心室肌细胞

摘要： 目的:基于网络药理学预测心律康宁方治疗缓慢性心律失常的作用机制并初步进行细胞生物学验证。方法:通过中药分子机制的生物信息学分析工具(Bioinformatics Analysis Tool for Molecular Mechanism of Traditional Chinese Medicine,BATMAN-TCM)、人类基因的综合数据库(GeneCards)、在线人类孟德尔遗传数据库(Online Mendelian Inheritance in Man,OMIM)等数据库分别对心律康宁方和BA进行分析靶点预测,并将二者获得的靶点基因取交集,获取心律康宁方治疗缓慢性心律失常(Bradyarrhythmia,BA)的靶点基因,通过蛋白互作分析,获取核心靶点基因,通过基因本体论(The Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,获取关键基因和靶点通路;制备含有不同浓度的心律康宁含药血清,利用Langendorff灌流系统急性分离单个大鼠的心肌细胞,加入含药血清,初步验证预测结果。结果:药物靶点1591个,疾病靶点1886个,交集靶点467个,KEGG通路主要通过钙信号通路、心肌中环磷酸腺苷(Cyclic Adenosine Monophosphate,cAMP)信号通路、丝裂原活化的蛋白激酶(Mitogen-activated Protein Kinase,MAPK)、神经活性配体-受体相互作用传导,GO主要涉及分子功能、细胞成分、生物过程三方面。动物实验验证表明,与正常血清对照组相比,心律康宁低、中、高剂量含药血清对静息细胞胞浆Ca^(2+)平均荧光强度有显著的增强作用(P<0.05),前后差值两两比较(P<0.05),有剂量依赖性。结论:网络药理学预测结果较为可靠,心律康宁能促进心肌细胞自发的外钙内流,具有治疗BA的潜在作用。

摘要： 目的探讨钙离子在急性低氧跑大鼠心肌损伤中的作用。方法将40只大鼠随机分为常氧安静组(NQ)、常氧跑步组(NR)、低氧安静组(HQ)和低氧跑步组(HR),10只/组。两个低氧组每天在低压氧舱(氧分压61.6 kPa)4 h,两个运动组每天使用跑轮装置运动4 h,其中低氧跑步组在低压氧舱运动4 h。使用酶消化法分离大鼠心室肌细胞,膜片钳技术记录动作电位和电流,共聚焦钙离子成像技术检测细胞内钙离子水平,Western blotting分析该蛋白的表达。结果与NQ组相比,HR组SOD显著降低,h-FABP显著升高(P<0.01)。HR组hs-CRP和IMA均高于NQ组(P<0.05或P<0.01)。HR组心肌纤维呈波浪形,横带增厚,部分细胞核浓缩。HR组APD50、APD90明显延长(P<0.05)。在不同的应激条件下,ICa,L电流密度均有不同程度的增加。其中,HR组的增加最为显著。HR组稳态激活曲线显著左移,稳态失活曲线显著右移。NR组、HQ组和HR组的自发性钙波事件均高于NQ组,尤其是HR组(P<0.05或P<0.01)。应激3组大鼠心肌细胞钙火花频率增加,火花幅度降低,其中HR组变化最显著。此外,与NQ组相比,应激组心室肌细胞钙释放幅度降低,钙离子回流吸收延迟。HR组Cav1.2通道和RyR2受体蛋白水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论急性低氧运动大鼠心肌功能损害的机制与钙电流增加和细胞内钙超载有关。

摘要： 目的 通过建立大鼠急性低氧运动模型,观察大鼠单个心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)的改变,在细胞水平探究模拟高原低氧条件下力竭运动对心脏电生理的影响.方法 将40只健康雄性清洁级SD大鼠随机分为低氧运动组、低氧安静组、常氧运动组和常氧安静组,每组10只.利用小动物低压氧舱和常氧状态下进行力竭运动试验.取出各组大鼠心脏,利用灌流酶解法分离大鼠单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录大鼠单个心室肌细胞的瞬时外向钾电流.采用SPSS 20.0统计软件进行数据处理,多组间比较采用ANOVA方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验.结果 与常氧安静组比较,+40 mV时,低氧运动组的Ito电流密度显著降低,且低于低氧安静组及常氧运动组,此效应呈现电压依赖性.门控机制研究显示,低氧运动时大鼠心肌细胞Ito稳态激活曲线失活向超极化方向移动,而稳态失活曲线则向去极化方向移动,二者综合效应使Ito电流显著降低.结论 急性低氧运动可通过改变钾通道稳态激活与稳态失活过程,降低大鼠心室肌细胞Ito,这可能是急性低氧运动导致心律失常的主要原因之一.

