SiHa细胞

摘要： 目的:分析宫颈癌组织诱捕受体3(DcR3)的表达与高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)感染的相关性。方法:回顾性分析贵航安顺医院2018年12月至2020年12月收治的80例HR-HPV感染患者(包括宫颈上皮内瘤变患者38例,宫颈癌患者42例)的临床资料。将38例宫颈上皮内瘤变患者作为宫颈上皮内瘤变组,将42例宫颈癌患者作为宫颈癌组。选择同期在该院接受体检的36例健康体检者作为正常宫颈组织组。应用免疫组织化学法(SP法)与第2代杂交捕获法检测宫颈组织中DcR3的表达,设计并合成靶向HR-HPV 16 E7的siRNA,将含有靶向HR-HPV 16 E7 siRNA的宫颈组织样本作为实验组,将未含有靶向HR-HPV 16 E7 siRNA的宫颈组织样本作为对照组,并设置空白组。采用脂质体法转染SiHa细胞,应用WB法检测HR-HPV 16 E7基因沉默对DcR3 mRNA和蛋白表达的影响,应用MTT法检测siHa细胞的增殖情况。结果:(1)与正常宫颈组织组体检者相比,宫颈上皮内瘤变组患者宫颈组织DcR3蛋白表达的阳性率、HR-HPV 16/18感染的阳性率均更高,差异有统计学意义(P<0.05)。与宫颈上皮内瘤变组患者相比,宫颈癌组患者宫颈组织DcR3蛋白表达的阳性率、HR-HPV 16/18感染的阳性率均更高,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)宫颈癌组患者中HR-HPV 16/18感染阳性患者宫颈组织DcR3蛋白表达的阳性率显著高于HR-HPV 16/18感染阴性的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)实验组样本HR-HPV 16 E7 mRNA的表达量、DcR3 mRNA的表达量、DcR3蛋白的表达量均低于空白组样本和对照组样本,差异有统计学意义(P<0.05)。在转染48 h后,实验组样本中siHa细胞的存活率低于空白组样本和对照组样本,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:宫颈癌组织DcR3的高表达与HRHPV感染率的增加有关,HR-HPV感染率越高,宫颈癌组织DcR3的表达水平就越高。靶向HR-HPV 16 E7的siRNA具有抑制DcR3转录与表达的作用,同时还能够抑制siHa细胞的增殖和癌变。

摘要： 目的 探究蛇葡萄素(ampelopsin,AMP)对人宫颈癌SiHa细胞增殖、周期、凋亡的影响及其可能的作用机制.方法 MTT法检测不同浓度(10、20、40、80、160、320μmol·L-1)和不同干预时间(24、48、72 h)的AMP对SiHa细胞增殖抑制作用;Hoechst 33258法、Annexin-FITC/PI法检测AMP对SiHa细胞凋亡的影响;流式细胞术检测细胞周期变化;Rh-123法检测线粒体膜电位的变化;Western blot检测AMP对SiHa细胞中Bcl-2、Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达的影响.结果 AMP对SiHa细胞抑制率呈浓度和时间依赖性(P<0.05),最低IC50值为40.33μmol·L-1;随着AMP浓度的增加或作用时间的延长,细胞凋亡率逐渐增加(P<0.05);当AMP浓度为80μmol·L-1时,细胞周期阻滞在G2/M期,呈一定的时间依赖性;线粒体膜电位随AMP浓度上升而下降;Bax/Bcl-2和Cleaved-caspase-3表达水平均上调,呈浓度和时间依赖性(P<0.05).结论 AMP明显抑制SiHa细胞的增殖,阻滞细胞周期于G2/M期,可能通过线粒体途径诱导SiHa细胞凋亡.

