微RNAs

摘要： 目的 研究miR-122-5p对类风湿关节炎(RA)滑膜细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法 运用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分别检测正常关节滑膜细胞、RA滑膜细胞中miR-122-5p以及盘状结构域受体激酶(DDR2)的表达。实验分为阴性对照(miR-NC)组(转染mimic NC序列)、miR-122-5p寡核苷酸模拟物(miR-122-5p)组(转染miR-122-5p模拟物mimics)、miR-122-5p特异性寡核苷酸抑制剂阴性对照(anti-miR-NC)组、miR-122-5p特异性寡核苷酸抑制剂(anti-miR-122-5p)组、miR-122-5p+pcDNA组(共转染miR-122-5p mimics和空载体(pcDNA))、miR-122-5p+pcDNA-DDR2组(共转染miR-122-5p mimics和DDR2过表达载体(pcDNA-DDR2)),用脂质体法转染至RA滑膜细胞。采用Western blot方法检测细胞中DDR2、P21和Survival的蛋白表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞中miR-122-5p与DDR2的结合力。结果 与正常滑膜细胞相比较,RA滑膜细胞中miR-122-5p的表达显著降低,DDR2的表达显著升高(t=27.714~48.853,P<0.001)。过表达miR-122-5p可抑制RA滑膜细胞增殖,促进其凋亡(t=16.716~121.500,P<0.001)。miR-122-5p可抑制野生型DDR2细胞的荧光活性。过表达DDR2可以逆转miR-122-5p对RA滑膜细胞的增殖抑制和凋亡促进作用(t=106.335~327.990,P<0.001)。结论 miR-122-5p可抑制RA滑膜细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与靶向DDR2有关。

摘要： 目的研究人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者外周血miR-21、miR-23a-3p表达变化,并分析两者对机会性感染的预测价值。方法选取2020年5月至2021年5月于唐河县疾病预防控制中心首次确诊的HIV感染者134例作为HIV感染组,并选取同期于我院行健康体检的80名健康志愿者作为健康组。在2组研究对象入组后每个月监测1次外周血miR-21、miR-23a-3p表达情况,共连续监测4次,对比分析miR-21、miR-23a-3p在HIV感染组、健康组中的表达差异。在对HIV感染组患者行连续4次的监测后随访30 d,30 d内是否出现机会性感染分为非机会性感染组、机会性感染组2个亚组。对比分析2组外周血miR-21、miR-23a-3p表达量,并分析两者对HIV感染者机会性感染的预测价值。结果HIV感染组在4次监测中外周血mi R-21、miR-23a-3p表达量均高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。机会性感染组在外周血mi R-21、miR-23a-3p表达量均高于非机会性感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-21、mi R-23a-3p与HIV感染者机会性感染呈正相关(r=0.832,P<0.05;r=0.865,P<0.05)。与miR-21、mi R-23a-3p单项预测相比,两项联合预测HIV感染者机会性感染的价值较高(P<0.05)。结论miR-21、miR-23a-3p在HIV感染者外周血中表达升高,其与患者机会性感染相关,可用于机会性感染的预测。

