PCR方法

摘要： HBV可以整合到肝细胞的宿主基因组中,最近的研究结果表明,整合的HBV有助于病毒蛋白的持续产生。来自荷兰阿姆斯特丹大学感染与免疫研究所的Erken等定量检测了慢性乙型肝炎(CHB)患者的HBV整合水平,并分析了HBV整合与病毒学活动(血浆HBV DNA和HBsAg水平)和临床转归的关系。研究者建立并验证了特异性扩增整合HBV的多步Alu-PCR方法和检测整合HBV mRNA转录本的RT-Alu-PCR方法,分析了接受聚乙二醇干扰素联合阿德福韦或替诺福韦治疗48周或未接受治疗的124例CHB患者的治疗前肝活检标本和基线特征。

摘要： 本刊讯本刊采用“顺序编码制”的著录方法,即以文中出现顺序用阿拉伯数字编号排序.提倡对国内同行近年已发表的相关研究论文给予充分的反映,并在文内引用处右上角加方括号注明角码.文中如列作者姓名,则需在“Pang等”的右上角注角码号;若正文中仅引用某文献中的论述,则在该论述的句末右上角注码号.如马连生[1]报告……,研究[2-5]认为……;PCR方法敏感性高[6,7].

摘要： 为了验证副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum,APG)和鼻气管鸟杆菌(Ornithobacterium rhinotracheale,ORT)侵害部位差异性,取混合感染发病鸡不同器官和组织分泌物,采用PCR方法进行检测,结果表明,ORT比APG侵害组织器官更广泛,APG只有在眶下窦和鼻液干酪物中检出,ORT在眶下窦、鼻液、气管、肺脏、肝脏、输卵管中广泛检出,两者混感会加重病情。

摘要： 本刊讯本刊采用“顺序编码制”的著录方法,即以文中出现顺序用阿拉伯数字编号排序.提倡对国内同行近年已发表的相关研究论文给予充分的反映,并在文内引用处右上角加方括号注明角码.文中如列作者姓名,则需在“Pang等”的右上角注角码号;若正文中仅引用某文献中的论述,则在该论述的句末右上角注码号.如马连生[1]报告……,研究[2-5]认为……;PCR方法敏感性高[6,7].文献序号作正文叙述时,用与正文同号的数字并排,如本实验方法见文献[8].

摘要： 本刊采用“顺序编码制”的著录方法,即以文中出现顺序用阿拉伯数字编号排序.提倡对国内同行近年已发表的相关研究论文给予充分的反映,并在文内引用处右上角加方括号注明角码.文中如列作者姓名,则需在“Pang等”的右上角注角码号;若正文中仅引用某文献中的论述,则在该论述的句末右上角注码号.如马连生[1]报告……,研究[2-5]认为……;PCR方法敏感性高[6,7].文献序号作正文叙述时,用与正文同号的数字并排,如本实验方法见文献[8].

摘要： 为了解宁波市南美白对虾苗种病原携带情况,于2021年在宁波市象山、宁海、奉化、余姚、慈溪、鄞州等区县主要南美白对虾养殖产区采集522批次虾苗样品,以PCR方法检测样品携带虾肝肠胞虫(EHP)、急性肝胰腺坏死病(AHPND)、十足目虹彩病毒1(DIV1)和白斑综合征病毒(WSSV)病原情况,结果表明近年来宁波市南美白对虾苗种病原携带状况日渐改善,并为下一步宁波市开展南美白对虾疾病防控工作提供参考。

摘要： 本刊讯本刊采用“顺序编码制”的著录方法,即以文中出现顺序用阿拉伯数字编号排序.提倡对国内同行近年已发表的相关研究论文给予充分的反映,并在文内引用处右上角加方括号注明角码.文中如列作者姓名,则需在“Pang等”的右上角注角码号;若正文中仅引用某文献中的论述,则在该论述的句末右上角注码号.如马连生[1]报告……,研究[2-5]认为……;PCR方法敏感性高[6,7].

