α-半乳糖苷酶

摘要： 采用海藻酸钠包埋法和壳聚糖交联法固定化鳞杯伞产生的α-半乳糖苷酶,通过比较固定化酶和游离酶的最适pH、pH稳定性、最适温度、温度稳定性、保存时间及两种固定化酶对豆浆中低聚糖的水解作用及操作稳定性等,探究较适宜于鳞杯伞α-半乳糖苷酶的固定化载体。结果表明:鳞杯伞α-半乳糖苷酶最佳硫酸铵饱和度为80%;两种固定化方法酶活性保持率都达到了50%以上,且固定化酶的温度稳定性、pH稳定性、保存时间相比游离酶都有提升;比较两种固定化酶,壳聚糖固定化酶的温度、酸度稳定性及操作稳定性要优于海藻酸钠固定化酶,但保存时间和对豆浆中低聚糖的水解效率要低于后者,两种固定化酶重复使用3次后低聚糖水解率在85%以上,相比于海藻酸钠,壳聚糖更适宜作为鳞杯伞α-半乳糖苷酶的固定化载体。

摘要： 为获得高效的α-半乳糖苷酶并了解其功能,采用基因工程技术,从鹿角菜中筛选获得的蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus中克隆得到一个新的α-半乳糖苷酶基因(BcgalA),并在Escherichia coli BL21(DE3)中成功进行了重组表达.结果表明:BcgalA基因序列编码441个氨基酸,预测的BcGalA蛋白相对分子质量约为50 380,生物信息学分析显示,该酶属于GH4家族;酶活试验表明,在37°C、pH 8.0条件下该酶水解4-硝基苯基-α-D-吡喃半乳糖苷(pNP-α-Gal)、棉子糖的比活力分别为(1.498±0.034)、(0.261±0.012)U/mg,但对半乳甘露聚糖无水解活性.研究表明,本研究中克隆表达的BcGalA是一种属于GH4中仅对低分子量底物起作用的α-半乳糖苷酶,为探究GH4 α-半乳糖苷酶的结构与功能关系提供了样本.

摘要： 为获得高效的α-半乳糖苷酶并了解其功能,采用基因工程技术,从鹿角菜中筛选获得的蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus中克隆得到一个新的α-半乳糖苷酶基因(BcgalA),并在Escherichia coli BL21(DE3)中成功进行了重组表达。结果表明:BcgalA基因序列编码441个氨基酸,预测的BcGalA蛋白相对分子质量约为50380,生物信息学分析显示,该酶属于GH4家族;酶活试验表明,在37°C、pH 8.0条件下该酶水解4-硝基苯基-α-D-吡喃半乳糖苷(pNP-α-Gal)、棉子糖的比活力分别为(1.498±0.034)、(0.261±0.012)U/mg,但对半乳甘露聚糖无水解活性。研究表明,本研究中克隆表达的BcGalA是一种属于GH4中仅对低分子量底物起作用的α-半乳糖苷酶,为探究GH4α-半乳糖苷酶的结构与功能关系提供了样本。

摘要： Globotriose是一种具有重要生理功能的α-低聚半乳糖,难以从天然产物中直接提取,酶法合成是主要的制备方式.水稻源GH36族α-半乳糖苷酶具有一步合成Globotriose的能力,但该酶在重组大肠杆菌中表达量和酶活力较低.为进一步提高酶蛋白的表达,以酶活力、菌体质量以及总酶活力为指标,研究LB、SOB、SOC、SB、NB等基础发酵培养基对酶表达量的影响.在此基础上讨论碳源(葡萄糖、乳糖、半乳糖、蔗糖、甲醇、柠檬酸)、氮源(硫酸铵、尿素、谷氨酸、天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸、精氨酸、半胱氨酸)、无机盐(KCl、FeCl3、FeSO4、MgSO4、MgCl2、MnCl2、CoSO4、CaCl2、CuCl2、ZnSO4)以及其他辅因子(维生素C、茶多酚、谷胱甘肽)的作用,根据筛选结果对可以提高总酶活力的提升因子进行浓度依存分析.结果表明:LB培养基最适合作为基础发酵培养基,在此基础上,额外添加20mmol·L-1葡萄糖、5mmol·L-1亮氨酸、1mmol·L-1 FeSO4以及3mmol·L-1维生素C可以有效提高目的蛋白的活性表达.经验证,利用该培养基在50mL培养体系中,总酶活力提高4倍,达到8.65U.上述研究结果将为Globotriose的高效生物转化及其在医药、食品生产领域的应用提供有效的途径,同时也为同类酶的高效表达提供有益参考.