摘要： 目的探讨微小核糖核酸(miRNA)495及miRNA-200b单核苷酸多态性(SNPs)与大动脉粥样硬化型(LAA)缺血性卒中发病年龄之间的关联。方法连续回顾性纳入2009年5月至2017年12月江苏省宜兴市人民医院神经内科LAA缺血性卒中住院患者697例,记录患者的基线资料,包括人口学特征(年龄、性别)、心脑血管疾病危险因素(高血压病、高脂血症、糖尿病)、不良嗜好(吸烟、饮酒史)。通过NCBI dbSNP数据库及既往文献筛选出2个基因(miRNA-495及miRNA-200b)中的2个SNPs位点,分别为rs2281611及rs7549819。采用SNPscan法对miRNA-495 rs2281611和miRNA-200b rs7549819多态性进行基因分型,并进行累计突变等位基因的个数。根据基因型中突变等位基因个数和,将697例患者分为3组,即突变等位基因总数0个(不携带突变等位基因)、1~2个、3~4个。为了避免不同年龄段对结果可能带来的影响,本研究先对年龄进行了分层分析,即年龄0.05)。(2)在miRNA-495 rs2281611的共显性模型中,TT、TG、GG型患者平均发病年龄分别为(66.3±10.3)、(66.7±9.5)、(64.1±10.0)岁,其差异有统计学意义(F=4.224,P=0.015);在miRNA-495 rs2281611的隐性模型中,GG型患者平均发病年龄早于TT型和TG型[(64.1±10.0)岁比(66.6±9.7)岁,t=2.870,P=0.004];在共显性和隐性模型中,携带miRNA-495 rs2281611 GG型患者发生LAA缺血性卒中的发病风险更高(共显性:HR=1.40,95%CI:1.12~1.74,P=0.003;隐性:HR=1.35,95%CI:1.13~1.62,P=0.001)。在miRNA-495 rs2281611的显性模型中,TT型与TG+GG型平均年龄的差异无统计学意义(P>0.05)。miRNA-200b rs7549819各遗传模型患者平均发病年龄的差异均无统计学意义(均P>0.05)。(3)在年龄≥59岁的老年患者中,与miRNA-200b rs7549819 TT+TC型相比,CC型LAA缺血性卒中发病风险增加了38.0%(HR=1.38,95%CI:1.08~1.77,P=0.009),且与CC型患者发病年龄更早(Log-rankχ^(2)=9.579,P=0.002);中青年患者中CC型携带者LAA缺血性卒中发病风险则呈降低趋势,但差异无统计学意义(HR=0.73,95%CI:0.45~1.18,P=0.193),且与CC型患者发病年龄的差异也无统计学意义(Log-rankχ^(2)=1.651,P=0.199)。(4)697例患者总体情况显示,随着携带累计突变等位基因数量的增加,LAA缺血性卒中患者平均发病年龄呈下降趋势,携带0、1~2、3~4个突变等位基因LAA缺血性卒中患者发病年龄分别为(67.7±9.1)、(66.4±10.0)、(64.1±9.6)岁,差异有统计学意义(F=4.108,P=0.017);携带3~4个突变等位基因与携带0、1~2个突变等位基因的LAA缺血性卒中患者发病年龄的差异均有统计学意义(P值分别为0.016、0.012),而携带0个与1~2个突变等位基因患者发病年龄的差异无统计学意义(P=0.331)。与不携带突变等位基因患者相比,携带3~4个累计突变等位基因患者LAA卒中发病风险增加了41.0%(HR=1.41,95%CI:1.04~1.91,P=0.029),该结果在女性及老年患者中仍显著(女性:HR=1.62,95%CI:1.03~2.55;老年:HR=1.46,95%CI:1.03~2.06;均P0.05)。结论miRNA-495 rs2281611、miRNA-200b rs7549819多态性与LAA缺血性卒中发病年龄提前相关。本研究结果有待进一步验证。

