑的平均直径大小可将供试菌株划分为致病力较强、致病力中等和致病力较弱3种类型.总体来说,来自草莓和番茄的菌株对草莓果实和叶片的致病力较强,来自辣椒的菌株对草莓果实和叶片的致病力较弱,但来自相同寄主的菌株间致病力也存在差异,菌株致病力差异与菌株地域来源无明显相关.

摘要： 由灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pers.)侵染引起的番茄灰霉病是当前番茄生产上重要病害,尤以设施栽培条件下发生较重,一般引起产量损失20％～30％。灰葡萄孢的寄主很广,已经报道过的寄主至少有235种,能为害多种粮食作物、经济作物、蔬菜、果树和观赏植物。随着高效农业的发展,温室中蔬菜、花卉、果树轮作、间作日渐频繁,使得同种作物间、不同种作物间交互感染成为可能。为了明确来自其他寄主植物的灰葡萄孢菌株能否侵染番茄,不同寄主来源的菌株对番茄的致病力是否存在差异,从而为生产上包括番茄灰霉病在内的灰葡萄孢所致植物灰霉病的综合治理提供参考依据,作者对不同寄主来源的灰霉菌株对番茄的致病力及其分化进行了研究。

摘要： 本文采用诱捕分离法从土壤中分离到28株放线菌,以大丽轮枝孢(Verticilliumdahliae)和灰葡萄孢(Botrytiscinerea)作为靶标菌,通过皿内拮抗试验从中筛选出效果明显的SW6,SW9,SW16,SW204株生防菌株,其发酵原液对靶标菌的抑制效果明显高于发酵滤液和菌丝初提液.其中,菌株SW20的发酵液对2种靶标菌均有较强的抑制作用.抗药性测定结果表明,4株生防菌株对链霉素最为敏感,对供试杀菌剂抗性较强.

摘要： 目的：为了获得具有高效杀菌活性的化合物,探索合成了结构新颖的2-烷基酰胺基-2-取代苯基乙磺酰胺类化合物.方法：以N-(2-三氟甲基-4-氯苯基)-2-(3,5-二氟苯基)-2-氧代乙磺酰胺为先导,经还原胺化,与烷基酰氯对接获得目标产物,测试其对灰葡萄孢的离体和活体杀菌活性,并利用3D-QSAR模型进行构效关系分析.结果：合成了23个结构新颖的2-烷基酰胺基-2-取代苯基乙磺酰胺,确证其构效关系,发现了高活性化合物V-17(EC50值为0.66 μg/mL).结论：该类化合物具有很好的杀菌效果,有进一步开发的价值.

摘要： 对引起烟草漂浮育苗中"茎腐病"的病原菌进行了分离鉴定以及致病性测定,确定病原菌为灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pers),为烟草灰霉病在烟草漂浮育苗中的一种特殊表现.由于烟草漂浮育苗处在湿度高,苗问密度大,通风透光条件差的环境中,加上育苗过程中剪叶造成伤口给病菌的感染提供了条件,造成了该病在漂浮育苗中的发生与流行.

摘要： 黄瓜灰霉病(BotrytiscinereaPers.)是由灰葡萄孢引起的植物病害,造成的产量损失通常在20﹪以上,严重时可达50﹪.目前化学杀菌剂的使用仍是该病的主要的防治方法.化学农药以有机化合物为主,大量使用不仅会使病菌产生抗病性,而且还会导致农药残留,污染环境,危害人类健康.因此寻找新的植病防治方法日益成为人们关注的热点.硅是自然界最丰富的元素之一.大量试验表明硅可以影响植物的生长发育和环境胁迫能力.目前人们主要是将硅制备成硅酸盐,配成营养液加入土壤中.硅在植物体内自主装成生物矿化的纳米SiO2,从而降低植物真菌病害的发生.这样的硅酸盐作为肥料在欧洲和美洲市场上已有大量销售,但是将SiO2水溶胶作为杀菌剂的报道还很少.本研究将硅制备成SiO2水溶胶后喷洒在植物表面防治黄瓜灰霉病,取得了较好的效果。

摘要： 本发明公开了一株灰葡萄孢及其应用。本发明的灰葡萄孢Jsz001，其保藏编号为：CCTCC NO：M 2020757。本发明通过致病力强的灰葡萄孢Jsz001菌丝块无伤接种葡萄果实，采用改良的保湿培养法在培养箱中进行培养，模拟葡萄果实的自然发病环境，快速诱导葡萄果实发病，根据果实的发病程度来鉴定不同品种对灰霉病的抗性。利用灰葡萄孢Jsz001来进行鉴定的方法操作简单，重复性好，且不受外界气候环境条件的影响，可在短时间内对葡萄果实进行灰霉病抗性鉴定，对于早期大量快速筛选抗病材料和指导葡萄抗病育种具有重要的应用价值。

摘要： 本发明属于农业微生物技术领域，具体公开了一株无致病力灰葡萄孢菌QT5‑19及应用，本发明提供的灰葡萄孢为灰葡萄孢（Botrytis cinerea）QT5‑19，保藏编号为：CCTCC NO：M 2018610，该菌株在PDA上的培养物及在麦粒培养基上的发酵物可产生挥发性物质，且该挥发性物质具有抑制植物灰霉病发生的能力。本发明提供的灰葡萄孢QT5‑19菌株几乎不能在本生烟草叶片上引起病斑，在黄瓜、油菜、草莓、苹果、葡萄及番茄上不能致病或致病力很弱，具有很好的生物安全性，适于大规模生产。