摘要： 为查明2021年四川省甘孜州某藏绵羊养殖场呼吸道疾病的发病病因,本研究采用PCR方法对送检的5份深部鼻腔棉拭子进行了“山羊副流感病毒3型、牛病毒性腹泻-黏膜病病毒、牛冠状病毒、多杀性巴氏杆菌、溶血性曼氏杆菌、绵羊肺炎支原体、丝状支原体簇成员”等常见呼吸道病原的检测。结果显示:多杀性巴氏杆菌和溶血性曼氏杆菌为阳性,其他病原为阴性;通过细菌分离培养成功获得5株溶血性曼氏杆菌和5株多杀性巴氏杆菌;分型结果显示5株溶血性曼氏杆菌为A2型,5株多杀性巴氏杆菌为D型。结合临床症状,确诊该场藏绵羊的呼吸道疾病是由A2型溶血性曼氏杆菌和D型多杀性巴氏杆菌混合感染所致。

摘要： 本刊讯本刊采用“顺序编码制”的著录方法,即以文中出现顺序用阿拉伯数字编号排序.提倡对国内同行近年已发表的相关研究论文给予充分的反映,并在文内引用处右上角加方括号注明角码.文中如列作者姓名,则需在“Pang等”的右上角注角码号;若正文中仅引用某文献中的论述,则在该论述的句末右上角注码号.如马连生^([1])报告……,研究^([2-5])认为……;PCR方法敏感性高^([6,7]).文献序号作正文叙述时,用与正文同号的数字并排,如本实验方法见文献[8].所引参考文献必须以近2-3年SCIE。

摘要： 本刊讯本刊采用“顺序编码制”的著录方法,即以文中出现顺序用阿拉伯数字编号排序.提倡对国内同行近年已发表的相关研究论文给予充分的反映,并在文内引用处右上角加方括号注明角码.文中如列作者姓名,则需在“Pang等”的右上角注角码号;若正文中仅引用某文献中的论述,则在该论述的句末右上角注码号.如马连生[1]报告……,研究[2-5]认为……;PCR方法敏感性高[6,7].

摘要： 2016年美国首次报道了猪圆环病毒(Porcine Circovius,PCV)出现了新的血清型即猪圆环病毒3型(PCV3).本研究建立了PCV3的PCR诊断方法,对进一步研究PCV3在中国的流行情况和其致病机理具有重要的意义.根据NCBI中PCV3的基因组序列,设计一对特异性引物,并对PCR的反应体系和反应条件进行了优化,同时进行了特异性和敏感性实验,最后应用所建立的PCR方法检测了临床送检的22份病料.结果表明,PCR总体积25μL退火56°C,模板DNA量3μL(1ng/ml),35个循环为PCR反应最佳条件,能特异的扩增出目的片段,长度约为381bp.测序结果表明,PCR扩增产物正确.特异性试验结果表明,该PCR反应特异性强,只能扩增PCV3阳性样品.敏感性试验结果表明,该PCR反应能扩增最低模板量为1×10-4ng/mL的PCV3.送检22份病料的PCV3阳性率13.6％.可见,本研究建立的PCR方法,特异、敏感,可用于PCV3的快速检测.

摘要： 2016年美国首次报道了猪圆环病毒(Porcine Circovius,PCV)出现了新的血清型即猪圆环病毒3型(PCV3).本研究建立了PCV3的PCR诊断方法,对进一步研究PCV3在中国的流行情况和其致病机理具有重要的意义.根据NCBI中PCV3的基因组序列,设计一对特异性引物,并对PCR的反应体系和反应条件进行了优化,同时进行了特异性和敏感性实验,最后应用所建立的PCR方法检测了临床送检的22份病料.结果表明,PCR总体积25μL退火56°C,模板DNA量3μL(1ng/ml),35个循环为PCR反应最佳条件,能特异的扩增出目的片段,长度约为381bp.测序结果表明,PCR扩增产物正确.特异性试验结果表明,该PCR反应特异性强,只能扩增PCV3阳性样品.敏感性试验结果表明,该PCR反应能扩增最低模板量为1×10-4ng/mL的PCV3.送检22份病料的PCV3阳性率13.6％.可见,本研究建立的PCR方法,特异、敏感,可用于PCV3的快速检测.