摘要： 目的探讨慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)非透析患者血清miR-129、miR-205表达水平与血管钙化的关系。方法选取2020年6月至2021年1月就诊于河北医科大学第四医院的54例CKD患者为研究对象,按照冠状动脉钙化积分结果分为无钙化组(n=21)与钙化组(n=33),定量PCR法检测两组患者血清miR-129、miR-205和Runx2的表达水平,对两组间的临床资料进行比较,Spearman相关分析评价miR-129、miR-205、Runx2与血管钙化的相关性,采用Logistic回归分析血管钙化发生的危险因素,ROC曲线分析miR-129、miR-205、Runx2单独及联合检测在CKD患者血管钙化中的诊断价值。结果使用在线工具TargetScan靶向预测与Runx2相关的miRNAs(http://www.targetscan.org),结果表明miR-129、miR-205与Runx2存在潜在的结合位点。钙化组血清miR-129、miR-205水平低于无钙化组,Runx2水平高于无钙化组(P<0.05)。Spearman相关性分析表明miR-129(r=-0.445,P<0.05)、mir-205(r=-0.560,P<0.05)表达与血管钙化呈负相关,Runx2表达与血管钙化呈正相关(r=0.28,P<0.05)。Logistic回归分析示高龄、高血磷水平、低水平的miR-129和miR-205是血管钙化发生的独立危险因素。ROC曲线分析显示miR-129、miR-205、Runx2诊断血管钙化的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.763、0.831、0.666,两两联合检测的AUC分别为miR_(129+205)=0.856,miR-129+Runx2=0.798,miR-205+Runx2=0.823,三者联合检测的AUC为0.851。结论CKD非透析患者血清miR-129、miR-205表达与血管钙化水平相关,miR-129、miR-205低表达是血管钙化发生的独立危险因素,miR-129、miR-205有望成为CKD非透析患者血管钙化的潜在生物标志物。

摘要： 目的从微小RNA-101(miR-101)/Zeste基因同源蛋白2(EZH2)轴的角度探究槲皮素逆转非小细胞肺癌(NSCLC)上皮间质转分化(EMT)及吉西他滨(Gb)耐药性的分子机制。方法用不同浓度槲皮素培养A549及A549/Gb,CCK-8法筛选适宜的槲皮素浓度进行后续试验;取A549细胞分为空白组、A549+EMT诱导剂组、A549+槲皮素组、槲皮素+EMT诱导剂组;A549细胞和A549/Gb分为A549组、A549/Gb组、A549/Gb+槲皮素组、A549/Gb+EMT诱导剂组、miR-101-inhibitor组、槲皮素+miR-101-inhibitor组、miR-NC组;实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组miR-101表达水平;Western blot法检测EZH2、转化生长因子(TGF)-β1、果蝇母亲DPP同源物4(SMAD4)、p-SMAD4和EMT标志蛋白E钙黏蛋白(E-cadherin)、N钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达;CCK-8法检测各组细胞光密度(OD)值,并计算半数抑制浓度(IC_(50))及耐药指数(IR)。结果槲皮素对A549及A549/Gb的IC_(50)分别为64、128μmol/L。EMT诱导剂增强A549细胞EMT特性(N-cadherin及Vimentin表达升高,E-cadherin表达降低)后,A549细胞miR-101表达降低,EZH2、TGF-β1、p-SMAD4/SMAD4蛋白表达水平,IC_(50)及IR升高(P<0.05);槲皮素可抑制A549细胞EMT特性、降低IC_(50)及IR,并上调miR-101,抑制EZH2、TGF-β1、p-SMAD4/SMAD4蛋白表达(P<0.05);EMT诱导剂可逆转槲皮素的上述作用(P<0.05)。与A549细胞相比,A549/Gb细胞的EMT特性增强,IC_(50)、IR、EZH2、TGF-β1、pSMAD4/SMAD4表达均升高(P<0.05);抑制miR-101或EMT诱导剂处理,均可进一步增强A549/Gb细胞的EMT特性,升高IC_(50)、IR,上调EZH2、TGF-β1、p-SMAD4/SMAD4蛋白表达(P<0.05);槲皮素可抑制A549/Gb细胞的EMT进程、降低其IC_(50)、IR及EZH2、TGF-β1、p-SMAD4/SMAD4蛋白表达(P<0.05);抑制miR-101表达可逆转槲皮素的上述作用(P<0.05)。结论槲皮素可通过上调miR-101,抑制EZH2表达,进而抑制EMT进程,降低NSCLC细胞耐药性。