摘要： 目的 探讨喜树碱对宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制.方法 取对数生长期的SiHa细胞,分别设置对照组(常规培养组)和不同浓度喜树碱(CPT)处理组.不同浓度喜树碱处理组在常规培养基中分别加入1,5,10,50μmol/L的喜树碱处理24 h.采用MTT法检测细胞增殖的影响.荧光显微镜观察经DAPI染色后细胞核形态学的变化.采用流式细胞术检测细胞的凋亡率.RT-RCR检测凋亡相关基因的表达水平.结果 MTT结果显示,与对照组相比,CPT组细胞增殖率降低(P<0.01),且各浓度组之间的差异有统计学意义(均P<0.05),呈现一定的剂量依赖性.形态学结果显示,喜树碱作用于SiHa细胞后,细胞数减少,细胞核开始固缩、出现浓染,呈现典型的凋亡核形态.流式细胞术结果显示,与对照组相比,CPT组细胞凋亡率增高(P<0.01),且各浓度组之间的差异均有统计学意义(均P<0.01),呈现一定的剂量依赖性.RT-PCR结果显示,与对照组相比,CPT组SiHa细胞的Bax基因表达增加(P<0.05),Bcl-2基因表达降低(P<0.05),且各浓度组之间的差异有统计学意义(均P<0.05),呈现一定的剂量依赖性.结论 喜树碱可以通过诱导细胞凋亡来抑制宫颈癌SiHa细胞的生长,其机制可能是通过线粒体通路作用.

摘要： 目的:探究脂肪抑制素对宫颈癌细胞增殖、克隆形成能力、侵袭及迁移能力以及细胞周期、细胞凋亡的影响.方法:选取宫颈癌细胞系SiHa,利用不同浓度脂肪抑制素进行培养.通过MTT实验、平板克隆形成实验、Transwell实验及流式细胞术检测实验分别检测脂肪抑制素对宫颈癌细胞增殖、克隆形成能力、侵袭/迁移能力以及细胞周期/细胞凋亡的影响,探究脂肪抑制素对宫颈癌细胞的抗肿瘤作用.结果:MTT实验显示,脂肪抑制素对SiHa细胞的增殖/生长具有明显抑制作用,存在时间和剂量依赖性(P<0.05);根据细胞增殖率得出72 h时SiHa细胞的IC50为16.98μmol/L.平板克隆形成实验显示,脂肪抑制素明显降低了SiHa细胞的克隆形成能力,具有剂量依赖性(P<0.01).Transwell实验显示,脂肪抑制素也明显降低SiHa细胞侵袭/迁移能力,具有剂量依赖性(P<0.001).流式细胞术检测实验显示,较高浓度脂肪抑制素可诱导宫颈癌细胞SiHa的细胞周期停滞在G2/M期,促进其细胞凋亡(P<0.05).结论:脂肪抑制素对宫颈癌细胞具有明显抗肿瘤作用,可作为宫颈癌治疗的新药物.

摘要： 目的 考察Tortoside A(TOA)对人宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响及可能机制.方法 以CCK-8法、流式细胞术等检测TOA对人宫颈癌细胞增殖抑制作用、对细胞凋亡水平和细胞周期的影响,Western blot法检测TOA对SiHa细胞凋亡相关蛋白表达的影响.结果 TOA通过作用于Caspase、Bcl-2家族蛋白而诱导细胞发生了凋亡,并使细胞停滞于G1期,降低肿瘤细胞的增殖活性.结论 TOA对SiHa细胞的增殖具有抑制作用,其抑制作用可能与促进细胞凋亡有关.

摘要： 目的 探讨hsa_circ_0005986对人宫颈癌细胞(SiHa细胞)增殖和转移的影响.方法 2021年3月从研域生物技术(上海)有限公司购入人宫颈癌细胞(SiHa细胞)和人正常宫颈上皮细胞(H8细胞)作为研究对象.利用实时荧光定量PCR检测SiHa细胞及人正常宫颈上皮细胞(H8细胞)中hsa_circ_0005986、miR-129-5p和ABCB1的表达量;分别利用CCK-8、细胞侵袭实验和Western blot检测下调hsa_circ_0005986对SiHa细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响.miRanda和双荧光素酶报告基因实验检测hsa_circ_0005986和miR-129-5p之间的关系.下调miR-129-5p表达后,检测SiHa细胞的增殖、侵袭和EMT能力;检测hsa_circ_0005986通过miR-129-5p对SiHa细胞增殖、侵袭和EMT的影响.TargetScan和双荧光素酶报告基因实验检测miR-129-5 p与ABCB1之间的关系.siRNA下调ABCB1表达,分析SiHa细胞增殖、侵袭和EMT能力.结果 与H8细胞相比,SiHa细胞中hsa_circ_0005986和ABCB1表达上调(P<0.01),miR-129-5p表达下调(P<0.01).下调hsa_circ_0005986明显抑制了SiHa细胞增殖、侵袭与EMT;hsa_circ_0005986与miR-129-5p具有靶向关系;上调hsa_circ_0005986通过miR-129-5p促进SiHa细胞增殖、侵袭与EMT.miR-129-5 p靶向ABCB1.下调ABCB1表达抑制了SiHa细胞增殖、侵袭与EMT.结论 过表达hsa_circ_0005986通过miR-129-5p/ABCB1轴促进SiHa细胞增殖、侵袭及EMT.

