合成肽疫苗

摘要： 【目的】构建非洲猪瘟病毒CAS19-01/2019株(GenBank登录号:MN172368.1)结构蛋白P72的合成肽疫苗,通过免疫小鼠评估合成肽疫苗的免疫效力。【方法】利用ProtParam、SOPMA等软件分析P72蛋白的理化性质与结构信息,通过ABCpred、SVMtrip、IEDB预测P72蛋白的T细胞与B细胞抗原表位,筛选出显著的表位多肽区域,合成多肽辅以弗氏佐剂腹腔注射免疫小鼠,检测免疫组小鼠产生的特异性抗体、T淋巴细胞亚群、脾脏淋巴细胞增殖、细胞因子白介素4(IL-4)、IL-2、γ干扰素(IFN-γ)、免疫球蛋白(IgG),从体液免疫与细胞免疫角度评估合成肽的免疫效力。【结果】综合分析得出P72蛋白是稳定性亲水蛋白,二级结构中α-螺旋、β-转角、延伸链、无规则卷曲分别占19.35%、5.42%、25.08%和50.15%。筛选出了P72蛋白的8个优势抗原表位,626-634、520-528、298-306、203-211位氨基酸处为T细胞抗原表位,587-606、232-251、110-129、39-58位氨基酸处为B细胞抗原表位。整合优势表位合成2个多肽P72-1与P72-2,首次免疫小鼠14 d时可检测到P72-1与P72-2的特异性抗体,首免后28 d达到最高值,其最高抗体效价分别为1∶25600与1∶12800;免疫后小鼠T淋巴细胞亚群CD4^(+)/CD8^(+)显著上升(P<0.05);脾脏淋巴细胞增殖试验结果显示,免疫组淋巴细胞数量均极显著升高(P<0.01);细胞因子IL-4、IL-2、IFN-γ含量均极显著增加(P<0.01)。【结论】本研究成功研制2种合成肽疫苗,在免疫效力上P72-2高于P72-1,二者都能产生高水平的特异性抗体,刺激脾脏淋巴细胞增殖,诱导产生细胞因子IL-4、IL-2、IFN-γ,本研究为非洲猪瘟合成肽疫苗研制奠定技术基础。

摘要： 为筛选出用于检测免疫接种猪口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗(多肽2700+2800+MM13)A型抗体的ELISA检测试剂盒,本研究用3种不同厂家生产的ELISA检测试剂盒进行检测分析.从某省免疫接种28d后的9个规模化猪场中,每个猪场随机采集10份血样,分离血清,共收集90份血清样品,分别用3种试剂盒进行检测.结果显示,3种试剂盒检测的猪口蹄疫A型抗体合格率分别为93.33％、87.78％、25.56％,试剂盒A与B、试剂盒A与C、试剂盒B与C的符合率分别为94.44％、32.22％、37.78％.结果表明,不同的试剂盒检测的抗体合格率有差异,试剂盒A和B检测的抗体合格率基本一致、符合率较高,能用于猪口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗的A型抗体检测;试剂盒C检测的A型抗体合格率、与试剂盒A和B的符合率均较低,不适用于猪口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗的A型抗体的检测.

摘要： 通过接种小鼠、豚鼠和仔猪,检验3个批次猪口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗的安全性和免疫效力.检验结果表明:3批疫苗对小鼠、豚鼠未见任何局部和全身反应,对仔猪未出现任何口蹄疫症状和因注射疫苗引起的毒性反应.3批疫苗每头份的PD50为13.59～15.59,疫苗攻毒保护效力批次间稳定且高于我国口蹄疫疫苗6 PD50/头份的质量标准.

