摘要:
目的:建立头孢喹诺在大鼠组织中的溶剂萃取-高效液相色谱HPLC检测方法. 方法:将组织样品用匀浆机在10000rpm条件下匀浆3min,称取匀浆液0.5g,加入乙腈∶水(95∶5)1.0mL,采用多管涡旋振荡器,在2500rpm条件下震荡2min,超声波萃取15min后,在12000rpm、4°C条件下离心10min,取上清液于5mL离心管,重复提取三遍,合并上清液,在40°C条件下氮气吹干至近干,用1mL0.1%甲酸水∶乙腈(90∶10)复溶,过0.22μm滤器后注入高效液相色谱仪检测.采用InertSustain C18色谱柱(250×4.6mm,5μm),称取一水合高氯酸钠3.45g溶于1000m L水中,加磷酸12mL,用三乙胺调至pH3.6,将此溶液与乙腈按90∶10的比例混合作为流动相,柱温30°C,流速为1mL/min,在紫外波长269nm处检测.将头孢喹诺以特定浓度分别添加到空白组织中,获得标准曲线、最低检测限、回收率、精密度. 结果:测得心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏组织中头孢喹诺回收率均在81%以上,平均回收率分别为83.57%、87.42%、86.29%、83.97%、82.80%.日内相对标准偏差在1.63%~6.42%之间,日间相对标准偏差在1.25%~6.42%之间.该方法的最低检测限为3μg/g,添加浓度在10~500μg/g范围内时,线性关系良好,R2=0.9998. 结论:该方法简易快捷、合适可靠,能够满足头孢喹诺在大鼠组织含量检测的要求.对头孢喹诺的临床应用和抗菌活性研究较多,药动学及组织分布研究较少,为此建立的大鼠组织硫酸头孢喹诺的检测方法,为进一步临床应用研究提供技术支持.