柱前衍生

摘要： 本文研究建立一种多功能净化柱-高效液相色谱法测定菜籽油中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)含量的方法。试样经PriboFast^(■)多功能净化柱净化,三氟乙酸柱前衍生后采用高效液相色谱法测定,以保留时间定性,外标法定量。结果表明,四种黄曲霉毒素在0.03~40.0μg/L线性范围内关系良好,相关系数(r^(2))均大于0.998,检测限均为0.03μg/kg,定量限均为0.1μg/kg,当添加浓度为0.1和0.5μg/kg,回收率为79.6%~89.0%,测定结果RSD(n=6)在0.8%~2.4%之间。

摘要： 为了测定纺织品中的羟脯氨酸含量,建立了柱前衍生高效液相色谱法,并采用9-芴甲基氯甲酸酯为衍生试剂,应用CAPCELLPAK C18色谱柱,以0.05 mol/L的乙酸钠溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱,DAD检测器在265 nm处进行检测,外标法定量。该试验结果表明,羟脯氨酸线性关系良好,相关系数为0.9999,回收率为86%~102%,相对标准偏差为1.9%~9.4%,测定低限为30 mg/kg。该试验表明,该方法灵敏、准确,精密度高,适用于分析测定纺织品中羟脯氨酸的含量。

摘要： 本实验选用80%乙腈水溶液提取茶叶中黄曲霉毒素B1,用免疫亲和柱净化,加入衍生化试剂(正己烷和三氟乙酸)进行柱前衍生,仅需简单的一步净化,结合荧光检测器技术进行检测。不仅克服了薄层层析法的繁琐步骤及对测定结果的干扰因素,同时克服了酶联免疫分析法中易出现假阳性结果的现象。样品的前处理、净化、衍生是成功的关键。黄曲霉毒素B1的质量浓度在0.10-10.0μg/L范围内与其峰面积呈线性关系,检出限为0.1μg/kg。在0.5,1.0,5.0μg/L等3个浓度水平进行加标回收试验,回收率在87.2-96.5%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在2.2-3.6%之间。

摘要： 合成了新型化学衍生试剂罗丹明B-N-羟基琥珀酰亚胺酯(RBS),基于RBS柱前衍生和高效液相色谱-质谱联用法建立了果蔬中单氰胺的检测方法。样品经乙酸乙酯萃取,用RBS衍生化后,采用高效液相色谱-质谱联用法测定。结果显示:衍生化试剂RBS具有很好的质谱检测灵敏度,对单氰胺的衍生化反应高效、专一。单氰胺浓度在0.005~5 mmol/L时呈现良好的线性关系,相关系数为0.9969,该方法的检出限为0.001 mmol/L,定量限为0.0025 mmol/L,样品加标回收率为77.56%~105.21%,相对标准偏差为1.88%~4.04%。该方法选择性好、灵敏度高、检测限低,可满足果蔬中的单氰胺残留量的测定。

摘要： 基于柱前衍生-高效液相色谱/紫外检测技术,建立了多糖水解单糖的HPLC分析技术,用于凉粉草提取液多糖水解单糖组分分析和含量测定。采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生,优化并获得了单糖组分的衍生条件和HPLC梯度洗脱分析流程,鉴别了核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖等8种单糖;应用于18种凉粉草提取液样品分析,凉粉草多糖水解单糖以半乳糖醛酸、葡萄糖和半乳糖为主,含量分别为2.50~20.48μg/mL、2.97~38.52μg/mL、2.72~89.32μg/mL。该方法操作简单、准确,可为凉粉草多糖提取液水解单糖组分特征评价与定量分析提供技术。

