抗原蛋白

摘要： 为了制备非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p30蛋白卵黄抗体,研究卵黄抗体的生物活性。试验构建了pET-32a-p30原核表达载体,制定了科学的免疫程序和样本采集方法。提取卵黄液,进行二次盐析,得到对应的卵黄抗体。用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定卵黄抗体效价,用免疫印迹(Western blotting)技术对其生物活性进行鉴定。ELISA试验表明:首次免疫p30蛋白7 d后,能够在蛋鸡的血清中检测出抗体(IgY),14 d后在卵黄中能够提取到IgY,35 d后IgY效价达到最高值。IgY具备和哺乳动物产生的IgY不同的生物活性,并可具有较高的特异性和稳定性,在免疫学研究中具有重要的价值。利用IgY进行实验检测,具有突出优势。通过抗原即ASFV p30蛋白免疫蛋鸡,分离提纯免疫蛋白,检测其生物活性,可用于鉴定非洲猪瘟。

摘要： 目的:筛选高产蛋白酶菌株,探究微生物发酵对豆粕抗原蛋白的影响,以期提高豆粕在水产饲料中的使用价值。方法:从土壤样品中筛选出1株蛋白酶酶活为1390.6±12.5 U/mL的菌株LX-6,经生理生化特性和16S rDNA分子鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。通过B.amyloliquefaciens LX-6不同时间发酵豆粕,分析SDS-PAGE中大分子抗原蛋白降解情况、发酵样品总蛋白以及水溶性蛋白含量。结果:在37°C、物料含50%水的条件下,发酵24 h豆粕中大分子抗原蛋白全部降解,48 h时水溶性蛋白含量达到最高44.45%。结论:B.amyloliquefaciens LX-6发酵后有效提高了豆粕的蛋白含量,此发酵豆粕有望今后开发成水产饲料。

摘要： 2021年3月,山东省龙口市某养猪场发生了一起以败血症为主要临床症状的烈性传染病。为对引起此次疫病的病原进行确诊,无菌采集发病死亡仔猪的肝脏、脾脏等脏器进行染色镜检、病原分离培养、生化鉴定及PCR检测。结果显示,本次分离株的形态结构、培养特性及生化结果与多杀性巴氏杆菌较为一致,且可特异性扩增出多杀性巴氏杆菌特异性基因Kmt,因此本次分离菌株为一株猪源多杀性巴氏杆菌,命名为LK01。随后,对该分离株的5个主要抗原蛋白基因(OmpH、OmpA、AspA、pIpE和TAA)进行克隆与原核表达。先将PCR成功扩增出的目的片段与双酶切回收后的pCold-I载体进行同源重组连接,测序结果正确的重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,随后经IPTG诱导后进行Western blot检测。结果显示,在30.0、21.5、52.0、37.5和45.5 kDa处出现特异性条带,表明各重组蛋白均成功表达。本研究为开展猪源多杀性巴氏杆菌病的流行病学研究,开发新型重组疫苗与诊断试剂奠定了基础。

摘要： 试验旨在探究不同碱性蛋白酶酶解对豆粕品质的影响。在酶解条件一致(加酶200 U/g、料水比1∶1、温度40°C、酶解时间48 h)的情况下,使用不同的碱性蛋白酶对豆粕进行酶解。结果显示,豆粕经过酶解后,颜色、气味变重,质地水润黏稠,pH值下降约35%,干物质含量减少约10%,蛋白水解度增加约43%,小肽含量最少增加103%,最多增加307%,抗原蛋白几乎全部被降解。研究表明,不同的碱性蛋白酶对豆粕品质的改善效果不同,可以选择适宜的碱性蛋白酶进行降解试验,提高利用率。

摘要： 一种饲用复合酶制剂及其使用方法专利类型:发明公开申请(专利)号:CN202110724840.2申请日:2021-06-29申请公布号:CN113491301A公开公告日:2021-10-12申请人:武汉新华扬生物股份有限公司发明人:陶敏;张成杰;詹志春;周樱摘要:本发明属于饲料添加剂技术领域,具体提供了饲用复合酶制剂及其使用方法,通过超级耐热型葡萄糖氧化酶与葡萄糖反应产生的过氧化氢将抗原蛋白的一级和二级蛋白结构打开。

