死亡受体

摘要： 目的探讨敲低死亡受体5(DR5)表达对重组变构人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rmhTRAIL)联合5氟尿嘧啶(5-FU)抑制人结直肠癌(CRC)HCT116细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养人CRC HCT116细胞,用DR5 shRNA质粒转染,构建敲低DR5的CRC HCT116/shRNA细胞系(HCT116/KD);MTS法检测rmhTRAIL、5-FU及两者联用对HCT116/KD细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting法检测细胞凋亡信号通路中凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、PARP和PARP裂解片段表达。结果成功构建敲低DR5的CRC HCT116/KD细胞系;MTS及流式细胞术结果显示,敲低DR5表达后,rmhTRAIL单药及与5-FU联用对CRC HCT116细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用减弱;Western blotting结果显示,rmhTRAIL单药及其联合5-FU作用于HCT116/KD细胞,Caspase-3、Caspase-9和PARP表达未见明显下降(P均>0.05)。结论敲低DR5表达后rmhTRAIL单药及其联合5-FU干预HCT116细胞,细胞增殖受抑减弱,凋亡减少。

摘要： 为探讨耐热直接溶血毒素(Thermostabile direct hemolysin,TDH)在体内和体外对小鼠黑色素瘤细胞B16的抑制作用,本研究通过MTT法、克隆形成试验、凋亡试验、Caspase-8和Caspase-3的活性试验、线粒体膜电位的检测以及体内C57BL/6小鼠(Mus musculus)荷瘤实验,比较TDH作用于不同细胞的半抑制浓度(IC50),评价TDH对小鼠黑色素瘤细胞B16的体内外抑制作用。结果发现:人结肠上皮细胞NCM460、人正常肝细胞LO2、人肝癌细胞SMMC-7721和小鼠黑色素瘤细胞B16在TDH处理24 h之后,细胞的半抑制质量浓度IC50分别为151、118、54和48μg/mL,正常细胞的IC50高出癌细胞近2~3倍。当质量浓度低于20μg/mL时,TDH以剂量依赖性的方式抑制B16细胞的克隆形成,6 mg/kg TDH在移植瘤模型中显著抑制体内肿瘤的生长(P<0.001)。流式细胞术和荧光试剂盒检测表明:20μg/mL的TDH能诱导19.4%的B16细胞发生早期凋亡,并激活Caspase-8和Caspase-3,但不影响线粒体膜电位。TDH具有体内外的抗肿瘤活性,可能通过细胞表面的死亡受体介导的凋亡信号通路引起凋亡,从而发挥抗肿瘤作用。

摘要： 目的:研究芹菜素(API)对人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,并探讨API诱导胃癌细胞凋亡的机制。方法:设置对照组及不同浓度(20、40、60、80μmol/L)的API组,分别作用SGC-7901细胞12、24和48 h后,CCK-8法检测细胞增殖率。选择作用24 h为后续处理时间点,采用流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测TRAIL通路中死亡受体DR4、DR5蛋白的表达水平;采用RNAi技术,用DR4 siRNA和DR5 siRNA分别沉默TRAIL通路中死亡受体DR4和DR5表达,设置对照组、API组、DR4 siRNA+API组、DR5 siRNA+API组,作用细胞24 h后,流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果:细胞增殖检测结果提示API对人胃癌SGC-7901细胞的增殖率具有明显抑制作用,呈现浓度依赖性(r12 h=-0.99,r24 h=-0.88,r48 h=-0.89,均为P<0.05);流式细胞术检测结果提示细胞凋亡率随着API作用浓度的增加而升高(r=0.96,P<0.05);Western blot检测发现API作用可上调细胞中DR4、DR5蛋白的表达水平;DR4 siRNA和DR5 siRNA分别沉默DR4和DR5的表达后,与API组相比,DR4 siRNA+API组和DR5 siRNA+API组的细胞凋亡率均降低(P<0.05)。结论:芹菜素具有抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用,其机制可能与TRAIL通路中死亡受体DR4、DR5蛋白的表达被激活有关。