摘要： 血管性认知障碍(vascular cognitive impairment,VCI)是由脑血管病导致的不同程度的认知功能损害,包括注意力、记忆力、执行力的下降,并且会影响患者的日常生活,但其发病机制尚未明确。微RNA(microRNA,miRNA)是一类短链非编码RNA,在调节各种神经系统疾病中起重要作用。但是,miRNA在VCI发病机制中的作用尚未得到很好的阐明。本文将主要从血脑屏障、突触可塑性、炎症和神经元自噬等方面对miRNA在VCI发病机制中的最新研究进展进行综述。

摘要： 目的探讨miR-1307-3p通过靶向ISM1促进乳腺癌细胞增殖和迁移的分子机制。方法 (1)利用TCGA数据库分析miR-1307-3p在乳腺癌患者中的表达水平及其与临床指标的关系。(2)利用qPCR、CCK-8实验、细胞划痕实验和流式细胞术检测过表达或沉默miR-1307-3p后乳腺癌MCF-7细胞miR-1307-3p表达、细胞增殖、迁移和凋亡水平变化。(3)生物信息学分析软件预测miR-1307-3p的靶基因,同时采用双荧光素酶实验进行验证。结果miR-1307-3p在乳腺癌细胞及乳腺癌组织中均显著上调。miR-1307-3p过表达可促进MCF-7细胞增殖和迁移;而miR-1307-3p inhibitor则抑制细胞迁移,并诱导凋亡。ISM1可能是miR-1307-3p的靶基因。乳腺癌组织中ISM1表达水平明显低于正常乳腺组织,且与临床病理分期有关。结论 miR-1307-3p可促进乳腺癌细胞增殖和迁移,可能通过调控ISM1基因而影响乳腺癌的发生发展。

摘要： 外泌体是一种被大多数细胞分泌的双层脂质囊泡,内含丰富的蛋白质、脂类、核酸。它能介导细胞间的信息传递和交换,是细胞信息传递的关键介质。近年来,越来越多的研究发现外泌体,尤其是外泌体微小RNA(microRNA,miRNA)可抑制炎症、减少细胞凋亡、参与多种心血管疾病的调节。现就外泌体的基本特征、在心血管疾病中的诊断意义及治疗前景作一综述。

摘要： 糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病的主要微血管病变之一,也是终末期肾衰竭的最主要原因,但尚缺乏有效的治疗手段。研究发现,肾小管损伤与DN中肾脏功能的恶化关系密切,而microRNA通过调节炎症反应、氧化应激、肾小管间质纤维化、抑制肾小管上皮细胞的衰老等多种调控机制参与了DN发展中的肾小管损伤过程。本文就microRNA参与DN肾小管损伤的病理生理过程作用机制做一综述,为今后DN的治疗提供参考。

摘要： 目的探究长链非编码RNA(LncRNA)生长抑制特异因子5(GAS5)靶向微小RNA(miR)-103,从而减轻3T3L1脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)的机制。方法培养并诱导分化3T3L1小鼠前脂肪细胞,油红O染色鉴定细胞分化情况。建立3T3L1脂肪细胞IR模型。实验分为对照组、模型组、空载体组(转染pEGFP-C1空载体)、GAS5过表达组(转染pEGFP-C1-GAS5载体)、GAS5过表达+mimic NC组(转染pEGFP-C1-GAS5+mimic NC)、GAS5过表达+miR-103 mimic组(转染pEGFP-C1-GAS5+miR-103 mimic)。实时荧光定量PCR检测细胞中GAS5、miR-103 mRNA水平;液体闪烁法检测葡萄糖摄取能力;蛋白质免疫印迹检测细胞中胰岛素受体底物-1(IRS-1)、p-IRS-1、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT蛋白表达水平;双荧光素酶鉴定miR-103与GAS5的靶向位点。结果诱导后脂肪细胞呈圆形、胞体变大,胞浆丰富,含有大量脂滴,油红染色明显,呈"指环样"结构,模型构建成功。与对照组比较,模型组、空载体组、GAS5过表达+miR-103 mimic组细胞中GAS5mRNA水平、葡萄糖摄取能力、p-IRS-1/IRS-1、PPARγ、GLUT4、p-AKT/AKT蛋白水平降低,细胞中miR-103 mRNA水平升高(P<0.05);与模型组、空载体组比较,GAS5过表达组、GAS5过表达+mimic NC组细胞中GAS5 mRNA水平、葡萄糖摄取能力、p-IRS-1/IRS-1、PPARγ、GLUT4、p-AKT/AKT蛋白水平升高,而miR-103 m RNA水平降低(P<0.05);与GAS5过表达组、GAS5过表达+mimic NC组比较,GAS5过表达+miR-103 mimic组细胞中GAS5 mRNA水平、葡萄糖摄取能力、p-IRS-1/IRS-1、PPARγ、GLUT4、p-AKT/AKT蛋白水平降低,miR-103 mRNA水平升高(P<0.05)。miR-103与GAS5存在互补的结合位点并经双荧光素酶靶向关系验证。结论过表达GAS5后靶向下调miR-103的表达可减轻3T3L1脂肪细胞IR。