摘要： 目的 探讨抑制stomatin样蛋白2(SLP-2)对宫颈癌细胞的迁移及侵袭能力的影响.方法 将人宫颈腺癌Hela细胞和鳞癌Siha细胞分别分为siRNA阴性对照组(siRNA-CON)和SLP2-siRNA组.采用western blot检测转染后各组细胞SLP-2蛋白表达水平;Transwell小室试验检测细胞侵袭能力;细胞划痕试验检测细胞迁移能力;western blot检测侵袭相关蛋白Rac1、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9表达水平.采用独立样本t检验进行统计学分析.结果 Western blot检测结果显示,SLP2-siRNA组Hela细胞和Siha细胞中SLP-2蛋白水平均低于siRNA-CON组,差异有统计学意义(P＜0.05).Transwell小室试验结果显示,SLP2-siRNA组Hela细胞和Siha细胞侵袭能力低于siRNA-CON组,差异有统计学意义(P＜0.05).细胞划痕试验结果显示,SLP2-siRNA组Hela细胞和Siha细胞24h和36h迁移能力低于siRNA-CON组,差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot检测结果显示,SLP2-siRNA组Hela细胞和Siha细胞中Rae1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均低于siRNA-CON组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 干扰SLP-2表达后宫颈腺癌Hela细胞和鳞癌Siha细胞的侵袭能力和迁移能力明显下降,提示SLP-2在宫颈癌进展中有着重要作用,可能是潜在的转移预测标志物和治疗靶点.

摘要： 目的 探讨miR?1246水平变化对人宫颈癌SiHa细胞上皮?间质转化(EMT)及其增殖、侵袭和迁移能力的影响.方法 体外向SiHa细胞分别转染miR?1246模拟物(miR?1246?mimics组)及阴性对照(mimics?NC组)、miR?1246抑制物(miR?1246?inhibitor组)及阴性对照(Inhibitor?NC组),以未作处理的SiHa细胞为空白对照组.通过流式细胞术和实时荧光定量PCR(qRT?PCR)检测转染效率.采用Western blotting检测转染后细胞E?钙黏蛋白(E?cadherin)、N?钙黏蛋白(N?cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及Twist?2蛋白的表达水平.通过CCK?8法、流式细胞术、Transwell小室实验和划痕实验检测转染后SiHa细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移能力.结果 流式细胞术结果显示,各组细胞转染效率均在90％以上.qRT?PCR结果显示,与空白对照组和阴性对照组比较,miR?1246?mimics组miR?1246的相对表达量显著增高,而miR?1246?inhibitor组明显降低(P<0.05).Western blotting结果显示,与阴性对照组比较,miR?1246?mimics组E?cadherin蛋白表达水平降低而N?cadherin、Vimentin和Twist?2蛋白表达水平显著增加(P<0.05),而miR?1246?inhibitor组E?cadherin蛋白表达水平增加而N?cadherin、Vi?mentin和Twist?2蛋白表达水平显著降低(P<0.05).与阴性对照组比较,miR?1246?mimics组细胞增殖、侵袭和迁移能力均显著提高(P<0.05),而细胞凋亡率显著降低(P<0.05);与阴性对照组比较,miR?1246?inhibitor组细胞增殖、侵袭和迁移能力均显著降低(P<0.05),而细胞凋亡率显著提高(P<0.05).结论 过表达miR?1246可能通过EMT促进宫颈癌SiHa细胞的增殖、侵袭及迁移并诱导细胞凋亡.

