Caco-2细胞

摘要： 目的 探讨翠云草总黄酮对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响及可能机制。方法 体外培养结直肠癌细胞Caco-2,用不同剂量(10、20、40μg/mL)翠云草总黄酮干预24 h、或转染环状RNA circ_0006528小干扰RNA至Caco-2细胞后培养24 h、或用40μg/mL的翠云草总黄酮干预转染circ_0006528过表达载体的Caco-2细胞24 h,然后用检测细胞存活与生长比色法(MTT)、克隆形成实验、划痕实验和流式细胞术分别检测细胞活性、克隆形成数、迁移和凋亡。Western Blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测circ_0006528和miR-330-3p表达。双荧光素酶报告基因实验验证circ_0006528和miR-330-3p调控关系。结果 Caco-2细胞经翠云草总黄酮干预后,细胞活性、克隆形成数、迁移距离和细胞中Bcl-2蛋白、circ_0006528的表达均降低,而凋亡率和Bax蛋白、miR-330-3p的表达升高,差异有统计学意义(P<0.05),且呈剂量依赖性。干扰circ_0006528后,Caco-2细胞活性、克隆形成数、迁移距离和Bcl-2蛋白表达降低,细胞凋亡率和Bax蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。circ_0006528靶向负调控miR-330-3p。过表达circ_0006528逆转了翠云草总黄酮对Caco-2细胞增殖、迁移和凋亡及miR-330-3p表达的影响。结论 翠云草总黄酮可能通过调控circ_0006528/miR-330-3p轴,抑制结直肠癌细胞增殖和迁移,并促进细胞凋亡。

摘要： 西兰花芽是多种生物活性成分的良好来源,营养价值极高,近年来被广泛研究。该文对西兰花芽提取物的抗肿瘤活性及其潜在机制进行探讨。通过观察细胞形态学变化,发现西兰花芽提取物可使结肠癌Caco-2细胞和肝癌HepG2细胞密度下降,且细胞出现凋亡状态。细胞增殖抑制率结果表明西兰花芽提取物能够抑制两种肿瘤细胞增殖,且呈剂量依赖性,CaCl_(2)组对Caco-2和HepG2细胞半数抑制浓度分别为(0.030±0.002)、(0.043±0.004)mg/mL。通过流式细胞术检测凋亡率,发现西兰花芽提取物可使细胞凋亡比例达到82.95%。活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和线粒体膜电位检测结果表明,西兰花芽提取物可能通过诱导细胞产生ROS,降低线粒体膜电势,促进细胞凋亡,从而抑制Caco-2细胞增殖。

摘要： 目的考察白坚木碱二聚体(10-dehydroxyl-12-demethoxy-conophylline,wtdr-11)在人类结肠癌细胞系Caco-2细胞模型中吸收和转运机制。方法建立Caco-2单层细胞完整模型,采用超高效液相色谱-荧光法(ultra-high performance liquid chromatography-fluorescence,UPLC-FLR)测定细胞模型中wtdr-11的浓度并计算表观渗透系数(apparent permeability coefficient,P_(app));分别考察不同浓度、时间、温度、pH值、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)抑制剂(维拉帕米和环孢素A)对wtdr-11在Caco-2细胞内摄取的影响;考察时间变化对wtdr-11在Caco-2细胞中双向转运分别从细胞刷状缘侧(apical,AP)→细胞基底侧(basolateral,BL)和BL→AP方向的影响。结果wtdr-11的吸收随着时间和药物浓度的增加而增加,但温度、pH值和P-gp抑制剂等因素对Caco-2细胞吸收该药物的影响无统计学意义(P>0.05)。跨膜转运实验中,P_(app)>10^(-6) cm/s,外排率<1.5。结论wtdr-11的主要吸收机制可能是被动扩散,wtdr-11可能不是P-gp转运蛋白的底物。