摘要： 研究采用复合菌分步发酵技术发酵大豆皮,以评估不同发酵时间、发酵温度、含水量等发酵工艺条件对大豆皮发酵效果的影响.结果表明:碳源和氮源添加比例为15:4时,其对抗营养因子的降解效果优于其他组合;不同的发酵时间、发酵温度、接种量、含水量等发酵参数对大豆皮抗营养因子的降解效果具有明显的影响,尤其以发酵温度37°C、含水量50％、枯草芽孢杆菌接种量1％、发酵时间为48 h为宜;复合菌厌氧发酵大豆皮可明显改善发酵料的气味和适口性,提高发酵料产品品质和产品稳定性.可见,采用复合菌分步发酵技术可使发酵大豆皮达到很好的发酵效果.

摘要： 猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体引起的一种重要的猪的呼吸道疾病,中国每年由此病造成的直接经济损失超过100亿元.现有的疫苗免疫保护效果不完全,且不能清除病原.因此,研发新型更加有效的疫苗是防制猪支原体肺炎的重要研究方向.本研究目的是表达并纯化猪肺炎支原体候选抗原蛋白,为后续的抗原筛选提供研究工具.本研究发现所有基因均能在大肠杆菌中以具有良好天然构象的可榕形式与GST蛋白可搭表达，表达的融合蛋白分子量分别为65kDa,70kDa、94kDa、81kDa、70kDa、45kDa、70kDa、79kDa、62kDa、95kDa、79kDa、57kDa、92kDa、72kDa、92kDa、51kDa、76kDa、92kDa、86kDa.Mhp252、Mhp390、Mhp404、Mhp424、Mhp433、Mhp504能被PsP酶酶切，酶切后的蛋白分子量分别为39kDa、68kDa、55kDa、44kDa、44kDa和66kDa。该研究为猪肺炎支原体基因工程疫苗的研发提供了研究材料。

摘要： 为有效检测发酵豆粕中的抗原蛋白水平,试验选择0.6％的KOH来破坏发酵豆粕因干燥形成的蛋白质变性表层,有效释放可溶性蛋白,使用Gelanalyzer软件对其SDS-PAGE电泳图进行蛋白质条带分析,从而得出抗原蛋白所占可溶性蛋白比例及其降解程度.

摘要： 目的：调查Anaplasma phagocytophilum在不同组织细胞间产生抗原差异的原因.方法：采用RT-PCR技术,对A.phag ocytophilum在不同组织细胞中的抗原蛋白的表达差异进行分析.并利用真核无细胞蛋白表达系统合成重组蛋白,用western blot法进行测试.结果：RT-PCR结果表明A.phagocytophilum根据组织培养细胞的不同,在菌体表面产生不同的P44外膜蛋白.通过检测认定3种P44蛋白是容易与患者血清中抗体结合的抗原蛋白,可作为HGA的诊断用抗原.结论：不同的组织细胞间存在抗原性差异的各式A.phagocytophilum.

摘要： 目的:采用免疫组化SABC法检测大鼠骨骼肌组织中血管内皮细胞CD34的表达水平，用以显示和计数微血管密度，更好地观察评价傅氏生化汤促血管新生效应。方法:采用切除右侧股动脉的方法建立后肢缺血模型.然后实验组每日给予傅氏生化汤提取剂灌胃.免疫组化检测CD34抗原蛋白的表达情况并计算微血管密度.结果:SHT各组都能增强后肢缺血大鼠的CD34抗原蛋白的表达(P＜0.01),CD34阳性表达主要定位于微血管壁,肌膜和肌纤维.SHT中剂量组和SHT大剂量组能明显增加后肢缺血大鼠骨骼肌的MVD.结论:傅氏生化汤提取剂对大鼠缺血后肢组织表达CD34蛋白有诱导作用,提示该方剂有对大鼠后肢缺血组织有促血管新生作用.

