BmNPV-家蚕幼虫多基因表达系统构建方法

摘要

本发明涉及一种BmNPV-家蚕幼虫多基因表达系统构建方法，按下列步骤顺序完成：(1)将阿拉伯糖启动子pBAD控制的I-SceI表达盒重组到E.coliDH10B的基因组中获得新的受体菌I-SceI DH10B；(2)结合转移用供体质粒的构建；(3)cre/loxp重组位点取代BmBacmid基因组中的v-cath和chitin基因，2个I-SceI位点取代BmBacmid中的p10基因获得受体I-sceIBmMultibac；(4)利用cre-loxp重组、Tn7重组和结合转移三种方法引入外源基因；(5)常规方法制备重组Bacmid DNA并转染昆虫细胞。本发明获得BmNPV-家蚕幼虫多基因表达系统，为研究多亚基蛋白、蛋白与蛋白之间相互作用以及制备病毒样颗粒奠定基础。