摘要： 本试验旨在研究硫色曲霉 α-半乳糖苷酶基因(As?gal1)在毕赤酵母中的表达及其对豆浆中大豆寡糖的酶解效果.以本实验室前期对硫色曲霉进行全基因组测序为依据,选取1条功能鉴定为α-半乳糖苷酶的cDNA序列As?gal1进行基因分析,并根据毕赤酵母密码子偏好性进行序列优化,构建优化型菌株进行72 h摇瓶发酵,测定酶学性质.对该工程菌株进行30 L发酵罐高密度发酵,用发酵罐所得粗酶酶解豆浆中的大豆寡糖.结果表明:1)该α-半乳糖苷酶基因As?gal1全长1626 bp,编码541个氨基酸,诱导72 h后优化型工程菌株的α-半乳糖苷酶活性为3.20 U/mL.2)发酵得到的α-半乳糖苷酶的最适pH为5.0,最适温度为55°C;除pH 6.0外,在pH 4.0～8.0稳定性良好;耐热性较差,60°C10 min和70°C5 min即可近乎全部失活;该酶对大部分金属离子具有抗性,但其被MnSO4抑制,被FeCl3促进;30 L发酵罐高密度发酵结果显示,甲醇诱导177 h酶活性可达最高,为190 U/mL,比摇瓶提高了约58倍.3)大豆寡糖酶解试验结果显示,55°C下加酶量为2 U/mL反应3 h时,豆浆中总寡糖的降解率为49.07％.综上所述,本试验选取的As?gal1异源表达后获得的α-半乳糖苷酶对大豆中寡糖具有较好的降解潜力.

摘要： 该实验测定了32株双歧杆菌和乳杆菌对水苏糖的利用情况,发现共有15株菌株能够利用水苏糖,包括短双歧杆菌、齿双歧杆菌、长双歧杆菌长亚种、假小链双歧杆菌、发酵乳杆菌、副格氏乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、瘤胃乳杆菌以及唾液乳杆菌.通过分析细菌培养上清液中水苏糖和棉籽糖含量、α-半乳糖苷酶活力以及基因组草图,发现双歧杆菌和乳杆菌对水苏糖的利用方式存在差异.(1)以双歧杆菌为代表,利用msmEFG转运体转运水苏糖,再由 α-半乳糖苷酶、β-呋喃果糖苷、α-葡萄糖苷酶或低聚-1,6-葡糖苷酶等酶水解为单糖再利用;(2)以乳杆菌为代表,利用透性酶或ABC(ATP-binding cassette)转运系统将水苏糖转运至胞内水解利用;(3)以长双歧杆菌长亚种L28和罗伊氏乳杆菌L17为例,存在胞外 α-半乳糖苷酶,可在细胞外将水苏糖初步水解以便进一步利用.该文研究双歧杆菌和乳杆菌对水苏糖的利用特性,对研究水苏糖与人体健康的关系具有指导意义.

摘要： 使用一株高产α-半乳糖苷酶的发酵乳杆菌C2-8作为鹰嘴豆酸面团发酵剂,通过高效液相色谱法、质构仪分析、固相微萃取结合气相色谱-质谱联用、电子舌分析和感官评定等方法,研究其对鹰嘴豆酸面团有机酸含量、棉子糖、水苏糖和还原糖含量、游离氨基酸水平及面包烘焙品质的影响.结果表明:鹰嘴豆酸面团发酵24?h后产生62.67 mmol/kg乳酸和15.53 mmol/kg乙酸,酸面团棉子糖及水苏糖完全被降解,还原糖质量分数达到11.50％,总游离氨基酸含量是发酵前的1.26倍.比容及质构数据表明,鹰嘴豆酸面团面包(chickpea sourdough bread,CSB)较鹰嘴豆面包(chickpea bread,CB)比容提高4.60％,硬度降低18.49％,咀嚼性降低15.64％.CSB的醇类、酸类、酯类、酮类风味化合物峰面积较CB明显提高,其中苯乙醇峰面积提高1.04倍,甜味、咸味、鲜味、酸味等滋味均优于CB,风味特性整体得到改善.除色泽评分外,CSB其他感官评定指标得分均高于CB,整体可接受度达到7.2分.