摘要： 随着生活节奏的加快和生活方式的改变,炎症性肠病的发病率不断增加,从饮食中寻找抑制炎症成分是防控炎性肠病的有效途径。本实验以金针菇蛋白聚糖(Flarnmulina velutipes proteoglycans,FPG)1-1为原料,建立脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人结肠腺癌细胞(Caco-2)、巨噬细胞(RAW264.7)共培养炎症模型,测定FPG1-1对一氧化氮(nitrite oxide,NO)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)及细胞因子的影响,以分析其对炎症的作用。结果显示:与模型组相比,质量浓度为200 μg/mL FPG1-1可以极显著降低RAW264.7 NO、ROS的生成(P<0.01),同时可以上调白细胞介素(interleukin,IL)-10、下调肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α)、IL-1β、IL-6的分泌。以上结果表明,FPG1-1能够有效抑制LPS诱导的Caco-2/RAW264.7共培养模型炎症反应。本研究结果可为金针菇功能成分利用和抑制炎性肠病功能食品开发提供理论依据。

摘要： 目的制备黄芪甲苷(AST)纳米胶束(AST-NMs),并通过Caco-2单层细胞转运实验评价其渗透性。方法以聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物(Pluronic F127)和D-α-维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)作为载体材料,采用冷冻干燥-水化法制备AST-NMs,并以Pluronic F127与TPGS质量比(X_(1))和聚合物与药物质量比(X_(2))作为变量因素,以AST-NMs的包封率(Y_(1))和粒径分布(Y_(2))作为评价指标,使用中心复合实验设计优化并得到AST-NMs的最优处方;采用差示扫描量热法(DSC)和透射电镜对AST-NMs进行表征;研究了AST-NMs在4种释放介质中的稀释稳定性以及体外药物释放特性;通过Caco-2单层细胞转运实验比较了AST原料药与AST-NMs的渗透性。结果经优化得到AST-NMs的最优处方为:Pluronic F127与TPGS质量比为5∶1,聚合物与药物质量比为38∶1;DSC测定显示,AST-NMs中的药物吸热峰消失;在透射电镜下观察到AST-NMs呈球状分布,无聚集;AST-NMs经不同pH介质稀释后稳定性均较好,在4种释放介质中均表现为平稳的缓慢释药特征;AST-NMs在Caco-2单层细胞的渗透性显著高于AST原料药。结论将AST制备成AST-NMs,可显著提高药物渗透性,有望提高生物利用度。

摘要： 目的研究雷公藤内酯醇(Triptolide,TL)对人结直肠腺癌细胞Caco-2紧密连接蛋白(Zonula Occludens 1,ZO-1)表达的影响。方法在Caco-2细胞建立肠黏膜屏障体外模型的基础上,通过荧光定量PCR、Western Blot和免疫荧光分析紧密连接蛋白ZO-1的表达变化。结果与对照组相比,TL不同浓度组Caco-2细胞内ZO-1基因和蛋白表达水平无显著变化;TNF-α组ZO-1表达显著降低;在不同浓度TL预保护后加入TNF-α,ZO-1表达水平随加入药物浓度的增加逐渐增加。对照组和TL不同浓度组内ZO-1的免疫荧光染色均表现为整齐、连续且分布规律;TNF-α组荧光强度则明显减弱,单层细胞散架且缺损,位于细胞边界的蛋白染色较模糊,蛋白定位出现弥散和不连续,表达信号减弱;在不同浓度TL预保护后加入TNF-α,ZO-1表达随药物浓度增加逐渐恢复,最高浓度下信号最强。结论TNF-α破坏单细胞层,且抑制ZO-1表达,TL通过ZO-1促进肠黏膜屏障紧密连接恢复。提示TL可能对肠黏膜屏障有一定保护作用。

摘要： 目的探讨Caco-2细胞模型中头花蓼提取液对左氧氟沙星吸收的影响。方法取直肠腺癌Caco-2细胞,培养至屏障模型形成。以0.5,1.0,2.0,4.0,8.0,16.0 mg/mL的头花蓼提取液和5,10,20,40,80,160,320,640µmol/mL左氧氟沙星溶液分别作用Caco-2细胞24 h,采用细胞增殖检测法检测细胞活力。以筛选出的上述2种药液最大安全浓度分别及同时作用于Caco-2细胞1 h,采用超高效液相色谱串联质谱法检测细胞中头花蓼提取液所含没食子酸、原儿茶酸及左氧氟沙星的含量。结果头花蓼提取液和左氧氟沙星的最大安全浓度分别为1 mg/mL和160µmol/mL。两药合用时左氧氟沙星的细胞摄取量为(3.903±0.394)µg/g,显著少于其单用时的(5.895±0.663)µg/g(P0.05)。结论头花蓼提取液能显著减少左氧氟沙星在Caco-2细胞中的吸收,而左氧氟沙星对头花蓼提取液的吸收无显著影响。