摘要： 目的:建立柱前衍生液相色谱法与柱后衍生液相色谱法测定疫苗中游离甲醛残留量,并考察2种方法测定结果的一致性程度。方法:柱前衍生液相色谱法色谱条件:岛津LC-20AT液相色谱仪(SPD-20A紫外检测器),采用Kromasil 100-5-C_(18)(250 mm×4.6 mm)色谱柱,流动相为60%乙腈溶液,流速0.8mL·min^(-1),柱温40°C,测定波长360 nm。柱后衍生液相色谱法色谱条件:岛津LC-20AT液相色谱仪(SPD-M20A二极管阵列检测器和vector衍生装置),采用纳谱AQ-C_(18)(250 mm×4.6 mm)色谱柱,流动相为0.2%(V/V)磷酸溶液,流速1.0 mL·min^(-1),柱温25°C,检测波长412 nm;衍生溶液为醋酸缓冲液,流速0.5 mL·min^(-1),温度100°C。分别对2种方法的精密度、重复性、加样回收率等项目进行考察,并对测定结果进行显著性检验(F检验和t检验)。结果:柱前衍生液相色谱法线性范围为0.025~100μg·mL^(-1)(R=0.9999,n=12),精密度RSD为0.06%,重复性RSD为0.3%~1.4%,平均加样回收率为97.3%~104.8%(RSD为0.7~2.9%),定量限为0.02μg·mL^(-1),检出限为0.01μg·mL^(-1)。柱后衍生液相色谱法线性范围为0.025~100μg·mL^(-1)(R=0.9999,n=12),精密度RSD为0.02%,重复性RSD为0.07%~3.5%,平均加样回收率为105.6%~114.6%(RSD为0.3%~1.9%),定量限为0.02μg·mL^(-1),检出限为0.006μg·mL^(-1)。对21批样品测定结果的F检验和t检验结果表明两者无显著性差异。结论:2种方法操作简便,专属性强,灵敏度高,结果准确,可用于疫苗中游离甲醛残留量测定。

摘要： 建立并优化了高效液相色谱测定草铵膦含量的检测方法。在碱性条件下草铵膦与氯甲酸-9-芴基甲酯(FMOC-CL)反应,对衍生物进行液相色谱分离和测定,以乙腈、甲醇、磷酸水溶液作为流动相,使用Diamonsil Plus 5μm C18柱为分离柱,在206nm波长下检测。本方法衍生反应时间快,有效成分与杂质能够得到很好的分离,衍生产物稳定。三个样品的加标回收率分别为99.93%、99.61%、99.39%;相对标准偏差分别为0.03、0.02、0.03;变异系数分别为0.17%、0.09%、0.02%。本方法使用C18柱较耐用,检测灵敏度高,适用于各种草铵膦微量以及痕量的样品检测。

摘要： 建立柱前衍生气相色谱法测定氯乙酰氯中二氯乙酰氯的方法。以正丁醇为衍生试剂,在60°C水浴中对样品进行衍生处理30 min,溶液冷却后用氢氧化钠溶液滴定中和,取正丁醇层,以SE-30毛细管柱为色谱柱直接进样进行测定。二氯乙酰氯的质量浓度在0.8~2.4 mg/mL范围内与色谱峰峰面积线性关系良好,相关系数为0.9995,方法检出限为8.93μg/mL。样品测定结果的相对标准偏差为2.0%(n=6),加标回收率为103.29%~111.99%。该方法适用于氯乙酰氯中二氯乙酰氯含量的测定。

摘要： 研究常见食品中甲醛本底值,为制定科学判定依据提供数据基础和技术支撑。分别采集350批次未经处理和市售的畜禽副产品、水产品、食用血制品,利用柱前衍生-高效液相色谱法测定其甲醛本底及含量。研究中所采集的样品均存在甲醛本底,平均本底值在0.536~1.26 mg/kg之间;市售食品均检出甲醛阳性样品,甲醛测定平均值在2.22~25.9 mg/kg之间,最大检出值为355 mg/kg。样品中是否非法添加甲醛,需根据甲醛检出值、甲醛本底值和甲醛使用目的等因素综合判断。