摘要： 法布里病是由于X染色体上编码α-半乳糖苷酶的基因突变,引起其编码的α-半乳糖苷酶A活性降低或完全丧失,使其代谢产物三己糖神经酰胺及相关鞘糖脂在全身多个器官内大量堆积导致各系统损伤的一种罕见疾病。本文报告1例以蛋白尿为首发症状的法布里病,通过肾脏活组织检查及基因检测以明确诊断,并进一步对法布里病的诊断及治疗进行探讨。

摘要： 为了探究不同盐度对龙须菜生长、琼胶合成及相关基因表达的影响, 研究了15、25和35三种盐度条件下龙须菜的生长速率、琼胶含量、琼胶合成酶α -半乳糖苷酶(GLA)、半乳糖苷转移酶(GAT)、α -1,3-糖脂磺基转移酶(GST)、半乳糖-2,6-硫酸化酶(GAS)的基因表达.结果表明, 盐度25时龙须菜生长速率最高, 为7.17%/d, 高于低盐(15)时的6.27%/d和高盐(35)时的3.57%/d, 低盐和高盐都表现出明显的暗呼吸速率上升和光合速率下降.龙须菜培养15d后, 在低盐条件下琼胶含量为9.27%, 盐度25和高盐分别为6.91%和8.09%.培养第3天时在低盐和高盐下龙须菜中gla基因表达量和酶活都显著高于盐度25的表达量; 15d后在盐度25条件下gla基因表达量仍然最低,但GLA酶活无显著差异.gat基因在低盐条件下先降低后升高,在高盐条件下表达量始终最高,为盐度25的3.03倍.在低盐条件下gst和gas基因都在短期内出现显著下降,但15d后恢复到与正常盐度无显著差异.龙须菜半乳糖含量在高盐条件下相对盐度25显著升高, 达到其3.27倍, 而在低盐条件下各种单糖含量相对较低, 半乳糖含量极低.研究结果说明过高和过低盐度都会对龙须菜造成一定程度的胁迫,并促进琼胶的合成, 但其促进琼胶积累的机制存在差异, α -半乳糖苷酶和半乳糖苷转移酶在其中扮演着非常重要的角色.

摘要： 目的：本研究旨在研究不同来源α-半乳糖苷酶对肉鸡的肠道微生物区系和肠道组织形态等指标的影响. 方法：选用864只1日龄AA肉仔鸡随机分为4个处理,每处理设12个重复,每重复18只肉仔鸡,公母各半,各处理组之间起始体重差异均不显著(P＞0.05).试验期共42d,分前期(1-21d)和后期(22-42d)两期进行. 结果：试验结果表明,转α-半乳糖苷酶基因玉米未对肉仔鸡的肠道造成破坏或不良影响,且转基因玉米来源的半乳糖苷酶降低了肉仔鸡肠道大肠杆菌数量(P＜0.05),降低了十二指肠的绒毛长度及隐窝深度(P＜0.05),提高了空肠的绒毛长度,作用与微生物源的α-半乳糖苷酶一致. 结论:转基因玉米源的α-半乳糖苷酶具有和微生物源α-半乳糖苷酶同样的作用,但在相近酶活条件下,转基因玉米来源的半乳糖苷酶的效果优于微生物源.