摘要： 微RNA(microRNA,miRNA)是通过基因转录后沉默来调控基因表达的内源性非编码小RNAs，其中miR-21、miR-17-92、miR-214、miR-26a、miR-221、miR-222等可以通过与PTEN mRNA 3’-UTR互补结合来抑制PTEN磷酸水解酶表达,而PTEN在细胞的增殖、凋亡、转移与侵袭中发挥重要作用,其低表达会导致肿瘤发生发展。

摘要： 微RNA(microRNA,miRNA)是通过基因转录后沉默来调控基因表达的内源性非编码小RNAs，其中miR-21、miR-17-92、miR-214、miR-26a、miR-221、miR-222等可以通过与PTEN mRNA 3’-UTR互补结合来抑制PTEN磷酸水解酶表达,而PTEN在细胞的增殖、凋亡、转移与侵袭中发挥重要作用,其低表达会导致肿瘤发生发展。

摘要： 微RNA(microRNA,miRNA)是通过基因转录后沉默来调控基因表达的内源性非编码小RNAs，其中miR-21、miR-17-92、miR-214、miR-26a、miR-221、miR-222等可以通过与PTEN mRNA 3’-UTR互补结合来抑制PTEN磷酸水解酶表达,而PTEN在细胞的增殖、凋亡、转移与侵袭中发挥重要作用,其低表达会导致肿瘤发生发展。

摘要： 微RNA(microRNA,miRNA)是通过基因转录后沉默来调控基因表达的内源性非编码小RNAs，其中miR-21、miR-17-92、miR-214、miR-26a、miR-221、miR-222等可以通过与PTEN mRNA 3’-UTR互补结合来抑制PTEN磷酸水解酶表达,而PTEN在细胞的增殖、凋亡、转移与侵袭中发挥重要作用,其低表达会导致肿瘤发生发展。

摘要： 公开了治疗有需要的受试者的双相型障碍的方法。所述方法包括给予受试者治疗有效量的miR‑135、其前体或编码所述miR‑135或其所述前体的核酸分子，从而治疗双相型障碍。还公开了诊断人类受试者的心境障碍和监测抗抑郁药物或治疗心境障碍的药物的治疗的方法。

摘要： 本发明涉及微RNA在对暴露于颗粒物2.5(PM2.5)进行鉴别方面的用途，以及使用该微RNA对暴露于PM2.5进行鉴别的方法。更精确地，当将小鼠模型暴露于PM2.5水溶性提取物和PM2.5有机可溶性提取物时，确认了一种微RNA以正常水平1.3倍的水平过表达。因此，该选定的微RNA可用作监测PM2.5和评估PM2.5风险的生物标志物，并可用作检验PM2.5毒性机制的工具。