摘要： 猪圆环病毒2型(PCV2)是目前已知的最小的猪病毒,但其却给养猪场带来巨大的经济损失.目前,防控PCV2的主要措施是免疫接种.2009年我国引进了首个猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗,同时也投入了大量的研究资金自主研发各种疫苗,目前市场上出现了多种类型的猪圆环病毒2型疫苗,包括全病毒灭活苗、基因工程疫苗等.本文着重概括一下我国猪圆环病毒2型疫苗研发及应用现状,提出一些看法与展望,希望对广大疫苗研发及使用单位有所启发.

摘要： 为降低猪口蹄疫O型合成肽疫苗(多肽2600+2700+2800)的黏度,使用新佐剂ISA 61VG和现用佐剂ISA 50V2分别制成相应的猪口蹄疫O型合成肽疫苗(多肽2600+2700+2800),根据现行的口蹄疫疫苗质量标准,对两种疫苗进行检验.结果表明,ISA 61VG佐剂制成的疫苗的外观、剂型、稳定性和黏度均符合产品的质量标准,且黏度结果明显优于ISA 50V2油佐剂,ISA 61VG佐剂可考虑作为口蹄疫合成肽疫苗的新佐剂的选择方向.

摘要： 为了比较GnRH二聚体和GnRH并列二聚体单次和两次免疫对雄性大鼠的免疫去势效果.将上述两种GnRH疫苗,分组免疫SD大鼠,免疫后每两周检测大鼠血清中的GnRH抗体滴度和血清睾酮水平、睾丸重量和组织结构变化.结果显示,两次免疫试验组的抗体滴度显著高于单次免疫试验组的抗体滴度(P ＜0.05);GnRH二聚体抗原免疫效果优于GnRH并列二聚体抗原的免疫效果,且差异极显著(P＜0.01).免疫组大鼠血清睾酮水平及睾丸重量均极显著低于空白对照组(P＜0.01).免疫去势效果显著的大鼠只数统计显示,GnRH二聚体(5/6)和GnRH并列二聚体(4/6)两次免疫均多于单次免疫(4/6和3/6).同时,组织学观察结果可见,免疫组大鼠睾丸组织结构萎缩,曲精小管管径变窄,内部精母细胞脱落,精子变少或者没有.表明GnRH二聚体疫苗与GnRH并列二聚体疫苗均能达到去势效果,前者优于后者,两次免疫优于一次免疫.

摘要： 本文旨在通过试验,进而对猪口蹄疫O型灭活疫苗以及合成肽疫苗的免疫效果以及科学的检测方法形成深入了解,此次试验在某猪场进行.采用了以下方法:将试验猪划分为3组,每组所注射的疫苗,由不同厂家生产.主要采用了猪口蹄疫O型灭活疫苗以及合成肽疫苗.其中,前者又可进一步划分为OZK/93株、OS/99株疫苗,并采用HI、口蹄疫O型液相阻断ELISA抗体检测试剂盒以及猪O型口蹄疫VPI抗体检测试剂盒来检测以上口蹄疫苗免疫效果.得出以下结果:在注射口蹄疫O型合成肽疫苗后,采用猪O型口蹄疫VPI抗体检测试剂盒进行检测,抗体阳性率达到100％;采用HI以及液相阻断ELISA方法之后,未能检测出抗体效价.探究结果表明,在注射免疫猪口蹄疫O型灭活疫苗之后,分别采用VPI抗体检测试剂盒、HI方法以及液相阻断ELISA方法进行检测,所得抗体阳性率相应为40％、75％、70％.

摘要： 为更好地了解猪口蹄疫O型合成肽疫苗与猪口蹄疫O型灭活疫苗的免疫效果与合理的检测方法,浦口区兽医站在某猪场进行了此次试验.试验猪分3组,分别注射不同厂家生产的猪口蹄疫O型合成肽疫苗、和猪口蹄疫O型(OZK/93株+OS/99株)灭活疫苗,并采用猪O型口蹄疫VPI抗体检测试剂盒、口蹄疫O型液相阻断ELISA抗体检测试剂盒和正向间接血凝试验(HI)分别对使用上述口蹄疫苗免疫效果进行检测.结果表明,猪注射口蹄疫O型合成肽疫苗后,用猪O型口蹄疫VPI抗体检测试剂盒检测,抗体阳性率达到100％;用正向间接血凝和液相阻断ELISA方法检测不到注射合成肽疫苗后产生的抗体效价.免疫猪口蹄疫O型(OZK/93株+OS/99株)灭活疫苗后,用VPI抗体检测试剂盒检测,抗体阳性率只有40％;用HI方法进行检测,抗体阳性率为75％:用液相阻断ELISA方法进行检测,抗体阳性率为70％.