摘要： 由于原料药2,3-吡嗪二羧酸酐易水解为有关物质2,3-吡嗪二羧酸,不能直接用高效液相色谱法测定.基于此,以甲醇衍生化2,3-吡嗪二羧酸酐后再采用高效液相色谱法测定2,3-吡嗪二羧酸酐中主成分和杂质2,3-吡嗪二羧酸、2-吡嗪甲酸的含量.按照质量体积比(mg∶mL)10∶7加入供试品和甲醇,超声衍生20 min,稀释后用高效液相色谱法分析.以YMC Triart C_(18)色谱柱为固定相,以不同体积比的0.5%(体积分数)三氟乙酸溶液和甲醇的混合溶液进行梯度洗脱,在270 nm处检测.结果显示:2,3-吡嗪二羧酸、2-吡嗪甲酸、2,3-吡嗪二羧酸酐之间的分离度均大于1.5,其质量浓度均在一定范围内与其对应的峰面积呈线性关系,检出限分别为0.0575,0.0548,0.0102 mg·L^(-1);对混合对照品溶液和供试品溶液连续分析6次,测定值的相对标准偏差均小于2.0%;2,3-吡嗪二羧酸、2-吡嗪甲酸的加标回收率分别为95.2%,98.3%;方法用于3批实际样品的分析,检出的2,3-吡嗪二羧酸酐的质量分数为97.83%~97.93%,2,3-吡嗪二羧酸的质量分数为2.07%~2.17%,而2-吡嗪甲酸未检出.

摘要： 本研究建立了柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测法同时测定土壤中草甘膦和氨甲基膦酸(AMPA)残留量的检测方法,并进行了方法参数优化.实验结果表明,按照此方法测定草甘膦和AMPA时峰型尖锐、对称,保留和分离效果好,在2.0μg/L-100μg/L范围内线性关系良好(R2＞0.999).针对土壤样品加标,草甘膦回收率为82.2％-86.8％,RSD％为0.3％-2.5％,AMPA回收率为61.8％69.1％,RSD％为0.8％-1.2％,说明本方法快捷可靠,精密度高,准确好,满足检测要求.

摘要： 目的:建立柱前衍生-反相高效液相色谱法测定中盐酸组氨酸的方法.方法:以正亮氨酸为内标,以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生化试剂,采用ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6×250mm,5μm)色谱柱,醋酸钠缓冲液(pH6.5)和80％乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为254nm,测定样品中的盐酸组氨酸含量.结果:该方法重现性好,精密度高,盐酸组氨酸在(12.54～31.35μg)范围内线性关系良好(r2=0.9999).结论:建立的PITC柱前衍生-反相高效液相色谱法可对样品中的盐酸组氨酸进行质量控制.

摘要： 以9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC)为柱前衍生试剂,谷氨酰胺、精氨酸、丙氨酸、缬氨酸和苯丙氨为分离检测对象,建立了高效液相色谱分离/紫外检测氨基酸的分析方法.在最优化的色谱条件下,五种氨基酸在19min内得到了很好的分离,衍生物的峰面积和氨基酸的浓度在0.0125-0.2mmol/L范围内成线性关系,信噪比为3时,检测限最低达到8×10-6mol/L。

摘要： 目的：建立了测定人血浆中白消安浓度的柱前衍生高效液相色谱法。方法：以1，5-戊二醇二甲磺酸酯为内标，血浆样品经二乙基二硫代氨基甲酸钠衍生化处理后，以乙腈-0.7％冰醋酸水溶液(69∶31)为流动相，流速1.0 mL·min-1，采用Xterra(R) RP 18色谱柱分离，在280nm波长下进行检测。结果：白消安线性范围为O.20～4.00 mg·L-1，以加权最小二乘法计算得到回归方程为Y=2.56X+16.7(r：0.9 993，n=7)，提取回收率81.01％～82.72％，方法回收率96.50％～97.90％，日内、日间精密度(RSD)均小于10％。最低血浆检测质量浓度为0.080 mg·L-1。结论：该方法准确、灵敏，适用于白消安血浆浓度测定及其药代动力学研究。