摘要： 目的 探讨秦皮乙素对宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能的分子机制.方法 将SiHa细胞分为对照组、不同剂量秦皮乙素组、si-NC组、si-猫白血病C亚类病毒受体1反义RNA1(FLVCR1)-AS1组、秦皮乙素高剂量+pcDNA组、秦皮乙素高剂量+pcDNA-FLVCR1-AS1组.秦皮乙素低、中、高剂量组分别给予1 mmol/L、2 mmol/L、4 mmol/L的秦皮乙素处理细胞;si-NC组、si-FLVCR1-AS1组分别给予si-NC、si-FLVCR1-AS1转染细胞;秦皮乙素高剂量+pcDNA组、秦皮乙素高剂量+pcDNA-FLVCR1-AS1组分别给予pcDNA、pcDNA-FLVCR1-AS1转染细胞后,再给予4 mmol/L的秦皮乙素处理细胞.采用流式细胞仪检测细胞周期,四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖情况,Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力,蛋白质印迹法检测上皮型钙黏附蛋白(E-cadherin)及神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)表达水平,实时荧光定量PCR检测FLVCR1-AS1 mRNA表达水平.结果 与对照组比较,秦皮乙素中、高剂量组SiHa细胞中G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例、细胞吸光度值降低,迁移和侵袭细胞数减少,E-cadherin蛋白相对表达水平升高,N-cadherin蛋白及FLVCR1-AS1 mRNA相对表达水平降低(均P<0.05).与si-NC组比较,si-FLVCR1-AS1组SiHa细胞中G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例、细胞吸光度值降低,迁移和侵袭细胞数减少,E-cadherin蛋白相对表达水平升高,N-cadherin蛋白相对表达水平降低(均P<0.05).与秦皮乙素高剂量+pcDNA组比较,秦皮乙素高剂量+pcDNA-FLVCR1-AS1组G0/G1期细胞比例降低,S期细胞比例、细胞吸光度值升高,迁移和侵袭细胞数增加,E-cadherin蛋白相对表达水平降低,N-cadherin蛋白相对表达水平升高(均P<0.05).结论 秦皮乙素可能通过下调FLVCR1-AS1基因的表达水平抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖、迁移和侵袭.

摘要： 目的:探讨青藤碱对HPV阳性宫颈癌SiHa细胞增殖和侵袭的影响.方法:体外培养SiHa细胞,在细胞培养液中分别加入0.2、0.4和0.8 mmol/L的青藤碱,阴性对照组细胞未加青藤碱,24和48 h后采用CCK-8法检测细胞活力.细胞培养液加入0.2 mmol/L的青藤碱,24 h后采用免疫荧光法检测Ki67阳性细胞数;Transwell实验检测侵袭细胞数;Western blot检测侵袭相关蛋白MMP-2和MMP-9的蛋白表达水平.结果:与阴性对照组相比,0.2、0.4和0.8 mmol/L青藤碱作用SiHa细胞24和48 h后,SiHa细胞的增殖率均明显降低(P<0.01);青藤碱处理组SiHa细胞中Ki67阳性细胞数减少(P<0.01),发生侵袭的SiHa细胞数减少(P<0.05),侵袭相关蛋白MMP-2和MMP-9蛋白的表达均降低(P<0.01).结论:在体外,青藤碱可以抑制体外培养的HPV阳性宫颈癌SiHa细胞的增殖和侵袭.

摘要： 目的:探讨cyclinD1过表达对子宫颈鳞癌SiHa细胞增殖、分化的影响及相关信号分子的变化规律. 方法:设计引物,PCR扩增cyclinD1基因全长,构建cyclinD1-pcDNA3.1质粒转染SiHa细胞,筛选cyclinD1稳定过表达细胞系.采用RT-PCR、Western blot检测转染细胞cyclinD1基因的mRNA和蛋白表达;MTT法绘制细胞生长曲线;RT-PCR、Western blot检测转染细胞Ck7、E-caderhin、vimentin、snail基因的mRNA和蛋白表达;RT-PCR检测增殖分化相关基因CDK4、CDK2、p21、p27、cyclinE、Rb、E2F、E6/E7、ki67基因的mRNA表达水平;对细胞同步化处理,RT-PCR检测细胞周期不同时间点cyclinD1/p21基因的mRNA表达变化. 结果:成功构建cyclinD1稳定过表达细胞株G-3,其mRNA与蛋白表达均明显升高;生长曲线及ki67mRNA升高显示G-3细胞增殖速度加快;G-3细胞中,vimentin、snail基因和蛋白表达明显增加,E-caderhin、Ck7基因和蛋白明显降低,显示转染细胞发生了上皮间质表型转化;cyclinD1过表达后,CDK4、CDK2、p21、p27、cyclinE表达增加,Rb、E2F、E6/E7、p16表达无明显改变;p21与cyclinD1表达趋势基本一致,在细胞周期不同时间点存在波动性,在G1晚期表达量最高; 结论:cyclinD1在HPV16阳性的子宫颈癌SiHa细胞中低表达,基因转染诱导cyclinD1过表达,可促进SiHa细胞增殖和上皮间质表型转化,这一过程中伴随着CDK4、CDK2、p21、p27、cyclinE基因表达的上调;cyclinD1过表达时,p21表达量同步增高,可能通过影响vimentin表达参与了SiHa细胞上皮间质表型转化的调控.

