心房肌细胞

摘要： 目的:探讨组织因子途径抑制物2(TFPI-2)对心房成纤维细胞和心房肌细胞功能的影响及相关分子机制。方法:采用ELISA法检测15例心房颤动(AF)患者和15名正常对照血清TFPI-2水平。分离、培养并鉴定SD乳鼠心房成纤维细胞和心房肌细胞。通过CCK-8实验检测0、50、100、200μg/L重组TFPI-2蛋白(rTFPI-2)处理24、48 h对心房成纤维细胞增殖能力的影响。采用Transwell小室实验检测100μg/L rTFPI-2处理24 h对心房成纤维细胞迁移能力的影响,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测rTFPI-2处理48 h对心房成纤维细胞和心房肌细胞凋亡的影响,采用Western blot法检测细胞中相关蛋白的表达。结果:AF患者血清TFPI-2水平低于正常对照(P0.05)。rTFPI-2下调心房成纤维细胞p-Erk1/2及MMP-9和MMP-2表达,上调PARP表达(P0.05);rTFPI-2抑制两种细胞Ⅲ型、Ⅰ型胶原表达(P<0.05)。结论:TFPI-2可抑制心房成纤维细胞增殖和迁移,促进心房成纤维细胞凋亡,但不增加心房肌细胞凋亡,TFPI-2能抑制两种细胞胶原合成;TFPI-2具有抑制心房纤维化的潜在价值。

摘要： 目的探讨CCAAT/增强子结合蛋白β(C/EBPβ)对心房肌细胞KCNQ1基因表达的调控作用。方法利用生物信息分析和转录因子筛选板筛选出C/EBPβ作为KCNQ1的转录因子。用5-Hz电刺激快速起搏心房肌细胞。用染色质免疫沉淀法检测C/EBPβ、KCNQ1 m RNA和蛋白的表达水平。将心房肌细胞转染慢病毒并分为对照组、C/EBPβ抑制组和过表达组,采用荧光定量PCR和蛋白质印迹技术检测KCNQ1的表达水平;采用膜片钳测定Iks膜电位和电流峰值。结果C/EBPβ参与了KCNQ1的转录,心房肌细胞中C/EBPβ、KCNQ1 m RNA和蛋白的表达水平快速起搏下显著高于非快速起搏下(均P<0.05)。与对照组比较,C/EBPβ抑制组KCNQ1 m RNA表达和Iks电流显著降低而C/EBPβ过表达组显著升高(均P<0.05)。结论C/EBPβ可能对心房肌细胞KCNQ1基因的表达有调控作用。

摘要： 目的:研究炙甘草汤对大鼠心房肌细胞L型钙电流(I_(Ca-L))及其动力学特征的影响。方法:选取24只大鼠随机分为空白对照组和炙甘草汤低剂量组(1.125 g/mL)、中剂量组(2.25 g/mL)、高剂量组(4.5 g/mL),每组6只。3组药物组大鼠分别按各自浓度给予相同体积的炙甘草汤药液灌胃,对照组大鼠予以等体积生理盐水灌胃。给药1周后利用酶解法对4组大鼠心房肌细胞进行急性分离,用全细胞膜片钳技术记录4组心房肌细胞I_(Ca-L)并比较I-V曲线,选取中剂量组与对照组的心房肌细胞比较I_(Ca-L)通道的动力学特征。结果:与对照组比较,炙甘草汤低、中、高剂量组的大鼠心房肌细胞I_(Ca-L)均发生不同程度的抑制效果,I-V曲线均上移。观察比较中剂量药物组与对照组的I_(Ca-L)通道动力学特征,发现2组细胞的激活曲线和半数激活电压,差异无统计学意义(P>0.05),但中剂量药物组细胞的稳态失活曲线发生向右偏移,半数失活电压V_(1/2)升高(P<0.05),失活后恢复曲线向下偏移,时间常数(τ)延长(P<0.01)。结论:炙甘草汤能够抑制大鼠心房肌细胞L型钙电流,减慢心房细胞钙通道失活速度,延长失活后恢复的时间,从而起到减慢心率的作用,这可能是炙甘草汤临床上治疗房性心律失常的作用机制。

