新孢子虫病

摘要： 奶牛流产是指由各种原因引起胎儿或母体异常而导致妊娠过程发生紊乱,或胎儿与母体正常关系受到破坏,使妊娠中断的临床病理现象。众所周知,奶牛流产后果很严重,可直接影响奶牛的繁殖效率、产奶量及养殖效益。引发奶牛流产的原因错综复杂,疫病是其中一个重要因素。笔者对北京市延庆区牛场中奶牛流产常见的4种疫病(布鲁氏菌病、衣原体病、牛传染性鼻气管炎和新孢子虫病)进行了归纳总结,希望对养牛户有所帮助。

摘要： 为了解云南省马属动物新孢子虫病流行情况,采用酶联免疫吸附试验检测了云南省8个地区的969份马属动物血清样品。结果显示,云南地区马属动物新孢子虫病抗体总阳性率为5.06%(49/969);其中马新孢子虫病抗体阳性率为1.08%(3/279),驴新孢子虫病抗体阳性率为7.25%(29/400),骡新孢子虫病抗体阳性率为5.86%(17/290);不同马属动物新孢子虫病抗体阳性率差异极显著(P0.05)。结果表明,云南部分地区马属动物中普遍存在新孢子虫感染,应采取有效的措施防控新孢子虫病。

摘要： 新孢子虫病是由犬新孢子虫寄生于哺乳动物细胞内引发的原虫病,能够引起孕畜流产、死胎以及新生儿的运动神经障碍等,该病对牛的危害尤为严重,给我国畜牧业造成了巨大的经济损失.然而,目前尚无针对新孢子虫病的特异性药物和疫苗,且现有治疗方案效果不显著,因此对抗新孢子虫病药物的研究具有十分重要的意义.本文从抗新孢子虫病的西药、中药及其他新型药物的试验研究及治疗效果等方面进行综述,为今后研制出毒害作用小、疗效显著的抗新孢子虫病的药物提供科学依据.

摘要： 新孢子病是由犬新孢子虫寄生多种动物引起的一种疾病,目前已分布于世界各地,主要引起孕畜的流产或者死胎,更为严重的会造成新生胎儿运动神经障碍.本文从临床症状和诊断方法进行阐述,以期为养殖户提供一些宝贵经验,及时发现并有效预防该病的发生,将养殖行业的危害降到最低.

摘要： 妊娠母牛流产是造成牛产犊间隙增大的重要原因之一,这不但会增加牛群的饲养成本,而且还会降低后备牛只的补充,给养牛业造成了严重的经济损失.其中引起妊娠母牛流产的因素有很多,大致分为自身的因素和病原的因素,自身的因素如营养不良、摔倒、损伤等导致不孕.病原的因素也有很多,本文重点讲解引起母牛流产的6种主要寄生虫病,为养牛场寄生虫病的防控提供参考.

摘要： 目的:本文查阅文献、统计分析、考证了昭苏地区导致母牛流产的主要病原——布氏杆菌病及新孢子虫病;方法:本试验选择昭苏地区作为调查点,在2017年9月至2018年10月在昭苏范围6个试验点(区),对11,538头牛进行血清学检测。结果:布鲁氏杆菌血清学检测呈阳性的有396份,阳性率3.43%;其中,C区、F区阳性率最高,可达到6.32% (174/2752)、5.23% (93/1778);E区相对较低,为1.32% (26/1956)。新孢子虫病呈阳性的有66份,阳性率0.57%,A区阳性率0.59%、F区阳性率1.18%为最高。结论:为今后昭苏县开展布鲁氏杆菌病、新孢子虫病的综合防控及研究工作提供相关流行病学数据支撑。

摘要： 为了解吉林省西部地区牛新孢子虫病的流行情况,应用ELISA试剂盒对采自吉林省西部地区洮南市、洮北区、通榆县、宁江区和乾安县等5个县市区共计208份牛血清样本进行了牛新孢子虫病抗体检测,并对不同地区、不同饲养方式、不同类别、不同性别及不同年龄段的208份牛血清样本进行了统计学分析.结果表明:不同地区之间通榆县与洮北区牛新孢子病抗体阳性率差异显著(P0.05);放养牛和圈养牛之间牛新孢子病抗体阳性率差异显著(P0.05);公牛与母牛之间牛新孢子病抗体阳性率差异不显著(P>0.05);1～3岁牛和4～6岁牛之间牛新孢子病抗体阳性率差异显著(P<0.05).试验证实,吉林省西部地区也是牛新孢子病的流行地区,为吉林省西部地区牛新孢子病防控提供了科学的流行病学资料.