摘要： 目的：建立人体唾液中脂肪酸的测定方法。rn 方法：以1，3，5，7-四甲基-8-丁酰肼-二氟化硼-二吡咯甲烷为柱前衍生试剂，HPLC分离荧光检测脂肪酸。rn 结果：在选定的最佳分离条件下，12种脂肪酸衍生物可在50 min内实现基线分离。rn 结论：所建立分析方法是分析人体唾液中脂肪酸的准确方法。

摘要： 目的:建立LC-MS/MS同时测定血浆中孕二烯酮、依托孕烯和炔雌醇的方法。方法:血浆样品经液-液萃取、柱前衍生处理后，采用ESI离子源，多反应离子监测(MRM)，正离子扫描进行测定。以炔诺孕酮为内标，采用C18(100mm×2.1 mm，5 μm)柱，梯度流动相，梯度流速测定血浆中孕二烯酮、依托孕烯和炔雌醇。结果:孕二烯酮、依托孕烯分别在0.1～20 ng·mL-1浓度范围内、炔雌醇在0.01～2 ng·mL-1浓度范围线性关系良好，精密度小于10.0%，方法回收率在93.6%～110.9%之间.并对复方孕二烯酮和复方依托孕烯透皮给药制剂进行了家兔的药动学研究。结论:本方法灵敏度高(孕二烯酮、依托孕烯达到100pg·mL-1，炔雌醇达到10pg·mL-1)、重现性好，适合药动学研究。

摘要： 目的:建立了同时测定浓缩果汁中游离氨基酸含量的柱前衍生-超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)。rn 方法:样品经异硫氰酸苯酯(PITC)衍生,用0.1％甲酸(含1mmol/L甲酸铵)/乙腈(比例3:7)定容,采用ACQUITY BEHC18(1.7μm 2.1×50mm,id,1.7μm)色谱柱分离,以乙腈/0.1％甲酸(含1mmol/L 甲酸铵)为流动相,在0.30mL·min-1流速下梯度洗脱,MS/MS进行检测、外标法定量。rn 结果:果汁中20种游离氨基酸的最小检测限(LOD),天门冬氨酸5.0 ng/mL,其它均为1.0ng/mL。浓度分别在10.0～1000.0ng·mL-1范围内线性良好(r≥0.9900),平均加标回收率在79.0～119.9％之间,相对标准偏差RSD≤8.00％(n=6)。rn 结论:该方法具有杂质干扰小、分析速度快、灵敏度高等特点,可以适用于果汁中氨基酸的定性定量分析。

摘要： 阿伦膦酸钠(ABP)为第3代双膦酸类抗骨质疏松药。分子结构中含有2个膦酸基团极性强，易电离，不能在反相色谱柱上保留;结构中无生色团，不能直接用常规的紫外检测器或荧光检测器检测。生物样品中阿仑膦酸钠药物含量分析是药物分析的难题之一。本实验采用对甲氧基苯磺酰氟(MOBS-F)作为新型柱前紫外衍生试剂，建立了用毛细管区带电泳测定了阿伦膦酸钠的含量的方法。

摘要： 本文采用了一种水溶性磺酸-3-氢吲哚菁染料(b-sb-cy3-NHS)进行蛋白质标记,分别对疾病组和对照组大鼠中脑提取蛋白质采用b-sb-cy3-NHS柱前衍生,再经第一维体积排阻色谱(SEC)和第二维反相液相色谱(RPLC)进行分离,并对比疾病和对照样本的分离结果。最后,对差异的色谱峰用μRPLC-MS/MS进行分离鉴定。采用该策略,不仅提高了样品的分离能力,而且也实现了差异组份的高灵敏度检测。