摘要： 目的探讨小鼠心房肌细胞外泌体miR⁃130在房颤(AF)发病中的作用机制。方法用miR⁃130 shRNA慢病毒(sh⁃miR⁃130)或对照(sh⁃Crtl)转染小鼠心房肌细胞,然后进行AngⅡ处理。从处理过的心房肌细胞中分离出外泌体,与THP⁃1巨噬细胞共培养。进行流式细胞术以检查CD86和CD163阳性巨噬细胞的百分比。此外,通过构建横向主动脉弓缩窄术(TAC)小鼠模型,将sh⁃miR⁃130注射到小鼠体内以敲低miR⁃130表达,进一步研究miR⁃130在体内心脏纤维化过程和巨噬细胞极化中的作用。结果AngⅡ处理的心房肌细胞衍生的外泌体(AngⅡ⁃Exo)中miR⁃130表达上调。AngⅡ⁃Exo通过转移miR⁃130诱导巨噬细胞向M1极化。在有或没有sh⁃Ctrl对照处理的TAC小鼠中miR⁃130的水平显著升高,并且注射sh⁃miR⁃130的TAC小鼠的miR⁃130水平显著降低。sh⁃miR⁃130明显改善了TAC小鼠心脏的结构并减小了心肌大小、纤维化水平。此外,sh⁃miR⁃130处理后TAC小鼠左心房组织中iNOS^(+)/CD68^(+)巨噬细胞显著降低,和CD163^(+)/CD68^(+)巨噬细胞显著增加。结论在AngⅡ处理的心房肌细胞衍生的外泌体中miR⁃130的表达水平升高,并且外泌体通过转移miR⁃130促进了M1巨噬细胞极化。

摘要： 目的探讨转录辅激活因子p300是否参与调控心房肌细胞Kv1.5蛋白的表达。方法以Western Blot检测细胞和C57BL/6小鼠心房组织p300蛋白、钾离子通道蛋白Kv1.5的表达。HL-1细胞在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激的基础上使用p300抑制剂姜黄素或p300 siRNA干预,观察p300对Kv1.5蛋白表达以及超速延迟整流钾电流(I_(kur))的作用。全细胞膜片钳技术检测各组细胞的I_(kur)和动作电位时程(APD)。快速起搏心房观察小鼠心房颤动(房颤)的可诱发性。结果动物实验显示,与对照组相比,AngⅡ处理组小鼠有着明显更高的房颤诱发率(P<0.01),心耳组织p300以及Kv1.5蛋白表达明显升高(均P<0.05),而姜黄素干预后可以明显减少小鼠的房颤诱发率(P<0.01),并使p300和Kv1.5蛋白表达减少(P<0.05)。细胞实验显示,和对照组相比,AngⅡ处理组HL-1细胞p300以及Kv1.5蛋白表达明显升高(P<0.05),I_(kur)电流密度上升,APD缩短。在分别用p300抑制剂姜黄素和p300 siRNA干预后表现为p300和Kv1.5蛋白表达减少(P<0.05),I_(kur)电流密度下降,APD延长。结论AngⅡ可通过p300引起心房肌细胞Kv1.5蛋白表达上升,I_(kur)电流密度上升,引起心房肌细胞电重构。

摘要： 目的:探讨新生SD大鼠心房肌细胞的原代培养及鉴定,并对其中部分步骤进行改良。方法:采用出生1~3 d的SD乳鼠,运用“两步法”提取心房肌细胞,利用心房肌细胞与成纤维细胞贴壁时间不同和Brd U能抑制成纤维细胞繁殖进行心房肌细胞纯化,并运用双色免疫荧光进行鉴定。结果:36 h后镜下可见细胞已经贴壁,并可见少数细胞出现自发搏动,72 h后细胞铺满瓶底90%,经双色免疫荧光鉴定超过95%为心房肌细胞。结论:“两步法”可缩短胰酶消化时间,Ⅱ型胶原酶+BSA联合消化可以更有效地培养出原代心房肌细胞。

