上皮间质转换

摘要： 目的探讨二甲双胍在胃癌细胞的增殖、迁移及上皮间质转化之间的作用。方法用不同浓度(0、10、20、40 mmol/L)的二甲双胍处理胃癌细胞,将细胞分为对照组、二甲双胍处理组(10、20、40 mmol/L)。采用CCK8试剂检测不同浓度二甲双胍处理的胃癌细胞的增殖活性。划痕实验及Transwell实验检测二甲双胍对胃癌细胞迁移和侵袭的影响。采用Western blot检测上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白水平。结果CCK8检测结果显示,与对照组比较,二甲双胍处理组随浓度增加增殖活性显著降低,呈浓度依赖(F=22.65,P=0.0003)。划痕实验结果显示,与对照组比较,二甲双胍处理组随浓度增加迁移率显著降低,呈浓度依赖(F=27.22,P<0.0001)。Western blot结果显示,二甲双胍处理组E-cadherin蛋白水平均高于对照组(F=64.82,P<0.0001),vimentin蛋白水平均低于对照组(F=11.28,P=0.003)。结论二甲双胍能够抑制胃癌细胞增殖、迁移,其在胃癌转移中发挥抑制作用,可能与抑制上皮-间充质转化相关。

摘要： 目的探讨人肾小管上皮细胞(HK-2)暴露于一水草酸钙(COM)6、24和48 h后,整合素连接激酶(ILK)在HK-2细胞中表达水平的变化以及与上皮间质转换(EMT)的关系。方法本实验以人HK-2细胞为研究对象,分为空白对照(NC)组和COM组(6、24和48 h)共4组,用CCK-8实验检测HK-2细胞存活率;倒置显微镜观察HK-2细胞形态学变化;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)和ILK基因表达水平;免疫印迹法(Western blot)检测HK-2细胞EMT相关蛋白,E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)和细胞外基质(ECM)重塑相关蛋白,MMP-2、MMP-9、TIMP-1、Ⅰ型胶原蛋白α1(COL1A1)、纤维连接蛋白(Fibronectin)以及ILK蛋白表达水平。结果与NC组相比,COM组COM对HK-2细胞具有损伤作用,HK-2表现为长梭形,形成纤维细胞样外观,细胞之间排列较为松散,细胞的间隙增大。COM抑制HK-2细胞的增殖活性,随着HK-2细胞暴露于COM时间的延长,HK-2细胞存活率下降(P均<0.01)。qRT-PCR结果显示,24、48 h时COM组MMP-2和MMP-9基因表达水平均降低(P均<0.01),TIMP-1和ILK基因表达水平均升高(P均<0.01)。Western blot结果显示,COM组E-cadherin蛋白表达水平均降低(P均<0.01);α-SMA和Vimentin蛋白表达水平升高(P均<0.01);ECM重塑相关蛋白MMP-2和MMP-9表达水平降低(P均<0.01);TIMP-1、COL1A1和Fibronectin蛋白表达水平增高(P均<0.01);ILK蛋白表达水平增高(P均<0.01)。结论ILK可能参与COM诱导的HK-2细胞EMT改变。

摘要： 上皮剪接调节蛋白1(epithelial splicing regulatory protein1,ESRP1)是近年发现的RNA结合蛋白,具有选择性剪接前体mRNA的作用,能够在转录水平调节基因的表达,进而影响基因转录过程。从分子生物学和基因学角度深入研究后发现,ESRP1在多种不同部位的肿瘤中表达情况不一,可能通过信号通路的调控致使恶性肿瘤浸润性、迁移性增强并影响患者预后。ESRP1对肿瘤的起源、进展、转移及预后判断等多方面具有重大意义,本文将围绕ESRP1与恶性肿瘤相关性的研究展开综述,为ESRP1相关的肿瘤诊疗扩展思路。

摘要： MicroRNAs(miRNAs)作为转录后调节因子参与多种生物学过程的基因表达调控.其中,miRNAs是调控细胞"上皮-间质转换"(EMT)过程的重要因子,与肿瘤细胞迁移、侵袭和转移过程密切相关,并参与众多疾病的发生和发展.研究表明,受miRNAs调控的靶基因较广泛,均通过影响特定的信号通路对EMT发挥促进或抑制的效应.研究miRNAs对EMT的调控作用和机制对于肿瘤等相关疾病的防治具有重要价值.本文综合分析了近年来报道的从正向和负向调控细胞EMT发生的miRNAs的靶基因及其信号途径.