摘要： 本发明涉及食品检测领域，具体涉及一种基于柱前在线衍生法的液相色谱系统及使用方法，包括进样针、切换阀、第一样品环、第二样品环、色谱柱和检测器，切换阀包括总进样口、第一进样口、第二进样口、总出样口、第一出样口和第二出样口，第一进样口和第二进样口分别通过总进样口与进样针连接，第一出样口和第二出样口分别通过总出样口与色谱柱连接，第一样品环的一端与第一进样口连接，另一端与第一出样口连接，第二样品环的一端与第二进样口连接，另一端与第二出样口连接，色谱柱与检测器连接。该系统可以检测食物中的生物胺含量，检测速度快。

摘要： 本发明属于分析化学技术领域，具体公开了一种手性衍生试剂柱前衍生高效液相色谱拆分R/S‑N‑Boc‑哌啶醇的方法：先将R/S‑N‑Boc‑哌啶醇与(+)‑萘普生经过酯化反应得到(+)‑萘普生‑R/S‑N‑Boc‑哌啶醇酯；再采用高效液相色谱仪，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，用水相和有机相作为流动相，控制(+)‑萘普生‑R/S‑N‑Boc‑哌啶醇酯样品溶液流速为0.4‑0.8mL/min，进样量为2‑10μL，检测波长为210‑260nm，柱温为20‑35°C，从而将R/S‑N‑Boc‑哌啶醇分离。本发明方法得到的色谱峰峰型和对称性好、分离度高，可以灵敏地拆分R/S‑N‑Boc‑哌啶醇。

摘要： 本发明公开一种利用手性衍生试剂对DL‑薄荷醇进行柱前衍生高效液相色谱手性拆分的方法，即使用手性芳香酸与DL‑薄荷醇进行柱前衍生化反应得具有紫外吸收的DL‑薄荷醇酯衍生物；再通过配有紫外可见光检测器的高效液相色谱仪，使用普通的非手性硅胶色谱柱，采用水相与有机相作为反相洗脱流动相，将上述所得DL‑薄荷醇酯衍生物配成浓度为0.5‑1.0 mg/mL的样品溶液，控制流速为0.4‑1.2 mL/min，进样量为2‑10µL，检测波长为210‑285 nm,色谱柱柱温箱为20‑35°C进行色谱柱分离，从而将上述所得的DL‑薄荷醇酯非对映异构体进行分离检测，最后再分别进行水解即得D‑薄荷醇和L‑薄荷醇。

摘要： 本发明公开了一种豆酱中生物胺的分离和液相色谱柱柱前衍生化方法，包括以下步骤：(1)向豆酱中加入三氯乙酸溶液，均质，离心，收集上清液；(2)向上清液中加入正己烷，振荡，静止分层后取出下层三氯乙酸相，备用；(3)向三氯乙酸相中加入NaOH溶液，再加入NaHCO3溶液缓冲，混合丹磺酰氯丙酮溶液进行衍生；(4)氨水去除丹磺酰氯终止反应，得到衍生液，过滤。本发明分离方法处理过程简单，消耗试剂少，避免了转移时所造成的分析物损失。经本发明分离净化后可达到检测要求，谱图杂峰干扰少且待测物损失小，生物胺的回收率可达到80％以上。本发明方法确定了衍生生物胺的最佳条件，丹磺酰氯衍生产物稳定，检测灵敏度高。

摘要： 本发明属于分析化学技术领域，具体公开了一种手性衍生试剂柱前衍生高效液相色谱拆分R/S‑N‑Boc‑哌啶醇的方法：先将R/S‑N‑Boc‑哌啶醇与(+)‑萘普生经过酯化反应得到(+)‑萘普生‑R/S‑N‑Boc‑哌啶醇酯；再采用高效液相色谱仪，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，用水相和有机相作为流动相，控制(+)‑萘普生‑R/S‑N‑Boc‑哌啶醇酯样品溶液流速为0.4‑0.8mL/min，进样量为2‑10μL，检测波长为210‑260nm，柱温为20‑35°C，从而将R/S‑N‑Boc‑哌啶醇分离。本发明方法得到的色谱峰峰型和对称性好、分离度高，可以灵敏地拆分R/S‑N‑Boc‑哌啶醇。