摘要： 目的:探讨2型糖尿病大鼠心室肌细胞离子通道电流及其相关蛋白表达的改变.方法:采用Zucker糖尿病肥胖(Zucker diabetic fatty,ZDF)大鼠建立2型糖尿病大鼠模型,Zucker瘦型(Zucker lean,ZL)大鼠为对照组.采用急性酶解法分离大鼠单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录其动作电位、L型钙通道电流(ICa-L)及瞬时外向钾电流(Ito)的变化;提取大鼠心肌组织蛋白,采用Western blot检测心肌细胞肥大标志物β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy chain,β-MHC)和心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP),以及L型钙通道(Cav1.2)和钾通道(Kv4.3)的蛋白表达水平.结果:用高脂饮食诱导ZDF大鼠成功建立2型糖尿病模型;与ZL大鼠相比,ZDF大鼠心室肌细胞的动作电位时程显著延长,ICa-L和Ito密度显著降低[峰值分别为(?5.96±0.37)pA/pF vs(?4.92±0.30)pA/pF,(12.43±0.86)pA/pF vs(7.48±0.58)pA/pF,均P<0.05];与ZL大鼠相比,ZDF大鼠心肌组织中β-MHC和ANP的表达水平明显增加,伴有Cav1.2和Kv4.3蛋白表达下降(P<0.05).结论:与ZL大鼠相比,2型糖尿病大鼠心肌细胞肥大,心室肌细胞动作电位时程延长,ICa-L和Ito密度及其相关蛋白表达水平降低,提示糖尿病大鼠心室肌细胞发生电生理重构.

摘要： 目的:探讨血管紧张素Ⅱ受体1型(AT1R)-钙调神经磷酸酶(CaN)信号通路对乳鼠肥大心室肌细胞L型钙离子通道电流(ICa-L)和动作电位时程(APD)的调控作用.方法:分离获得1 d龄SD乳鼠心室肌细胞,分为4组,对照组不予干预;苯肾上腺素(PE)组常规培养1 h后加入PE(终浓度0.1 mmol/L)干预24 h;氯沙坦(Los)+PE组先予Los(终浓度1μmol/L)干预1 h,再予PE干预24 h;环孢素A(CsA)+PE组先予CsA(终浓度0.25μg/mL)干预1 h,再予PE干预24 h.实时荧光定量聚合酶链反应检测肌球蛋白重链β(β-MHC)的mRNA表达水平.Western blot检测CaN A亚基β亚单位(CaNAβ)蛋白表达水平.全细胞膜片钳技术检测细胞膜ICa-L和单细胞APD.结果:PE组β-MHC的mRNA表达水平和CaNAβ的蛋白表达水平均高于对照组;ICa-L电流密度峰值绝对值[(-18.23±1.44)pA/pF对(-10.78±1.87)pA/pF]、50％APD[(25.7±2.4)ms对(15.3±3.0)ms]和90％APD[(197.6±10.6)ms对(91.8±21.3)ms]均高于对照组(P均<0.05).Los+PE组β-MHC的mRNA表达水平和CaNAβ的蛋白表达水平均低于PE组;ICa-L电流密度峰值绝对值[(-14.02±1.51)pA/pF]、50％APD[(20.4±2.9)ms]和90％APD[(128.7±18.5)ms]均低于PE组(P均<0.05).CsA+PE组β-MHC的mRNA表达水平和CaNAβ的蛋白表达水平均低于PE组;ICa-L电流密度峰值绝对值[(-12.19±1.09)pA/pF]、50％APD[(22.7±1.9)ms]和90％APD[(121.7±15.0)ms]均低于PE组(P均<0.05).结论:AT1R-CaN信号通路参与乳鼠肥大心室肌细胞ICa-L和APD的调控.