摘要： 目的 研究长链非编码RNA-肺腺癌转移相关转录因子1(lncRNA-MALAT1)在缺氧诱导的肾小管上皮细胞及肾脏纤维化组织中的表达情况.方法 缺氧及常氧刺激HK-2细胞72 h后,比较两组细胞中lncRNA-MALAT1的mRNA和蛋白表达情况;建立大鼠单侧输尿管结扎(UUO)模型,比较UUO组和对照组中lncRNA-MALAT1的mRNA和蛋白表达情况;选取IgA肾病(Lee氏Ⅲ～Ⅴ级)患者的肾活检组织,比较其与正常组织中lncRNA-MALAT1的mRNA表达情况.结果 与对照组比较,缺氧组lncRNA-MALAT1的mRNA及蛋白的表达均增加(P<0.01).与对照组比较,UUO组lncRNA-MALAT1的mRNA及蛋白的表达均增加(P<0.05).与癌旁正常肾组织比较,IgA肾病(Lee氏Ⅲ～Ⅴ级)患者肾脏穿刺活检组织中lncRNA-MALAT1的mRNA表达增加(P<0.05).结论 lncRNA-MALAT1在缺氧刺激、UUO模型和IgA肾病细胞中表达上调,可作为预测肾脏EMT及纤维化的生物标志物.

摘要： 目的:探讨高糖条件下肝癌Huh-7细胞株的E2启动结合因子1(E2F1)与上皮-间质转化(EMT)之间的关系.方法:将肝癌Huh-7细胞分别用高糖培养基(25mmol/L,高糖组)和低糖培养基(5.5 mmol/L,对照组)培养,在高糖环境下,培养沉默E2F1的Huh-7细胞记为HG+SIE组,未沉默E2F1的Huh-7细胞记为HG+NC组.采用CCK-8试验测试Huh-7细胞的增殖能力;采用Transwell侵袭试验和划痕试验检测细胞的侵袭和迁移能力;采用蛋白质印迹(Western blotting)法、逆转录定量PCR(RT-PCR)检测E2Fl、EMT相关蛋白(E-cadherin、β-catenin、Vimentin、α-SMA)表达和mRNA水平.结果:与对照组比较,高糖组Huh-7细胞增殖、侵袭与转移能力明显升高(均P＜0.05).高糖组E2F1、EMT相关蛋白表达和mRNA水平均明显升高(均P＜0.05).沉默E2F1后,高糖组细胞侵袭和迁移的数目明显减少,而且EMT相关蛋白表达和mRNA水平均低于对照组(均P＜0.05).结论:高糖条件下可通过上调E2F1增强Huh-7肝癌细胞的增殖能力,并促进细胞发生EMT.

摘要： 目的 探讨地高辛与他莫昔芬联合用药对MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能的机制.方法 MTT法、平板克隆和流式细胞术实验检测他莫昔芬和地高辛联合用药对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响,划痕和Transwell实验检测他莫昔芬与地高辛联合用药对MCF-7细胞迁移和侵袭的影响,Western blot检测他莫昔芬和地高辛联合用药对MCF-7细胞中相关蛋白表达的影响.结果 MTT、平板克隆和流式细胞术结果显示,地高辛可与他莫昔芬可协同抑制MCF-7细胞增殖并促进其凋亡;划痕愈合实验和Transwell实验结果显示地高辛与他莫昔芬联合用药可协同抑制MCF-7细胞的迁移和侵袭;Western blot结果显示地高辛与他莫昔芬联合用药可协同抑制PI3K、p-PI3K、p-AKT、Bcl-2、N-cad-herin、Vimentin的表达,促进Bax、cleaved-caspase-3、cleaved-caspase-9、E-cadherin的表达.结论 他莫昔芬联合地高辛用药可协同抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭,促进凋亡,其机制可能与其抑制PI3K-AKT信号通路及EMT有关.

摘要： 目的:观察在胃癌中E-cadherin和Vimentin这两种上皮间质转化(epithelial-mesenchy-mal transition,EMT)标记物和Her-2的表达情况,分析EMT与胃癌临床病理特征的关系及与Her-2表达的关系.方法:采用免疫组化检测EMT标记物E-cadherin和Vimentin在198例胃癌中的表达情况;同时检测胃癌中Her-2的表达情况与EMT之间的关系.结果:胃癌中Vimentin表达高于癌旁组织,E-cadherin表达低于癌旁组织,差异具有统计学意义(P0.05);E-cadherin和Vimentin的表达与肿瘤分化程度、浸润深度及是否有淋巴结转移有关(P<0.05);Vimentin在Her-2阳性的胃癌组织中的表达高于Her-2阴性的组织,而E-cadherin在Her-2阳性的胃癌组织中的表达低于Her-2阴性的组织,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:EMT现象在胃癌的发生、发展过程中发挥作用;在胃癌中,Her-2的表达对EMT标志物表达有所影响.