摘要： 目的 观察降脂1号对高脂血症模型大鼠小肠及Caco-2细胞胆固醇代谢的影响,探讨其相关机制。方法 将48只大鼠随机分为对照组、模型组、阿托伐他汀组和降脂1号低、中、高剂量组,每组8只,高脂乳剂连续灌胃6周制备高脂血症模型,造模第2周开始予相应药物灌胃,连续6周。Caco-2细胞分为对照组、模型组、依折麦布组和降脂1号低、中、高浓度组,造模并予药物处理24 h。称量大鼠体质量,全自动生化分析仪检测血脂及肝肾功能指标,HE染色观察小肠组织病理变化,免疫组化、免疫荧光分别检测小肠组织及Caco-2细胞ATP结合盒转运蛋白G5(ABCG5)、NPC1L1表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠体质量增长缓慢,血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)水平明显升高(P0.05);与模型组比较,降脂1号各剂量组大鼠体质量有所增加,TC、LDL-C、ALT、BUN、SCr水平明显降低(P0.05),降脂1号低剂量组大鼠小肠组织NPC1L1蛋白表达明显降低(P<0.05)。细胞实验结果显示,与对照组比较,模型组细胞ABCG5、NPC1L1蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,降脂1号高浓度组细胞ABCG5蛋白表达明显升高(P<0.05),NPC1L1蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论 降脂1号能调节高脂血症模型大鼠血脂代谢紊乱状态,减轻小肠病变程度,减少小肠细胞对胆固醇的吸收,增加胆固醇流出,发挥治疗高脂血症的作用。

摘要： 为评价某市售儿童成长配方奶粉的补钙和促进骨骼生长能力,以常见市售纯牛奶A作为对照,运用人结肠腺癌细胞(Caco-2)单层模型,研究其对钙离子转运的作用;运用成骨细胞(MC3T3-E1)矿化模型,研究其对成骨细胞增殖与矿化的影响。Caco-2细胞模型结果表明,各剂量组儿童配方奶粉组的钙转运量均高于市售纯牛奶A,但相较空白组无显著性差异(p<0.05)。成骨细胞增殖实验结果表明,5~50μg/mL的儿童配方奶粉对成骨细胞均有促进增殖作用,增殖速度均在30%以上;并测定细胞碱性磷酸酶活性,当儿童配方奶粉质量浓度为50μg/mL时,酶活达7.79 U/g蛋白,相较空白组极显著提高(p<0.01),较市售纯牛奶A的效果更稳定。成骨细胞矿化结果表明,5~50μg/mL儿童配方奶粉能显著促进成骨细胞产生矿化结晶,50μg/mL时茜素红吸光值均为0.180,对比空白组提高50%以上,较市售纯牛奶A矿化程度更稳定。综上实验结果,儿童配方奶粉虽对钙在小肠上皮的转运吸收无明显促进作用,但很可能通过促进骨生长而对儿童生长发育起作用。

摘要： 探讨两种硒化物对人结肠腺癌Caco-2细胞的毒性作用.将Caco-2细胞暴露在不同浓度的亚硒酸钠(SeIV)和硒代蛋氨酸(SeMet)中培养24 h,用Annexin V-FITC/PI双染色法检测在同样浓度的SeIV和SeMet培养下细胞的凋亡率,并设置不做硒处理的空白对照.用MTT法检测细胞存活率;检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)释放率、细胞内的超氧化物歧化酶SOD活力和谷胱甘肽GSH的含量.相同浓度时(0.8μg Se/mL),与对照相比,SeIV诱导细胞凋亡显著率上升(p<0.05),SeMet变化不显著.一定浓度的SeIV(≥0.4μg Se/mL)和SeMet(≥40μg Se/mL)与对照组相比均显著降低细胞的存活率(p<0.05);随着Se含量的升高细胞的存活率呈下降趋势,SeIV、SeMet的IC50分别为2.56、215.55μg Se/mL.当SeIV浓度为≥0.8μg Se/mL,SeMet浓度为≥40μg Se/mL时,细胞的LDH释放率均显著高于对照组(14.80％)(p<0.05).当SeIV浓度≥4μg Se/mL,SeMet≥4μg Se/mL时,细胞的SOD活性均显著低于对照组(56.76 U/mg prot)(p<0.05).当SeIV浓度≥4μg Se/mL,SeMet浓度为160μg Se/mL时,细胞的GSH含量均显著低于对照组(61.67μg/mg prot)(p<0.05).一定浓度的SeIV和SeMet会使Caco-2细胞产生氧化应激而导致细胞毒性,诱导细胞凋亡.