摘要： 目的 探讨1型糖尿病小鼠及AGE参与心房肌细胞电重塑机制研究.方法 STZ腹腔注射小鼠,诱导1型糖尿病模型;全细胞膜片钳技术检测糖尿病小鼠心房肌细胞动作电位时程、ICa,L、Ito及Ikur电流变化;Western blot检测心房肌组织AGE、RAGE及通道蛋白表达水平;AGE/RAGE处理HL-1细胞,检测离子通道蛋白的表达.结果 与对照组相比,糖尿病小鼠随机血糖水平明显上升,心房肌细胞动作电位时程明显延长,ICa,L、Ito、Ikur电流密度及通道蛋白Cav1.2、Kv4.3、Kv1.5表达均明显降低,AGE、RAGE蛋白水平增加;AGE诱导HL-1细胞离子通道蛋白明显下调,Anti-RAGE预处理可逆转其作用.结论 1型糖尿病心房肌细胞动作电位明显延长,ICa,L、Ito、Ikur电流及其通道蛋白表达降低;AGE参与HL-1心房肌细胞电重塑.

摘要： 目的:研究高甲状腺素导致房颤与肾素-血管紧张素系统(RAS)相关的发病机制.方法:左旋甲状腺素经兔腹腔注射,制作甲亢源性房颤易患模型,同时厄贝沙坦经胃管灌胃,乳兔左心房肌细胞培养药物干预;检测房颤诱发率、左心房肌细胞凋亡情况,检测RAS相关的细胞因子,凋亡蛋白表达情况.结果:中途撤药组、厄贝沙坦组、对照组房颤诱发率低于持续给药组(P＜0.05).中途撤药组、持续给药组、厄贝沙坦组心肌细胞凋亡率、ACEmRNA相对表达量、ACE血浆浓度、表达量、AngⅡ血浆浓度、表达量均高于对照组,持续给药组高于中途撤药组、厄贝沙坦组(P＜0.05).中途撤药组、持续给药组、厄贝沙坦组PARP,caspase3相对表达量均高于对照组,持续给药组高于中途撤药组、厄贝沙坦组(P＜0.05).AngⅡ组药物干预后左心房肌细胞凋亡率高于对照组、甲状腺素组(P＜0.05).结论:高甲状腺素所致的房颤发病机制可能是间接过度激活RAS,循环、组织AngⅡ表达增高,后者诱导心房肌细胞凋亡,左心房发生电-解剖重构.

摘要： 目的 探讨转录辅激活因子p300 在调控老年小鼠心房肌细胞电重塑,进而导致房颤中的作用.方法 分别收集5?13 和18 月龄的C57BL/6 小鼠左心耳组织,Western blot 检测p300 蛋白,钙通道蛋白和衰老信号通路相关蛋白的表达.分别取5 月龄和18 月龄小鼠,分离单个心房肌细胞,全细胞膜片钳技术检测各组细胞的L 型钙电流(L-type calcium current,ICa,L)和动作电位时程(action potential duration,APD).快速起搏心房观察不同月龄小鼠房颤的可诱发性.结果 与5 月龄小鼠相比,13 和18 月龄小鼠左心房组织p300?衰老相关信号通路蛋白p53 和p21 表达明显增加(P <0.05),而L 型钙通道蛋白Cav1.2 表达减少;老年小鼠心房肌细胞ICa,L电流密度明显减小,APD 缩短.不同剂量的p300 抑制剂-姜黄素(50?100 mg?kg -1 ?d -1 )饲养后能明显减少老年小鼠房颤的可诱发率,并使衰老小鼠心房肌细胞的ICa,L 密度增加和APD 延长(P <0.05).结论 p300 可能通过调控ICa,L参与衰老相关心房肌细胞电重塑.