摘要： 目的:探讨cyclinD1过表达对子宫颈鳞癌SiHa细胞增殖、分化的影响及相关信号分子的变化规律. 方法:设计引物,PCR扩增cyclinD1基因全长,构建cyclinD1-pcDNA3.1质粒转染SiHa细胞,筛选cyclinD1稳定过表达细胞系.采用RT-PCR、Western blot检测转染细胞cyclinD1基因的mRNA和蛋白表达;MTT法绘制细胞生长曲线;RT-PCR、Western blot检测转染细胞Ck7、E-caderhin、vimentin、snail基因的mRNA和蛋白表达;RT-PCR检测增殖分化相关基因CDK4、CDK2、p21、p27、cyclinE、Rb、E2F、E6/E7、ki67基因的mRNA表达水平;对细胞同步化处理,RT-PCR检测细胞周期不同时间点cyclinD1/p21基因的mRNA表达变化. 结果:成功构建cyclinD1稳定过表达细胞株G-3,其mRNA与蛋白表达均明显升高;生长曲线及ki67mRNA升高显示G-3细胞增殖速度加快;G-3细胞中,vimentin、snail基因和蛋白表达明显增加,E-caderhin、Ck7基因和蛋白明显降低,显示转染细胞发生了上皮间质表型转化;cyclinD1过表达后,CDK4、CDK2、p21、p27、cyclinE表达增加,Rb、E2F、E6/E7、p16表达无明显改变;p21与cyclinD1表达趋势基本一致,在细胞周期不同时间点存在波动性,在G1晚期表达量最高; 结论:cyclinD1在HPV16阳性的子宫颈癌SiHa细胞中低表达,基因转染诱导cyclinD1过表达,可促进SiHa细胞增殖和上皮间质表型转化,这一过程中伴随着CDK4、CDK2、p21、p27、cyclinE基因表达的上调;cyclinD1过表达时,p21表达量同步增高,可能通过影响vimentin表达参与了SiHa细胞上皮间质表型转化的调控.

摘要： 目的:探讨cyclinD1过表达对子宫颈鳞癌SiHa细胞增殖、分化的影响及相关信号分子的变化规律. 方法:设计引物,PCR扩增cyclinD1基因全长,构建cyclinD1-pcDNA3.1质粒转染SiHa细胞,筛选cyclinD1稳定过表达细胞系.采用RT-PCR、Western blot检测转染细胞cyclinD1基因的mRNA和蛋白表达;MTT法绘制细胞生长曲线;RT-PCR、Western blot检测转染细胞Ck7、E-caderhin、vimentin、snail基因的mRNA和蛋白表达;RT-PCR检测增殖分化相关基因CDK4、CDK2、p21、p27、cyclinE、Rb、E2F、E6/E7、ki67基因的mRNA表达水平;对细胞同步化处理,RT-PCR检测细胞周期不同时间点cyclinD1/p21基因的mRNA表达变化. 结果:成功构建cyclinD1稳定过表达细胞株G-3,其mRNA与蛋白表达均明显升高;生长曲线及ki67mRNA升高显示G-3细胞增殖速度加快;G-3细胞中,vimentin、snail基因和蛋白表达明显增加,E-caderhin、Ck7基因和蛋白明显降低,显示转染细胞发生了上皮间质表型转化;cyclinD1过表达后,CDK4、CDK2、p21、p27、cyclinE表达增加,Rb、E2F、E6/E7、p16表达无明显改变;p21与cyclinD1表达趋势基本一致,在细胞周期不同时间点存在波动性,在G1晚期表达量最高; 结论:cyclinD1在HPV16阳性的子宫颈癌SiHa细胞中低表达,基因转染诱导cyclinD1过表达,可促进SiHa细胞增殖和上皮间质表型转化,这一过程中伴随着CDK4、CDK2、p21、p27、cyclinE基因表达的上调;cyclinD1过表达时,p21表达量同步增高,可能通过影响vimentin表达参与了SiHa细胞上皮间质表型转化的调控.