摘要： 2016年美国首次报道了猪圆环病毒(Porcine Circovius,PCV)出现了新的血清型即猪圆环病毒3型(PCV3).本研究建立了PCV3的PCR诊断方法,对进一步研究PCV3在中国的流行情况和其致病机理具有重要的意义.根据NCBI中PCV3的基因组序列,设计一对特异性引物,并对PCR的反应体系和反应条件进行了优化,同时进行了特异性和敏感性实验,最后应用所建立的PCR方法检测了临床送检的22份病料.结果表明,PCR总体积25μL退火56°C,模板DNA量3μL(1ng/ml),35个循环为PCR反应最佳条件,能特异的扩增出目的片段,长度约为381bp.测序结果表明,PCR扩增产物正确.特异性试验结果表明,该PCR反应特异性强,只能扩增PCV3阳性样品.敏感性试验结果表明,该PCR反应能扩增最低模板量为1×10-4ng/mL的PCV3.送检22份病料的PCV3阳性率13.6％.可见,本研究建立的PCR方法,特异、敏感,可用于PCV3的快速检测.

摘要： 目的：利用PCR方法鉴定SPF金定鸭的性别.方法：根据已有的报道合成一对禽类性染色体上的染色质解螺旋蛋白DNA结合蛋白1(CHD1)基因的通用引物gCHD.采集培育中的85只SPF金定鸭血液样品,提取血液基因组DNA,进行PCR扩增.通过分析PCR扩增产物凝胶电泳后的条带数判定禽类性别.结果：PCR扩增产物经琼脂糖电泳分析后,雌性鸭样品扩增出CHD1-Z和CHD1-W,而雄性鸭样品只扩增出CHD1-Z.结论：这种PCR方法可作为SPF动物育种过程中有效的鉴定方法.

摘要： 目的：利用PCR方法鉴定SPF金定鸭的性别.方法：根据已有的报道合成一对禽类性染色体上的染色质解螺旋蛋白DNA结合蛋白1(CHD1)基因的通用引物gCHD.采集培育中的85只SPF金定鸭血液样品,提取血液基因组DNA,进行PCR扩增.通过分析PCR扩增产物凝胶电泳后的条带数判定禽类性别.结果：PCR扩增产物经琼脂糖电泳分析后,雌性鸭样品扩增出CHD1-Z和CHD1-W,而雄性鸭样品只扩增出CHD1-Z.结论：这种PCR方法可作为SPF动物育种过程中有效的鉴定方法.

摘要： 目的：利用PCR方法鉴定SPF金定鸭的性别.方法：根据已有的报道合成一对禽类性染色体上的染色质解螺旋蛋白DNA结合蛋白1(CHD1)基因的通用引物gCHD.采集培育中的85只SPF金定鸭血液样品,提取血液基因组DNA,进行PCR扩增.通过分析PCR扩增产物凝胶电泳后的条带数判定禽类性别.结果：PCR扩增产物经琼脂糖电泳分析后,雌性鸭样品扩增出CHD1-Z和CHD1-W,而雄性鸭样品只扩增出CHD1-Z.结论：这种PCR方法可作为SPF动物育种过程中有效的鉴定方法.

摘要： 基因全长序列是研究新基因功能的前提基础，很多模式生物已经完成序列测定，其基因序列可以直接从测序数据库中查询。而对于大量的非模式生物，在其基因组数据未知时，要想研究其新基因的功能，就必须要利用基于PCR建立的序列全长获取技术通过已知片段获取未知基因的全长序列[1]。依据原理，该方法分为连接成环PCR、外源接头介导PCR和随机引物PCR三类。各类技术各有优缺点，且应用的主要领域和潜力各有差别。在这些研究中形成的多种染色体步移方法和cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends，RACE)技术成为基于cDNA和基因组DNA的基因全长序列获取方法的典型代表。