摘要： [目的]本文旨在研究Th表位肽和聚肌胞苷酸[Poly(I:C)]2种免疫增强剂对猪O型口蹄疫合成肽抗原细胞免疫和体液免疫的增强作用。[方法]将上述2种免疫增强剂分别与O型口蹄疫病毒(FMDV)合成肽抗原混合乳化,分组免疫Balb/c小鼠,分别在免疫后7、14、21和28 d检测小鼠血清中的VP1抗体、IL-4和IFN-γ水平,以及脾脏中T淋巴细胞转化率及脾脏组织形态变化。[结果]免疫后14 d Th表位肽疫苗组和Poly(I:C)疫苗组血清VP1抗体水平显著高于普通疫苗组(P<0.05),免疫后28 d Th表位肽疫苗组显著高于Poly(I:C)疫苗组和普通疫苗组(P<0.05)。细胞因子检测结果显示:免疫后14、21 d Th表位肽与Poly(I:C)疫苗组IL-4含量显著高于普通疫苗组(P<0.05),免疫后14 d Th表位肽疫苗组IFN-γ含量明显高于其他组(P<0.05),免疫后21 d Th表位肽与Poly(I:C)疫苗组IFN-γ含量显著高于普通疫苗组(P<0.05)。Th表位肽与Poly(I:C)均可使试验小鼠脾脏白髓区增大,着色加深,动脉周围淋巴鞘胀大,Poly(I:C)疫苗组淋巴细胞增殖系数显著高于其他各试验组(P<0.05)。[结论]Th表位肽和Poly(I:C)对猪O型口蹄疫合成肽抗原均有显著免疫增强作用,而Th表位肽可延长体液免疫持续时间。

摘要： 应用猪O型口蹄疫合成肽疫苗、猪O型口蹄疫灭活疫苗两种疫苗分别免疫仔猪,观察疫苗反应情况,经口蹄疫O型液相阻断ELISA和猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白ELISA交叉检测,确定两种疫苗的免疫效果,比较两种实验方法。结果显示猪O型合成肽疫苗免疫转阳率高于猪O型口蹄疫灭活疫苗,口蹄疫O型液相阻断ELISA不适合检测猪O型合成肽疫苗免疫抗体。

摘要： 应用猪O型口蹄疫合成肽疫苗、猪O型口蹄疫灭活疫苗两种疫苗分别免疫仔猪,观察疫苗反应情况,经口蹄疫O型液相阻断ELISA和猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白ELISA交叉检测,确定两种疫苗的免疫效果,比较两种实验方法。结果显示猪O型合成肽疫苗免疫转阳率高于猪O型口蹄疫灭活疫苗,口蹄疫O型液相阻断ELISA不适合检测猪O型合成肽疫苗免疫抗体。

