粘多糖贮积症II型动物模型的构建方法及应用

摘要

本发明提供了粘多糖贮积症II型动物模型的构建方法，包括针对小鼠IDS基因设计靶点，合成寡核苷酸链，合成的寡核苷酸链经退火与pUC57‑T7‑sgRNA质粒进行连接，获得sgRNA表达载体；获得小鼠受精卵；将转录好的Cas9mRNA和sgRNA混合均匀得到RNA混合物，将RNA混合物显微注射至小鼠受精卵的细胞质，随后将存活的受精卵植入雌性小鼠体内，繁殖获得F0代小鼠；提取F0代小鼠的基因组DNA，作为模板，进行PCR反应，产物经酶切，选择突变小鼠，从而确定Founder小鼠；Founder小鼠与野生型雄性小鼠交配获得F1代小鼠。本发明还提供了由该方法构建的动物模型以及该模型在研究粘多糖贮积症II型中的用途。