摘要： 基因全长序列是研究新基因功能的前提基础，很多模式生物已经完成序列测定，其基因序列可以直接从测序数据库中查询。而对于大量的非模式生物，在其基因组数据未知时，要想研究其新基因的功能，就必须要利用基于PCR建立的序列全长获取技术通过已知片段获取未知基因的全长序列[1]。依据原理，该方法分为连接成环PCR、外源接头介导PCR和随机引物PCR三类。各类技术各有优缺点，且应用的主要领域和潜力各有差别。在这些研究中形成的多种染色体步移方法和cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends，RACE)技术成为基于cDNA和基因组DNA的基因全长序列获取方法的典型代表。

摘要： 基因全长序列是研究新基因功能的前提基础，很多模式生物已经完成序列测定，其基因序列可以直接从测序数据库中查询。而对于大量的非模式生物，在其基因组数据未知时，要想研究其新基因的功能，就必须要利用基于PCR建立的序列全长获取技术通过已知片段获取未知基因的全长序列[1]。依据原理，该方法分为连接成环PCR、外源接头介导PCR和随机引物PCR三类。各类技术各有优缺点，且应用的主要领域和潜力各有差别。在这些研究中形成的多种染色体步移方法和cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends，RACE)技术成为基于cDNA和基因组DNA的基因全长序列获取方法的典型代表。

摘要： 本实验室保存的两株鸭疫里氏杆菌疑有大肠杆菌污染，鉴于此，通过细菌分离培养、菌落形态观察、染色镜检和生理生化实验确定为鸭疫里氏杆菌，并参照《鸭疫里默氏杆菌的分离、鉴定及培养条件优化》文中所使用引物设计PCR反应体系和程序进行菌落PCR鉴定，结果表明：相对传统鉴定方法，PCR方法具有特异性强、敏感性高等特点，可以为鸭疫里氏杆菌的快速鉴定提供有效的工具。

摘要： 本发明提供利用PCR扩增法从作为模板的核酸分子可以优先扩增含有所期望核酸序列的核酸链，可以更简便、而且具有重复性更高的核酸扩增法。即提供分别设计在PCR扩增反应使用的两个引物的碱基序列，要使得夹住应当扩增的碱基序列区域的两个引物的溶解温度Tm值在PCR反应条件下各不相同，使用Tm值不同的这两个引物，由作为模板的核酸分子进行PCR扩增反应的方法。

摘要： PCR反应容器(10)包括：基板(14)；流道(12)，形成于基板(14)；一对第1过滤器(28)、第2过滤器(30)，设于流道(12)的两端；一对第1空气连通口(24)、第2空气连通口(26)，通过第1过滤器(28)、第2过滤器(30)而与流道(12)相连通；热循环区域(12e)，形成于流道(12)中的第1过滤器(28)与第2过滤器(30)之间；分岔点(112c)，形成于流道(12)中的第1过滤器(28)与第2过滤器(30)之间；分岔流道(131)，其一端连接于分岔点(112c)；以及样品导入口(133)，形成于分岔流道(131)的另一端。

摘要： 本发明提供了一种用于PCR设备的反应容器。该反应容器包括限定用于执行PCR的反应室的试样瓶以及限定用于光学检测的储存室的储存容器。反应室与用于向反应室供应含有至少一个目标DNA的液体试样的液体供应口流体连通。反应室和储存室通过间隔元件和多孔膜流体连通以将液体试样内的至少一个目标DNA杂交到特定的固定杂交探针上。间隔元件的下端延伸到反应室中，但未到达其底部。间隔元件的上端位于由在干燥状态和湿润状态下具有不同物理特性的材料制成的多孔膜附近。在干燥状态下，多孔膜允许空气以及液体从其中穿过。在湿润状态下，多孔膜仍允许液体从其中穿过，但不允许空气穿过，使得在PCR期间，液体试样仍保留在反应室中，而在PCR之后，反应容器构造成迫使液体试样经由间隔元件（42）到达多孔膜，以用于液体试样中的至少一个目标DNA的杂交和检测。此外，描述了包括有这种反应容器的PCR设备以及用于执行PCR的方法。

摘要： 本发明提供利用PCR扩增法从作为模板的核酸分子可以优先扩增含有所期望核酸序列的核酸链，可以更简便、而且具有重复性更高的核酸扩增法。即提供分别设计在PCR扩增反应使用的两个引物的碱基序列，要使得夹住应当扩增的碱基序列区域的两个引物的溶解温度Tm值在PCR反应条件下各不相同，使用Tm值不同的这两个引物，由作为模板的核酸分子进行PCR扩增反应的方法。

