愈伤诱导

摘要： 以三叶木通成熟种子的幼胚为材料,探讨不同浓度2,4-D(1.0、2.0、4.0 mg/L)、NAA(0.05、0.1、0.2、0.5、1.0 mg/L)、6-BA(0.1、0.2、0.5、1.0 mg/L)、KT(0.2、0.5、1.0 mg/L)的植物生长调节剂对三叶木通愈伤组织的诱导及体细胞胚胎发生的影响,分别筛选出诱导愈伤组织、体细胞胚、次生胚增殖、植株再生的最适培养基,以此间接途径建立三叶木通体细胞胚胎发生及植株再生体系。结果表明:三叶木通种子最佳灭菌处理方式为0.1%HgCl2灭菌18 min,无菌水冲洗干净后接种在添加了0.05%PPM的愈伤诱导培养基上;三叶木通幼胚诱导愈伤组织的最佳培养基是MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA,愈伤诱导率为95.67%;胚性愈伤诱导三叶木通体胚发生的最佳培养基为MS+0.1 mg/L NAA+0.2 mg/L 6-BA,体胚诱导率为55%;次生胚增殖的最佳培养基为MS+0.05 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA,增殖倍数达19.84,体胚随继代次数增多逐渐分化,次生胚增殖活力变弱;成熟的体胚分化后一部分可再生成苗,在MS中能起到壮苗作用,再生植株转移至人工光照培养箱中炼苗3~5 d再转入V(泥炭土)∶V(蛭石)∶V(珍珠岩)为2∶1∶1的基质中能够稳定生根成活且形态正常。

摘要： 以经过越冬后刚发芽的大同黄花菜幼叶为材料,进行愈伤组织的诱导和分化。结果表明,幼叶用0.1%HgCl2灭菌8 min外植体污染率、死亡率均为0。幼叶在MS+2 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L 6-BA培养基观察到最高的出愈率,为41.67%;在MS+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA培养基愈伤组织分化率达到65%,平均每块愈伤组织不定芽个数为1.48。生根培养基为不添加植物激素的MS培养基,平均每个芽苗生根数为3.21,组培苗炼苗移栽后成活率达到85.42%。该技术经济实用、简单易操作,可应用于大同黄花菜的快速繁殖。

摘要： 以大花海棠带顶芽茎段为试验材料,建立外植体直接诱导组培苗和愈伤组织间接诱导成苗2种途径,通过单因素和完全组合试验,研究不同种类植物激素及其不同质量浓度对愈伤组织诱导、丛芽诱导及组培苗壮苗的影响,筛选最佳再生途径以及最佳培养基。结果表明:外植体通过愈伤组织诱导,再生植株成苗周期较长,但丛芽增殖系数高,组培苗生长健壮,更适合工厂化大规模生产。

摘要： 对易形成愈伤组织的不同谷子品种进行筛选,优化愈伤分化体系,为谷子功能基因的遗传转化奠定基础。本研究对31个宜在承德本地播种的谷子品种进行筛选,以茎尖为材料进行组织培养,综合分析筛选出发芽率高、愈伤组织诱导率高、染菌率低的4个品种分别是:红粘谷、9115、长农35、师院-1。后续研究以师院-1的茎尖为实验材料,探究谷子愈伤组织诱导及分化最适条件。结果显示,2,4-D浓度为1.0 mg/L时,愈伤诱导率最高;KT与1.0 mg/L 2,4-D搭配诱导愈伤的最适浓度为0.1 mg/L;ZT与1.0 mg/L 2,4-D搭配诱导愈伤的最适浓度为1.0 mg/L。选择胚性愈伤组织进行分化条件探究,结果表明,诱导愈伤分化的激素配比为1.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L TDZ,生芽率为35%;2.0 mg/L 6-BA+0.6 mg/L NAA,生芽率为28%。本研究为谷子茎尖组织培养和遗传转化研究提供参考。

摘要： 为筛选蒙古黄芪种子萌发前适宜的消毒剂和诱导愈伤组织适宜的培养基,以0.1％HgCl2和2％NaClO处理不同时间,筛选适合蒙古黄芪种子灭菌的最佳方法,并获得无菌苗;分别以无菌苗的下胚轴和叶片为外植体,接种到附加6-BA、2,4-D和NAA不同质量浓度及其组合的培养基中诱导愈伤组织,以筛选适宜培养基,并通过测定其鲜质量,绘制愈伤组织生长曲线.结果显示,蒙古黄芪种子的最佳灭菌方法为0.1％HgCl2灭菌处理10 min;MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA最适于下胚轴愈伤组织诱导,诱导率达88％,且愈伤组织色绿、致密;MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L NAA最适于叶片愈伤组织诱导,诱导率达93％,且愈伤组织生长良好,不易褐化.通过绘制愈伤组织生长曲线,结果显示,黄芪下胚轴愈伤组织生长略强于叶片愈伤组织生长,二者均在生长第5天进入对数生长期,第25天进入生长停滞期,说明20～25 d为最适继代周期,可保持其旺盛生长.黄芪种子灭菌处理和愈伤组织诱导培养基的筛选结果可为蒙古黄芪组培快繁提供理论依据.