摘要： 目的:探讨丹参素通过干预Na+-K+-ATPaseα亚型的H-H2结构域参与调控大鼠心室肌细胞的哇巴因毒性.方法:选取60只清洁级成年雄性SD大鼠,平均分为对照组、哇巴因干预组(A1组)、生理盐水干预组(A2组)、丹参素高剂量干预组(B1组,20 mg/kg)、丹参素中剂量干预组(10 mg/kg)和丹参素低剂量干预组(5 mg/kg)、SSA78干预(C1组,50μg SSA78)、WJS干预(C2组,50μg WJS)、生理盐水干预组(C3组),除对照组外均构建心衰模型.测定各组大鼠各组大鼠心肌细胞收缩、钙瞬变和钠电流差异.结果:各组大鼠心肌细胞收缩、钙瞬变和钠电流比较(P<0.05).与对照组相比,A1组心肌细胞收缩及钙瞬变各指标均增大,B组和C组较A1组降低(P<0.05);A1组心肌细胞钠电流降低,B组和C组较A1组增加(P<0.05).结论:丹参素通过干预Na+-K+-ATPaseα亚型的H_-H2结构域参与调控大鼠心室肌细胞的哇巴因毒性,降低由于哇巴因毒性引起的大鼠心室肌细胞收缩力,维持离子转运功能.

摘要： 目的 探讨右美托咪定对布比卡因抑制的大鼠心室肌钠电流(INa)的影响.方法 选择SD雄性大鼠,建立Langendorff模型灌流酶解获得心室肌细胞32个,采用随机数字表法分为4组:Bupi组、Dex组、Bupi+Dex组以及空白对照组,每组心室肌细胞8个,分别灌流含50滋mol/L布比卡因的细胞外液、含50 ng/ml右美托咪定的细胞外液、含50滋mol/L布比卡因复合50 ng/ml右美托米咪定的细胞外液及空白细胞外液,采用全细胞膜片钳技术测定灌流前后的INa峰值、INa原始电流图、INa峰值抑制值和灌流前后INa的I-V曲线.结果 Bupi组、Dex组和Bupi+Dex组的INa灌流后峰值[(6.4±1.0)、(13.8±3.3)、(10.4±3.0)nA/pF]均低于空白对照组(19.5±2.7 nA/pF),Dex组、Bupi+Dex组的INa灌流后峰值均高于Bupi组,Bupi+Dex组的INa灌流后峰值低于Dex组,差异均有统计学意义(均P<0.05).Bupi组、Dex组和Bupi+Dex组的INa峰值抑制值均高于空白对照组,Dex组和Bupi+Dex组的INa峰值抑制值低于Bupi组,Bupi+Dex组的INa峰值抑制值高于Dex组,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 右美托咪定可以减轻布比卡因对大鼠心室肌细胞INa的抑制作用.布比卡因和右美托咪定对INa的激活和反转电位无影响.

摘要： QT间期是指心电图上从QRS波开始到T波结束的时间,代表整个心室从除极开始到复极结束的过程。QT间期延长是由于心室肌细胞复极相关的离子通道以及蛋白的结构和功能异常引起,可能导致早期后除极,诱发尖端扭转型室速、致命性室性心律失常和心脏性猝死,危害极大。

摘要： 目的：制备桂枝甘草汤及各组分含药血清,观察桂枝甘草汤及不同组分含药血清对单个豚鼠心室肌细胞钠离子通道电流及其动力学参数的影响. 方法：急性分离豚鼠心室肌细胞,细胞复钙后随机分为空白组、甘草组、桂枝组、甘草加桂枝组和桂枝甘草汤组,各组分别加入各含药血清,实验分为10％和15％两个浓度组,加药完成后细胞放于37°C,5％CO2的孵育箱中孵育24h后进行膜片钳实验. 结果：各组与空白组比较均不同程度抑制Na+电流(n=8,P＜0.05),15％浓度炙甘草组、桂枝组和桂枝甘草汤组与空白组比较使INa激活时间延长(n=8,P＜0.05). 结论：桂枝甘草汤及各组分含药血清对Na+通道有不同程度的抑制作用,与Ⅰ类抗心律失常药物作用机制相同,这可能是桂枝甘草汤抗心律失常的作用机理.