摘要： 应用猪口蹄疲病毒VP1结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验(VP1-ELISA)时7个省市接种猪口蹄疫O型合成肤疫苗的134个规模化猪场的2030份血样进行了检测,以掌握合成肤疫苗免疫后的整体抗体水平.同时使用猪口蹄疫VP1结构蛋白抗体ELISA诊断试剂盒.液向阻断ELISA诊断试剂盒、正向间接血凝诊断试剂对接种猪口蹄疫O型合成肽疫苗、猪口蹄疫O型灭活苗(Ⅱ)的22头猪进行抗体检测,分析抗体消长趋势.抗体检测结果表明,2030份血样中有1831份样品呈阳性,总体阳性率为90.2%;同时对接种不同批号的7批疫苗进行了猪场抽检,总体阳性率较高,母猪的阳性率91.3%.育肥猪阳性率93.2%,由此说明接种猪口蹄疫O型合成肽疫苗的猪群抗体水平和免疫合格率均较高.3种不同的检测方法表明,VP1结构蛋白抗体ELISA诊断试剂盒比较适合用于猪口蹄疫O型合成肤疫苗的抗体检测,不适合传统全病毒灭活疫苗的检测;液向阻断ELISA诊断试剂盒检测结果的规律性差;而正向间接血凝诊断试剂的检测结果尚有一定规律性,至于后两种方法对合成肽疫苗免疫抗体检测的特异性和敏感性如何,还需进一步大量的试验.

摘要： 综合论述近年来我国兽用重组亚单位疫苗、合成肽疫苗、基因缺失疫苗、活载体疫苗等新型疫苗的研究与发展情况.指出，从新技术应用来看，当前基因工程疫苗、合成肽疫苗仅占我国生物制品总量的2.17%，多肽疫苗占18.5%。从整体比重来看，我国新型兽用生物制品在当前市场所占比例较轻。随着行业技术水平的提高，新型兽用生物制品将在不久将来发展成生物制品的主力军，使行业产品质量稳步提升，为动物疫病防控提供更有力的保障。

摘要： 为明确猪口蹄疫O型合成肽疫苗与油乳灭活疫苗联合免疫后抗体水平的动态变化。将91头51日龄四元杂交猪随机分为7组(13头/组)，其中AA、DD及DDD组分别为接种油乳灭活疫苗A及合成肽疫苗D的免疫组，AD、AAD及ADD分别为和油乳灭活疫苗A及合成肽疫苗D的联合免疫组，在首免或二免后4周加强免疫，采用阻断ELISA方法检测首免后2、4、6、8、10及12周(WPI)特异性抗体的阻断率。研究结果表明，在6WPI，DD及DDD组抗体阻断率开始上升，接近或达到峰值，其阻断率分别分别为94.5%(13/13)和97.1%(13/13)，随后DD组抗体水平基本维持稳定，而DDD组抗体水平在10WPI缓慢攀升至峰值，随后下降至65.7%(11/13);AA组在6WPI尽管抗体阻断率也呈上升趋势，且在8WPI达到峰值60.1%(11/13);在10WPI，除AAD抗体阻断率峰值为68.5%(6/13)外，AD及ADD组的抗体阻断率均在8WPI达到或接近峰值，其阻断率分别为72.9%(11/13)和71.8%(13/13)，且此后直至试验结束ADD组抗体水平呈现缓慢攀升的趋势;综上，试验数据提示猪口蹄疫O型合成肽疫苗无论单独使用抑或同油乳灭活疫苗联合使用均较油乳灭活疫苗单独使用显示出良好的免疫效果。

摘要： 为更好地了解猪口蹄疫O型合成肽疫苗与猪口蹄疫O型灭活疫苗的免疫效果与合理的检测方法，在A育肥场进行相关试验，试验随机分为合成肽苗组和灭活苗组，分别接种相应的疫苗，对试验猪的血清采用多种检测试剂进行免疫效果的监测，同时对比不同的检测试剂。试验结果表明：免疫合成肤疫苗，用猪O型口蹄疫VP1抗体检测试剂盒检测，抗体阳性率达到100％，用正向间接血凝试验(IHA)方法检测不到合成肽疫组的抗体。免疫猪口蹄疫0型灭活疫苗后，用VP1抗体检测试剂盒检测阳性率只有30％，用IHA方法检测，阳性率为60％。