摘要： 本发明公开了一种可拮抗灰葡萄孢菌的葡萄汁有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)及其应用，具体涉及微生物培养及应用领域。所述方法包括酵母菌株的分离鉴定及保藏；样本菌悬液的配制；不同梯度的稀释液配制及培养；筛选不同菌落颜色和形态的菌株保藏；经过多重筛选后获得对灰葡萄孢菌具有良好拮抗作用葡萄汁有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)LY3。体外筛选实验所示LY3对灰葡萄孢的体外抑制率达到100％。通过抑制霉菌生长最小浓度测定和产硫化氢等机制的探索，进一步证明该菌在体内环境也能够保持良好的抑菌性。

摘要： 本发明提供了一种农杆菌介导葡萄灰葡萄孢遗传转化体系的构建方法，属于遗传转化体系的构建技术领域。在含乙酰丁香酮的共培养培养基中平铺一张支撑介质，将含外源基因的农杆菌菌液与灰葡萄孢的分生孢子液混合涂布至支撑介质上，经共培养，将支撑介质转移至含潮霉素B和头孢噻肟钠的PDA培养基中进行筛选培养得到阳性转化子。本发明建立并优化了农杆菌介导的灰葡萄孢遗传转化体系，通过分析分生孢子浓度、乙酰丁香酮浓度、共培养温度和时间以及潮霉素B以及头孢噻肟钠的浓度，能获得较高遗传转化效率。同时所述方法能获得稳定遗传潮霉素抗性的转化子，得到高比例的单拷贝插入转化子，为今后开展葡萄灰葡萄孢基因功能解析提供基础。

摘要： 本发明公开了一种贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)及其抑制灰葡萄孢菌的方法及其应用。该贝莱斯芽孢杆菌JWYB9保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC 24000。本发明通过16S rDNA菌种鉴定来确定JWYB9为贝莱斯芽孢杆菌，在密闭的两分格培养皿中利用JWYB9产生的挥发性有机物进行熏蒸来抑制灰葡萄孢菌，并将该方法应用到采后水果上，达到防止或减少水果腐败变质、延长保质期的目的。优点在于安全性高、方便快捷、绿色环保。该发明在采后活性包装环节的应用潜力巨大。

摘要： 本发明公开了一种拟康氏木霉(Trichoderma koningiopsis)C5‑9，保藏编号为CGMCCNo.40015，由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏日期为2021年12月22日。所述的拟康氏木霉C5‑9对灰葡萄孢菌有直接的拮抗作用，所述的拟康氏木霉C5‑9可应用于防治由灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)侵染引起的灰霉病病害。

摘要： 本发明公开了一种识别灰葡萄孢菌的单克隆抗体及其杂交瘤细胞株，所述识别灰葡萄孢菌的单克隆抗体，由保藏编号为：CCTCC No：C2021115的杂交瘤细胞株分泌产生；所述杂交瘤细胞株命名为BcA4，于2021年5月13日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为：CCTCC No：C2021115。该单克隆抗体被用于由灰葡萄孢菌侵染引发的动植物病害的鉴定、动态监测以及灰葡萄孢菌的生物学研究，通过BaL b/c小鼠腹腔注射该细胞株，即可获得大量的该单克隆抗体，与多克隆抗体相比，具有灵敏度高，纯度高，专一性强，重复性好等优点。

摘要： 本发明属于植物增长技术领域，尤其为一种用于抑制灰葡萄孢菌的植物增长剂，按照重量配比包括以下组分，乙烯利5‑20份，正丁醇15‑22份，杂醇油6‑9份，乳酸2‑5份，尿素6‑11份，氯化胆碱10‑15份，硫酸钾2‑5份，硫酸锌3‑7份，乙二胺四乙酸15‑22份，异菌脲6‑13份；本发明中的植物增长剂具有促进生产效果好且对灰霉病具有有效防治的特点。

摘要： 本发明公开了一株灰葡萄孢及其应用。本发明的灰葡萄孢Jsz001，其保藏编号为：CCTCC NO：M 2020757。本发明通过致病力强的灰葡萄孢Jsz001菌丝块无伤接种葡萄果实，采用改良的保湿培养法在培养箱中进行培养，模拟葡萄果实的自然发病环境，快速诱导葡萄果实发病，根据果实的发病程度来鉴定不同品种对灰霉病的抗性。利用灰葡萄孢Jsz001来进行鉴定的方法操作简单，重复性好，且不受外界气候环境条件的影响，可在短时间内对葡萄果实进行灰霉病抗性鉴定，对于早期大量快速筛选抗病材料和指导葡萄抗病育种具有重要的应用价值。

摘要： 本发明公开了一种灰霉病病原菌灰葡萄孢菌间接ELISA检测试剂盒。本发明试剂盒能精准检测出农作物组织研磨液中的灰葡萄孢菌抗原，并且样品处理简单，操作方便快捷，检测数量大，灵敏度高，专一性强，重复性好。其中试剂盒检测用到的灰葡萄孢菌单克隆抗体，由保藏编号为：CCTCC No：C2021116的杂交瘤细胞株分泌产生。本发明对灰葡萄孢菌侵染引发的植物病害的鉴定、动态监测以及灰葡萄孢菌的生物学研究提供了更高效的方法。