摘要： 目的：本研究旨在研究不同来源α-半乳糖苷酶对肉鸡的肠道微生物区系和肠道组织形态等指标的影响. 方法：选用864只1日龄AA肉仔鸡随机分为4个处理,每处理设12个重复,每重复18只肉仔鸡,公母各半,各处理组之间起始体重差异均不显著(P＞0.05).试验期共42d,分前期(1-21d)和后期(22-42d)两期进行. 结果：试验结果表明,转α-半乳糖苷酶基因玉米未对肉仔鸡的肠道造成破坏或不良影响,且转基因玉米来源的半乳糖苷酶降低了肉仔鸡肠道大肠杆菌数量(P＜0.05),降低了十二指肠的绒毛长度及隐窝深度(P＜0.05),提高了空肠的绒毛长度,作用与微生物源的α-半乳糖苷酶一致. 结论:转基因玉米源的α-半乳糖苷酶具有和微生物源α-半乳糖苷酶同样的作用,但在相近酶活条件下,转基因玉米来源的半乳糖苷酶的效果优于微生物源.

摘要： 目的：本研究旨在研究不同来源α-半乳糖苷酶对肉鸡的肠道微生物区系和肠道组织形态等指标的影响. 方法：选用864只1日龄AA肉仔鸡随机分为4个处理,每处理设12个重复,每重复18只肉仔鸡,公母各半,各处理组之间起始体重差异均不显著(P＞0.05).试验期共42d,分前期(1-21d)和后期(22-42d)两期进行. 结果：试验结果表明,转α-半乳糖苷酶基因玉米未对肉仔鸡的肠道造成破坏或不良影响,且转基因玉米来源的半乳糖苷酶降低了肉仔鸡肠道大肠杆菌数量(P＜0.05),降低了十二指肠的绒毛长度及隐窝深度(P＜0.05),提高了空肠的绒毛长度,作用与微生物源的α-半乳糖苷酶一致. 结论:转基因玉米源的α-半乳糖苷酶具有和微生物源α-半乳糖苷酶同样的作用,但在相近酶活条件下,转基因玉米来源的半乳糖苷酶的效果优于微生物源.

摘要： 目的：本研究旨在研究不同来源α-半乳糖苷酶对肉鸡的肠道微生物区系和肠道组织形态等指标的影响. 方法：选用864只1日龄AA肉仔鸡随机分为4个处理,每处理设12个重复,每重复18只肉仔鸡,公母各半,各处理组之间起始体重差异均不显著(P＞0.05).试验期共42d,分前期(1-21d)和后期(22-42d)两期进行. 结果：试验结果表明,转α-半乳糖苷酶基因玉米未对肉仔鸡的肠道造成破坏或不良影响,且转基因玉米来源的半乳糖苷酶降低了肉仔鸡肠道大肠杆菌数量(P＜0.05),降低了十二指肠的绒毛长度及隐窝深度(P＜0.05),提高了空肠的绒毛长度,作用与微生物源的α-半乳糖苷酶一致. 结论:转基因玉米源的α-半乳糖苷酶具有和微生物源α-半乳糖苷酶同样的作用,但在相近酶活条件下,转基因玉米来源的半乳糖苷酶的效果优于微生物源.

摘要： α-半乳糖苷酶催化α-半乳糖苷键的水解,可将豆制食品及饲料中的抗营养因子α-半乳糖苷类转化分解,改善营养成分使其易于消化吸收.近年,α-半乳糖苷酶的固定化更是成为研究的热点方向.作为固定化酶技术的重要组成部分,载体及固定化方法的选取在很大程度上直接影响着固定化酶的活性及稳定性.本文综述了近些年国内外有关α-半乳糖苷酶固定化方法、固定化载体材料的研究现状和发展趋势,以期对固定化α-半乳糖苷酶的酶活性及稳定性提高提供参考.

摘要： α-半乳糖苷酶催化α-半乳糖苷键的水解,可将豆制食品及饲料中的抗营养因子α-半乳糖苷类转化分解,改善营养成分使其易于消化吸收.近年,α-半乳糖苷酶的固定化更是成为研究的热点方向.作为固定化酶技术的重要组成部分,载体及固定化方法的选取在很大程度上直接影响着固定化酶的活性及稳定性.本文综述了近些年国内外有关α-半乳糖苷酶固定化方法、固定化载体材料的研究现状和发展趋势,以期对固定化α-半乳糖苷酶的酶活性及稳定性提高提供参考.