摘要： 本研究分别进行了体、内外两个试验。体外试验分析了酶水解对抗原蛋白GIycinin和β-Conglycinin免疫活性的降解，然后通过体内试验观察了大豆抗原蛋白在不同生理阶段猪体内免疫活性的变化，同时比较了大豆抗原对不同生理阶段猪生长性能和养分消化率的影响。结果表明：β-Conglycinin在胃中有较差的消化率，而GlyciIliIl在小肠中抵制胰蛋白酶消化；大豆抗原蛋白的存在是导致不同生理阶段猪对抗原蛋白敏感性差异的原因。

摘要： 以大豆抗原蛋白和胰蛋白酶抑制因子等蛋白类的抗营养因子为筛选培养基的中唯一氮源，从不同土样中分离到169株芽孢杆菌。从中得到1株对大豆11S和7S抗原蛋白、胰蛋白抑制因子的降解能力强的菌株B9，根据该菌的形态观察和生理生化特征，以及16srDNA序列测定鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。通过与发酵豆粕生产菌株B3b的比较试验，B9对大豆11s和7s抗原蛋白的降解程度分别为63.12％和52.56％，对胰蛋白抑制因子则达到57.24％，与B3b相比分别提高了39.28％，48.22％及2.82％。

摘要： 本文综述了转基因苜蓿、转基因植物疫苗的优点，转基因苜蓿植物疫苗的研究进展，及克服转基因植物疫苗存在问题的方法，如建立高效表达载体提高抗原蛋白的表达量，连接上适当的定位信号序列修饰外源基因，使外源蛋白蛋白特异性集中的表达于某一部位增加疫苗的稳定性，选用合适的基因转化方法和转化受体，优化转化过程等，并针对转基因植物疫苗存在的问题展开了探讨，提出了今后的发展方向。

摘要： 利用基因工程技术构建植物生物反应器,生产畜禽的植物基因工程疫苗是新兴的研究领域,和其它疫苗相比,它具有廉价、安全、有效等优点。在最近的研究中,越来越多的抗原蛋白在植物中得到了表达。应用植物基因工程生产畜禽疫苗对预防集约化饲养动物传染病的发生和流行,具有重要意义。作者就植物基因工程疫苗的特点、以及在畜禽业的应用和发展前景进行了综述。

摘要： 本文探讨慢性丙型肝炎患者体内不同功能区抗体的免疫应答及与HCVRNA浓度的关系；克隆表达丙型肝炎病毒不同功能区优势表位抗原蛋白(HCV-C、NS3、NS4、NS5和HVR1),建立单片段ELISA法检测抗HCV抗体,并以定量HCVRT-PCR法检测患者血清中HCVRNA浓度。研究结论:HCV-C、NS3、NS4、和HVR1抗体滴度与HCVRNA浓度均有较好的相关性。

摘要： 本发明提供了一种蛋白抗原的纯化方法，其中，该纯化方法中速离心去除表达的蛋白液中的大分子杂质，用核酸酶处理该去除大分子杂质后的蛋白液，以去除宿主菌的核酸，加入EDTA抑制核酸酶；以及用凝胶层析对该抑制了核酸酶的蛋白液进行纯化分离，以获得纯化的蛋白抗原。本发明的纯化方法能相当程度地保留免疫原性，且显著增加纯化蛋白的收率。本发明还提供了该纯化方法制备的蛋白抗原，以及用其制备的疫苗。

摘要： 本发明公开了一种用于EB病毒衣壳抗原和核抗原1蛋白抗体联合检测的蛋白质芯片及其制备和应用，其特征在于：蛋白质芯片用于人血清中EB病毒衣壳抗原IgM抗体、衣壳抗原IgG抗体和核抗原1蛋白IgG抗体的联合检测；所述蛋白质芯片是在固相载体表面点阵固定有EB病毒衣壳抗原探针和EB病毒核抗原1蛋白探针；所述固相载体为S‑S‑PEG‑COOH化学修饰的金箔芯片，在所述S‑S‑PEG‑COOH上用EDC和NHS活化羧基以固定特异性抗原为探针。本发明的芯片具有高特异性和敏感性，其可视检测限与CLIA法测得EB病毒抗体的最低检测限近乎相同，且其可以实现高通量联合检测。

摘要： 编码一种表达于人T细胞表面的嵌合抗原受体蛋白的核酸，所述嵌合抗原受体蛋白包含顺序连接的胞外结合区，跨膜区和胞内信号区，其中所述胞外结合区包含特异性识别人表皮生长因子受体EGFR的第287‑302位氨基酸表位的单链抗体scFv(EGFR)。