摘要： 为初步了解河南省清丰县奶牛新孢子虫病流行情况,于2017年3～9月应用ELISA技术对清丰县6个奶牛养殖场按20.0％比例随机采集438份血液样品进行奶牛新孢子虫病血清抗体检测.结果显示,438份血液样品中有63份检测为新孢子虫病血清抗体阳性,平均阳性率为14.38％,6个奶牛场血清抗体阳性率为8.06％～19.05％;不同年龄阶段奶牛新孢子虫病血清抗体阳性率存在一定差异,流产奶牛较未流产奶牛阳性率高.结果表明,奶牛新孢子虫病感染在清丰县广泛存在,应引起养殖场(户)的重视.

摘要： 本调查旨在初步了解安阳市奶牛新孢子虫病流行情况,于2017年3月至2017年9月应用ELISA技术对安阳市6个奶牛养殖场按20.0％随机采集438份血液样品进行奶牛新孢子虫病血清抗体检测.结果显示,418份血液样品中有63份检测为新孢子虫病血清抗体阳性,平均阳性率为15.07％,6个奶牛场血清抗体阳性率为8.06％～19.05％;不同年龄阶段奶牛新孢子虫病血清抗体阳性率存在一定差异,流产奶牛较未流产奶牛阳性率高.结果表明,奶牛新孢子虫病感染在安阳市广泛存在,应引起养殖户重视.

摘要： 为了调查西藏不同地区牦牛新孢子虫病的流行情况,试验采用酶联免疫吸附法(ELISA)对西藏四个地市(拉萨市、林芝市、那曲市、昌都市)牦牛进行血清流行病学调查,并用SPSS 21.0软件对不同地区的抗体阳性率进行显著性分析.结果表明:牦牛新孢子虫病抗体总阳性率为14.95％(68/455).其中昌都市阳性率最高,为29.12％(53/182);其次是林芝市,为16.48％(15/91);拉萨市和那曲市未检测到阳性样品.从不同地区来看,西藏牦牛新孢子虫病血清抗体阳性率差异显著(P＜0.05).说明新孢子虫病在西藏不同地区有不同程度的流行,需要引起相关部门的关注.

摘要： 本研究对分析新孢子虫基因组获得的含有SRS结构域的40-KD表面抗原(NcP40)基因进行了原核表达和纯化,结果显示NcP40在E.coli中成功表达,且纯化结果良好,终浓度为3.07mg/ml.经Western-blot分析NcP40与弓形虫血清没有交叉反应,为新孢子虫特异性抗原.以纯化好的NcP40作为抗原建立新孢子虫间接ELISA检测方法并对ELISA条件进行了优化,优化结果为NcP40-ELISA最佳抗原包被浓度为0.1μg/孔,最佳血清稀释度为1:20.最佳封闭液为5％MILK,最佳封闭时间为1.5h,与血清最佳反应时间为2h,底物最佳作用时间为25min,临界值为N×2.172,批内变异系数为1.5％-6.7％,批间变异系数为4.7％-9.6％.以IFAT做为参考,特异性为97％,灵敏度为94％.上述结果表明本试验建立的ELISA检测方法具有特异性好,灵敏度高,重复性好的特点,可以用于新孢子虫病检测.

摘要： 应用酶联免疫吸附试验对上海地区奶牛血清样品进行新孢子虫病抗体检测.结果显示,被检的1239份血清中有63份抗体阳性,41个奶牛场阳性率从0-44.23﹪不等。

摘要： 奶牛新孢子虫病是由犬新孢子虫(Neospora caninum)引起的多种家畜共患的一种原虫病.该病对牛的危害尤其严重,主要造成孕畜流产、死胎以及新生儿的运动神经系统疾病.本研究采集自北京地区的94份奶牛血清样本和河北地区的55份奶牛血清样本,分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接荧光抗体试验(IFAT)检测N.caninum血清抗体.结果发现,北京地区奶牛N.caninum抗体阳性率为18.1﹪,河北地区奶牛N.caninum抗体阳性率为23.6﹪;N.caninum抗体阳性血清样本龚地弓形虫(T.gondii)抗体检测的结果为阴性.采用牛奶记录体系(DHI)对北京地区17头N.caninum血清抗体阳性牛进行了日产奶量、乳中蛋白率和乳脂率的测定.结果表明,N.caninum血清抗体阳性牛日产奶量、乳中蛋白率和乳脂率分别比阴性牛低9.7﹪,降、20﹪和15.4﹪.初步证明N.caninum血清抗体阳性奶牛产奶量及奶品质下降,影响了奶牛的生产性能.