摘要： 目的 探究长链非编码RNA HIF1A-AS2诱导宫颈癌细胞的上皮间质转换和肿瘤干细胞样特性的机制.方法 设计3种可以沉默HIF1A-AS2的shRNA转染caski细胞株,选出干扰效果最好的shRNA进行后续研究;将caski细胞分为:Control组、shRNA-NC组和Sh-HIF1A-AS2组;检测各组细胞活力、侵袭能力、上皮间质转换及相关蛋白表达情况、肿瘤细胞成球情况和干细胞标记物情况;结果 各组细胞活性差异无统计学意义(P>0.05);干扰结果确认使用HIF1A-AS2-shRNA1为shRNA;相比Control组,shRNA-NC组所有指标均无显著改变(P>0.05);相比shRNA-NC组,Sh-HIF1A-AS2组单位面积侵袭细胞数目、Vimrntin和N-cadherin、细胞成球数目、成球细胞直径、ABCG2阳性细胞率、Nanog、OCT4、SOX2蛋白和mRNA相对表达均显著降低,E-cadherin相对表达显著升高(P<0.05).结论 沉默长链非编码RNA HIF1A-AS2可以抑制宫颈癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力.

摘要： 非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)是一种难发现、难诊断、难治疗的疾病.近年来研究发现,periostin在多种肿瘤中过表达,且和肿瘤生长和转移有密切关系.本课题组前期研究证实在NSCLC中,periostin在癌组织中是明显高于正常和癌旁组织,且高表达periostin的肺癌患者预后不佳.在非小细胞肺癌中，periostin通过与整合素ανβ3和ανβ5作用，促进肿瘤细胞的上皮间质转换(EMT)，从而导致肿瘤细胞繁殖和迁移，ανβ3和ανβ5杭体在细胞水平和不同程度上抑制periostin的迁移能力，该实验结果为非小细胞肺癌患者提供新的诊治靶点。

摘要： 本发明包括发现细胞表面波形蛋白作为从癌症患者的血液检测和分离间质和上皮‑间质转化的循环肿瘤细胞的新颖生物标志物。此外，提供一种对循环肿瘤细胞上的细胞表面波形蛋白的检测具有特异性的抗体以及所述抗体检测、计数和分离CTC的用途。

摘要： 本发明提供了一种抑制人羊膜上皮细胞上皮间质转化的方法。具体地，本发明提供了一种在体外抑制人羊膜上皮细胞上皮间质转化(EMT)的方法，包括步骤：(i)在存在式I化合物的培养体系中，培养人羊膜上皮细胞。本发明所筛选到的方法中，所述化合物在抑制人羊膜上皮细胞上皮间质转化方面的具有显著效果，并且其对细胞的细胞活性和增殖能力没有影响，对细胞毒副作用较小；并且，本发明从基因表达水平和蛋白表达水平验证了式I化合物对于人羊膜上皮细胞有维持上皮表型、干细胞特性和抑制间质细胞特性的作用。

摘要： 本发明涉及一种视网膜色素上皮细胞上皮－间充质转换模型及其应用。将ARPE‑19细胞用胰酶消化后，再转入无血清含N2和非必需氨基酸的DMEM‑F12培养基中，并在陪替氏培养皿中培养，即得视网膜色素上皮细胞上皮－间充质转换模型；该模型用于研究视网膜色素上皮细胞发生上皮－间充质转换的分子机制及寻找上皮－间充质转换的干预靶向。与现有技术相比，本发明方法简单易行、重复性好。

摘要： 本发明包括发现细胞表面波形蛋白作为从癌症患者的血液检测和分离间质和上皮-间质转化的循环肿瘤细胞的新颖生物标志物。此外，提供一种对循环肿瘤细胞上的细胞表面波形蛋白的检测具有特异性的抗体以及所述抗体检测、计数和分离CTC的用途。

摘要： 本发明提供了一种抑制人羊膜上皮细胞上皮间质转化的方法。具体地，本发明提供了一种在体外抑制人羊膜上皮细胞上皮间质转化(EMT)的方法，包括步骤：(i)在存在式I化合物的培养体系中，培养人羊膜上皮细胞。本发明所筛选到的方法中，所述化合物在抑制人羊膜上皮细胞上皮间质转化方面的具有显著效果，并且其对细胞的细胞活性和增殖能力没有影响，对细胞毒副作用较小；并且，本发明从基因表达水平和蛋白表达水平验证了式I化合物对于人羊膜上皮细胞有维持上皮表型、干细胞特性和抑制间质细胞特性的作用。