摘要： @@1980年以来，已有不少外国学者研制SS合成肽疫苗，用于免疫绵羊和肉牛，获得显著增重效果，但合成肽成本太高，难以在生产上推广应用。为此我们改用更先进的基因工程技术，研制激生系列疫苗获得成功。1985年秋农业部生物工程中心派出以贾士荣、范云六二位研究员牵头的工作组来我校召开一次座谈会。议题是在“七五期间在农口如何开展基因工程研究”。

摘要： 用中牧实业股份有限公司兰州生物药厂生产的5批中试疫苗在辽宁省、浙江省、广东省、甘肃省和河南省挑选的猪场进行区域性试验,包括了东北、华北、华南、华中、西北和西南地区,在国内有较强的区域代表性.经过对断奶仔猪、育肥猪和种母猪及种公猪约23万头份的免疫试验,获得较满意的区域试验结果.

摘要： 生长抑素(somatostatin)对垂体分泌的生长激素(GH)等具有明显的抑制作用,SS免疫动物能刺激产生特异性抗体,中和内源性SS,使与生长和泌乳相关的激素释放增加,从而促进动物生长,在畜牧生产中有巨大的应用前景,在畜牧业生产方面的应用已成为当前研究的热点之一.为了便于大家进一步了解及研究,本文对近年来有关生长抑素的主动和被动免疫,生长抑素基因免疫以及现存的问题等方面作一较为系统的综述.

摘要： 生长抑素(somatostatin)对垂体分泌的生长激素(GH)等具有明显的抑制作用,SS免疫动物能刺激产生特异性抗体,中和内源性SS,使与生长和泌乳相关的激素释放增加,从而促进动物生长,在畜牧生产中有巨大的应用前景,在畜牧业生产方面的应用已成为当前研究的热点之一.为了便于大家进一步了解及研究,本文对近年来有关生长抑素的主动和被动免疫,生长抑素基因免疫以及现存的问题等方面作一较为系统的综述.

摘要： 本发明提供了一种短肽、其作为疫苗佐剂的应用及以所述短肽作为疫苗佐剂的疫苗，所述短肽引入具有抗炎效果的封端基团，并且可以形成水凝胶，所述水凝胶简便地与抗原物理混合后不仅可有效增强抗原免疫应答的能力，并且用于预防性肿瘤疫苗中能完全抑制肿瘤的生长。所述短肽的序列为X‑GDFDFDY，其中X为Fbp或Car。

摘要： 本发明“一种小反刍兽疫疫苗株和野毒株差异性合成肽及其应用”涉及小反刍兽疫病毒多肽合成物领域。所述小反刍Nigeria 75/1疫苗株合成肽，其包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的肽段I。所述小反刍野毒株合成肽，其包括氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的肽段III。本发明提供了两种敏感、特异性好的小反刍H多肽，此多肽可用于鉴别小反刍病毒自然感染动物和疫苗免疫动物血清。本发明多肽主要用于制作鉴别诊断试纸条包被抗原，减少了使用全病毒的危害性，避免病毒扩散。合成肽纯度高，可用于制备特异、敏感、安全、可靠的小反刍兽疫野毒株和疫苗株病毒血清抗体检测试纸条。本发明多肽抗原的优点：分子量小、活性高、抗原稳定，特异性好，制备过程简便、安全可控等优点。

摘要： 本发明提供了一种短肽、其作为疫苗佐剂的应用及以所述短肽作为疫苗佐剂的疫苗，所述短肽引入具有抗炎效果的封端基团，并且可以形成水凝胶，所述水凝胶简便地与抗原物理混合后不仅可有效增强抗原免疫应答的能力，并且用于预防性肿瘤疫苗中能完全抑制肿瘤的生长。所述短肽的序列为X‑GDFDFDY，其中X为Fbp或Car。