摘要： 目的：采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)方法鉴别穿心莲与Caco-2细胞亲和的活性成分. 方法：将Caco-2细胞与穿心莲药液共培养(即药物摄取和药物转运实验),采用UPLC-Q-TOF-MS方法测定亲和前后的细胞样品.根据各化学成分的保留时间、质谱信息,并结合提取离子流图与对照品、相关文献质谱数据对比鉴定各亲和活性成分. 结果：从穿心莲中共筛选出10种能与Caco-2细胞亲和的活性成分,分别为12,13-双氢穿心莲内酯(1)、黄芩黄酮I-2'-O-葡萄糖苷(2)、穿心莲内酯(3)、14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯苷(4)、7-羟基-14-脱氧穿心莲内酯(5)、新穿心莲内酯(6)、3,14-二脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯苷(7)、去氧穿心莲内酯(8)和脱水穿心莲内酯(9). 结论：建立的Caco-2细胞亲和-UPLC-Q-TOF-MS方法,可用于筛选中药复杂体系中的活性成分,为进一步研究活性成分群间的协同配伍效应奠定基础.

摘要： 目的：采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)方法鉴别穿心莲与Caco-2细胞亲和的活性成分. 方法：将Caco-2细胞与穿心莲药液共培养(即药物摄取和药物转运实验),采用UPLC-Q-TOF-MS方法测定亲和前后的细胞样品.根据各化学成分的保留时间、质谱信息,并结合提取离子流图与对照品、相关文献质谱数据对比鉴定各亲和活性成分. 结果：从穿心莲中共筛选出10种能与Caco-2细胞亲和的活性成分,分别为12,13-双氢穿心莲内酯(1)、黄芩黄酮I-2'-O-葡萄糖苷(2)、穿心莲内酯(3)、14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯苷(4)、7-羟基-14-脱氧穿心莲内酯(5)、新穿心莲内酯(6)、3,14-二脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯苷(7)、去氧穿心莲内酯(8)和脱水穿心莲内酯(9). 结论：建立的Caco-2细胞亲和-UPLC-Q-TOF-MS方法,可用于筛选中药复杂体系中的活性成分,为进一步研究活性成分群间的协同配伍效应奠定基础.

摘要： 目的：采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)方法鉴别穿心莲与Caco-2细胞亲和的活性成分. 方法：将Caco-2细胞与穿心莲药液共培养(即药物摄取和药物转运实验),采用UPLC-Q-TOF-MS方法测定亲和前后的细胞样品.根据各化学成分的保留时间、质谱信息,并结合提取离子流图与对照品、相关文献质谱数据对比鉴定各亲和活性成分. 结果：从穿心莲中共筛选出10种能与Caco-2细胞亲和的活性成分,分别为12,13-双氢穿心莲内酯(1)、黄芩黄酮I-2'-O-葡萄糖苷(2)、穿心莲内酯(3)、14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯苷(4)、7-羟基-14-脱氧穿心莲内酯(5)、新穿心莲内酯(6)、3,14-二脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯苷(7)、去氧穿心莲内酯(8)和脱水穿心莲内酯(9). 结论：建立的Caco-2细胞亲和-UPLC-Q-TOF-MS方法,可用于筛选中药复杂体系中的活性成分,为进一步研究活性成分群间的协同配伍效应奠定基础.