摘要： 目的：建立兔心肌缺血再灌注动物模型,研究重组人脑钠尿肽(rhBNP)对兔在体缺血再灌注后心室肌细胞ICa-L的影响,探讨rhBNP拮抗再灌注心律失常的细胞学离子机制.方法：45只新西兰大耳白兔随机分为3组:缺血再灌注动物模型组(I－R组,结扎冠脉左前降支30min后再开放120min);rhBNP治疗组(rhBNP组,再灌注后给予动物耳缘静脉注射rhBNP 0.06 ug/kg/min);假手术对照组(只开胸不结扎血管).采用酶解的方法分离缺血部位心室肌外膜单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录ICa-L.结果:①心律失常发生率:与I-R组比较rhB NP组兔室速、室颤发生率及持续时间明显下降，其心律失常的评分明显低于I-R组(2.6±0.7 VS 3.6±0.8,P0.05)。结论:rhBNP可降低心肌缺血再灌注期间心律失常的发生率。心肌缺血再灌注后，ICa-L明显增高，rhBNP可使上升的ICa-L，下调，逆转电重构，可能为rhBNP降低心律失常发生率的细胞学离子机制。

摘要： 目的：通过研究重组人脑钠尿肽(rhBNP)对兔在体缺血再灌注后心室肌细胞钠离子通道电流(sodiumcurrent,INa)的影响,探讨rhBNP拮抗再灌注心律失常的细胞学离子机制.方法：新西兰大耳白兔45只随机分为3组:缺血再灌注动物模型组(I-R组,缺血30min后再灌注120min);rhBNP治疗组(rhBNP组,再灌注后给予动物耳缘静脉注射rhBNP 0.06 ug/kg/min);假手术对照组(只开胸不结扎血管).采用酶解的方法分离缺血部位心室肌外膜单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录INa.结果 对照组、I-R组、rhBNP组INa电流密度峰值(-30mV)分别为–42.78±5.48(n=16),–24.46±5.32(n=12),–37.82±5.45 pA/pF(n=15),I-R组较对照组明显下降(P<0.01),rhBNP 组较I－R 组明显升高(P<0.01).结论：心肌缺血再灌注后,INa明显下降,rhBNP可使下降的INa上调,逆转电重构,这可能为rhBNP降低心律失常发生率的细胞学离子机制.

摘要： 目的：建立兔心肌缺血再灌注动物模型,研究重组人脑钠肽(rhBNP)对兔在体缺血再灌注后心室肌细胞ICa-L的影响,探讨rhBNP拮抗再灌注心律失常的细胞学离子机制.rn 方法：45只新西兰大耳白兔随机分为3组:缺血再灌注动物模型组(I-R组,结扎冠脉左前降支30min后再开放120min);rhBNP治疗组(rhBNP组,再灌注后给予动物耳缘静脉注射rhBNP 0.06ug/kg/min);假手术对照组(只开胸不结扎血管).采用酶解的方法分离缺血部位心室肌外膜单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录ICa-L.rn 结果：①心律失常发生率:与I-R组比较rhBNP组兔室速、室颤发生率及持续时间明显下降，其心律失常的评分明显低于I-R组(2.6±0.7 VS 3.6±0.8，P0.05)。rn 结论：rhBNP可降低心肌缺血再灌注期间心律失常的发生率。心肌缺血再灌注后，ICa-L明显增高，rhBNP可使上升的ICa-L下调，逆转电重构，可能为rhBNP降低心律失常发生率的细胞学离子机制。

摘要： 目的:研究细胞内高镁对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响及其作用机制.rn 方法:利用Langendroff灌流装置,采用胶原酶法急性分离单个豚鼠心室肌细胞.应用膜片钳技术,采用细胞贴附模式和膜内面向外模式记录单个L型钙通道电流,观察不同游离镁离子浓度[Mg2+]i(0.9mM、2.7mM、8.1mM、30mM和100mM)对单通道钙电流的影响.rn 结果:当[Mg2+]i为0.9mM生理值时，膜内面向外模式恢复L型钙通道活性(NPo)至176.5±34.1% (n=7)。2.7mM、8.1mM、30mM和100mM[Mg2+]i分别恢复NPo至131.1±25.9% (n=6), 64.8±18.1% (n=6，P＜0.05)、24.4±10.4%(n=7，P＜0.01)和23.4±5.0% (n=5，P＜0.01)。[Mg2+]i的升高减弱了L型钙通道活性的恢复。进一步分析高镁对L型通道开放和关闭时间。0.9mM[Mg2+]i作用时，L型钙通道平均开放时间(To)和平均关闭时间(Tc)分别为2.67±0.46ms(n=7)和19.73±4.14ms (n=7)。2.7mM、8.1mM、30mM和100mM[Mg2+]i分别减少To至1.04±0.41(n=7，P＜0.05), 0.66±0.16(n=7，P＜0.01), 0.46±0.07(n=7,P＜0.001)和0.37±0.07(n=7,P＜0.001)。而[Mg2+]i的升高对Tc没有明显影响。rn 结论:细胞内高镁降低L型钙通道活性，其可能机制是抑制通道平均开放时间。