摘要： 构建水稻LBD基因家族中CRL1基因的CRISPR/CAS9基因敲除载体,并转化中花11水稻愈伤,获得了8个转基因片段缺失家系;对CRL1基因敲除材料种子进行愈伤诱导实验;结果显示,它们的愈伤组织诱导受到了强烈抑制,与已知的水稻OsIAA10基因的RNA干扰材料表型相似。进行OsIAA10的亚细胞定位实验,结果显示,OsIAA10同时定位在细胞核与细胞膜上。通过酵母双杂交筛库实验,发现OsIAA10能与OsARF家族成员中的OsARF5、OsARF1、OsARF721、OsARF23四个转录因子发生互作。以CRL1基因启动子为诱饵构建载体,进行酵母单杂交点对点实验,结果显示,这4个转录因子中只有OsARF5与OsARF21能特异性结合CRL1基因启动子区的AuxRE基序,激活CRL1基因转录。本研究结果初步证明水稻侧根发育通路与愈伤组织诱导过程存在直接相关,水稻与双子叶植物之间存在保守的生长素调控机制,在水稻种子的愈伤组织诱导过程中发挥着重要的作用。

摘要： 东方百合‘索邦’作为市售主流鲜切花百合品种,具有巨大的市场潜力。为满足市场需求,利用花器官作为初始材料,对东方百合‘索邦’离体培养涉及的愈伤组织诱导、丛生芽增殖及生根培养等相关技术进行研究。结果表明,子房为合适的初始诱导外植体,进一步扩繁诱导愈伤组织时适宜选用叶片下部或鳞茎片为外植体,合适的愈伤组织诱导培养基为MS+2.0 mg·L^-12,4-D+0.2 mg·L^-16-BA+30 g·L^-1蔗糖+6.5 g·L^-1琼脂,pH 5.8。丛生芽增殖培养基为MS+1.0 mg·L^-16-BA+0.1 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖+6.5 g·L^-1琼脂,pH 5.8。生根培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖+6.5 g·L^-1琼脂,pH 5.8。结果为进一步完善东方百合‘索邦’的离体培养体系,进行优质种球的规模化生产提供基础。

摘要： 以珍稀濒危植物香果树的叶片、叶柄、茎段为外植体,进行胚性愈伤组织诱导,并针对愈伤组织继代培养中褐化严重的问题进行抗褐化剂的筛选.实验结果表明,叶柄是香果树愈伤组织诱导的最适外植体,依次用75%酒精处理60 s、0.2% HgCl2处理15 min灭菌效果最好,并选定了香果树愈伤组织最适诱导培养基和继代培养基.

摘要： 以珍稀濒危植物香果树的叶片、叶柄、茎段为外植体,进行胚性愈伤组织诱导,并针对愈伤组织继代培养中褐化严重的问题进行抗褐化剂的筛选。实验结果表明,叶柄是香果树愈伤组织诱导的最适外植体,依次用75%酒精处理60 s、0.2%HgCl_(2)处理15 min灭菌效果最好,并选定了香果树愈伤组织最适诱导培养基和继代培养基。

摘要： 甘青青兰是传统的藏药材,具有止咳化痰,和胃疏肝,清热利水等重要的药用价值。由于野生资源被大量挖掘破坏,目前甘青青兰野生遗传多样性受到严重威胁。其再生体系的建立对于甘青青兰野生资源保护和可持续利用具有重要意义。获得无菌苗是建立植物再生体系的基础,本研究首先以75%乙醇和不同浓度的次氯酸钠作为消毒剂依次对种子进行消毒处理,后置于MS固体培养基上萌发;研究结果表明,75%乙醇处理1 min后,用5%次氯酸钠处理10 min对种子的消毒及萌发综合效果最佳,萌发率达68%。甘青青兰种子萌发15 d后,子叶完全展开;取子叶作为外植体,通过调整激素配比,探究了甘青青兰植株再生的最佳体系。研究结果表明:甘青青兰愈伤诱导最佳培养基为MS+2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;不定芽诱导最佳培养基为MS+2 mg/L 6-BA+1 mg/L IAA+2 mg/L ZT。本研究建立的植株再生体系为后续进行甘青青兰野生资源保护和遗传育种提供了理论基础。