摘要： 本发明提供了用于治疗和诊断与五羟色胺‑、肾上腺素‑、去甲肾上腺素‑、谷氨酸‑和促肾上腺皮质素‑释放激素相关的病症的微RNA以及包含微RNA的组合物。

摘要： 本发明涉及微RNA和包含微RNA的组合物。本发明提供了用于治疗和诊断与五羟色胺‑、肾上腺素‑、去甲肾上腺素‑、谷氨酸‑和促肾上腺皮质素‑释放激素相关的病症的微RNA以及包含微RNA的组合物。

摘要： 公开了治疗有需要的受试者的双相型障碍的方法。所述方法包括给予受试者治疗有效量的miR‑135、其前体或编码所述miR‑135或其所述前体的核酸分子，从而治疗双相型障碍。还公开了诊断人类受试者的心境障碍和监测抗抑郁药物或治疗心境障碍的药物的治疗的方法。

摘要： 本发明涉及微RNA hsa‑mir‑1‑3p及其类似物的应用，和表达该微RNA载体的应用。本发明提供微RNA hsa‑mir‑1‑3p在如下任一项中的应用：(1)制备ATP6V1A蛋白表达抑制剂中的应用；(2)制备空泡ATP酶抑制剂中的应用；(3)制备预防流感产品中的应用；(4)制备治疗流感产品中的应用；(5)制备流感病毒抑制剂中的应用；hsa‑mir‑1‑3p的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。hsa‑mir‑1‑3p的表达有助于机体对于流感病毒的控制，通过靶向利于流感病毒复制的宿主因子ATP6V1A降低其蛋白水平，从而抑制流感病毒的复制。

摘要： 本发明涉及微RNA hsa‑mir‑486‑5p及其类似物的应用，和表达该微RNA载体的应用。本发明提供微RNA hsa‑mir‑486‑5p在如下任一项中的应用：(1)制备诊断流感产品中的应用；(2)制备预防流感产品中的应用；(3)制备治疗流感产品中的应用；(4)制备流感病毒抑制剂中的应用；hsa‑mir‑486‑5p的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。hsa‑mir‑486‑5p的表达有助于机体对于流感病毒的控制，通过靶向流感病毒的PB2和NS上的片段，从而降解其mRNA。

摘要： 本发明涉及微RNA hsa‑mir‑127‑3p及其类似物，以及表达该微RNA载体的应用。本发明提供微RNA hsa‑mir‑127‑3p在如下任一项中的应用：(1)制备诊断流感产品中的应用；(2)制备预防流感产品中的应用；(3)制备治疗流感产品中的应用；(4)制备流感病毒抑制剂中的应用；hsa‑mir‑127‑3p的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。hsa‑mir‑127‑3p的表达有助于机体对于流感病毒的控制，通过靶向流感病毒的PB2、M和NS上的片段，从而降解其mRNA。

摘要： 本发明涉及微RNA hsa‑mir‑593‑5p及其类似物的应用，和表达该微RNA载体的应用。本发明提供微RNA hsa‑mir‑593‑5p在如下任一项中的应用：(1)制备诊断流感产品中的应用；(2)制备预防流感产品中的应用；(3)制备治疗流感产品中的应用；(4)制备流感病毒抑制剂中的应用；hsa‑mir‑593‑5p的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。hsa‑mir‑593‑5p的表达有助于机体对于流感病毒的控制，通过靶向流感病毒的PB1和M上的片段，从而降解其mRNA。

摘要： 本发明涉及微RNA mmu‑mir‑487b‑5p及其类似物的应用，和表达该微RNA载体的应用。本发明提供微RNA mmu‑mir‑487b‑5p在如下任一项中的应用：(1)制备诊断流感产品中的应用；(2)制备预防流感产品中的应用；(3)制备治疗流感产品中的应用；(4)制备流感病毒抑制剂中的应用；mmu‑mir‑487b‑5p的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。mmu‑mir‑487b‑5p的表达有助于机体对于流感病毒的控制，通过靶向流感病毒的PB2上的片段，从而降解其mRNA。