摘要： 研究环维黄杨星D(CVB-D)对糖尿病大鼠心室肌细胞内游离钙的影响。以四氧嘧啶复制大鼠糖尿病模型,在糖尿病大鼠的第6周,用酶解分离方法分离糖尿病大鼠的单个心室肌细胞,采用细胞内双波长荧光钙检测系统测定心室肌细胞内游离钙的浓度,记录给药前后糖尿病大鼠心室肌细胞内游离钙及钙瞬变的变化,并与对照组比较。

摘要： 目的：观察单独及联合使用延胡索乙素和人参皂苷Re对大鼠心室肌细胞L-型钙通道的影响。rn 方法：采用急性酶解分离法获得大鼠的单个心肌细胞，使用全细胞膜片钳技术记录钙通道电流。观察给药前后钙通道电流峰值的变化。rn 结果：单独使用延胡索乙素（3，10，100μmol/L）对钙电流峰值的抑制率分别为:1.4±2.7%（n=5）;8.3±6.4%（n=6）;27.2±8.7%（n=13）。单独使用人参皂苷Re（3，10，100μmol/L）对钙电流峰值的抑制率分别为5.2±4.7%（n=3）；20.4±13.3%（n=4）；68.8±9.5%（n=6）。联合使用人参皂苷Re（20μmol/L）和延胡索乙素（40μmol/L）对钙通道电流峰值的抑制作用强于单独使用人参皂苷Re（20μmol/L）或延胡索乙素（40μmol/L），差异有统计学意义（P﹤0.05）。毛喉素（forskolin 10mmol/L）能够减弱人参皂苷Re 对L-型钙通道的抑制作用，而加强延胡索乙素的抑制作用。rn 结论：人参皂苷Re和延胡索乙素对大鼠心室肌细胞L-型钙通道均有抑制作用，两者联合使用能够产生增强协应，并且这两种有效成分调控L-型钙通道的作用机制不同。

摘要： 目的：评价参松养心对心脏器官及细胞水平电生理作用特性。方法：将中华小型猪随机分为2组，一组给予参松养心治疗，另一组给予安慰剂治疗，均治疗4周(每组8只)。对用药前后心脏电生理进行监测。酶消化豚鼠心室肌细胞，使用全细胞电压钳技术评价参松养心对心脏动作电位的作用。结果：参松养心治疗在不影响其他体表心电图参数情况下，将心率从(141.8±36.0)次/min提高至(163.0±38.0)次/min(P<0.05)。使用美托洛尔和阿托品阻断自主神经系统后，参松养心对固有心率无影响，但可降低纠正窦结房恢复时间及窦房传导时间。心内电生理显示，参松养心可显著降低A-H及A-V间隔，并缩短心房、房室结及心室有效不应期。参松养心对小型猪离体心室肌细胞动作电位最明显的作用是，缩短动作电位持续时间，动作电位形态无改变。APD=30，APD50和APD90缩短率分别为19.5％，17.8％及15.3％。静息电位及APD30末和APD90末间隔未发生明显变化。结论：参松养心可提高心率并增强传导能力，调节自主神经系统。参松养心可均衡降低心脏电生理并缩短心肌动作电位时间，提示其有抗心律失常作用，且无致心律失常作用。

摘要： 目的：通过观察安律胶囊对豚鼠心室肌细胞钠电流(INa)的影响，以探讨其抗早搏的作用机制。rn 方法：采用膜片钳全细胞记录技术记录了安律胶囊对单个豚鼠心室肌细胞钠电流的影响。rn 结果：①安律胶囊清膏2、20、200μg/L，分别使INa幅值从给药前的(-8.8±0.96)nA，降低到(-8.61±0.84、-7.73±0.84和-6.03±1.26)nA，中剂量有显著的统计学意义(p<0.05)，大剂量具有极为显著的统计学意义(p<0.01)。②在5Hz或10Hz的条件下，当加入200μg/L安律胶囊清膏，给予1、5、10次系列脉冲刺激时，第10次系列脉冲刺激时钠电流从未给药时的(-7.8±0.6)nA降低到(-4.9±0.5)和(-4.3±0.3)nA，差异有显著性(p<0.05)。③在200μg几的安律胶囊清膏作用下，1、5和10MIN为实验统计结果，10MIN时钠电流峰值从未给药时的(-5.60±0.49nA)降低到(-4.68±0.53 nA)，有显著差异(p<0.05)。rn 结论：安律胶囊可剂量依赖性的阻滞钠电流且具有一定的使用依赖性和时间依赖性。