摘要： 为了解决黄竹分株,扦插等无性繁殖方式存在系统年龄的问题,以黄竹成熟种胚为外植体,研究不同植物生长调节剂对黄竹愈伤诱导、愈伤分化不定芽以及生根的影响,建立稳定的繁殖再生体系.结果表明:黄竹愈伤诱导最佳培养基为MS+2,4-D5mg·L-1+KT0.4mg·L-1+Pro500mg·L-1+CH500mg·L-1,诱导率达到73％.愈伤组织分化最佳培养基为MS+6-BA3mg·L-1+NAA1mg·L-1+KT1mg·L-1.最佳生根培养基为1/2MS+6-BA0.3mg·L-1+NAA3mg·L-1+IBA0.5mg·L-1.组培苗移栽到体积配比为1:1的珍珠岩和腐殖土的基质中,成活率达到100％.

摘要： 目的:筛选优化阿来源黄芩愈伤组织诱导条件及再生体系培养条件。方法:分别将其茎段、根段和叶片在光照或黑暗条件下,放在含有不同激素组合的MS固体培养基上诱导愈伤、芽和根组织。结果:0.5m/L2,4-D和1.0mg/LNAA适合两来源黄芩愈伤的诱导。且在三种外植体中,茎段诱导最易获得愈伤组织,光照条件对北京来源黄芩茎的愈伤诱导率有促进作用。低浓度(1.3mg,L)的TDZ均可以诱导两来源黄芩芽的分化,且在MS基本培养基中两来源黄芩的根组织诱导率均为100%。结论:适合两来源黄芩愈伤诱导的条件为:以茎段为外植体,培养基为含有6-BA、0.5mg/L2,4-D和1.0mg/L NAA的MS培养基。芽诱导的条件为:含有1mg/L TDZ的MS培养基;根诱导的条件为:无激素的MS培养基。

摘要： 试验研究了培养基、激素组合、培养方法、pH值、活性碳以及继代培养次数等因素对五种不同品种的蔺草愈伤组织诱导和植株再生的影响,以期建立高效的蔺草植株再生体系.切下蔺草基部1～2 mm茎段放在21种含有不同2,4-D和BA以及2,4-D和KT浓度组合的MS[1]培养基中.在加4 mg/L2,4-D和0.5 mg/L BA的MS培养基中,农林4号有最高的愈伤诱导率(90.48％),而对其它4个品种而言,2 mg/L2,4-D和0.5 mg/LBA激素组合愈伤诱导率最高.胚性愈伤组织需要培养基更新才能实现植株再生,首先需要将胚性愈伤组织在含有0.5 mg/L BA和1 mg/L KT的分化培养基1中培养10 d,然后转移到含有0.5 mg/L BA,1 mg/L KT和3 mg/LIAA的分化培养基2中再培养10d,台湾绿种由此得到最高的植株再生率(74.67％).pH值、在合适的培养基中添加活性炭、以及通过愈伤继代选择合适愈伤生长状态是影响植株再生的其它重要因素.通过不同激素组合和培养基更新,我们成功实现5种不同蔺草品种的植株再生.在pH值为5.6的继代培养基2中添加活性炭,得到了高达83.48％的植株再生率.从胚性愈伤建立起来新的植株再生体系目前正被用于笔者蔺草转基因和植株离体诱变等育种研究中.

摘要： 红掌是具有重要观赏价值和经济价值的花卉,具有广阔的市场前景.本文以盆栽红掌优良品种为材料,进行了组培快繁技术研究.结果表明：适宜红掌愈伤组织诱导的培养基为改良MS+6-BA1.0mg·L-1+2,4-D0.2～0.5mg·L-1;适宜增殖的培养基为MS+6-BA0.5～1.0mg·L-1+NAA0.1～0.2mg·L-1;最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg·L-1+AC1g·L-1+蔗糖15g·L-1.

摘要： 红掌是具有重要观赏价值和经济价值的花卉,具有广阔的市场前景.本文以盆栽红掌优良品种为材料,进行了组培快繁技术研究.结果表明：适宜红掌愈伤组织诱导的培养基为改良MS+6-BA1.0mg·L-1+2,4-D0.2～0.5mg·L-1;适宜增殖的培养基为MS+6-BA0.5～1.0mg·L-1+NAA0.1～0.2mg·L-1;最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg·L-1+AC1g·L-1+蔗糖15g·L-1.