摘要： 目的:研究芹菜素(API)对人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,并探讨API诱导胃癌细胞凋亡的机制.方法:设置对照组及不同浓度(20、40、60、80μmol/L)的API组,分别作用SGC-7901细胞12、24和48 h后,CCK-8法检测细胞增殖率.选择作用24 h为后续处理时间点,采用流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测TRAIL通路中死亡受体DR4、DR5蛋白的表达水平;采用RNAi技术,用DR4 siRNA和DR5 siRNA分别沉默TRAIL通路中死亡受体DR4和DR5表达,设置对照组、API组、DR4 siRNA+API组、DR5 siRNA+API组,作用细胞24 h后,流式细胞术检测各组细胞凋亡率.结果:细胞增殖检测结果提示API对人胃癌SGC-7901细胞的增殖率具有明显抑制作用,呈现浓度依赖性(r12 h=-0.99,r24 h=-0.88,r48 h=-0.89,均为P<0.05);流式细胞术检测结果提示细胞凋亡率随着API作用浓度的增加而升高(r=0.96,P<0.05);Western blot检测发现API作用可上调细胞中DR4、DR5蛋白的表达水平;DR4 siRNA和DR5 siRNA分别沉默DR4和DR5的表达后,与API组相比,DR4 siRNA+API组和DR5 siRNA+API组的细胞凋亡率均降低(P<0.05).结论:芹菜素具有抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用,其机制可能与TRAIL通路中死亡受体DR4、DR5蛋白的表达被激活有关.

摘要： 间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一种具有自我更新及多向分化潜能的干细胞.MSCs具有对多种肿瘤组织归巢及定向迁移的特性,可以将其作为治疗肿瘤药物的载体,用来治疗无法通过手术去除的肿瘤;同时,MSCs自身参与重塑肿瘤微环境,影响其侵袭、增殖和转移等生物学行为,并且具有抗炎及损伤组织修复的能力.肿瘤坏死因子相关凋亡配体(TRAIL/Apo2L)作为诱导细胞凋亡的肿瘤坏死因子家族成员之一,可通过结合肿瘤细胞表面两个特异性死亡受体(DR4、DR5),特异激活肿瘤细胞凋亡.TRAIL基因修饰的MSCs(TRAIL-MSCs)可定位至肿瘤组织并抑制原发肿瘤及转移瘤的增殖、促进其凋亡,有望用于多种实体肿瘤及血液肿瘤的靶向治疗.综述了 TRAIL-MSCs治疗肿瘤的研究进展,并讨论了TRAIL-MSCs联合放化疗对肿瘤的治疗效果,为该疗法在肿瘤治疗领域的应用提供理论依据.

摘要： 目的 通过检测帕金森病(PD)患者外周血中各淋巴细胞亚型的百分率差异,探讨神经免疫机制与PD发生的相关性.方法 应用荧光染色法测定新疆医科大学第一附属医院(以下简称"我院")2014年6月—2017年7月收治的原发性PD患者(病例组,83例)及同期我院健康体检者(对照组,100名)外周血中CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD56+、Fas、Tregs细胞百分率差异,并进一步分析病例组患者是否服用药物复方左旋多巴、Hoehn-Yahr(HY)分级差异与各淋巴细胞亚群变化相关性.结果 病例组CD3+、CD4+、CD8+低于对照组,CD56+细胞、Fas和Tregs阳性亚群高于对照组,差异有高度统计学意义(P<0.01).服药组Fas和Tregs细胞亚群低于未服用组,差异有统计学意义(P<0.05).相关性分析显示,Fas和Tregs阳性细胞数与HY分级呈正相关(r=0.620、0.761,P<0.05).结论 PD患者外周血各淋巴细胞亚群存在比例紊乱,其中Fas及Tregs细胞比例与PD患者病情严重程度有关,对于未口服复方左旋多巴治疗的PD患者该比例会进一步升高.

摘要： 心肌细胞凋亡(apoptosis)是机体内外某些因素刺激特定信号的传导通路,触发细胞中预先存在的"自杀"机制,继而正常死亡的过程,而过度凋亡可造成心肌不可逆损伤,是急性心脏病微观水平的主要表现.目前,中医方药主要通过减少钙超载、干预线粒体通路、死亡受体通路,以及内质网通路等4个方面来调节心肌细胞凋亡.中医方药可限制Ca2+从细胞外过度流入细胞内,防止Ca2+泵被激活和细胞负荷过多,从而抑制钙超载导致细胞崩解;通过抑制线粒体通透性转变孔过度开放,稳定线粒体结构,并能清除过多活性氧保护细胞内膜,减少细胞色素C的释放,从而有效保护心肌细胞;抑制死亡受体被激活,祛除趋化因子,恢复细胞内稳态,有效阻止Caspases被激活而诱发的级联反应,减少细胞非正常凋亡;另外可清除对心肌细胞产生刺激因子,恢复心肌细胞正常生长环境,维护细胞超微结构的稳定性,从而避免内质网应激导致的细胞凋亡.