摘要： 目的:探讨cyclinD1过表达对子宫颈鳞癌SiHa细胞增殖、分化的影响及相关信号分子的变化规律. 方法:设计引物,PCR扩增cyclinD1基因全长,构建cyclinD1-pcDNA3.1质粒转染SiHa细胞,筛选cyclinD1稳定过表达细胞系.采用RT-PCR、Western blot检测转染细胞cyclinD1基因的mRNA和蛋白表达;MTT法绘制细胞生长曲线;RT-PCR、Western blot检测转染细胞Ck7、E-caderhin、vimentin、snail基因的mRNA和蛋白表达;RT-PCR检测增殖分化相关基因CDK4、CDK2、p21、p27、cyclinE、Rb、E2F、E6/E7、ki67基因的mRNA表达水平;对细胞同步化处理,RT-PCR检测细胞周期不同时间点cyclinD1/p21基因的mRNA表达变化. 结果:成功构建cyclinD1稳定过表达细胞株G-3,其mRNA与蛋白表达均明显升高;生长曲线及ki67mRNA升高显示G-3细胞增殖速度加快;G-3细胞中,vimentin、snail基因和蛋白表达明显增加,E-caderhin、Ck7基因和蛋白明显降低,显示转染细胞发生了上皮间质表型转化;cyclinD1过表达后,CDK4、CDK2、p21、p27、cyclinE表达增加,Rb、E2F、E6/E7、p16表达无明显改变;p21与cyclinD1表达趋势基本一致,在细胞周期不同时间点存在波动性,在G1晚期表达量最高; 结论:cyclinD1在HPV16阳性的子宫颈癌SiHa细胞中低表达,基因转染诱导cyclinD1过表达,可促进SiHa细胞增殖和上皮间质表型转化,这一过程中伴随着CDK4、CDK2、p21、p27、cyclinE基因表达的上调;cyclinD1过表达时,p21表达量同步增高,可能通过影响vimentin表达参与了SiHa细胞上皮间质表型转化的调控.

摘要： 目的:探讨丹参酮ⅡA对SiHa细胞增殖及COX-2转录的影响.方法:以SiHa细胞系作为体外模型,MTT法检测丹参酮ⅡA对SiHa细胞增殖的影响.用COX-2启动子质粒和AP-1位点质粒转染SiHa细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测COX-2的转录水平和AP-1的活性.结果:MTT实验结果显示丹参酮ⅡA显著抑制SiHa细胞的增殖(P<0.01).荧光素酶检测结果显示丹参酮ⅡA显著降低SiHa细胞COX-2的转录水平(P<0.01),同时显著抑制AP-1的活性.结论:丹参酮ⅡA可通过抑制转录因子AP-1的活性,进而抑制COX-2的转录,从而抑制SiHa细胞的增殖.

摘要： 目的:探讨丹参酮ⅡA对SiHa细胞增殖及COX-2转录的影响.方法:以SiHa细胞系作为体外模型,MTT法检测丹参酮ⅡA对SiHa细胞增殖的影响.用COX-2启动子质粒和AP-1位点质粒转染SiHa细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测COX-2的转录水平和AP-1的活性.结果:MTT实验结果显示丹参酮ⅡA显著抑制SiHa细胞的增殖(P<0.01).荧光素酶检测结果显示丹参酮ⅡA显著降低SiHa细胞COX-2的转录水平(P<0.01),同时显著抑制AP-1的活性.结论:丹参酮ⅡA可通过抑制转录因子AP-1的活性,进而抑制COX-2的转录,从而抑制SiHa细胞的增殖.