摘要： 目的：采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)方法鉴别穿心莲与Caco-2细胞亲和的活性成分. 方法：将Caco-2细胞与穿心莲药液共培养(即药物摄取和药物转运实验),采用UPLC-Q-TOF-MS方法测定亲和前后的细胞样品.根据各化学成分的保留时间、质谱信息,并结合提取离子流图与对照品、相关文献质谱数据对比鉴定各亲和活性成分. 结果：从穿心莲中共筛选出10种能与Caco-2细胞亲和的活性成分,分别为12,13-双氢穿心莲内酯(1)、黄芩黄酮I-2'-O-葡萄糖苷(2)、穿心莲内酯(3)、14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯苷(4)、7-羟基-14-脱氧穿心莲内酯(5)、新穿心莲内酯(6)、3,14-二脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯苷(7)、去氧穿心莲内酯(8)和脱水穿心莲内酯(9). 结论：建立的Caco-2细胞亲和-UPLC-Q-TOF-MS方法,可用于筛选中药复杂体系中的活性成分,为进一步研究活性成分群间的协同配伍效应奠定基础.

摘要： 目的：采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)方法鉴别穿心莲与Caco-2细胞亲和的活性成分. 方法：将Caco-2细胞与穿心莲药液共培养(即药物摄取和药物转运实验),采用UPLC-Q-TOF-MS方法测定亲和前后的细胞样品.根据各化学成分的保留时间、质谱信息,并结合提取离子流图与对照品、相关文献质谱数据对比鉴定各亲和活性成分. 结果：从穿心莲中共筛选出10种能与Caco-2细胞亲和的活性成分,分别为12,13-双氢穿心莲内酯(1)、黄芩黄酮I-2'-O-葡萄糖苷(2)、穿心莲内酯(3)、14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯苷(4)、7-羟基-14-脱氧穿心莲内酯(5)、新穿心莲内酯(6)、3,14-二脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯苷(7)、去氧穿心莲内酯(8)和脱水穿心莲内酯(9). 结论：建立的Caco-2细胞亲和-UPLC-Q-TOF-MS方法,可用于筛选中药复杂体系中的活性成分,为进一步研究活性成分群间的协同配伍效应奠定基础.

摘要： 目的:采用人肠源Caco-2细胞单层模型,模拟研究牛黄、体外培育牛黄及人工牛黄体内吸收成分及转运.方法:建立人结肠癌细胞Caco-2细胞单层模型,结合具有高灵敏度的液质联用分析技术对牛黄及其代用品在Caco-2细胞模型的转运进行研究.结论:人工牛黄和体外培育牛黄中大多数胆汁酸类成分的双向透过率均低于天然牛黄,预测天然牛黄中胆汁酸类成分生物利用率高于人工牛黄和体培外培育牛黄.

摘要： 目的:采用人肠源Caco-2细胞单层模型,模拟研究牛黄、体外培育牛黄及人工牛黄体内吸收成分及转运.方法:建立人结肠癌细胞Caco-2细胞单层模型,结合具有高灵敏度的液质联用分析技术对牛黄及其代用品在Caco-2细胞模型的转运进行研究.结论:人工牛黄和体外培育牛黄中大多数胆汁酸类成分的双向透过率均低于天然牛黄,预测天然牛黄中胆汁酸类成分生物利用率高于人工牛黄和体培外培育牛黄.

摘要： 目的:采用人肠源Caco-2细胞单层模型,模拟研究牛黄、体外培育牛黄及人工牛黄体内吸收成分及转运.方法:建立人结肠癌细胞Caco-2细胞单层模型,结合具有高灵敏度的液质联用分析技术对牛黄及其代用品在Caco-2细胞模型的转运进行研究.结论:人工牛黄和体外培育牛黄中大多数胆汁酸类成分的双向透过率均低于天然牛黄,预测天然牛黄中胆汁酸类成分生物利用率高于人工牛黄和体培外培育牛黄.

摘要： 目的:采用人肠源Caco-2细胞单层模型,模拟研究牛黄、体外培育牛黄及人工牛黄体内吸收成分及转运.方法:建立人结肠癌细胞Caco-2细胞单层模型,结合具有高灵敏度的液质联用分析技术对牛黄及其代用品在Caco-2细胞模型的转运进行研究.结论:人工牛黄和体外培育牛黄中大多数胆汁酸类成分的双向透过率均低于天然牛黄,预测天然牛黄中胆汁酸类成分生物利用率高于人工牛黄和体培外培育牛黄.