摘要： 本发明涉及一种β‑乳球蛋白的抗原表位肽、完全抗原、抗体以及测定β‑乳球蛋白残留量的方法。抗原表位肽的氨基酸序列为CGAQALIVTQTMKGLDIQKVAGTWYS。测定β‑乳球蛋白残留量的方法为：S1：合成β‑乳球蛋白作用表位肽。S2：将β‑乳球蛋白作用表位肽制备为完全抗原。S3：制备单抗或多抗。S4：以步骤S3的单抗或多抗为一抗，采用间接竞争ELISA方法检测不同蛋白酶水解β‑乳球蛋白的水解液中β‑乳球蛋白残留量。本发明通过间接竞争ELISA方法实现β‑乳球蛋白的测定，以β‑乳球蛋白的AA12～37抗原表位肽作为免疫原，利用该免疫原制备测定所需的抗体。制备的抗体对β‑乳球蛋白水解物中残留的含有作用表位的肽段有极高的特异性，检测更加准确。

摘要： 本发明提供了一种蛋白抗原的纯化方法，其中，该纯化方法中速离心去除表达的蛋白液中的大分子杂质，用核酸酶处理该去除大分子杂质后的蛋白液，以去除宿主菌的核酸，加入EDTA抑制核酸酶；以及用凝胶层析对该抑制了核酸酶的蛋白液进行纯化分离，以获得纯化的蛋白抗原。本发明的纯化方法能相当程度地保留免疫原性，且显著增加纯化蛋白的收率。本发明还提供了该纯化方法制备的蛋白抗原，以及用其制备的疫苗。

摘要： 本发明公开一种可有效地适用于恙虫感染与否的诊断并作为恙虫疫苗进行使用的从TSA56抗原的保守序列导出的全新重组蛋白抗原以及使用上述重组蛋白抗原的疫苗组合物。

摘要： 本发明涉及一种制备水貂犬瘟热抗原蛋白复合物的方法、抗原蛋白复合物及其应用，属于生物制药领域。用低血清培养基悬浮VeroE6‑TY株细胞培养驯化水貂犬瘟热病毒，驯化后的病毒接种到低血清悬浮VeroE6‑TY株细胞培养液中，培养增殖后收获毒液，制备水貂犬瘟热抗原蛋白复合物。本发明使得水貂犬瘟热抗原蛋白复合物实现了从转瓶贴壁培养向大规模细胞悬浮培养的转变，这不仅简化了生产工艺，降低了生产成本，还大大提高了产品的产量和质量。

摘要： 本申请提供一种嗜吞噬细胞无形体重组蛋白抗原的制备方法，包括：含有p44基因的基因片段的反转录及PCR扩增、扩增产物的回收和克隆、目标基因的提取及再确认、重组蛋白抗原rP44‑47E合成的步骤。本申请的嗜吞噬细胞无形体重组蛋白抗原的制备方法，能单一、高效且大量制备重组蛋白抗原rP44‑47E；所制备的重组蛋白抗原rP44‑47E表达量和稳定性高，克服了p44全基因组抗原表达量低且不易制备的缺点，所制得的重组蛋白抗原rP44‑47E作为抗原蛋白具有特异性高、能有效降低检测成本、易于标准化的特点。

摘要： 本发明涉及一种制备水貂细小病毒性肠炎抗原蛋白复合物的方法、抗原蛋白复合物及其应用，属于生物制药领域。用低血清培养基悬浮F81‑TY株细胞培养驯化水貂细小病毒性肠炎病毒，驯化后的病毒接种到低血清悬浮F81‑TY株细胞培养液中，培养增殖后收获毒液，制备水貂细小病毒性肠炎抗原蛋白复合物。本发明使得水貂细小病毒性肠炎抗原蛋白复合物实现了从转瓶贴壁培养向大规模细胞悬浮培养的转变，这不仅简化了生产工艺，降低了生产成本，还大大提高了产品的产量和质量。

摘要： 本发明涉及一种制备水貂犬瘟热抗原蛋白复合物的方法、抗原蛋白复合物及其应用，属于生物制药领域。用低血清培养基悬浮VeroE6‑TY株细胞培养驯化水貂犬瘟热病毒，驯化后的病毒接种到低血清悬浮VeroE6‑TY株细胞培养液中，培养增殖后收获毒液，制备水貂犬瘟热抗原蛋白复合物。本发明使得水貂犬瘟热抗原蛋白复合物实现了从转瓶贴壁培养向大规模细胞悬浮培养的转变，这不仅简化了生产工艺，降低了生产成本，还大大提高了产品的产量和质量。