摘要： 目的：比较全细胞膜片钳和穿孔膜片钳方法记录大鼠心室肌细胞L型钙通道电流随时间经过的变化差异，并观察脱氢紫堇碱对L型钙通道的影响。方法：采用全细胞膜片钳和穿孔膜片钳方法记录急性分离的大鼠心室肌细胞L型钙通道电流。结果：采用全细胞膜片钳法记录到的L型钙通道电流峰值在15分钟内衰减了34+23％(n=10)，采用穿孔膜片钳方法记录到的L型钙通道电流峰值15分钟内仅衰减了2.7±3.4％(n=9)；采用穿孔膜片钳方法能够记录到人参皂苷Re(100μmol.L-1)的抑制效应，而采用全细胞膜片钳方法产生的电流衰减几乎完全掩盖了人参皂苷Re的效应。脱氢紫堇碱(10,100μmmol·L-1)能够抑制L型钙通道的电流峰值，抑制率分别为97±5％(n=5)；28.6±8.5％(n=5).结论：穿孔膜片钳方法较全细胞膜片钳方法在对L型钙通道电流记录方面更具稳定性和准确性，脱氢紫堇碱能够浓度依赖性的抑制L型钙通道。

摘要： 本发明涉及一种使成熟右心室心肌细胞转变为未成熟心肌细胞的方法。本发明发现特异的敲除小鼠部分右心室心肌细胞的组蛋白乙酰化转移酶CBP/p300后，右心室心肌细胞转分化为未成熟状态(细胞变小，肌节相关基因表达下调，成熟心肌细胞特有标志T管表达减少或消失，心肌细胞处理钙离子能力下调)，并且心肌细胞形成多个增殖簇，表明通过抑制CBP/p300可以使右心室成熟心肌细胞转分化为未成熟心肌细胞，使其具备增殖再生的能力。本发明为右心衰的治疗提供一种可供选择的方法。

摘要： 公开了用于从多能干细胞产生心肌细胞群体的方法。群体可以对于心房心肌细胞或心室心肌细胞进行富集，并且所得到的心室群体可以基本上不含起搏细胞。该方法包括使在合适的培养基中的多能干细胞与BMP组分和激活素组分一起温育，激活素的量可以改变以富集心房心肌细胞或心室心肌细胞。公开了富集的群体，以及使用其治疗需要心脏修复的患者的方法。

摘要： 本发明涉及一种使成熟右心室心肌细胞转变为未成熟心肌细胞的方法。本发明发现特异的敲除小鼠部分右心室心肌细胞的组蛋白乙酰化转移酶CBP/p300后，右心室心肌细胞转分化为未成熟状态(细胞变小，肌节相关基因表达下调，成熟心肌细胞特有标志T管表达减少或消失，心肌细胞处理钙离子能力下调)，并且心肌细胞形成多个增殖簇，表明通过抑制CBP/p300可以使右心室成熟心肌细胞转分化为未成熟心肌细胞，使其具备增殖再生的能力。本发明为右心衰的治疗提供一种可供选择的方法。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体是一种在体促进右心室心肌细胞增殖的方法，所述方法为：通过注射野百合碱构建得到肺动脉高压动物模型，进而造成其右心室压力升高、右心室壁肥厚，来实现促进动物右心室心肌细胞增殖。本发明结果还发现：压力超负荷极大地改变了心肌细胞的基因表达，存在5469个差异表达基因，其中2902个基因上调，2567个基因下调，且动物年龄越小，增殖标志物越显著。本发明通过促进内源性心肌细胞的增殖再生以取代收缩功能受损的心肌细胞，可以有效缓解或逆转心力衰竭的症状。其优点为：既为心力衰竭，尤其是右心衰的治疗提供了一种可能的方法或手段，也为心脏再生的研究提供了一种较目前的模型更可靠的哺乳动物模型。

