具有生防烟草赤星病的菌株及其发酵方法、烟草赤星病防治复配剂

摘要

本申请公开了一种具有生防烟草赤星病的菌株及其发酵方法、烟草赤星病防治复配剂，菌株为菌株WSWFJ38，保藏登记号为：CGMCC No.20142；菌株为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。通过将WSWFJ35菌、10％多抗霉素、助剂、水按照比例复配，将所得复配制剂喷雾施用于烟叶叶片正反两面。由于将低毒化学农药用量减半并与该生防菌剂稀释互配使用，经试验证明，本发明提供的WSWFJ35菌与10％多抗霉素复配剂双重作用机制对烟草赤星病病原菌有很强的抑制作用，对烟草赤星病显示出很好的防病效果，从源头上减少了化学农药的使用，同时防止过度施用化学农药导致病菌不产生抗药性的问题，增效作用明显，该复配制成本低、效果好、对环境友好，因此具有很好的生物农药开发前景。

说明书

技术领域

本申请涉及一种具有生防烟草赤星病的菌株及其发酵方法、烟草赤星病防治复配剂，属于生物农药技术领域。

背景技术

烟草(学名：Nicotiana tabacum)属于茄科，一年生草本植物，目前，中国种植烟草面积为世界最大。烟草赤星病是由链格孢属真菌(Alternaria alternate(Fr)Keissler)侵染烟草植株引起的叶斑病害，特别是在烟叶采收中后期，成为影响烟叶成熟度的障碍因素。

该病具有潜育期短、流行速度快的特点，烟株现蕾后至成熟期为该病的易感病阶段，在环境条件适宜的情况下，短时间内即可大面积发生流行。病害从烟株下部叶片开始发生，随着叶片的成熟，病斑自下而上逐步发展。叶片发病初期为褐色小斑点，以后逐渐扩大为1～2cm的深褐色至赤褐色病斑，病斑为圆形或不规则圆形，扩展中的病斑周围有淡黄色晕圈，病斑具多重同心轮纹。病斑质脆易破，病害严重时，许多病斑相互连接合并成大斑块枯焦。严重时还会危害茎杆、花梗和蒴果，影响烟叶产量和品质，不利于优质烟叶生产，但至今除了化学农药外，尚无有效的防治手段。

赤星病自1892年首次在美国发现以来，曾几次给世界烟叶生产带来巨大的经济损失。我国1916年首次在北京附近发现，1964年在山东烟区大流行，损失很大，随后此病在全国各烟区均有发生，以黑龙江、山东、河南、安徽、湖南、广西、贵州等省区发生为害较重。一般烟田发病率为 5％～10％，重病田可达20％甚至50％以上。1989～1991年，河南省平均每年因赤星病造成烟草损失达人民币2300万元，成为毁灭性的病害。2000 年8月美国康乃狄克州和麻萨诸塞州，烟草赤星病大暴发，两州烟草减产 75％和89％。据近年统计，赤星病对烟叶产值的负影响远大于对产量的影响，烟叶产量损失率最高为28.56％，产值损失率最高可达89.67％。

烟草是叶用经济作物，对烟叶的外观和内在质量都有特殊要求，如为防治赤星病对烟叶喷洒化学农药容易造成烟叶的农药残留，持续施加化学农药还会引发病原菌的抗药性，从而影响卷烟的安全，所得低质量烟叶也不利于烟叶的出口。

发明内容

本申请提供了一种具有生防烟草赤星病的菌株及其发酵方法、烟草赤星病防治复配剂，用于解决现有技术中应对赤烟叶易感星病时，仅能通过施加化学农药导致烟叶农药残留超标、诱导出抗药性毒株、降低烟叶质量的技术问题。

本申请提供了一种具有生防烟草赤星病、烟草青枯病功能的菌株菌株，菌株为菌株WSWFJ35，保藏登记号为：CGMCC No.20142；所述菌株为枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis。

该菌株能有效防治烟草赤星病，将其应用于农业生产过程中，可以对烟草赤星病进行有效防治，能够在很大程度上减少化学农药的施用量，减少环境污染，提高作物安全性，使用该菌株的增殖液后，所达到的对赤星病防治效果接近单独施用化学农药的防治效果。通过试验发现，该菌株还还具有对烟草青枯病的生防效果。

