大鼠血浆

摘要： 建立了超高效液相色谱-电喷雾串联质谱(UPLC-ESI MS/MS)法测定大鼠血浆中的重组降血压肽VLPVPR的方法.大鼠血浆样品经甲醇沉淀蛋白处理后,经Thermo Hypersil GOLD C18柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm)分离,流动相为10 mmol·L乙酸铵水溶液-乙腈.梯度洗脱流程为:0~4 min乙腈(vol%)10%~90%;4~4.5 min乙腈90%~10%,4.5~6.5 min乙腈保持10%,流速:0.2 mL·min^(-1).质谱条件采用ESI离子源,检测方式为正离子电离,选择性离子检测(MRM).VLPVPR和内标VLPVPR-R位C,N双标的选择性检测离子分别为m/z 680.4→255.2和m/z 690.6→264.2.VLPVPR浓度在0.1~100 ng·mL^(-1)范围内线性良好;定量下限为0.1 ng·mL^(-1);日内、日间RSD均小于15%;低、中、高3个浓度下的提取回收率分别为(101±7.4)%;(99±4.2)%;(100±3.3)%.该方法专属性强,灵敏度高,血浆中内源物对测定无干扰,适用于复杂生物基质中VLPVPR的检测,可用于VLPVPR药代动力学方面的研究.

摘要： 建立大鼠血浆中杨芽黄素的高效液相色谱串联质谱定量分析方法,考察大鼠灌胃给药后,杨芽黄素在其体内的药动学特征。血浆样品经乙腈试剂沉淀蛋白后,取上清液5μL进样分析。珊瑚菜内酯作为内标物质,采用高效液相色谱串联质谱分析方法,检测大鼠血浆中杨芽黄素的浓度。选择色谱柱为Zorbax Eclipse Plus C_(18)柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(体积比60:40)梯度洗脱;采用电喷雾离子源,在正离子模式下的选择性反应离子监测m/z 268.8→225.9(杨芽黄素)和m/z 300.9→233.0(内标杨芽黄素)。杨芽黄素在0.5~200.0 ng/mL范围内线性关系良好;日间、日内精密度相对标准偏差为3.28%~13.12%,准确度相对误差-6.38%~7.60%;基质效应为98.43%~103.57%;提取回收率为93.36%~96.31%。经方法学完整验证,该分析方法可用于大鼠血浆中杨芽黄素的测定及其药动学评价研究。

摘要： 目的测定厚朴排气合剂主要药效成分厚朴酚、和厚朴酚在不同种属动物血浆中的蛋白结合率并比较种属差异。方法采用平衡透析法,将牛、兔、大鼠血浆(即透析内液)置于4.5、9.0、13.5μg/mL(按厚朴排气合剂饮片质量计)的含药透析液中平衡透析24 h;采用超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱技术检测透析内、外液中厚朴酚、和厚朴酚的质量浓度,计算血浆蛋白结合率并进行比较。结果在4.5、9.0、13.5μg/mL质量浓度下,厚朴酚在牛血浆中的蛋白结合率分别为(68.13±4.52)%、(74.34±1.12)%、(86.22±0.50)%,在兔血浆中的蛋白结合率分别为(59.55±4.62)%、(72.81±4.56)%、(86.40±1.91)%,在大鼠血浆中的蛋白结合率分别为(56.63±2.87)%、(77.81±1.83)%、(83.18±0.65)%;和厚朴酚在牛血浆中的蛋白结合率分别为(34.82±1.67)%、(40.29±3.28)%、(63.57±0.59)%,在兔血浆中的蛋白结合率分别为(34.25±5.62)%、(62.12±7.36)%、(80.86±4.01)%,在大鼠血浆中的蛋白结合率分别为(37.06±3.28)%、(52.61±1.69)%、(79.83±7.38)%,组间比较差异大多具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论厚朴排气合剂主要药效成分厚朴酚、和厚朴酚的血浆蛋白结合率存在明显的种属差异,且有一定的浓度依赖趋势。