摘要： 目的 研究别隐品碱对小鼠心房肌细胞的T-型钙电流的影响.方法 采用胶原酶Ⅱ急性消化分离小鼠心房细胞,别隐品碱被用灌流法作用于细胞,应用电压钳模式测量小鼠心房肌细胞T-型钙电流(ICa,T).结果 在细胞外应用30μM别隐品碱能降低小鼠心房肌细胞ICa,T电流密度.在-40 mV电压下,使其峰值密度从(3.3±0.4)pA/pF减少至(1.7±0.2)pA/pF(n=15,P＜0.01).门控机制检测结果显示,别隐品碱可使ICa,T通道电流的稳态激活过程发生改变,曲线正向移动,使其失活后恢复时间常数(τ)延长,从(54.9±3.3)ms变为(75.6±3.4)ms(n=15,P＜0.01).揭示别隐品碱的作用机制可能通过抑制ICa,T稳态激活和失活后恢复过程所致.结论 别隐品碱可降低小鼠心房肌细胞T-型钙电流密度,可能与其延迟通道激活及失活后再激活有关.

摘要： 目的：从心房肌细胞钙浓度改变的角度,探索血管紧张素Ⅱ及甘松提取物对人心房肌细胞电重构的影响。方法：选取正常及房颤患者的右心耳组织,进行心房肌细胞的分离、培养、鉴定，分别予血管紧张素Ⅱ、甘松提取物干预,测定其细胞内钙离子浓度，进行对比分析.结果：房颤组心房肌细胞[Ca2+]、较正常对照组显著升高;AngⅡ使正常人心房肌细胞[Ca2+]、显著升高;甘松提取物抑制AngⅡ诱导的人心房肌细胞[Ca2+]、升高;同时减轻房颤患者心房肌细胞内[Ca2+]、升高的程度。结论：AngⅡ可能通过诱导心房肌细胞内钙超载而引发房颤;甘松提取物可以通过拮抗AngⅡ对细胞膜离子流作用而抑制人心房肌细胞内钙超载，从而减缓心房电重构。

摘要： 目的：TNF-α参与冠心病、心律衰竭、心内膜炎等多种心血管疾病病理过程,但在AF发病机制中的作用尚不清楚。本研究观察与SR患者相比,AF患者左心耳组织TNF-α及其两种受体的表达变化,以及与AF发生的关系,进一步在心房肌细胞株HL-1细胞观察TNF-α对T-型钙通道的慢性作用,以阐明TNF-α参与AF的发病机制。方法：收集择期行心脏瓣膜置换手术的风心病伴持续性房颤AF (≥6个月)患者19例，行体外循环的搭桥术窦性心律患者15例。结果：(1)发现AF患者与SR患者比较TNF-α和TNFR1在心房组织表达增加，而TNFR2表达变化不明显，TNF-α的表达与LAD和TNFR 1的表达呈正相关，提示TNF-α及其受体1参与了AF的病理过程并且与左房结构重构有关。(2)用25ng/ml或50ng/ml TNF-α培养24小时后，观察到TNF-a呈浓度依赖性地抑制Ica,T引起失活曲线左移激活曲线右移，失活加快、激活减慢，复活时间延长，提示TNF-α可能通过抑制ICa,T缩短动作电位参与心房肌细胞发生电重构。(3)用TNF-α培养HL-1细胞24小时后，T-型钙通道的RNA和蛋白的表达水平明显降低。结论：TNF-α可能通过调节心房肌细胞T-型钙通道参与房颤电重构的发生。

摘要： 心房颤动(简称房颤)至今仍是困扰人类健康的一个难题。随着膜片钳和分子生物学技术的不断发展,目前对房颤的认识已提高到离子通道的基因表达和蛋白质编码的分子水平。随着新的离子通道的发现,治疗房颤的抗心律失常药的新靶点正在被提出，延迟整流钾通道(IK)电流是心房肌细胞复极的主要离子流,早先发现IK的快速激活成分(IKr)和缓慢激活成分(IKs)是动作电位3相复极时的重要离子流,较晚发现的第三种成分即超快速激活的延迟整流钾通道(IKur)电流主要在动作电位2相复极中起作用,且已证实人类心脏的IKur通道仅存在于心房肌,心室肌中不存在。因其具有心房特异性,理论上认为作用于IKur的药物可能选择性作用于人体心房肌而基本不影响心室功能,近些年IKur通道已成为房颤药物治疗的新靶点。本文主要阐述人体和几种常见动物心房肌细胞膜IKur的共性、差异以及现有研究中的争议和悬疑问题。