摘要： α-半乳糖苷酶催化α-半乳糖苷键的水解,可将豆制食品及饲料中的抗营养因子α-半乳糖苷类转化分解,改善营养成分使其易于消化吸收.近年,α-半乳糖苷酶的固定化更是成为研究的热点方向.作为固定化酶技术的重要组成部分,载体及固定化方法的选取在很大程度上直接影响着固定化酶的活性及稳定性.本文综述了近些年国内外有关α-半乳糖苷酶固定化方法、固定化载体材料的研究现状和发展趋势,以期对固定化α-半乳糖苷酶的酶活性及稳定性提高提供参考.

摘要： α-半乳糖苷酶催化α-半乳糖苷键的水解,可将豆制食品及饲料中的抗营养因子α-半乳糖苷类转化分解,改善营养成分使其易于消化吸收.近年,α-半乳糖苷酶的固定化更是成为研究的热点方向.作为固定化酶技术的重要组成部分,载体及固定化方法的选取在很大程度上直接影响着固定化酶的活性及稳定性.本文综述了近些年国内外有关α-半乳糖苷酶固定化方法、固定化载体材料的研究现状和发展趋势,以期对固定化α-半乳糖苷酶的酶活性及稳定性提高提供参考.

摘要： α-半乳糖苷酶催化α-半乳糖苷键的水解,可将豆制食品及饲料中的抗营养因子α-半乳糖苷类转化分解,改善营养成分使其易于消化吸收.近年,α-半乳糖苷酶的固定化更是成为研究的热点方向.作为固定化酶技术的重要组成部分,载体及固定化方法的选取在很大程度上直接影响着固定化酶的活性及稳定性.本文综述了近些年国内外有关α-半乳糖苷酶固定化方法、固定化载体材料的研究现状和发展趋势,以期对固定化α-半乳糖苷酶的酶活性及稳定性提高提供参考.

摘要： 通过离子交换层析,凝胶过滤层析,从云芝子实体中纯化出电泳纯的α-半乳糖苷酶(α-Gal),SDS-PAGE和分子筛的结果显示此酶的分子量为70 kDa,且为单亚基蛋白.纯化倍数为332,比活达到561 U/mg.酶学性质测定显示此酶的最适pH为3.0,且在酸性条件下活性稳定,最适反应温度为60°C,在50°C下热稳定性强.当以豆饼粉为诱导物时,可以从云芝发酵液中诱导出高活性的α-半乳糖苷酶,且最适培养时间为8天.α-半乳糖苷酶与瓜尔豆胶作用,可以有效的降解此多糖复合物,使还原糖的含量增加,而且发酵液中的α-半乳糖苷酶降解能力远远高于提纯的α-半乳糖苷酶.因此可以将云芝发酵液作为酶制剂,添加到饲料中,可以降解饲料中的α-半乳糖苷等抗营养因子,提高饲料的利用率.

摘要： 本发明公开了一种产转糖基活性β‑半乳糖苷酶的菌株，其特征在于：其分类命名为开菲尔乳杆菌(Lactobacillus kefiri)L6，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO:M 20191030，保藏日期为2019年12月9日。

摘要： 本发明提供一株耐有机溶剂高效转糖基β‑半乳糖苷酶高产菌株，β‑半乳糖苷酶，其编码核酸，包含该核酸的表达载体以及含有该核酸或表达载体的转化体。本发明还提供所述耐有机溶剂β‑半乳糖苷酶作为催化剂，以廉价易得的乳糖为供体，在非水相体系中修饰核苷类药物的应用。该酶优良的催化活性很好地克服了目前核苷糖基化反应中糖基供体价格昂贵等问题，具有潜在的工业应用价值。