摘要： 目的:探讨丹参酮ⅡA对SiHa细胞增殖及COX-2转录的影响.方法:以SiHa细胞系作为体外模型,MTT法检测丹参酮ⅡA对SiHa细胞增殖的影响.用COX-2启动子质粒和AP-1位点质粒转染SiHa细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测COX-2的转录水平和AP-1的活性.结果:MTT实验结果显示丹参酮ⅡA显著抑制SiHa细胞的增殖(P<0.01).荧光素酶检测结果显示丹参酮ⅡA显著降低SiHa细胞COX-2的转录水平(P<0.01),同时显著抑制AP-1的活性.结论:丹参酮ⅡA可通过抑制转录因子AP-1的活性,进而抑制COX-2的转录,从而抑制SiHa细胞的增殖.

摘要： 目的:探讨丹参酮ⅡA对SiHa细胞增殖及COX-2转录的影响.方法:以SiHa细胞系作为体外模型,MTT法检测丹参酮ⅡA对SiHa细胞增殖的影响.用COX-2启动子质粒和AP-1位点质粒转染SiHa细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测COX-2的转录水平和AP-1的活性.结果:MTT实验结果显示丹参酮ⅡA显著抑制SiHa细胞的增殖(P<0.01).荧光素酶检测结果显示丹参酮ⅡA显著降低SiHa细胞COX-2的转录水平(P<0.01),同时显著抑制AP-1的活性.结论:丹参酮ⅡA可通过抑制转录因子AP-1的活性,进而抑制COX-2的转录,从而抑制SiHa细胞的增殖.

摘要： 目的:探讨丹参酮ⅡA对SiHa细胞增殖及COX-2转录的影响.方法:以SiHa细胞系作为体外模型,MTT法检测丹参酮ⅡA对SiHa细胞增殖的影响.用COX-2启动子质粒和AP-1位点质粒转染SiHa细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测COX-2的转录水平和AP-1的活性.结果:MTT实验结果显示丹参酮ⅡA显著抑制SiHa细胞的增殖(P<0.01).荧光素酶检测结果显示丹参酮ⅡA显著降低SiHa细胞COX-2的转录水平(P<0.01),同时显著抑制AP-1的活性.结论:丹参酮ⅡA可通过抑制转录因子AP-1的活性,进而抑制COX-2的转录,从而抑制SiHa细胞的增殖.

摘要： 目的:探讨丹参酮ⅡA对SiHa细胞增殖及COX-2转录的影响.方法:以SiHa细胞系作为体外模型,MTT法检测丹参酮ⅡA对SiHa细胞增殖的影响.用COX-2启动子质粒和AP-1位点质粒转染SiHa细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测COX-2的转录水平和AP-1的活性.结果:MTT实验结果显示丹参酮ⅡA显著抑制SiHa细胞的增殖(P<0.01).荧光素酶检测结果显示丹参酮ⅡA显著降低SiHa细胞COX-2的转录水平(P<0.01),同时显著抑制AP-1的活性.结论:丹参酮ⅡA可通过抑制转录因子AP-1的活性,进而抑制COX-2的转录,从而抑制SiHa细胞的增殖.

摘要： 本发明公开了一种宫颈癌SiHa细胞系β‑hCG实时监控方法，具体涉及肿瘤细胞监控方法领域，包括以下操作步骤：S1、通过转染pCIneo‑βhCG质粒建立稳定表达βhCG的SiHa细胞系；S2、皮下接种BALB/C小鼠建立肿瘤模型，通过监测尿β‑hCG/肌酐比值监测肿瘤生长情况，以及腹腔顺铂化疗后，尿β‑hCG/肌酐比值对监测其抗肿瘤作用的效果。本发明采用分子生物学手段，发明一种分泌肿瘤标志物——β‑hCG的动物模型，用以体外监控肿瘤大小变化，本发明β‑hCG肿瘤表达体系，可持续、简便的监测动物体内肿瘤生长变化，为宫颈癌研究提供新的动物模型方法。