云南省微生物发酵工程研究中心有限公司经对微生物进行特异性筛选得到该微生物，筛选出能与低毒化学农药10％多抗霉素互配使用的菌株WSWFJ35，其保藏登记号为：CGMCC No.20142。

优选地，所述菌株WSWFJ35在LB培养基上所形成菌落形态为：白色近圆形菌落，菌落生长前期表面不光滑中间凸起，呈后山口形状，边缘锯齿状，菌落不透明。

该菌株的休眠保藏温度与现有枯草芽孢杆菌相似，为-80℃。

本申请的另一方面还提供了一种烟草赤星病防治复配剂，包括：如上述菌株WSWFJ35的发酵液、低毒化学农药和助剂，低毒化学农药稀释后与混有助剂的发酵液混合后，得到所述复配剂；

低毒化学农药的用量为该农药正常用量减半；

发酵液按使用倍数稀释后加入。

通过上述配方复配得到复配剂后，仅需使用低毒化学农药正常使用量一半的用量，即可实现对烟草赤星病病毒生长的有效抑制，达到对赤星病的有效防治。能有效减少化学农药的用量，同时保证对赤星病的有效抑制作用。

为便于喷洒施用，该复配剂中还含有喷洒所需计量的溶剂，例如可以添加水进行稀释。

上述复配剂中所用助剂可以为各类农药复配所用助剂，例如润湿助剂等，在此不累述。

本申请中的“低毒化学农药”是指将现有农药用量减半并稀释后所得的农药原液含量较低的化学农药试剂。例如包括但不限于多抗霉素可湿性粉剂、菌核净、甲基硫菌灵、CK等常用化学农药，此类化学农药通过用量减半和稀释后即可得到该农药。该复配剂中通过将低毒化学农药减半用量后与该菌发酵液混合并稀释至使用浓度后，均可发挥与单独施用化学农药相同的对赤星病的抑制效果。

优选地，所述低毒化学农药为10wt.％多抗霉素可湿性粉剂。采用该类型低毒化学农药，该菌株所能形成的菌落数最多，对该菌株的生长抑制率最低，同时该低毒化学农药与该菌株复配后，对赤星病能达到优于单独施用化学农药的防治效果。

优选地，所述菌株WSWFJ35的发酵液中有效活菌数在2.0×10

优选地，所述助剂为润湿助剂，例如为吐温20，所述助剂的加入量为菌株WSWFJ35发酵液质量的千分之一。按此比例加入所用助剂，能较好的实现复配剂的混合，提高复配后所得复配剂对叶片表面的润湿效果。

本申请的另一方面还提供了一种复配剂施用方法，包括以下步骤：将如上述的烟草赤星病防治复配剂喷雾施用于烟叶叶片正反两面。

本申请的另一方面还提供了一种上述用于防治烟草赤星病菌株的发酵方法，包括以下步骤：

1)菌种活化：在LB固体培养基上活化12～16h，得到活化菌株；

2)种子液制备：将活化菌株接种至LB液体培养基中，在30～40℃下，并在转速为150～170rpm/min条件下培养20～30h，得种子液；

3)发酵液制备：按照菌种、培养液体积比为1：100～150的比例将种子液接种至发酵料培养基中，在35℃～38℃条件下，转速为100～140rpm/min 条件下培养25～30h，得所述菌株的发酵液。

更优选地，该发酵方法包括以下步骤：

(1)菌种活化：将-80℃下保存的枯草芽孢杆菌WSWFJ35在LB固体培养基上活化12～16h，，得活化的菌株。

(2)种子液制备：用无菌接种环刮取一环步骤(1)中活化的菌株接种到50ml LB液体培养基中，在温度为35℃、转速为160rpm/min条件下培养24h，得种子液。

(3)发酵液制备：按照菌种、培养液体积比为1：120左右的比例将步骤(2)所得的种子液接入到车间发酵料培养基中，在温度为35℃(可上下浮动0.5℃)，转速为120rpm/min条件下培养25-30h，得发酵液，即为具有防治烟草赤星病功能的解淀粉芽孢杆菌发酵液，菌液的有效活菌数均控制在2.0×10