摘要： 建立了以超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UHPLC-QQQ-MS)同时检测大鼠血浆中20(S)-人参皂苷Rg3(20(S)-ginsenoside Rg3,G-Rg3)及其主要代谢产物20(S)-人参皂苷Rh2(20(S)-ginsenoside Rh2,G-Rh2)含量的快速分析方法,用于分析中波紫外线(UVB)辐射致抑郁模型大鼠口服G-Rg3后的药代动力学行为.选择Ascentis?Express C18色谱柱(5 mm×3 mm,2.7μm),以0.1％甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,进样量为5μL,电喷雾离子源(ESI)在负离子模式下,对G-Rg3和G-Rh2进行定性与定量分析.定量分析选择多反应监测(MRM)模式进行扫描,以人参皂苷Rb1(20(S)-ginsenoside Rb1,G-Rb1)为内标(Internal standard,IS),离子对分别为m/z 783.5/621.4、621.4/459.4和1107.6/954.5.本方法的精密度、日内及日间准确率均满足药代动力学分析要求,10 min内即可完成全部分析.G-Rg3与G-Rh2分别在2.0～2500 ng/mL和2.0～2500 ng/mL范围内线性关系良好(R2>0.9907),G-Rg3经灌胃给药后在两组大鼠体内代谢过程皆符合二室模型特征,正常组和模型组t1/2α分别为(0.35±0.116)h和(1.954±0.609)h,t1/2β分别为(66.103±6.425)h和(52.496±33.639)h,AUC(0-t)分别为(346.75±14.11)μg/(L·h)和(551.374±117.557)μg/(L·h),AUC(0-∞)分别为(497.66±39.672)g/(L·h)和(694.523±213.077)g/(L·h).两组之间的药代动力学参数具有显著差异(p<0.01),推断UVB辐射导致的抑郁作用可改变大鼠的机体内环境,影响G-Rg3的吸收与代谢.本方法简便、快速、选择性好、灵敏度高,适用于UVB辐射致抑郁模型大鼠的G-Rg3及其代谢产物G-Rh2的药代动力学研究.

摘要： [目的]建立一种LC-MS/MS测定大鼠血浆中EGCG浓度的方法,进而研究其药动学.[方法]选用Agilent SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-水(90:10)为流动相,等度洗脱,ESI离子源,多反应离子监测,负离子扫描;以香草醛为内标,采用内标法定量.[结果]EGCG和内标不受基质干扰;定量限分别为10 ng/mL(EGCG)和5 ng/mL(香草醛),血浆样品批内和批间精密度(RSD)≤11.5％,准确度在92.0％～118.9％,萃取回收率≥92.7％,基质效应为95.3％～115.3％,大鼠腹腔注射20 mg/kg EGCG后的血浆动力学符合二室模型,消除半衰期较长,表观分布容积(Vd)大于总体水体积.[结论]该方法重现性好、分析时间短,能满足EGCG在大鼠血浆中浓度的检测要求,并符合《中国药典》2015年版对生物样品分析的要求,可用于大鼠血浆中EGCG的浓度测定和药代动力学研究.

摘要： 目的:虽然我国居民膳食中某些微量营养素摄入不足影响少年儿童体格发育的问题已经得到预防医学界的普遍认可和重视，但是，如何准确、灵敏的评价机体的骨骼发育状况，仍然需要建立一些简便、灵敏的生化指标。骨碱性磷酸酶(Bone alkaline phosphatase，简称BALP)是成骨细胞分泌的酶，它能及时反映骨细胞活性及骨骼钙化过程。本实验旨在建立一种简便灵敏准确的方法，对大鼠血浆中骨特异性碱性磷酸酶(Bone alkaline plaosphatase，BALP)的活性进行测定。rn 方法:采用聚丙烯酰胺凝胶(PA)电泳法检测BALP活性。以纯化的BALP作为标准品，进行回收率测定和精密度检验。rn 结果:此方法测定大鼠血浆中BALP可得到准确的结果：(1)以标准BALP加入量对实际测定光密度值作图，可见有良好的直线关系(r=0.9986，P＜0.05)。(2)标准回收率范围为93.8％～100.34％。(3)对同一样品进行10次测定，其变异系数为4.4％。(4)实际样品测定中缺锌组BALP显著低于对喂组和对照组，而缺锌组与对照组和对喂组的总ALP也有差别。rn 结论:本研究建立一种电泳方法检测大鼠血浆中的BALP，实验证实该方法操作简便，具有良好的准确性和精密度。

摘要： 本文建立了快速灵敏的高效液相色谱-紫外检测法,用于测定大鼠血浆中的羟基红花黄色素A.方法以芦丁为内标,血浆样品在C反相色谱柱上进行分离.该方法通过了符合国际标准的方法确证,并成功的应用于羟基红花黄色素A在大鼠血浆中的药物动力学研究.