摘要： 本发明的目的在于，提供能够使T细胞或NK细胞高效地增殖并且维持该细胞的状态(例如未分化性)的T细胞或NK细胞的制造方法、T细胞或NK细胞的培养用培养基、T细胞或NK细胞的培养方法、维持未分化T细胞的未分化状态的方法和T细胞或NK细胞的增殖促进剂。本发明涉及T细胞或NK细胞的制造方法等，其包括如下步骤：在含有式(X‑1)或式(X‑2)所示的双苄基异喹啉生物碱或者其中的1个醚键断裂后的化合物或其药学上可接受的盐的培养基中培养T细胞或NK细胞。

摘要： 提供能保存细胞的组合物。本发明的组合物包含微小气泡。

摘要： 本发明涉及一种红细胞除去装置(100)，具备：血液容器(10)，其容纳血液；以及红细胞除去器(11)，其从血液容器(10)接受血液，并从血液至少部分地除去红细胞。

摘要： 提供一种细胞的培养方法，在细胞培养器内向细胞导入因子，并在与上述细胞培养器相同的细胞培养器内培养导入了上述因子的细胞。另外，提供一种单核细胞的回收方法，其包括：对血液进行处理，制作至少部分地除去了红细胞而得到的处理血液；对处理血液进行稀释；使稀释后的处理血液中所含的单核细胞沉降；除去稀释后的处理血液的上清液；以及回收单核细胞。

摘要： 本申请提供了一种制备NKT细胞刺激性树突细胞的方法，该方法包括：将单个核细胞置于培养容器内并通过保持该培养容器静置而使得所述单个核细胞中的一些沉降于所述容器的底表面上的步骤；将除已沉降于所述培养容器的底表面上的细胞以外的悬浮细胞去除的步骤；通过向所述培养容器内添加预定的因子而使已沉降于所述底表面上的细胞中的单核细胞分化为未成熟树突细胞的步骤；通过向所述培养容器内添加预定的因子而使所述未成熟树突细胞成熟；和通过向所述培养容器内添加α‑半乳糖神经酰胺而将成熟树突细胞诱导为NKT细胞刺激性树突细胞的步骤。

摘要： 含有细胞细胞外基质的制造方法包括：在具有前端开口部的移液管的内部准备含有(i)细胞外基质前体以及(ii)细胞或者细胞团的细胞外基质溶液；排出上述细胞外基质溶液，在上述移液管的前端开口部形成上述细胞外基质溶液的液滴；使上述移液管的前端开口部接近细胞培养容器的培养面，按照使上述移液管的前端开口部不与上述培养面接触的方式将上述液滴载置于上述培养面上；使上述移液管的前端开口部从上述培养面远离，将上述液滴与上述移液管的前端开口部分离；以及使上述细胞外基质溶液凝胶化，形成含有细胞细胞外基质。

摘要： 本发明提供具备适宜的亲水性和强度，细胞接种后的固定性较高，可高效进行细胞增殖的细胞培养用支架材料。本发明的细胞培养用支架材料为含有合成树脂的细胞培养用支架材料，其中，所述合成树脂的氮含量为0.1质量％以上10质量％以下。

摘要： 本发明公开一种以前所未有的效率及功能性从人类iPSC诱导神经祖细胞、寡树突细胞祖细胞、寡树突细胞的新颖方法。本发明的核心是循着多能细胞到外胚层、神经外胚层到NPC到OPC到寡树突细胞路径的多个关键分化决定点处以早先未知的方式使用经实验发现的转录因子。

摘要： 本发明提供了CLCA2蛋白在人宫颈癌siha细胞中表达的检测方法及其应用，涉及分子生物学和药学应用技术领域。本发明采用异紫堇碱为前药物处理剂，结合基因芯片、RT-PCR和Western？Blot等分子生物学技术，实现了宫颈癌Siha细胞中CLCA2表达的定性定量检测，经检测发现，异紫堇碱处理宫颈癌Siha细胞后能诱导CLCA2表达的上调，具有时间与剂量依赖性，且CLCA2蛋白表达上调抑制了HPVE6的表达，进而抑制其功能。本发明的研究方法表明了异紫堇碱能够通过诱导CLCA2蛋白的上调表达对宫颈癌Siha细胞起抑制作用，从而得到CLCA2可成为人宫颈癌诊断的有效分子标记物，进而得到CLCA2在治疗人宫颈癌Silia方面具有重大应用价值。