以上发酵方法可用于扩大该菌株进行培养，其中所用各培养基的成分按现有技术中常用配方即可。

优选地，所述LB固体培养基由：细菌学蛋白胨8～12g/L、酵母提取粉3～7g/L、氯化钠8～12g/L、水1L、琼脂粉13～18g组成。

更优选地，所述LB固体培养基由：细菌学蛋白胨10g/L、酵母提取粉5g/L、氯化钠10g/L、水1L、琼脂粉15g组成。采用该配方能在为活化阶段的菌株提供生长所需的蛋白质和碳元素含量。

优选地，所述LB液体培养基由细菌学蛋白胨8～12g/L、酵母提取粉 3～7g/L、氯化钠8～12g/L、水1L组成。

更优选地，所述LB液体培养基由细菌学蛋白胨10g/L、酵母提取粉 5g/L、氯化钠10g/L、水1L组成。

继续采用上述配方配置的液体培养基进行扩大繁殖，能有效提高菌液中活菌含量，达到种子液所需菌含量。

优选地，所述发酵料培养基由黄豆粉1.0～1.6重量份、蔗糖0.1～0.5重量份、蛋白胨0.2～0.6重量份、玉米粉0.2～0.6重量份、碳酸钙0.3～0.9重量份、鱼粉0.1～0.3重量份、硫酸铵0.01～0.08重量份、硫酸镁0.02～0.05 重量份、磷酸二氢钾0.01～0.04重量份、磷酸氢二钾0.02～0.05重量份、硫酸锰0.01～0.04重量份、氢氧化钠0.01～0.04重量份、氯化钠0.02～0.03重量份、消泡剂0.5～1.5重量份组成，并用盐酸或氢氧化钠调节所述发酵料培养基的PH至6.8～7.5。

采用上述配方的发酵培养基，能有效缩短该菌种的发酵时间，减少发酵后菌液中其它杂菌的含量，提高菌液质量。

本申请能产生的有益效果包括：

1)本申请所提供的用于防治烟草赤星病的菌株，该菌株为云南省微生物发酵工程研究中心有限公司从菌种库中筛选得到能与低毒化学农药互配发挥协同抑制赤星病菌生长效果的生防菌株，该菌株经鉴定机构鉴定属于枯草芽孢杆菌WSWFJ35，其保藏登记号为：CGMCC No.20142，该菌株应用于农业生产过程中，可以对烟草赤星病进行有效防控。

2)本申请所提供的烟草赤星病防治复配剂，通过将WSWFJ35菌、10％多抗霉素、助剂按照比例复配后制得复配剂，之后通过将复配剂喷雾施用于烟叶叶片正反两面能有效实现对赤星病的防治效果。由于概况复配剂中将低毒化学农药用量减半并与该生防菌剂稀释互配使用，经试验证明，该复配剂的双重作用机制能对烟草赤星病病原菌有很强的抑制作用，对烟草赤星病显示出很好的防病效果，从源头上减少了化学农药的使用，同时防止过度施用化学农药导致病菌不产生抗药性的问题，增效作用明显，该复配制成本低、效果好、对环境友好，因此具有很好的生物农药开发前景。

3)本申请所提供的烟草赤星病防治复配剂，该复配剂在云南省曲靖市宣威市得禄乡、云南省曲靖市师宗县恩谷新寨进行试验，试验结果表明该复配剂对于烟草赤星病的防治效果较好，采用本发明的枯草芽孢杆菌 WSWFJ35发酵液与低毒化学农药用量减半互配对烟草赤星病进行防控，连续喷施3-5次后具有相对于化学农药较好的防治效果。该复配剂能有效降低化学农药的使用剂量，能提升烟草品质，降低化学农药残留、减少环境污染等问题。

生物保藏证明

用于防治烟草赤星病的菌株为菌株WSWFJ35，建议的分类命名：枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis，该菌株于2020年6月28日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：北京市朝阳区北辰西路 1号院3号，保藏登记号为：CGMCC No.20142。

附图说明

图1为本申请提供的实施例6中枯草芽孢杆菌WSWFJ35发酵液液与低毒化学农药互配实验中各低毒性化学农药与菌株WSWFJ35发酵液复配后的培养结果照片；其中：a)为10wt.％多抗霉素板上菌株WSWFJ35发酵液复配剂的实验结果；b)为CK板上菌株WSWFJ35发酵液复配剂的实验结果；c)为40wt.％菌核净板上菌株WSWFJ35发酵液复配剂的实验结果；d)为70wt.％甲基硫菌灵板上菌株WSWFJ35发酵液复配剂的实验结果。