摘要： 多种离子通道参与心房肌动作电位的复极过程以及心房颤动(房颤)的发生,关于晚钠电流与房颤的关系并没有充分的研究依据.本研究在新西兰兔离体心脏模型上,观察晚钠电流增大对房颤诱发情况的影响,以及晚钠电流抑制剂对房颤的作用,探讨晚钠电流增大时心房颤动发生的机制.晚钠电流可影响细胞内钙调节过程，从而导致心房颤动易于诱发，这可能是心房颤动发生的机制之一。

摘要： 心肌T型管(横小管)是心肌细胞膜上特异性的细胞器,在心肌规律性收缩中对于钙离子信号和兴奋-收缩偶联起关键作用.T型管有许多分支并形成相互连通的网络,这些网络突入肌细胞内部并与细胞基质形成连接.T型管可以选择性富集离子通道和蛋白,这些离子通道和蛋白对于兴奋-收缩偶联中钙离子转运具有重要作用.因此,T型管是心肌细胞功能的一个关键组成部分.近期有多项研究证实了T型管在房颤病理中的重要作用并且作为房颤的一种发生机制。大型哺乳动物可自发房颤，因为心房足够大，有足够的组织维持房颇的颤动转子，也就是心房比颤动转子波长大。

摘要： 目的：本研究以人的心房肌细胞作为研究对象，采用全细胞膜片钳和Western blotting方法，比较PKC对窦性心律(SR)组和AF组SK2通道电流的调控差异，旨在研究AF时PKC的功能变化对SK2的调控作用。rn 方法：分AF组和SR组，通过电生理实验、蛋白水平测定实验观察SK2电流的变化和PKC蛋白表达水平。rn 结果：两组相比:AF组SK2通道电流密度明显大于SR组；AF时PKC对SK2通道活动的抑制作用强于SR组；AF时外源性加入PKC的激活剂PMA可以加强对SK2的抑制作用，机体可能通过某种机制下调PKC的蛋白水平，最终导致SK2通道电流的增加；AF时外钙内流对SK2功能的调控作用强于SR组；PKC对SK2的调控作用可能与状态相关。rn 结论：PKC对SK2通道的调控参与了心房电重构过程，可能是RF发生和维持基础之一。

摘要： 本文选用花生四烯酸(arachidonic acid,AA,二十碳四烯酸)研究长链多不饱和脂肪酸对冠心病病人心房细胞钠通道特性影响.

摘要： 本文研究目的：探讨增龄对健康犬心房心肌细胞、肺静脉肌袖心肌细胞缝隙连接蛋白的影响. 研究方法：健康杂种犬15只,体重14.3～24.2 kg,年龄在0.75～10.00岁之间,根据不同年龄段分为幼龄组、成年组、老龄组.开胸取材,标本进行免疫荧光组织化学染色后,经图像分析软件计算Cx40和Cx43荧光斑面积,进行定量分析. 研究结果：在左、右心房Cx40和Cx43都有明显表达,Cx43表达强于Cx40;肺静脉主要以表达Cx43为主,Cx40表达极弱;心房和肺静脉组织从幼龄到老龄Cx43的表达量呈现明显的下降趋势,P＜0.01或0.001. 研究结论：增龄引起心房肌、肺静脉肌袖心肌细胞缝隙连接蛋白的重构,可能是导致老龄多发房颤的重要原因.