摘要： 本实用新型提供一种大鼠血液中血浆和血清分离器。所述大鼠血液中血浆和血清分离器包括工作桌、血浆分离组件以及放置组件，所述工作桌上表面设有血浆分离组件以及放置组件，血浆分离组件由电机、底座、夹持板以及翻板组成，电机通过固定螺栓与工作桌可拆卸式连接，底座设置于电机输出轴处，且底座与电机输出轴固定连接，夹持板为两组，两组夹持板相对设置，且两组夹持板分别设置于底座内部，翻板设置于底座上表面，且翻板与底座转动连接。本实用新型通过对此装置增设了血浆分离组件，简化了提取血浆的步骤，且造价得到了改善，工作人员可以快速的对血液进行加工，一定程度上节省了工作人员的工作时间。

摘要： 本发明提供一种大鼠血浆中芦荟苦素的LC‑MS/MS测定方法，包括以下步骤：(1)血浆的样品处理：取含芦荟苦素的待测血浆，加入含内标芦荟新苷D的甲醇溶液涡旋沉淀，离心，取上清液为待检测样品；(2)设定液相色谱条件为：采用流动相A和流动相B进行梯度洗脱，流动相A为含0.1～1.0‰(v/v)甲酸水溶液，流动相B为甲醇；(3)设定质谱条件为：电喷雾离子源，负离子检测，喷雾电压4500V，喷雾温度为550°C，采用多反应离子监测扫描模式，用于芦荟苦素定量分析的离子对为m/z 393.1→272.9,内标化合物芦荟新苷D离子对m/z为555.3→144.9。本发明方法可更加快速、灵敏、准确地检测血浆中芦荟苦素。

摘要： 本发明提供一种大鼠血浆中麝香通心滴丸蟾蜍二烯内酯成分的检测方法及其用途，具体采用超高效液相色谱‑串联质谱(UPLC‑MS/MS)对大鼠血浆中沙蟾毒精、远华蟾毒精、去乙酰华蟾毒精、蟾毒灵和酯蟾毒配基进行定性和定量检测，具体步骤为灌胃麝香通心滴丸大鼠血浆加内标物，经甲醇蛋白沉淀；通过UPLC‑MS/MS进行检测。其中蟾毒灵检出限为1.00ng/mL，定量限为3.00ng/mL；沙蟾毒精、远华蟾毒精和酯蟾毒配基检出限为2.00ng/mL，定量限为6.00ng/mL；去乙酰华蟾毒精检出限为3.00ng/mL，定量限为9.00ng/mL。本方法可在15min完成检测，通过MRM色谱图的保留时间、峰面积比值，结合标准曲线完成定量计算，操作更便捷，减少了血浆中内源性物质干扰，可用于麝香通心滴丸的药代动力学研究。

摘要： 本发明公开了一种同时检测大鼠血浆中四种吲哚类物质的高效液相色谱方法，属于检测技术领域，包括以下步骤：(1)标准品溶液的配制；(2)液液萃取处理样本；(3)采用高效液相色谱法进行定性定量测定。本发明方法使大鼠血浆中硫酸吲哚酚、吲哚乙酸、吲哚丙酸和吲哚充分提取分离，采用程序检测波长可实现大鼠血浆中含量差异较大的四种吲哚类物质同时定量检测，具有灵敏度高、重现性好、分析时间短、样本用量小等优点。

摘要： 本发明公开了一种同时检测大鼠血浆中四种吲哚类物质的高效液相色谱方法，属于检测技术领域，包括以下步骤：(1)标准品溶液的配制；(2)液液萃取处理样本；(3)采用高效液相色谱法进行定性定量测定。本发明方法使大鼠血浆中硫酸吲哚酚、吲哚乙酸、吲哚丙酸和吲哚充分提取分离，采用程序检测波长可实现大鼠血浆中含量差异较大的四种吲哚类物质同时定量检测，具有灵敏度高、重现性好、分析时间短、样本用量小等优点。