摘要： 目的:探讨维生素E琥珀酸酯(VES)通过酸性神经磷脂酶(ASmase)-神经酰胺(Cer)诱导人胃癌细胞凋亡过程中对死亡受体信号通路以及氧化应激反应的影响.方法:将人胃癌SGC-7901细胞分为对照组、ASMase抑制剂地昔帕明(DES)组(12.5μmol/L)、VES处理组(20μg/mL)以及VES+DES组(12.5μmol/L的DES预处理细胞2 h后加入20μg/mL的VES).在不同时间点用ELISA法测定ASMase活性,免疫荧光法检测Cer表达情况;处理24 h时用DAPI染色检测细胞凋亡率,Western blot法检测死亡受体信号通路蛋白Fas、死亡受体5(DR5)、caspase-8、caspase-9和PARP的蛋白表达水平,流式细胞术检测活性氧簇(ROS)水平.结果:VES处理细胞后ASMase活性在1.5 h时开始增加,同时Cer开始在细胞膜上的聚集增加,两者的表达水平分别在3、6 h时达到高峰,24 h的细胞凋亡率为(41.00±1.00)％;抑制ASMase活性显著降低了VES处理组细胞的凋亡率,Fas、DR5、c-caspase-8、c-caspase-9、c-PARP蛋白表达水平和氧化应激水平(P均<0.01).结论:ASMase/Cer可能是VES通过死亡受体信号通路及氧化应激反应促进胃癌细胞发生凋亡的上游因子.

摘要： 细胞凋亡在病毒感染导致病理变化中起到重要的作用.这篇文章研究了鸭瘟病毒(DPV,duck plague virus)导致鸭胚成纤维细胞发生细胞凋亡的分子机制.DPV感染鸭胚成纤维细胞(DEF,duck embryo fibroblast)后会出现明显的病理变化,用DAPI染细胞核会发现明显的细胞核碎裂、染色质浓缩等凋亡形态特征的变化.同时发现DPV感染细胞时能够激活caspase-3/7、caspase-8、caspase-9.Caspase-8在死亡受体通路起关键作用,caspase-9在线粒体通路中起关键作用,因此DPV能通过死亡受体通路及线粒体通路诱导DEF凋亡.另外DPV感染细胞后还能引起线粒体膜电位降低.用qRT-PCR检测死亡受体及线粒体通路相关因子(caspase3、caspase-8、caspase-9、Bcl-2、Bcl-xl、Bak、Bid、Apaf-1、Fas、FasL、cyt-c)mRNA都有明显的上调.这是第一次证明鸭瘟病毒感染细胞后能够通过死亡受体通路及线粒体通路诱导细胞凋亡.

摘要： 本研究以矽肺患者为研究对象，收集其大容量肺灌洗回收液中AM，采用酶联免疫吸附实验方法，检测AM培养上清中可溶性DR及六种炎性细胞因子，采用Western blot检测AMs裂解液中膜结合型DR，通过光镜、电镜、共聚焦显微镜来观察其形态特征，采用DMA ladder, TUNEL染色来测定凋亡的各种生化特征，同时用流式细胞仪定量分析凋亡程度，探讨死亡受体及巨噬细胞炎症因子表达水平、细胞凋亡程度与矽肺发病的关系。

摘要： 细胞的凋亡分为外在途径——死亡受体途径和内在途径——线粒体途径。其中,大部分的癌症细胞的凋亡是通过死亡受体途径。现就死亡受体及其有关机制的研究进展进行综述。

摘要： 细胞的凋亡分为外在途经-死亡受体途径和内在途径-线粒体途径。其中，大部分的癌症细胞的凋亡是通过死亡受体途径。本文就死亡受体及其有关机制的研究进展做一综述。

摘要： 死亡受体是一组Ⅰ型膜表面受体,属于肿瘤坏死因子受体超家族成员,包括Fas,TNF-R1,DR3,TRAIL-R1/DR4,TRAIL-R2/DR5,DR6.它们的特征:胞外区含有2-6个约由40个氨基酸残基组成的富含半胱氨酸的结构域,是形成同源或异源三聚体,并与相京戏配体结合的特征区域;胞内区含死亡域.在相应配体激发下,形成三聚体,从而通过细胞内的死亡域招募含死亡域的接头分子,如FADD或TRADD等,依次引起caspase串联的激活和最终诱导细胞凋亡.