摘要： 本文研究目的：探讨增龄对健康犬心房心肌细胞、肺静脉肌袖心肌细胞缝隙连接蛋白的影响. 研究方法：健康杂种犬15只,体重14.3～24.2 kg,年龄在0.75～10.00岁之间,根据不同年龄段分为幼龄组、成年组、老龄组.开胸取材,标本进行免疫荧光组织化学染色后,经图像分析软件计算Cx40和Cx43荧光斑面积,进行定量分析. 研究结果：在左、右心房Cx40和Cx43都有明显表达,Cx43表达强于Cx40;肺静脉主要以表达Cx43为主,Cx40表达极弱;心房和肺静脉组织从幼龄到老龄Cx43的表达量呈现明显的下降趋势,P＜0.01或0.001. 研究结论：增龄引起心房肌、肺静脉肌袖心肌细胞缝隙连接蛋白的重构,可能是导致老龄多发房颤的重要原因.

摘要： 本文研究目的：探讨增龄对健康犬心房心肌细胞、肺静脉肌袖心肌细胞缝隙连接蛋白的影响. 研究方法：健康杂种犬15只,体重14.3～24.2 kg,年龄在0.75～10.00岁之间,根据不同年龄段分为幼龄组、成年组、老龄组.开胸取材,标本进行免疫荧光组织化学染色后,经图像分析软件计算Cx40和Cx43荧光斑面积,进行定量分析. 研究结果：在左、右心房Cx40和Cx43都有明显表达,Cx43表达强于Cx40;肺静脉主要以表达Cx43为主,Cx40表达极弱;心房和肺静脉组织从幼龄到老龄Cx43的表达量呈现明显的下降趋势,P＜0.01或0.001. 研究结论：增龄引起心房肌、肺静脉肌袖心肌细胞缝隙连接蛋白的重构,可能是导致老龄多发房颤的重要原因.

摘要： 本发明的课题在于，改善纯化至不含有心肌细胞以外的细胞且不含有来源于其他物种的成分的心肌细胞在移植后的存活率。为了解决上述课题，本发明人等就经纯化的心肌细胞是否能够构筑细胞块进行了研究。其结果明确了：通过提供一种制备来源于多能干细胞的心肌细胞的细胞块的方法，可以解决上述课题。该方法的特征在于，将心肌细胞用无血清条件下的培养基进行培养，使该细胞聚集，所述心肌细胞为如下的心肌细胞：使包含由多能干细胞分化、诱导出的心肌细胞的、聚集状态的细胞块分散并单细胞化，从而得到的经纯化的来源于多能干细胞的心肌细胞。

摘要： 公开了用于从多能干细胞产生心肌细胞群体的方法。群体可以对于心房心肌细胞或心室心肌细胞进行富集，并且所得到的心室群体可以基本上不含起搏细胞。该方法包括使在合适的培养基中的多能干细胞与BMP组分和激活素组分一起温育，激活素的量可以改变以富集心房心肌细胞或心室心肌细胞。公开了富集的群体，以及使用其治疗需要心脏修复的患者的方法。

摘要： 本发明涉及产生胚胎干细胞来源的心肌细胞的方法和由所述方法产生的心肌细胞、由心肌细胞产生心肌细胞聚集体的方法和由所述方法产生的心肌细胞聚集体、用于治疗心脏病的包含所述心肌细胞聚集体作为活性成分的细胞治疗产品、使用所述细胞治疗产品治疗心脏病的方法、以及心肌细胞和心肌细胞聚集体用于产生细胞治疗产品的用途。通过使用本发明的产生心肌细胞的方法，可以容易地纯化胚胎干细胞来源的心肌细胞，并且心肌细胞聚集体可以由纯化的心肌细胞产生，因此可用作可以用于治疗心脏病的细胞治疗产品。因此，本发明可以广泛用于开发用于预防或治疗多种心脏病的制剂。

摘要： 本发明公开了一种诱导干细胞往心肌细胞方向分化及心肌细胞传代与纯化的方法及药剂，属于人多能干细胞向心肌细胞分化调控及维持技术领域。该诱导干细胞往心肌细胞方向分化的方法包括：将人多能干细胞置于含烟酰胺的第一培养基中培养，第一培养基为E5培养基。心肌细胞的传代方法包括：将心肌细胞置于含烟酰胺的第二培养基中培养，第二培养基为E6培养基。心肌细胞的纯化方法包括：将传代处理后的心肌细胞置于含烟酰胺的第三培养基中培养，第三培养基为E6培养基。上述方法能够为人多能干细胞来源的心肌细胞的产生和传代培养提供有效可行的新方法，且效率稳定，费用较低，利于大规模生产。相应的药剂应用前景较广。