摘要： 本发明提供一种用于制备猪圆环合成肽疫苗的抗原多肽及应用。所述抗原多肽为序列2、序列3或序列4所示的多肽。本发明提供的猪圆环合成肽疫苗具有良好的免疫效力，并且不会引发传统疫苗存在的发热、红肿等问题，因此本发明的疫苗可以有效应对目前猪圆环病毒的抗原变异、不存在生物安全性，易于大规模合成，具有良好的应用前景。本发明还提供了所述多肽和多肽疫苗的制备方法以及其制药用途。

摘要： 本发明提供一种用于制备口蹄疫O型合成肽疫苗及其制备方法和应用。口蹄疫O型合成肽疫苗包括抗原多肽组合物，抗原多肽组合物包括序列1和序列2所示的多肽。本发明提供的口蹄疫合成肽疫苗具有良好的免疫效力，且疫苗的抗原为化学合成多肽，不含口蹄疫病毒核酸粒子，安全性高。因此本发明的疫苗可以有效应对目前口蹄疫流行毒株、不存在生物安全性，易于大规模合成，具有良好的应用前景。本发明还提供了所述多肽和肽疫苗的制备方法以及其制药用途。

摘要： 本发明公开了一种用于制备猪圆环合成肽疫苗的抗原多肽、多肽组合物及疫苗。抗原多肽为序列1或序列2所示的多肽。本发明的疫苗包括多肽或多肽组合物。本发明提供的猪圆环合成肽疫苗具有良好的免疫效力，并且不会引发传统疫苗存在的发热、红肿等问题，因此本发明的疫苗可以有效应对目前猪圆环病毒的抗原变异、不存在生物安全性，易于大规模合成，具有良好的应用前景。本发明还提供了所述多肽和多肽疫苗的制备方法以及其制药用途。

摘要： 本发明提供一种用于制备牛口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗的抗原多肽组合物及疫苗。抗原多肽组合物包括序列1和序列2所示的多肽。本发明的疫苗包括多肽组合物。本发明提供的牛口蹄疫O型、A型二价合成肽疫苗具有良好的免疫效力，且疫苗的抗原为化学合成多肽，不含口蹄疫病毒核酸粒子，安全性高。因此本发明的疫苗可以有效应对目前口蹄疫病毒的抗原变异、不存在生物安全性，易于大规模合成，具有良好的应用前景。本发明还提供了所述多肽和肽疫苗的制备方法以及其制药用途。

摘要： 本发明公开了一种用于制备犬细小合成肽疫苗的抗原多肽、多肽组合物及疫苗。抗原多肽为序列1或序列2所示的多肽。本发明的疫苗包括多肽或多肽组合物。由该多肽制成的疫苗可以有效应对犬细小病毒的抗原变异，也不存在安全性问题，易于大规模的合成，具有良好的应用前景。

摘要： 本发明提供一种用于制备口蹄疫A型合成肽疫苗及其制备方法和应用。口蹄疫A型合成肽疫苗包括抗原多肽组合物，抗原多肽组合物包括序列1和序列2所示的多肽。本发明提供的口蹄疫合成肽疫苗具有良好的免疫效力，且疫苗的抗原为化学合成多肽，不含口蹄疫病毒核酸粒子，安全性高。因此本发明的疫苗可以有效应对目前口蹄疫流行毒株、不存在生物安全性，易于大规模合成，具有良好的应用前景。本发明还提供了所述多肽和肽疫苗的制备方法以及其制药用途。

摘要： 本发明提供了一种口蹄疫合成肽疫苗。具体涉及用于O型口蹄疫合成肽疫苗的多肽或其多肽聚合物，以及含有该多肽或其多肽聚合物的疫苗及它们的制备方法，所述多肽具有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。本发明通过大量动物试验对这些候选多肽抗原进行筛选，根据筛选结果对口蹄疫病毒抗原位点进行了优化，并有效组合了T细胞表位和B细胞表位，增强了多肽抗原的免疫效果。该O型口蹄疫合成肽疫苗可以有效应对口蹄疫病毒的抗原变异，生物安全性好，易于大规模合成，具有良好的应用前景。