摘要： 本研究选择中药(姜黄素、常山酮)、除草剂(阿特拉津、草甘膦)、抗球虫药(妥曲珠利、泊那珠利和磺胺氯吡嗪钠)及环磷酰胺、三氮脒和吡喹酮等10种药物,以蒿甲醚和磺胺嘧啶作为对照药物；进行体外、体内的抗弓形虫和新孢子虫作用比较研究.结果表明,各种药物在体外和小鼠体内的效果不尽一致,在体外姜黄素、妥曲珠利、泊那珠利和阿特拉津对弓形虫和新孢子虫有效,在体内妥曲珠利、泊那珠利、磺胺氯吡嗪钠及常山酮对弓形虫有效,对新孢子虫没有明显效果.

摘要： 本研究选择中药(姜黄素、常山酮)、除草剂(阿特拉津、草甘膦)、抗球虫药(妥曲珠利、泊那珠利和磺胺氯吡嗪钠)及环磷酰胺、三氮脒和吡喹酮等10种药物,以蒿甲醚和磺胺嘧啶作为对照药物；进行体外、体内的抗弓形虫和新孢子虫作用比较研究.结果表明,各种药物在体外和小鼠体内的效果不尽一致,在体外姜黄素、妥曲珠利、泊那珠利和阿特拉津对弓形虫和新孢子虫有效,在体内妥曲珠利、泊那珠利、磺胺氯吡嗪钠及常山酮对弓形虫有效,对新孢子虫没有明显效果.

摘要： 本研究选择中药(姜黄素、常山酮)、除草剂(阿特拉津、草甘膦)、抗球虫药(妥曲珠利、泊那珠利和磺胺氯吡嗪钠)及环磷酰胺、三氮脒和吡喹酮等10种药物,以蒿甲醚和磺胺嘧啶作为对照药物；进行体外、体内的抗弓形虫和新孢子虫作用比较研究.结果表明,各种药物在体外和小鼠体内的效果不尽一致,在体外姜黄素、妥曲珠利、泊那珠利和阿特拉津对弓形虫和新孢子虫有效,在体内妥曲珠利、泊那珠利、磺胺氯吡嗪钠及常山酮对弓形虫有效,对新孢子虫没有明显效果.

摘要： 本研究选择中药(姜黄素、常山酮)、除草剂(阿特拉津、草甘膦)、抗球虫药(妥曲珠利、泊那珠利和磺胺氯吡嗪钠)及环磷酰胺、三氮脒和吡喹酮等10种药物,以蒿甲醚和磺胺嘧啶作为对照药物；进行体外、体内的抗弓形虫和新孢子虫作用比较研究.结果表明,各种药物在体外和小鼠体内的效果不尽一致,在体外姜黄素、妥曲珠利、泊那珠利和阿特拉津对弓形虫和新孢子虫有效,在体内妥曲珠利、泊那珠利、磺胺氯吡嗪钠及常山酮对弓形虫有效,对新孢子虫没有明显效果.

摘要： 本发明公开一种牛新孢子虫病与弓形虫病的内标多重PCR检测试剂盒，在双重PCR反应体系中引入指示假阴性的内标，通过引物设计和PCR扩增，经反应条件优化，反应条件为：dNTP 浓度为2.0 mmol/L，Mg

摘要： 本发明提供用于牛新孢子虫病防控的疫苗及其制备方法和应用。该疫苗为基因佐剂重组腺病毒载体疫苗，编码该疫苗抗原的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。该疫苗的制备方法具体为根据犬新孢子虫NcSRS9基因序列和IFN‑γ基因序列的开放阅读框设计引物，扩增拼接NcSRS9基因和IFN‑γ基因，构建pMD18T‑NcSRS9‑IFN‑γ重组克隆质粒，构建重组腺病毒穿梭质粒pCR259‑NcSRS9‑IFN‑γ和表达质粒H294‑NcSRS9‑IFN‑γ，脂质体介导转染QBI‑HEK 293细胞包装Ad5‑NcSRS9‑IFN‑γ重组腺病毒，扩增、纯化制备重组腺病毒载体疫苗。

摘要： 本发明提供的一种新孢子虫病rELISA抗体检测试剂盒，根据GenBank中的新孢子虫NcSRS2基因序列设计一对引物，引入酶切位点，截去NcSRS2蛋白的信号肽区，从新疆地方奶牛阳性血清中提取DNA；通过PCR扩增了长约975bp的tNcSRS2基因片段，克隆到pMD-18-T载体上，酶切并测序鉴定；然后将目的片段进一步定向连接到pGEX-4T-2表达载体，转化到大肠杆菌中，诱导表达、纯化；表达融合蛋白的分子量约为62kDa；用于ELISA包被抗原，获取rELISA抗体检测试剂盒；其使用步骤：将包被好的酶标反应板取出，经洗涤、封闭、再洗涤，加检测样品；再经第三次洗涤，加二抗；经第四次洗涤，显色、终止反应；读板OD