摘要： 近年来的研究已鉴定了19个以上的肿瘤坏死因子超家族成员(tumor necrosis factor superfamily,TNFSF)和29个以上相应的受体超家族成员(TNF receptor superfamily,INFRSF).当配体与其相应的膜受体结合后,可通过受体介导的信号传导引起广泛的生物学效应.TNFRSF中TNFR1、Fas、DR3、DR4、DR5和DR6称之为死亡受体(death receptor,DR),主要介导细胞凋亡活性.依据蛋白质密码理论,编写了相应的计算机筛选软件,从DR相应的配体分子中获得了具有模拟或拮抗活性的多肽片段,可用于小分子多肽药物的研发.

摘要： 本文重点分析了TLR4与单核细胞的凋亡。细胞的凋亡是受自身多基因调控和众多细胞因子及其他多种因素调节的一个复杂的过程。但目前己确定的细胞凋亡最终途径主要包括以下两条：死亡受体介导途径和线粒体介导途径，且两种途径存在交叉影响。单核细胞作为机体主要的炎症细胞可以通过凋亡的机制调控和减轻炎症损伤，构成炎症反应的主要收敛机制之一，也是一把双刃剑，过早凋亡会使细胞生命期限缩短，生物学功能减弱，对病原的杀伤力不足，过迟的凋亡又会使细胞生命期限延长，生物学功能增强，而带来自身组织的损伤。TLR4作为病原识别受体对单核细胞的功能起着决定性的作用，在炎症的发生、发展及转归中发挥重要的调控功能。通过对单核细胞和TLRa的研究，期望找到一个有效的控制炎症的途径，在单核细胞对机体的防御和损伤之间找到一个平衡点，在有效抵抗外来入侵的同时更好地保护机体。

摘要： TNF 超家族(TNFSF)及其受体超家族(TNFRSF)成员在多细胞动物的大量生理功能中起着关键作用。迄今，已经鉴别了19个TNFSF与29个TNFRSF成员。根据它们胞内序列和信号转导特点，TIWRSF成员可以分成3大类。事实上，机体内的情况非常复杂，在每一类的受体信号转导过程中还有很多调控因索。本文仅对死亡受休相关的研究作简要的综述。

摘要： 本文研究了云芝糖肽(PSP)对Molt-4细胞诱导凋亡的作用,并分析了Fas及TRAIL蛋白在凋亡中的表达变化.方法:观察PSP处理后Molt-4细胞的形态变化,并采用流式细胞仪及免疫印迹检测细胞表面Fas及TRAIL蛋白的表达、细胞凋亡率、sub-G1峰及Caspase-8凋亡酶的激活.结果:100,400μg/mlPSP处理Molt-4细胞48h后,细胞出现明显凋亡特征,细胞凋亡百分率增加,细胞周期中出现了Sub-G1,并呈剂量依赖,同时伴随Caspase-8酶原被激活和Fas抗原的表达量增加,TRAIL蛋白的表达量无明显变化.结论:PSP对Molt-4细胞有诱导凋亡的作用,其作用可能与Fas表达水平上调有关,与TRAIL表达水平无关.:

摘要： 本文研究了云芝糖肽(PSP)对Molt-4细胞诱导凋亡的作用,并分析了Fas及TRAIL蛋白在凋亡中的表达变化.方法:观察PSP处理后Molt-4细胞的形态变化,并采用流式细胞仪及免疫印迹检测细胞表面Fas及TRAIL蛋白的表达、细胞凋亡率、sub-G1峰及Caspase-8凋亡酶的激活.结果:100,400μg/mlPSP处理Molt-4细胞48h后,细胞出现明显凋亡特征,细胞凋亡百分率增加,细胞周期中出现了Sub-G1,并呈剂量依赖,同时伴随Caspase-8酶原被激活和Fas抗原的表达量增加,TRAIL蛋白的表达量无明显变化.结论:PSP对Molt-4细胞有诱导凋亡的作用,其作用可能与Fas表达水平上调有关,与TRAIL表达水平无关.:

摘要： 本发明涉及放射性药物化学技术领域，具体涉及一种程序性细胞死亡蛋白受体‑1靶向的分子探针及其制备方和用途，本发明提供的一种程序性细胞死亡蛋白受体‑1靶向的分子探针，该小分子探针对靶标PD‑L1具有中等亲和力，可以选择性在PD‑L1阳性肿瘤部位摄取，能够较好区分阴阳性肿瘤，对PD‑L1高表达的肿瘤部位有响应，可以用于开发PD‑L1小分子PET显像剂。