摘要： 本发明公开一种耐有机溶剂半乳糖苷酶高产菌株，一种半乳糖苷酶以及一种以乳糖为供体酶法半乳糖基化核苷类化合物的方法。该菌株分类命名为

摘要： 本发明公开了一种产生低温β-半乳糖苷酶的短芽孢杆菌(Brevibacillus sp.)和利用此菌株生产低温β-半乳糖苷酶的生产工艺，同时还提供了低温β-半乳糖苷酶。通过利用短芽孢杆菌(CGMCC.No.1424)，建立菌种保藏、复壮及选育的系统工艺技术，经过培养基配方优化筛选及发酵工艺条件优化控制，使发酵周期缩短，确立了稳定的发酵工艺，生产的低温β-半乳糖苷酶具有良好的低温活性、高酶活。可广泛用于发酵乳、饮料、冰激凌糖等食品医药、环境检测等各个领域，有效改善乳制品的风味和营养，解除乳糖不耐受患者因食用乳制品引起的腹泻、腹涨等多种不良反应，能最大限度地保留其营养及风味物质方面具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种产生β-半乳糖苷酶的乳球菌(Lacfococcussp.)和利用此菌株生产β-半乳糖苷酶的生产工艺，本发明还同时提供了β-半乳糖苷酶。本发明利用乳球菌(CGMCC.No.1425)，建立菌种保藏、复壮及选育的工艺技术，通过培养基配方优化筛选及发酵工艺条件优化控制，使发酵周期缩短，确立了稳定的发酵工艺，本发明的β-半乳糖苷酶具有良好的高温活性、高酶活。其产品广泛用于发酵乳、饮料、冰激凌糖等食品医药、环境检测等各个领域，解除乳糖不耐受患者因食用乳制品引起的腹泻、腹涨等多种不良反应，能最大限度地保留其营养及风味物质方面具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种产转糖基活性β‑半乳糖苷酶的菌株，其特征在于：其分类命名为开菲尔乳杆菌(Lactobacillus kefiri)L6，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO:M 20191030，保藏日期为2019年12月9日。

摘要： 本发明公开一种耐有机溶剂半乳糖苷酶高产菌株，一种半乳糖苷酶以及一种以乳糖为供体酶法半乳糖基化核苷类化合物的方法。该菌株分类命名为Lactobacillus casei YZ09，其保藏编号为：CCTCC NO：M 2014540。本发明分离克隆到该菌株所产耐有机溶剂半乳糖苷酶的基因，它具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。菌株YZ09所产半乳糖苷酶具有溶剂耐受性好、作用pH范围广、底物特异性好等性质。该半乳糖苷酶能廉价易得的乳糖为供体在非水相体系中修饰核苷类药物，具有很好的工业应用价值。

摘要： 本发明提供一株耐有机溶剂高效转糖基β-半乳糖苷酶高产菌株，β-半乳糖苷酶，其编码核酸，包含该核酸的表达载体以及含有该核酸或表达载体的转化体。本发明还提供所述耐有机溶剂β-半乳糖苷酶作为催化剂，以廉价易得的乳糖为供体，在非水相体系中修饰核苷类药物的应用。该酶优良的催化活性很好地克服了目前核苷糖基化反应中糖基供体价格昂贵等问题，具有潜在的工业应用价值。

摘要： 本发明公开了一种产生低温β－半乳糖苷酶的短芽孢杆菌(Brevibacillus sp.)和利用此菌株生产低温β－半乳糖苷酶的生产工艺，同时还提供了低温β－半乳糖苷酶。通过利用短芽孢杆菌(CGMCC.No.1424)，建立菌种保藏、复壮及选育的系统工艺技术，经过培养基配方优化筛选及发酵工艺条件优化控制，使发酵周期缩短，确立了稳定的发酵工艺，生产的低温β－半乳糖苷酶具有良好的低温活性、高酶活。可广泛用于发酵乳、饮料、冰激凌糖等食品医药、环境检测等各个领域，有效改善乳制品的风味和营养，解除乳糖不耐受患者因食用乳制品引起的腹泻、腹胀等多种不良反应，能最大限度地保留其营养及风味物质方面具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种产生β－半乳糖苷酶的乳球菌(Lacfococcus sp.)和利用此菌株生产β－半乳糖苷酶的生产工艺，本发明还同时提供了β－半乳糖苷酶。本发明利用乳球菌(CGMCC.No.1425)，建立菌种保藏、复壮及选育的工艺技术，通过培养基配方优化筛选及发酵工艺条件优化控制，使发酵周期缩短，确立了稳定的发酵工艺，本发明的β－半乳糖苷酶具有良好的高温活性、高酶活。其产品广泛用于发酵乳、饮料、冰激凌糖等食品医药、环境检测等各个领域，解除乳糖不耐受患者因食用乳制品引起的腹泻、腹胀等多种不良反应，能最大限度地保留其营养及风味物质方面具有重要意义。