摘要： 本发明公开一种牛新孢子虫病检测方法，通过采用在PCR反应体系中加入指示假阴性的扩增内标，通过碱基重排、引物设计和搭桥法PCR扩增，构建了一条内标模板，并构建了含有内标的荧光定量PCR反应体系，确定了共扩增体系的反应条件，Mg2+2.5mmol/L，dNTP各0.3mmol/L，引物各0.5mmol/L，探针各0.2mmol/L，扩增条件为50°C，2min，1个循环；95°C，5min，1个循环；95°C15s，57°C45s，45个循环。本发明检测灵敏度高，特异性好，操作方便且能够指示并校正假阴性结果的发生，广泛应用于及时准确有效的检测牛新孢子虫病领域。

摘要： 本发明公开一种牛新孢子虫病与弓形虫病的内标多重PCR检测试剂盒，在双重PCR反应体系中引入指示假阴性的内标，通过引物设计和PCR扩增，经反应条件优化，反应条件为：dNTP浓度为2.0mmol/L，Mg

摘要： 本发明属于分子生物学检测技术领域，是涉及一种基于3D数字PCR标量阳性对照建立的新孢子虫病（Real-Time？PCR）检测试剂盒，用于动物感染新孢子虫病的临床诊断和日常监测。本发明试剂盒包括用于检测的新孢子虫特异性引物、探针其核苷酸如SEQ？ID？NO.1-3，检测的新孢子虫NcSRS2基因为SEQ？ID？NO.4所示。本试剂盒具有检测准确，灵敏度高，特异性强，简便快速的特点，用于检测早期感染和隐性“带虫”阶段的虫体DNA，为新孢子虫病的临床诊断和日常监测提供科学的技术支撑。

摘要： 本发明提供用于牛新孢子虫病防控的疫苗及其制备方法和应用。该疫苗为基因佐剂重组腺病毒载体疫苗，编码该疫苗抗原的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。该疫苗的制备方法具体为根据犬新孢子虫NcSRS9基因序列和IFN-γ基因序列的开放阅读框设计引物，扩增拼接NcSRS9基因和IFN-γ基因，构建pMD18T-NcSRS9-IFN-γ重组克隆质粒，构建重组腺病毒穿梭质粒pCR259-NcSRS9-IFN-γ和表达质粒H294-NcSRS9-IFN-γ，脂质体介导转染QBI-HEK 293细胞包装Ad5-NcSRS9-IFN-γ重组腺病毒，扩增、纯化制备重组腺病毒载体疫苗。

摘要： 本发明提供的一种新孢子虫病rELISA抗体检测试剂盒，根据GenBank中的新孢子虫NcSRS2基因序列设计一对引物，引入酶切位点，截去NcSRS2蛋白的信号肽区，从新疆地方奶牛阳性血清中提取DNA；通过PCR扩增了长约975bp的tNcSRS2基因片段，克隆到pMD-18-T载体上，酶切并测序鉴定；然后将目的片段进一步定向连接到pGEX-4T-2表达载体，转化到大肠杆菌中，诱导表达、纯化；表达融合蛋白的分子量约为62kDa；用于ELISA包被抗原，获取rELISA抗体检测试剂盒；其使用步骤：将包被好的酶标反应板取出，经洗涤、封闭、再洗涤，加检测样品；再经第三次洗涤，加二抗；经第四次洗涤，显色、终止反应；读板OD

摘要： 本发明公开一种牛新孢子虫病检测方法，通过采用在PCR反应体系中加入指示假阴性的扩增内标，通过碱基重排、引物设计和搭桥法PCR扩增，构建了一条内标模板，并构建了含有内标的荧光定量PCR反应体系，确定了共扩增体系的反应条件，Mg2+2.5mmol/L，dNTP各0.3mmol/L，引物各0.5mmol/L，探针各0.2mmol/L，扩增条件为50°C，2min，1个循环；95°C，5min，1个循环；95°C15s，57°C45s，45个循环。本发明检测灵敏度高，特异性好，操作方便且能够指示并校正假阴性结果的发生，广泛应用于及时准确有效的检测牛新孢子虫病领域。

摘要： 本发明涉及为了新孢子虫病的诊断和预防其的接种的目的的NcSAG4基因、所述基因的信使RNA、基于其核苷酸序列或其任何片段设计的寡核苷酸、和由此编码的NcSAG4蛋白、或其任何重组形式、含有其的表达载体和宿主细胞。本发明还涉及其作为犬新孢子虫慢殖子阶段特异性标志、用于分析发病机理或抗中间宿主中慢性感染确立的疫苗有效性的用途。