摘要： 红掌是具有重要观赏价值和经济价值的花卉,具有广阔的市场前景.本文以盆栽红掌优良品种为材料,进行了组培快繁技术研究.结果表明：适宜红掌愈伤组织诱导的培养基为改良MS+6-BA1.0mg·L-1+2,4-D0.2～0.5mg·L-1;适宜增殖的培养基为MS+6-BA0.5～1.0mg·L-1+NAA0.1～0.2mg·L-1;最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg·L-1+AC1g·L-1+蔗糖15g·L-1.

摘要： 红掌是具有重要观赏价值和经济价值的花卉,具有广阔的市场前景.本文以盆栽红掌优良品种为材料,进行了组培快繁技术研究.结果表明：适宜红掌愈伤组织诱导的培养基为改良MS+6-BA1.0mg·L-1+2,4-D0.2～0.5mg·L-1;适宜增殖的培养基为MS+6-BA0.5～1.0mg·L-1+NAA0.1～0.2mg·L-1;最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg·L-1+AC1g·L-1+蔗糖15g·L-1.

摘要： 红掌是具有重要观赏价值和经济价值的花卉,具有广阔的市场前景.本文以盆栽红掌优良品种为材料,进行了组培快繁技术研究.结果表明：适宜红掌愈伤组织诱导的培养基为改良MS+6-BA1.0mg·L-1+2,4-D0.2～0.5mg·L-1;适宜增殖的培养基为MS+6-BA0.5～1.0mg·L-1+NAA0.1～0.2mg·L-1;最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg·L-1+AC1g·L-1+蔗糖15g·L-1.

摘要： 本发明公开了一种诱导白木香愈伤细胞产生名贵中药沉香中的主要活性成分2‑(2‑苯乙基)色酮化合物的方法，包括将白木香愈伤细胞置于含有氯化钠75mM～300mM的生产培养基中进行培养。本发明方法简单，能够诱导白木香愈伤组织产生更多种类和更高含量的2‑(2‑苯乙基)色酮化合物。

摘要： 本发明公开了一种诱导与培养梨花药愈伤的方法，属于植物组织培养技术领域，包括如下步骤：(1)梨花蕾采回后，4°C预处理1‑5天；(2)对预处理后的花蕾进行清洗、消毒；(3)无菌条件下，拨开花蕾，取出花药，接种到诱导培养基上暗培养20‑45天，获得花药愈伤组织；(4)无菌条件下，将诱导出的花药愈伤组织接到增殖培养基中进行增殖培养。通过本发明方法获得的高质量胚性愈伤组织可满足遗传转化研究的需要。

摘要： 本发明公开了一种桃金娘诱导愈伤再生成苗的方法。包括以下步骤：A、将无菌的桃金娘试管苗叶片或者茎段作为外植体接种至愈伤组织诱导培养基上诱导培养，得到愈伤组织；B、将所述愈伤组织接种至增殖分化培养基上增殖分化培养，先得到颗粒致密的愈伤组织，后逐渐形成丛生芽；C、将所述丛生芽分切并移入生根培养基上进行生根培养，得到再生的小苗；D、将高6～8cm的生根试管苗去瓶盖置于自然光照下炼苗3～5天后，从培养瓶中取出试管苗并洗去根部培养基，移栽到由腐殖质土和黄沙泥混合成的基质中。本发明方法的操作简单、易于掌握，有利于开展桃金娘种苗扩繁的后续工作。

摘要： 本发明公开了一种杜梨花药愈伤的诱导及遗传转化方法，属于植物组织培养技术领域，杜梨花药愈伤的诱导方法包括如下步骤：(1)杜梨花蕾采回后，4°C预处理3‑7天；(2)对预处理后的花蕾进行消毒处理；(3)将花蕾中的花药取出，接种到诱导培养基上暗培养20‑60天，获得花药愈伤组织；(4)将诱导出的花药愈伤组织接到增殖培养基中进行增殖培养，获得胚性愈伤组织。通过本发明方法获得的高质量胚性愈伤组织用于遗传转化研究，转化率高，适于推广应用。

摘要： 本发明申请属于虎舌红植物组织培养技术领域，具体公开了一种虎舌红成熟胚愈伤诱导和分化及不定芽增殖方法，该方法包括成熟果实的获取、种子的预处理、种子消毒、胚的获取、愈伤组织诱导、分化和不定芽增殖培养。在超净工作台上，成熟种子经消毒处理，取出胚接种到培养基上，胚污染率为0；培养60～80天，愈伤组织诱导率为90％，愈伤组织分化率为48％；将分化的不定芽接种到增殖培养基中继续培养45～55天，不定芽增殖率可达1600％以上。本试验为虎舌红培育提供了一种高效的繁殖方法，以成熟胚为外植体，污染率低、诱导率高，培育周期短，不定芽数量多，为虎舌红繁殖、新品种开发和优良品种的保护奠定了基础。