摘要： 本发明提供一种植物免提取直接实时荧光快速PCR扩增稳定剂、PCR扩增组合物和PCR扩增方法，具体公开了一种植物免提取PCR反应的稳定剂，所述稳定剂包括MgCl

摘要： 本发明提供PCR反应容器、PCR装置、PCR方法。PCR反应容器(10)包括：基板(14)；流道(12)，形成于基板(14)；一对第1过滤器(28)、第2过滤器(30)，设于流道(12)的两端；一对第1空气连通口(24)、第2空气连通口(26)，通过第1过滤器(28)、第2过滤器(30)而与流道(12)相连通；热循环区域(12e)，形成于流道(12)中的第1过滤器(28)与第2过滤器(30)之间；分岔点(112c)，形成于流道(12)中的第1过滤器(28)与第2过滤器(30)之间；分岔流道(131)，其一端连接于分岔点(112c)；以及样品导入口(133)，形成于分岔流道(131)的另一端。

摘要： 本发明涉及一种PCR热循环装置、PCR热循环方法及PCR仪。该PCR热循环装置包括壳体，其形成一负压空间；设置于负压空间内的基板，其上开设若干反应腔，基板包括包裹于反应腔外的温控腔；加热模块；冷却模块；及对基板配合的密封件。加热模块采用导热油作为加热源，冷却模块为采用二氧化碳作为冷却源。加热模块和冷却模块均为提供循环式流体流经温控腔，进而控制反应腔的温度。该PCR热循环装置具有温度均匀、质轻、升降温速度快、功率要求低等特性，大大的改善了仪器整体的基因扩增效果和检测性能的精准度及稳定性。

摘要： 本发明提供一种PCR模组可移动式荧光定量PCR仪、PCR仪集组及方法，荧光定量PCR仪包括框体、检测模组、PCR模组和平移驱动机构；PCR模组包括控温组件、托块和热盖组件，平移驱动机构驱动PCR模组水平移动，从而使托块的多个内凹孔位依次移动到检测模组的正下方进行检测。检测模组采用固定式，有助于检测模组内部光路结构和检测器件保持在可靠稳定状态，相比检测模组移动式，寿命更长，能保持良好的检测精确度；采用PCR模组移动式，直接借助平移驱动机构实现PCR模组从框体内移出，方便操作人员取样和放样；采用PCR模组侧向移出式，方便多台荧光定量PCR仪的上下堆叠，大大节约了占用空间，也方便应用到到实验室全自动检测流水系统中。

摘要： PCR反应容器(10)包括：基板(14)；流道(12)，形成于基板(14)；一对第1过滤器(28)、第2过滤器(30)，设于流道(12)的两端；一对第1空气连通口(24)、第2空气连通口(26)，通过第1过滤器(28)、第2过滤器(30)而与流道(12)相连通；热循环区域(12e)，形成于流道(12)中的第1过滤器(28)与第2过滤器(30)之间；分岔点(112c)，形成于流道(12)中的第1过滤器(28)与第2过滤器(30)之间；分岔流道(131)，其一端连接于分岔点(112c)；以及样品导入口(133)，形成于分岔流道(131)的另一端。

摘要： 本发明提供了琼脂糖在PCR扩增中的应用，在配置PCR扩增体系过程中加入琼脂糖。进一步的，本发明还提供了相应的PCR扩增试剂盒及PCR扩增方法，PCR扩增试剂盒包括盒体及盒体中单独存放的试剂，所述试剂包括琼脂糖。所述PCR扩增方法，包括在配置PCR扩增体系过程中加入琼脂糖的步骤。本发明通过实验证明了在配置PCR扩增体系过程中加入琼脂糖，可以提高PCR扩增反应敏感度，使反应更加充分，提高微量DNA的PCR扩增效果，最终获得完整STR分型结果。并且，由于PCR扩增反应敏感度的提高，PCR扩增过程中试剂的使用量可明显降低，从而降低实验成本。