摘要： 本发明公开了一种氯离子阻断剂诱导干细胞分化成心肌细胞的方法及心肌细胞与其应用，属于人多能干细胞向心肌细胞分化调控技术领域，其包括以下步骤：于含有分化第3‑5天的干细胞的分化培养基中加入氯离子通道阻断剂以诱导干细胞向心肌方向分化。该方法的特点是采用氯离子阻断剂来诱导干细胞向心肌方向分化。本申请详细阐述了该方法的具体操作步骤，并对分化的心肌细胞进行了鉴定和功能分析，为人多能干细胞来源的心肌细胞的产生提供了新思路。

摘要： 本发明涉及细胞片的制造方法，所述方法包含下述工序：在使动物细胞朝培养液的中央方向集中的同时对培养液中分散的动物细胞进行悬浮培养，在所述培养液中形成悬浮的细胞片。

摘要： 本发明涉及干细胞领域，具体涉及一种多能干细胞快速分化为骨骼肌细胞的方法，旨在解决多能干细胞诱导骨骼肌细胞时间长，效率低的问题。具体包括向培养基中的多能干细胞中引入含有至少一种潜能基因的表达载体，从而将所述多能干细胞定向分化为骨骼肌细胞。通过在诱导人的多能干细胞向骨骼肌细胞定向分化的不同阶段，特异诱导Mef2b、Pax3、Pax7、Mydo1、Pitx1、Myogenin、Mef2c、Mrf4、Desmin中的一种或几种不同组合基因的表达，可获得了纯度高达80％的功能性的骨骼肌细胞，而且显著缩短了诱导的周期。

摘要： 本发明公开了一种成年小鼠心房肌细胞的分离与培养方法，本方法在心房肌细胞的不同培养阶段分别利用两种不同培养液进行培养，以增加心房肌细胞的数量与质量，在培养过程中加大了对细胞的营养与保护，大大降低了心房肌细胞的受损率。铺板培养液的应用能够使离体的心房肌细胞快速适应培养环境，提高细胞贴壁的效率；普通培养液则为心房肌细胞的后续培养提供具有稳定温度、pH及充足营养的生存条件，保持其良好的生长状态。结果表明，本发明方法能够得到高产量与高质量的成年小鼠心房肌细胞，成本低且高效稳定，分离出的心房肌细胞数量大、活力高，能在体外继续培养4‑5天，为在细胞水平上研究成年小鼠心脏生理及病理功能提供了良好的实验素材。

摘要： 本发明公开了一种成年小鼠心房肌细胞的分离与培养方法，本方法在心房肌细胞的不同培养阶段分别利用两种不同培养液进行培养，以增加心房肌细胞的数量与质量，在培养过程中加大了对细胞的营养与保护，大大降低了心房肌细胞的受损率。铺板培养液的应用能够使离体的心房肌细胞快速适应培养环境，提高细胞贴壁的效率；普通培养液则为心房肌细胞的后续培养提供具有稳定温度、pH及充足营养的生存条件，保持其良好的生长状态。结果表明，本发明方法能够得到高产量与高质量的成年小鼠心房肌细胞，成本低且高效稳定，分离出的心房肌细胞数量大、活力高，能在体外继续培养4‑5天，为在细胞水平上研究成年小鼠心脏生理及病理功能提供了良好的实验素材。

摘要： 本发明公开了一种大鼠心房肌细胞的培养方法，属于细胞培养技术领域。所述培养方法包括取材、消化、分离、离心、接种培养等步骤，本发明的大鼠心房肌细胞的培养方法成本低，高效、稳定，分离出的细胞活力好，纯度高，心房肌细胞数量大、产量高；本发明的方法在培养过程中加大了对细胞的保护作用，提高了细胞活性，细胞存活率高；培养过程中不使用青霉素和Brdu等药物，从而能够避免青霉素和Brdu对后续研究的潜在影响。