摘要： 本文采用Caco-2细胞模型评价黄芩主要活性成分,黄芩苷和黄芩素,对P-gp活性和表达的影响.本文以维拉帕米为阳性对照,荧光素为阴性对照,考察药物是否能够抑制细胞对P-gp底物Rh-123的外排;药物作用后,采用免疫细胞化学法,流式细胞仪分析Caco-2细胞膜上P-gp表达量的变化.结果显示,黄芩苷能够减少Rh-123的外排但对P-gp的表达无作用,黄芩素能够显著增加Rh-123的外排并降低P-gp的表达.这一结果说明黄芩素为P-gp抑制剂,将为探索高效低毒的P-gp抑制剂提供理论依据.

摘要： 本发明提供了一种检测附子中二萜类生物碱在Caco-2细胞模型中吸收转运含量的方法，包括以下步骤：a)提取附子中的二萜类生物碱，得到生物碱提取物；b)将所述生物碱提取物溶解于Hanks平衡盐缓冲液中，将得到的溶液作为供给侧、Hanks平衡盐缓冲液作为接收侧在Caco-2细胞模型中进行吸收转运，自接收侧取样，得到待测样品；c)以利血平为内标物，采用超高效液相色谱仪和质谱仪对所述待测样品进行分离检测，得到质谱图；d)根据所述质谱图和预先建立的标准工作曲线得到各生物碱在Caco-2细胞模型中的吸收转运含量。超高效液相色谱仪对复杂样品的分离效果较好，而质谱仪则具有较高的灵敏度和精确性，检测结果更为准确。

摘要： 本发明公开了白及中六种成分在Caco‑2细胞模型中吸收转运量的测定方法，包括以下步骤：制备白及提取物溶液、作为对照品的标准溶液和内标溶液；建立人源结肠腺癌细胞系Caco‑2细胞模型；通过Caco‑2细胞模型制备出细胞悬液；通过UPLC‑MS/MS测定6种成分的含量；按考马斯亮蓝染液蛋白测定试剂盒方法测定总蛋白含量，并计算细胞摄取量X=待测物总蛋白。本发明采用UPLC‑MS/MS建立白及提取物中6个成分的分析方法，测定白及提取物在时间、浓度、温度、pH和P‑gh抑制剂条件下对Caco‑2细胞的吸收摄取影响，初步评价白及提取物的体内吸收特性。为白及提取物的口服制剂研发提供科学依据。

摘要： 本发明提供了一种检测附子中二萜类生物碱在Caco-2细胞模型中吸收转运含量的方法，包括以下步骤：a)提取附子中的二萜类生物碱，得到生物碱提取物；b)将所述生物碱提取物溶解于Hanks平衡盐缓冲液中，将得到的溶液作为供给侧、Hanks平衡盐缓冲液作为接收侧在Caco-2细胞模型中进行吸收转运，自接收侧取样，得到待测样品；c)以利血平为内标物，采用超高效液相色谱仪和质谱仪对所述待测样品进行分离检测，得到质谱图；d)根据所述质谱图和预先建立的标准工作曲线得到各生物碱在Caco-2细胞模型中的吸收转运含量。超高效液相色谱仪对复杂样品的分离效果较好，而质谱仪则具有较高的灵敏度和精确性，检测结果更为准确。

摘要： 本发明公开了一种Caco‑2细胞倒置模型及其制备方法，属于细胞模型技术领域。该制备方法包括：在Transwell小室的底端外侧设置连接件，得到培养器皿；将培养器皿放置于细胞培养板内，并使培养器皿的培养腔开口朝上；将Caco‑2细胞接种于培养腔内，进行细胞培养，待Caco‑2细胞铺满Transwell小室的底壁后；将Transwell小室重新按照常规方式放置于细胞培养板的培养孔内，得到Caco‑2细胞倒置模型。该Caco‑2细胞倒置模型能够扩展传统Caco‑2细胞模型的研究范畴，对小密度物质进行吸收研究，实验效果良好、且模型构建过程简单，方便易行，利于在不同实验室中进行推广，应用前景广阔。