具体实施方式

下面结合实施例详述本申请，但本申请并不局限于这些实施例。

实施例

如无特别说明，本申请的实施例中的原料、溶剂和助剂均通过商业途径购买，不进行处理。

实施例1枯草芽孢杆菌WSWFJ35

枯草芽孢杆菌WSWFJ35,其保藏登记号为CGMCC No.20142。从云南省微生物发酵工程研究中心有限公司菌种库中筛选得到的生防菌株。

菌株WSWFJ35形态特征：在LB培养基上白色近圆形菌落，前期表面不光滑中间凸起，呈后山口形状，边缘锯齿状，菌落不透明。鉴定为枯草芽孢杆菌。

该菌株WSWFJ35青枯病生防试验：

1.试验材料及方法

1.1试验地点

云南省微生物发酵工程研究中心有限公司温室大棚和露天试验地。

1.2.2试验材料

供试材料：云烟87，58％甲霜灵锰锌。

供试菌剂：青枯病生防功能菌剂(枯草芽孢杆菌其保藏登记号为 CGMCC NO20142)，黑胫病生防功能菌剂(枯草芽孢杆菌其保藏登记号为CGMCC NO 20141)。

1.2.3试验设计

将烟草种子置于塑料穴盘育苗后，将生长一致的三叶期烟草幼苗移栽至18*18的塑料花盆中继续培养(温度28-30℃)，待烟草植株生长至6-7 叶期时进行处理，生防菌处理组每株苗浇灌30ml供试菌株菌液，使菌液细菌密度维持在3.0-5.0*10

试验设置如下处理：

处理1：清水处理

处理2：先浇清水+后浇青枯病原菌

处理3：先浇生防青枯病功能菌剂+后浇青枯病病原菌

2结果与分析

2.1不同生防菌株对烟草青枯病的温室防效

所得结果列于表1 中。

表1 各处理对烟草青枯病的温室防治结果表

注：不同字母表示在a＝0.05显著下的差异

由表1 可知，接种病原菌8天后，对照组烟株开始发病，植株底部叶片出现萎蔫现象，而试验组各处理的感病时间则相对有所推迟，病原菌接种后30天，对各处理的感病程度进行了统计分析，该菌株处理对烟株青枯病的防效达42.51％，说明该菌株具有生防烟草青枯病的功能。

该菌株可以发酵增殖后，可以作为生防烟草青枯病菌剂单独施用。

实施例2～4枯草芽孢杆菌WSWFJ35发酵液样品F1～3制备

菌株WSWFJ35发酵液的制备包括以下步骤：

(1)菌种活化：将实施例1中所述的枯草芽孢杆菌WSWFJ35于-80℃下保存，在LB固体培养基上活化12h，得活化菌株；

(2)种子液制备：用无菌接种环刮取一环步骤(1)中活化的菌株接种到50ml LB液体培养基中，在温度为35℃、转速为160rpm/min条件下培养24h，得种子液。

(3)发酵液制备：按照菌种、培养液体积比为1：120左右的比例将步骤(2)所得的种子液接入到车间发酵料培养基中，在温度为35℃(可上下浮动0.5℃)，转速为120rpm/min条件下培养28h，得发酵液样品1～3，即为具有防治烟草赤星病功能的解淀粉芽孢杆菌发酵液，菌液的有效活菌数均控制在2.0×10

LB液体培养基的组成成分及其配比为：细菌学蛋白胨10g/L，酵母提取粉5g/L，氯化钠10g/L，水1L，即得液体培养基；在以上物质中再加入琼脂粉24g/L即得固体培养基。

发酵培养基的组成为：黄豆粉1.4％、蔗糖0.4％、蛋白胨0.5％、玉米粉 0.4％、碳酸钙0.6％、鱼粉0.2％、硫酸铵0.05％、硫酸镁0.04％、磷酸二氢钾0.03％、磷酸氢二钾0.04％、硫酸锰0.03％、氢氧化钠0.03％、氯化钠0.02％、消泡剂1.0％，根据配置所得培养基的pH值选用盐酸或氢氧化钠调节pH至7。