摘要： 本发明公开了一种同时定量大鼠血浆中丹七通脉片15种人参皂苷类成分的分析方法。本发明以含0.1％甲酸的水溶液‑含0.1％甲酸的乙腈溶液为流动相，使用BEH C18色谱柱进行目标化合物分离，采用电喷雾电离三重四级杆质谱在scheduled MRM模式下进行含量测定。15种人参皂苷类成分的线性范围为2‑2000ng/mL，该方法灵敏度高，专属性强，重现性好，实现了对大鼠血浆中15种人参皂苷类成分的同时定量分析。

摘要： 本方法不同于以往的其它方法，在相关报道的基础上，建立了液液萃取法测定大鼠血浆吡非尼酮检测的高效液相色谱方法，研究吡非尼酮的药代动力学。血浆经乙酸乙酯，采用ZORBAX SB‑C18色谱柱；流动相为乙腈‑水‑0.1％TFA(三氟乙酸)，流速为1.0mL·min‑1；检测波长为318nm(0～8min)、246nm(8～10min)。6只雄性大鼠单剂量灌胃给予15mg·kg‑1吡非尼酮，分别在给药后多点尾静脉采血。灌胃后，血浆吡非尼酮在0.39h达到1.69mg·L‑1的峰值浓度，血浆半衰期为2.21h。用DAS(数据采集系统)计算药代动力学参数。吡非尼酮在大鼠体内符合一级吸收的二室模型。用该方法检测血浆中吡非尼酮的浓度，准确可靠、简便快速，适用于大鼠血浆吡非尼酮浓度的测定及其药代动力学研究。

摘要： 本发明提供一种HPLC‑MS‑MS法测定SD大鼠血浆中咪喹莫特成分含量的方法，包括以下步骤：分别向校正标示样品、质控样品、内标样品以及待测SD大鼠样品中加入10.0ng/mL咪喹莫特‑D9内标工作液稀释20倍，分别离心取上清液，然后再分别将上清液用超纯水溶液稀释2倍即可进样分析。分别向空白基质和溶剂样中加入空白基质和超纯水，再分别用乙腈稀释20倍，分别离心取上清液，然后再分别将上清液用超纯水溶液稀释2倍即可进样分析。将上述处理后的各个样品分别注入液相色谱质谱联用仪中，对咪喹莫特以及咪喹莫特‑D9成分进行定量检测。本发明对样品分析简单便捷，检出限低、灵敏度高、重复性和回收率好。

摘要： 本发明提供一种HPLC‑MS‑MS法测定SD大鼠血浆中北五加皮苷N成分含量的方法，包括以下步骤：分别向校正标示样品、质控样品、内标样品以及待测SD大鼠样品中加入10.0ng/mL甲苯磺丁脲内标工作液稀释20倍，分别离心取上清液，然后再分别将上清液用超纯水溶液稀释2倍即可进样分析。分别向空白基质和溶剂样中加入空白基质和超纯水，再分别用乙腈稀释20倍，分别离心取上清液，然后再分别将上清液用超纯水溶液稀释2倍即可进样分析。将上述处理后的各个样品分别注入液相色谱质谱联用仪中，对北五加皮苷N以及甲苯磺丁脲成分进行定量检测。本发明对样品分析简单便捷，检出限低、灵敏度高、重复性和回收率好。

摘要： 本发明公开了一种SD大鼠血浆中北五加皮苷M含量的测定方法，包括以下步骤：配制北五加皮苷M梯度浓度为10.0～10000ng/mL的校正标示工作液。采用空白基质将各浓度的校正标示工作液稀释20倍，得到校正标示样品，所述空白基质为不含北五加皮苷M的SD大鼠血浆。采用10.0ng/mL甲苯磺丁脲内标工作液将各浓度的校正标示样品稀释20倍，离心取上清液，用超纯水稀释2倍，采用LC‑MS/MS进样分析，得到北五加皮苷M的线性回归方程。采用10.0ng/mL甲苯磺丁脲内标工作液将待测SD大鼠血浆稀释20倍，离心取上清液，用超纯水稀释2倍，采用LC‑MS/MS进样分析，根据北五加皮苷M的线性回归方程得到北五加皮苷M的含量。本发明测定方法对样品分析简单便捷，检出限低、灵敏度高、重复性和回收率好。