摘要： 本发明脂多糖诱导的Caco‑2/RAW264.7细胞共培养模型的建立方法及应用，包括：1）Caco‑2细胞和RAW264.7细胞的培养；2）将Caco‑2细胞接种于Transwell板上室的AP侧，孵化；3）RAW 264.7细胞接种于24孔板，孵化；4）将Transwell上室转移到24孔板；5）将脂多糖溶于PBS中，配制母液，过滤后稀释备用；6）在BL侧加入LPS‑10%DMEM培养基孵化，形成肠道炎症模型。本发明建立了肠上皮细胞系Caco‑2和巨噬细胞系RAW‑264.7细胞的体外模型，以建立肠道炎症反应，用以研究巨噬细胞介导的Caco‑2细胞对C3G纳米脂质体的吸收机制。

摘要： 本发明公开了一种基于Caco‑2细胞高效诱变筛选肠道定植益生菌的育种方法，属于益生菌培育技术领域，包括以下步骤：步骤1、制备益生菌株；步骤2、诱变筛选；步骤3、基于体外模拟肠道环境耐受性筛选；步骤4、基于Caco‑2细胞模型黏附性筛选。与现有技术相比较具有体外快速高效诱变筛选能够长时间定植于动物肠道的益生菌的特点。

摘要： 本发明提供了一种基于体外消化/Caco2细胞模型测定冬虫夏草中砷的生物可给性方法，属于重金属生物可给性检测技术领域。本发明采用transwell培养建立Caco‑2肠吸收模型，并通过体外模拟胃、肠消化的二步消化法建立体外消化/Caco‑2细胞模型，并采用ICP‑MS法测定冬虫夏草中砷的生物可给性，为科学、客观地评价中药中重金属的健康风险以及限量标准的制修定提供依据。实验证明，冬虫夏草中Caco‑2细胞转运后砷的生物可给性为1.5％～13.0％。本发明所述方法促进中药产业发展，节约资源，同时为客观、科学地评价中药中重金属对人体的健康风险提供新的思路，为制定科学、合理的重金属限量标准提供依据。

摘要： 本发明提出了一种Caco‑2细胞单层膜形成培养方法：用含20％胎牛血清、1％青霉素/链霉素的MEM培养基培养Caco‑2细胞，当细胞汇合度达到60％‑70％时胰酶消化，连续传代培养2‑3次，待细胞培养到对数生长期，过量接种细胞培养，细胞贴壁展开后，用PBS清洗未贴壁细胞，即得到Caco‑2单层膜细胞。本发明方法建立的Caco‑2单层膜模型状态良好，呈铺路石状镶嵌状排列，细胞之间紧密连接，基本无空泡形成，Caco‑2细胞模型可靠稳定、重复性好，为后续的药物吸收、转运研究奠定实验基础。

摘要： 本发明公开了一种基于Caco‑2细胞模型的活性肽定向制备方法，属于农产品精深加工及其副产物综合利用的技术领域。本发明以大米蛋白为原料，经蛋白酶处理后，通过体外模拟胃肠消化和Caco‑2细胞吸收模型模拟小肠吸收过程，定向高效筛选抗消化和易吸收的抗氧化肽组分，然后经凝胶色谱层析和高效液相色谱层析分离纯化，获得氨基酸序列明确、易被人体吸收利用的高活性抗氧化肽。该发明构建了基于体外模拟胃肠消化和Caco‑2细胞吸收模型模拟小肠吸收的活性肽高效筛选体系，从根源上提高米蛋白抗氧化肽的生物利用率，在一定程度上解决了活性肽在体内生物利用率低的问题，具有广泛的应用前景。

摘要： 本实用新型公开了一种组合式Caco‑2细胞培养装置，包括箱体和箱门，箱体内腔底端的两侧均放置有支架，两个支架之间放置有若干个用于放置培养皿的托盘，托盘顶端的正面设置有调节机构，调节机构包括两个固定块、一个螺纹杆和一个活动板，两个固定块的底端分别固定安装在托盘正面顶端的两侧，两个固定块的中部均通过轴承连接有同一螺纹杆。该种组合式Caco‑2细胞培养装置，通过透明视窗和活动板的配合使用，使设置不同生长环境的培养皿放置在托盘上时可以被活动板分隔，进而使工作人员可以通过透明视窗进行观察并记录并且无需反复的打开箱门并通过培养皿上的标签才可区别不同的培养皿再记录数据。