实施例3～4与实施例2的区别如下表所示，其他未述内容与实施例2相同：

表2 发酵液制备工艺及配方

实施例5配置复配剂样品P1

复配剂样品P1包括以下组分：枯草芽孢杆菌WSWFJ35发酵液样品F1、润湿助剂吐温20、低毒化学农药10％多抗霉素可湿性粉剂。

润湿助剂吐温20的用量为复配剂样品P1总质量的1‰。

其制备方法：

1)将发酵液样品F1加水稀释1000倍后加入润湿助剂吐温20混合均匀备用；

2)再将10wt.％多抗霉素可湿性粉剂按说明书指示使用量减少一半剂量后，加水稀释至1000倍后备用；

3)将步骤1)～2)中配置好的溶液转入大容器中搅拌均匀后，得到所述复配剂样品P1。

发酵液样品F2～3制成复配剂的方法于此相同，在此不累述。

实施例6枯草芽孢杆菌WSWFJ35发酵液与低毒化学农药互配实验

1、材料与方法

1.1、材料

杀菌剂：10％多抗霉素、70％甲基硫菌灵可湿性粉剂、40％菌核净；

枯草芽孢杆菌WSWFJ35。

1.2、方法

1.2.1、配制LB固体培养基(与实施例3中所用培养基相同)，溶解琼脂后，分装到三角瓶中，每瓶100毫升。灭菌后冷却至60℃左右，按杀菌剂说明用量称量好，倒入三角瓶里，充分摇匀，溶解；另1个三角瓶做为无杀菌剂的空白对照。每三角瓶倒板4个(每皿25毫升)，做好各药剂编号(培养皿外边壁)，在超净工作台上风干至无自由水。

1.2.2、配置生防菌。提前一天，在LB液体培养基中培养生防菌剂 WSWFJ35，置于35℃摇床中培养24小时。取已灭菌的三角瓶空瓶，加入 10毫升灭菌水，从培养好的生防菌液三角瓶中，取生防菌液10微升放入加了灭菌水三角瓶中，充分混合后再稀释100倍，取最后稀释倍数的菌液20 微升加入到装有低毒化学农药的培养基平板中及未加农药的空白对照板，涂布均匀。

1.2.3、计数调查抑制率。培养24小时后，统计各个平板中的菌落数。根据下述公式计算各平板的抑制率。

2、结果分析

所得结果的菌落计数结果及抑制率结果列于表3 中，计数平板如图1所。

表3 生防菌剂与低毒化学农药平板筛选结果

注：上述数据均为4次重复的均值，“～”表示无抑制作用。

从表3 中看出，生防菌剂WSWFJ35在含有低毒化学农药40％的菌核净可湿性粉剂板上的抑制率为85.19％，在10％的多抗霉素板上抑制率为 11.11％，在70％的甲基硫菌灵板上抑制率为75.93％。

由表3 结果可见，本申请提供的枯草芽孢杆菌WSWFJ35可以在含有以上3种低毒性化学农药的培养基表面生存，说明该菌株对低毒化学农药具有一定耐受性，与低毒性化学农药混合后不会影响该菌株的生长。