摘要： 本发明提供了双特异性抗体，其包含结合于EGFR的第一结合结构域和结合于PD‑1的第二结合结构域，其中，所述抗体或其抗原结合片段是选自由单链抗体(scFv)、双抗体和上述形式的寡聚物所组成的组中的形式。本发明还提供了本发明抗体的氨基酸序列、克隆或表达载体、宿主细胞、以及用于表达或分离抗体的方法。还提供了包含本发明抗体的治疗组合物。本发明还提供了用双特异性抗体治疗癌症和其他疾病的方法。

摘要： 本发明涉及结合死亡受体4和/或死亡受体5的单克隆抗体，包括所述抗体的药物组合物，以及对患者给予所述药物组合物的治疗方法。

摘要： 本发明公开了一种识别人程序性死亡受体1的DNA适配体及方法和应用，属于生化检测领域。利用Cell‑SELEX技术进行适配体的筛选，将构建的pDisplay/PD‑1N表面展示表达质粒转染L02细胞并用G418进行抗性筛选，获得稳定表达PD‑1N的细胞系L02‑PD‑1N。再以L02‑PD‑1N细胞为靶标进行筛选，利用寡核苷酸文库与该细胞系进行反复的多轮孵育‑洗脱‑扩增，以不表达PD‑1N的细胞进行反筛，最终通过鉴定富集的ssDNA亚文库，测序及亲和力比较，获得能高亲和性结合PD‑1N的ssDNA，即核酸适配体。本发明提供识别人PD‑1N的DNA适配体，以该适配体为核心，可利用生物素及荧光标记等用于识别细胞或组织中T淋巴细胞表面的PD‑1分子，具有用于结核及肿瘤等诊断和治疗潜在应用前景。

摘要： 已经开发了用于治疗胰腺炎的死亡受体5(DR5)激动剂组合物和方法。这些组合物包括肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)、其类似物和抗DR5激动性抗体。在某些实施例中，TRAIL类似物和抗死亡受体5激动性抗体对胰腺具有镇痛作用和疾病缓解作用。

摘要： 本公开涉及用于治疗和/或预防自身免疫纤维化，如系统性硬化症(SSc；硬皮病)的方法和组合物。该方法包括向有需要的受试者给予有效量的死亡受体激动剂。适合的死亡受体激动剂包括肿瘤坏死因子(TNF)相关细胞凋亡诱导配体(TRAIL)、激动死亡受体抗体以及其变异体、类似物或衍生物。该死亡受体激动剂的该给予阻断成纤维细胞或促纤维发生细胞活化和/或减少或耗尽肌成纤维细胞，进而减少或预防系统性硬化症。

摘要： 本发明涉及抗人程序性死亡受体1抗体及其制备方法和用途。具体而言，本发明涉及利用天然抗体库筛选平台筛选获得的一株新型抗人程序性死亡受体1抗体，其能够特异性识别人PD‑1分子，阻断PD‑1/PD‑L1以及PD‑1/PD‑L2相互作用，提高免疫应答水平。

摘要： 本发明涉及结合死亡受体4和/或死亡受体5的单克隆抗体，包括所述抗体的药物组合物，以及对患者给予所述药物组合物的治疗方法。

摘要： 本发明提供了一种靶向TRAIL受体的嵌合受体配体，包含基于TRAIL的死亡受体结合结构域、跨膜区及胞内信号结构域。本发明还提供了一种靶向TRAIL受体的嵌合受体配体修饰的T细胞，能够特异地与肿瘤细胞表面的TRAIL受体(DR4、DR5)结合，进而对肿瘤细胞产生特异的杀伤作用。本发明还涉及所述靶向TRAIL受体的嵌合受体配体及其免疫效应细胞在制备抗肿瘤免疫治疗药物中的应用。

摘要： 本发明涉及一种结合程序性死亡受体1(PD‑1)的抗体及其用途。具体而言，结合程序性死亡受体1(PD‑1)的抗体，或其抗原结合片段，包括：(a)包含SEQ ID NO:5的重链CDR1、包含SEQ ID NO:6的重链CDR2和包含SEQ ID NO:7的重链CDR3；以及(b)包含SEQ ID NO:8的轻链CDR1、包含SEQ ID NO:9的轻链CDR2和包含SEQ ID NO:10的轻链CDR3。