СПОСІБ ВИЗНАЧЕННЯ ЗАГАЛЬНОГО ЗАЛІЗА ЗА ДОПОМОГОЮ ФЕРОЗИН-КОЛОРИМЕТРИЧНОГО АНАЛІЗУ У ПЕЧІНЦІ ЩУРІВ

摘要

Спосіб визначення внутрішньоклітинного заліза за допомогою ферозин-колориметричного аналізу включає приготування інкубаційних сумішей з додаванням лізату клітин до інкубаційних сумішей, вивільняють залізо з білків за допомогою соляної кислоти та залізовивільняючого реагенту, інкубацією при 60 ºC, зупинкою реакції охолодженням, додаванням рагенту для визначення заліза, інкубація 30 хв., приготування стандартів для побудови стандартної кривої в межах 0-20 нмоль, та визначають абсорбцію Fе2+-ферозин комплексу з максимумом поглинання λ=550 нм. Додатково використовують покращену методику ферозин-колориметричного аналізу для вивільнення заліза з тканин печінки, використовують тканину печінки щурів, готують гомогенати тканини з додаванням відповідної концентрації натрію гідрохлориду та залишають на шейкері при 25 ºC через ніч. Стандартну криву будують в межах 0-60 нмоль.