实施例7复配剂样品P1的田间施用实验

目的：为验证生防菌剂WSWFJ35与低毒化学农药10％多抗霉素可湿性粉剂减半后互配在田间防治烟草赤星病的效果，特开展以下试验。

实验地点：云南省微生物发酵工程研究中心有限公司温室大棚、云南省曲靖市宣威市得禄乡，云南省曲靖市师宗县恩谷新寨。

试验处理及调查方法

3.1.试验喷施处理：采用18L电动喷雾器，以喷施叶片润湿为度进行处理。试验设置以下4个处理，分别为：

a.10％多抗霉素剂量减半(2000倍)+生防菌剂WSWFJ35(稀释100倍)、

b.全量10％多抗霉素(1000倍)、

c.生防菌剂WSWFJ35(50倍)、

d.空白对照。上述每个处理重复3次。

施用方法：间隔3天喷施1次，连续喷施3次。

3.2、调查方法

处理前及处理结束后3、7、10天对各植株进行病害调查，按照烟草赤星病病害严重度分级标准调查所有叶片(每个重复10株)，并做好结果记录。

每小区调查10株，每株调查全部叶片，以株为单位分级统计。

烟草赤星病病害严重度分级方法：

0级：全株无病斑；

1级：全株病斑很少，即小病斑(直径≤2mm)不超过15个，大病斑 (直径＞2mm)不超过2个；

3级：全株叶片有少量病斑，即小病斑50个以内，大病斑2个～10个；

5级：三分之一以下叶片上有中量病斑，即小病斑50个～100个，大病斑10个～20个；

7级：三分之一至三分之二叶片上有病斑，病斑中量到多量，即小病斑100以上，大病斑20个以上，下部个别叶片干枯；

9级：三分之二以上叶片上有病斑，病斑多，部分叶片干枯。

根据上述调查处理前后的病害严重程度，根据以下公式计算其病情指数及防治效果。

公式如下：

病情指数＝100×∑(各级病叶数×各级代表值)/(调查总叶数×最高级代表值)

防治效果(％)＝[(1～(空白对照区施药前病情指数×处理区施药后病情指数)/(空白对照区施药后病情指数×处理区施药前病情指数)]×100

4.0结果

4.1.云南省微生物发酵工程研究中心有限公司温室大棚烟草赤星病统计防效结果

该试验点所得结果列于表4 中。

表4 烟草赤星病生防菌剂与低毒化学农药互配使用防效统计结果(温室大棚)

注：上述处理均为三次重复的平均值，“/”表示无防效作用。

从表4 中可以看出，单独喷施生防菌剂及农药均有一定的防治效果，分别为25.73％、27.11％，但将其用量分别减半后混合处理，其防效明显高于单独喷施处理，防效达到45.31％。因此，生防菌剂与农药互配使用能在温室大棚中能有效防治烟草赤星病。

4.2.云南省曲靖市宣威市得禄乡烟草赤星病统计防效结果

该试验点所得结果如表5 所示。

表5 烟草赤星病生防菌剂与低毒化学农药互配使用防效统计结果(得禄乡)

注：上述处理均为三次重复的平均值，“/”表示无防效作用。

从表5 中可以看出：单独喷施生防菌剂与低毒化学农药在烟草赤星病的防治上均有一定的作用，其防治效果分别为27.12％、28.93％。而将生防菌剂与低毒化学农药互配使用喷施后，其防治效果达到40.98％，说明互配使用有增效的作用。能达到预期防治效果。

4.3云南省曲靖市师宗县恩谷新寨烟草赤星病统计防效结果

该试验点所得结果如表6 所示。

表6 烟草赤星病生防菌剂与低毒化学农药互配使用防效统计结果(恩谷新寨)

从表6 中可以看出：单独喷施生防菌剂与低毒化学农药在烟草赤星病的防治上均有一定的作用，其防治效果分别为33.67％、28.84％。而利用生防菌剂与低毒化学农药互配使用喷施后，其防治效果达到47.19％，说明互配使用有增效的作用。能达到预期防治效果。

云南省微生物发酵工程研究中心有限公司经对微生物进行特异性筛选，提出“一种具有防治烟草赤星病生防菌剂与低毒化学农药配合使用”的防治方法，筛选出能与低毒化学农药10％多抗霉素互配使用的菌株 WSWFJ35，其保藏登记号为：CGMCC No.20142，将其应用于农业生产过程中，能够在很大程度上减少低毒化学农药使用的同时，实现对烟草赤星病进行有效防控，以达到减少化学农药用量，减少环境污染同时提高作物安全性的效果。

在本说明书中所谈到的“一个实施例”、“另一个实施例”、“实施例”、“优选实施例”等，指的是结合该实施例描述的具体特征、结构或者特点包括在本申请概括性描述的至少一个实施例中。在说明书中多个地方出现同种表述不是一定指的是同一个实施例。进一步来说，结合任一实施例描述一个具体特征、结构或者特点时，所要主张的是结合其他实施例来实现这种特征、结构或者特点也落在本申请的范围内。

尽管这里参照本申请的多个解释性实施例对本申请进行了描述，但是，应该理解，本领域技术人员可以设计出很多其他的修改和实施方式，这些修改和实施方式将落在本申请公开的原则范围和精神之内。更具体地说，在本申请公开说明书和权利要求的范围内，可以对主题组合布局的组成部件和/或布局进行多种变型和改进。除了对组成部件和/或布局进行的变形和改进外，对于本领域技术人员来说，其他的用途也将是明显的。