摘要： 本发明提供体外诱导多能干细胞分化为心室肌细胞的方法，其是通过在体外维持、扩增、培养多能干细胞，在多能干细胞心肌分化的中期即由中胚层细胞或心肌前体细胞向心肌细胞分化的时期，向培养基中加入可直接或间接激活Smad1/5/8信号通路的物质，使干细胞定向分化为心室肌细胞。利用本发明方法，成功获得了具有生物学活性及功能的心室肌细胞，不仅揭示了心肌前体细胞向心室肌细胞分化过程中的调节机制，而且分化得到的人心室肌细胞对细胞移植治疗心肌梗死和心脏毒理分析及心脏相关药物的研发有广泛的应用。

摘要： 本发明提供体外诱导多能干细胞分化为心室肌细胞的方法，其是通过在体外维持、扩增、培养多能干细胞，在多能干细胞心肌分化的中期即由中胚层细胞或心肌前体细胞向心肌细胞分化的时期，向培养基中加入可直接或间接激活Smad1/5/8信号通路的物质，使干细胞定向分化为心室肌细胞。利用本发明方法，成功获得了具有生物学活性及功能的心室肌细胞，不仅揭示了心肌前体细胞向心室肌细胞分化过程中的调节机制，而且分化得到的人心室肌细胞对细胞移植治疗心肌梗死和心脏毒理分析及心脏相关药物的研发有广泛的应用。

摘要： 本发明属生物医学研究与应用领域，涉及人类多能干细胞来源的人类心室肌细胞的筛选及制备方法，本发明从人类多能干细胞定向分化形成心肌细胞后对人类心室肌细胞进行特异性筛选纯化及大量制备。本发明利用基因组编辑技术，构建MYL2基因结尾携带新霉素或绿色荧光蛋白筛选基因的人类多能干细胞细胞系，并定向诱导分化为心肌细胞，进而通过新霉素或绿色荧光蛋白筛选基因纯化得到人类心室肌细胞，其可与任意支架材料结合培养形成性质不同的各种工程化人类心室肌组织。本发明的人类心室肌细胞具备与正常人类心室肌细胞相似的表型及电生理反应，来源广泛，且能长期体外培养。为针对心室肌损伤与疾病的治疗手段和筛选有效的药物提供了良好的平台。

摘要： 本发明提供体外诱导多能干细胞分化为心室肌细胞的方法，其是通过在体外维持、扩增、培养多能干细胞，在多能干细胞心肌分化的中期即由中胚层细胞或心肌前体细胞向心肌细胞分化的时期，向培养基中加入可直接或间接激活Smad1/5/8信号通路的物质，使干细胞定向分化为心室肌细胞。利用本发明方法，成功获得了具有生物学活性及功能的心室肌细胞，不仅揭示了心肌前体细胞向心室肌细胞分化过程中的调节机制，而且分化得到的人心室肌细胞对细胞移植治疗心肌梗死和心脏毒理分析及心脏相关药物的研发有广泛的应用。

摘要： 本发明提供体外诱导多能干细胞分化为心室肌细胞的方法，其是通过在体外维持、扩增、培养多能干细胞，在多能干细胞心肌分化的中期即由中胚层细胞或心肌前体细胞向心肌细胞分化的时期，向培养基中加入可直接或间接激活Smad1/5/8信号通路的物质，使干细胞定向分化为心室肌细胞。利用本发明方法，成功获得了具有生物学活性及功能的心室肌细胞，不仅揭示了心肌前体细胞向心室肌细胞分化过程中的调节机制，而且分化得到的人心室肌细胞对细胞移植治疗心肌梗死和心脏毒理分析及心脏相关药物的研发有广泛的应用。

摘要： 一种大鼠压力超负荷对心室肌细胞Bax、Bcl的影响，将所分离出的心肌细胞计数，各取1×106个细胞，分别加入4支试管中；40g・L‑１多聚甲醛固定60min，1500r/min离心，PBS清洗2次；将细胞重悬于10mL・L‑１ Tween80中30min,1500r/min离心，PBS清洗3次；每管加入封闭用羊血清100μL,20min，5mLL‑１Tween80清洗1次，PBS清洗2次；每试管中加入100μL1：100的小鼠抗大鼠Bax或Bcl2抗体，室温下孵育30min，加入5mL・L－１ Tween80孵育5～10min，1500r/min离心，PBS清洗2次；各试管中加入PBS 400μL，使用ALTRA流式细胞仪进行Bax和Bcl2蛋白的检测，结果用Bax、Bcl2的表达率和平均荧光强度表示。