摘要： 本发明公开一种利用手性衍生试剂对DL-薄荷醇进行柱前衍生高效液相色谱手性拆分的方法，即使用手性芳香酸与DL-薄荷醇进行柱前衍生化反应得具有紫外吸收的DL-薄荷醇酯衍生物；再通过配有紫外可见光检测器的高效液相色谱仪，使用普通的非手性硅胶色谱柱，采用水相与有机相作为反相洗脱流动相，将上述所得DL-薄荷醇酯衍生物配成浓度为0.5-1.0 mg/mL的样品溶液，控制流速为0.4-1.2 mL/min，进样量为2-10 μL，检测波长为210-285 nm,色谱柱柱温箱为20-35°C进行色谱柱分离，从而将上述所得的DL-薄荷醇酯非对映异构体进行分离检测，最后再分别进行水解即得D-薄荷醇和L-薄荷醇。

摘要： 本发明公开了一种豆酱中生物胺的分离和液相色谱柱柱前衍生化方法，包括以下步骤：(1)向豆酱中加入三氯乙酸溶液，均质，离心，收集上清液；(2)向上清液中加入正己烷，振荡，静止分层后取出下层三氯乙酸相，备用；(3)向三氯乙酸相中加入NaOH溶液，再加入NaHCO3溶液缓冲，混合丹磺酰氯丙酮溶液进行衍生；(4)氨水去除丹磺酰氯终止反应，得到衍生液，过滤。本发明分离方法处理过程简单，消耗试剂少，避免了转移时所造成的分析物损失。经本发明分离净化后可达到检测要求，谱图杂峰干扰少且待测物损失小，生物胺的回收率可达到80％以上。本发明方法确定了衍生生物胺的最佳条件，丹磺酰氯衍生产物稳定，检测灵敏度高。

摘要： 本发明公开了一种柱前衍生化法测定维格列汀中3‑氨基‑1‑金刚烷醇残留量的方法，属于医药分析检测技术领域；采用衍生试剂制备得到3‑氨基‑1‑金刚烷醇对照品衍生溶液以及维格列汀供试品衍生溶液，将上述衍生物溶液进行高效液相色谱分析，采用外标法按峰面积计算3‑氨基‑1‑金刚烷醇残留。本发明的液相色谱分析方法能够准确灵敏地检测维格列汀中3‑氨基‑1‑金刚烷醇的残留量，从而保证维格列汀原料药的质量。

摘要： 本发明提供了一种柱前衍生‑HPLC检测发酵液中卡那霉素含量的方法，包括以下步骤：制备卡那霉素对照品溶液和样品溶液、制备衍生溶液、采用HPLC法进行检测、记录峰面积，采用外标法计算样品中卡那霉素的含量。本方法样品预处理步骤较为简单，衍生试剂用量较小，衍生条件温和，操作过程简便易控；通过优化色谱条件，更适于卡那霉素与发酵培养基成分完全分离，适用于对发酵液中卡那霉素含量及有关组分进行同时监测，从而为发酵过程调控提供指导。

摘要： 本实用新型公开了一种液相色谱柱的柱前衍生装置，包括储液罐、反应罐、高压泵、色谱柱以及检测仪，所述储液罐的出液口通过送液管连接反应罐上的进液口，反应罐的出液口通过增压管连接高压泵的入口，高压泵的出口通过管道连接进样器，本实用新型在反应罐的顶部出气口连接有真空管，且真空管连接真空泵的抽气口，利用真空管将反应罐内抽真空，从而避免外部气体对液样造成影响而产生误差，通过低压状态易于液样在低温时蒸发，从而便于排出液样中的水分，低温状态下也可以避免液样出现燃烧的情况，整体更加安全，同时通过向水套内注水可以实现整个反应罐的水冷以及水热，这样可以使得整体更加安全。