摘要： 本实用新型涉及一种间质型与间质上皮转化型循环肿瘤细胞检测试剂盒，该方案包括盒体、试剂座、保护盖板及盒盖；所述盒体内设有用于对试剂座进行保护支撑的柔性支撑层，盒体左右两内壁上分别设有一弹性夹持板，盒体前后两内壁上均设有冷盒；所述试剂座上设有多个用于放置试剂和样品的放置槽；所述保护盖板上设有对应放置槽的避让槽，且保护盖板前后两端分别设有一固定孔，盒体上设有与固定孔配合将保护盖板与盒体锁定的第一锁定件；所述盒体与盒盖可拆卸连接，该实用新型具有防跌性能好，可有效保护盒体内的试剂等不会掉出盒体外。

摘要： 本实用新型涉及一种间质型与间质上皮转化型循环肿瘤细胞伴随诊断试剂盒，该方案包括盒体、试剂座、保护封盖、盒盖及蓄冷盒；所述盒体内底面设有保温保护层，且所述保温保护层上设有定位框，所述定位框上设有用于安放蓄冷盒的安装槽和用于安装试剂座的定位槽，且所述盒体外设有半导体制冷片，所述半导体制冷片的冷端通过换热块和换热管分别与蓄冷盒抵接，半导体制热端设于盒体外且表面设有散热器，盒体外壁上设有与半导体制冷片电连接的电源盒；所述盒体与盒盖表面均覆盖有保温隔热层，该诊断盒具有可持续制冷，相比当用蓄冷盒的方式，冷藏时间更长，且通过对盒体与盒盖进行保温处理，保温效果好。

摘要： 本申请涉及检测器具领域，特别是涉及上皮型与上皮间质转化型循环肿瘤细胞检测试剂盒，其设计组合合理、既可直接用于常温环境的保存与运输，又可对于低温保藏试剂进行冷链运输储存，确保了试剂盒中的试剂耗材组合有效性，同时方便对药品试剂名称进行查看，提高使用效果；包括盒体、盒盖、隔板、试管架、吸水盘、网板、冰袋组和固定座，盒盖设在盒体顶部，盒体顶部设有安置槽，隔板固定在安置槽内侧壁上，吸水盘放置在安置槽内底壁上，网板分设在隔板底部两侧，冰袋组分放在网板与安置槽侧壁之间，试管架抽拉固定在两侧网板之间，固定座位于隔板上方，固定座顶部设有材料放置槽和若干药品放置槽，并在每个药品放置槽旁侧均设有名牌块。

摘要： 本发明涉及一种三阴性乳腺癌细胞上皮间质转换过程中对内皮细胞分泌功能影响的检测方法，选取三阴性乳腺癌细胞株MDA‑MB‑231及人脐静脉内皮细胞HUVEC，设置实验组：MDA‑MB‑231和HUVEC共培养组、对照组：MDA‑MB‑231单独培养组；将实验组和对照组均应用10ng/ml TGF‑β刺激36小时后，应用TMT定量蛋白质组表达谱分析两组中细胞上清中分泌蛋白的差异表达，比较SERPINE(PAI‑1)因子在共培养组和单独培养组的分泌结果。三阴性乳腺癌细胞上皮间质转换的过程中三阴性乳腺癌细胞株能够促进内皮细胞分泌趋化因子CCL5，从而促进三阴性乳腺癌细胞的转移。

摘要： 本发明涉及一种三阴性乳腺癌细胞上皮间质转换过程中对内皮细胞分泌功能影响的检测方法，选取三阴性乳腺癌细胞株MDA‑MB‑231及人脐静脉内皮细胞HUVEC，设置实验组：MDA‑MB‑231和HUVEC共培养组、对照组：MDA‑MB‑231单独培养组；将实验组和对照组均应用10ng/ml TGF‑β刺激36小时后，应用TMT定量蛋白质组表达谱分析两组中细胞上清中分泌蛋白的差异表达，比较SERPINE(PAI‑1)因子在共培养组和单独培养组的分泌结果。三阴性乳腺癌细胞上皮间质转换的过程中三阴性乳腺癌细胞株能够促进内皮细胞分泌趋化因子CCL5，从而促进三阴性乳腺癌细胞的转移。