КОМПЛЕКСНИЙ СПОСІБ ДЕТЕКЦІЇ НЕЙРОПЕПТИДІВ В НЕЙРОНАХ МОЗКУ ЩУРІВ ПРИ ІМУНОГІСТОХІМІЧНОМУ ДОСЛІДЖЕННІ

摘要

Комплексний спосіб детекції нейропептидів в нейронах мозку щурів при імуногістохімічному дослідженіі, при якому шляхом попереднього до імуногістохімічного дослідження вмісту та локалізації нейрогормонів проведення демаскування їх резистентних епітопів шляхом багаторазового температурного (85-90 °C) та мікрохвильового "відновлення" епітопів нейрогормонів в мікрохвильовій печі у спеціальних скляних контейнерах об'ємом 50-70 мл, заповнених розчином фосфатного буферу, дворазовим по 5 хв. відмиванням розчином фосфатного буферу рН 7,4 із подальшим імуногістохімічним дослідженням їх локалізації та вмісту. Проводять in vivo щурам стереотаксичним методом у латеральний шлуночок мозку інтрацеребровентрикулярно вводять колхіцин, за координатами: 9,5 мм від міжвушної лінії до переду; 1,5 мм вправо від серединної лінії та 6 мм у глибину; через дві доби щурам проводять декапітацію, вилучають мозок та після стандартної гістологічної обробки і виготовлення 14 мкм зрізів мозку проводять температурно-мікрохвильове демаскування резистентних епітопів шляхом 3-й разового по 3 хв. у ПВЧ 800 Ватт інкубації у розчині фосфатного буферу рН 6,0, із подальшим імуногістохімічним дослідженням локалізації та вмісту нейропептидів.