摘要： 本发明涉及一种诱导桢楠快速愈伤的方法，以桢楠幼嫩叶片为外植体，经过外植体采集和清洁、消毒、切割和接种、暗培养以及光培养完成桢楠快速诱导愈伤，愈伤诱导率最高达到98.1％，且泛绿程度和愈伤增长量明显，为今后桢楠愈伤组织诱导，组织培养繁殖苗木，加速良种繁育，满足市场需求提供基础与相关技术支持。

摘要： 本发明提供了一种景天属植物外植体灭菌方法，包括：获取景天属植物外植体；用酒精浸泡景天属植物外植体；用0.08‑0.12w/w％的HgCl2水溶液对景天属植物外植体消毒2.8‑3.2min；用无菌水冲洗景天属植物外植体，得到灭菌的景天属植物外植体。本发明还提供了一种用于景天属植物愈伤组织诱导的诱导培养基，包括：MS培养基，5‑8g/L琼脂、25‑35g/L蔗糖、2.4‑2.6mg/L 6‑BA和0.09‑0.11mg/L NAA。本发明还提供了一种景天属植物愈伤组织诱导方法，使用前述诱导培养基诱导培养经前述方法灭菌的景天属植物的外植体以形成景天属植物愈伤组织。该方法愈伤诱导率高。

摘要： 本发明公开了一种高效诱导愈伤及再生的饲用狗牙根种质的筛选。本发明公开的饲用狗牙根种质的筛选方法包括：以‘Wrangler’的种子为外植体，在愈伤诱导培养基中诱导1个月，而后在继代培养基培养1个月，得到的黄色或淡黄色、形态为硬质颗粒状、致密又健康的胚性愈伤组织，即为目的饲用狗牙根种质，愈伤诱导培养基中2,4‑D的添加量3mg/L，PH为5.8，继代培养基中，2,4‑D、6‑BA的添加量分别为3mg/L、0.15mg/L，PH为5.8。利用本发明的饲用狗牙根胚性愈伤组织的诱导方法成功得到了黄色或淡黄色，形态为硬质颗粒状、致密又健康、分化率高的胚性愈伤组织。

摘要： 本发明公开了一种姜荷花品种玉如意愈伤诱导及高效再生的方法，以姜荷花玉如意种球萌发出的芽点作为外植体，或者以姜荷花玉如意的嫩叶叶鞘作为外植体，消毒，暗培养后产生愈伤组织，两周后愈伤组织块接入新配的愈伤诱导培养基进行增殖，再过两周后转入愈伤再分化成芽培养基，再过两周后进行继代。愈伤诱导培养基为：MS+0.5mg/L TDZ+0.5mg/L BA+0.3mg/L 2,4‑D，蔗糖30g/L，琼脂0.6g/L，遮光暗培养，温度为26±2°C；愈伤再分化成芽培养基为：MS+0.5mg/L TDZ+2.0mg/L BA+0.2mg/L NAA，蔗糖30g/L，琼脂0.6g/L，光照时间为16h每天，温度为26±2°C，光照强度1900‑5000 LX；继代培养基为：MS,0.5mg/L BA，蔗糖30g/L，琼脂0.6g/L，光照时间为16h每天，温度为26±2°C。本发明通过愈伤诱导和分化的方法进行姜荷花“玉如意”的组培，繁殖效率大大提高。

摘要： 本发明申请属于虎舌红植物组织培养技术领域，具体公开了一种虎舌红成熟胚愈伤诱导和分化及不定芽增殖方法，该方法包括成熟果实的获取、种子的预处理、种子消毒、胚的获取、愈伤组织诱导、分化和不定芽增殖培养。在超净工作台上，成熟种子经消毒处理，取出胚接种到培养基上，胚污染率为0；培养60～80天，愈伤组织诱导率为90％，愈伤组织分化率为48％；将分化的不定芽接种到增殖培养基中继续培养45～55天，不定芽增殖率可达1600％以上。本试验为虎舌红培育提供了一种高效的繁殖方法，以成熟胚为外植体，污染率低、诱导率高，培育周期短，不定芽数量多，为虎舌红繁殖、新品种开发和优良品种的保护奠定了基础。