特异性沉默鸡马立克氏病病毒gI、gE基因的siRNA序列及其载体和应用

摘要

本发明提供了一种能有效地特异性沉默鸡马立克氏病病毒(MDV)gI和gE的siRNA序列及其载体和在MDV基因治疗和制备基因工程疫苗中的应用。本发明使用http//www.ambion.com的靶位点筛选和设计工具，通过一步法PCR扩增含有禽源U6启动子的siRNA表达盒用于快速筛选出MDV gI和gE基因的干扰序列。根据siRNA对应的起始位点在gI和gE基因mRNA序列上的位置，分别命名为sigI735和sigE936。构建分别含有干扰序列的siRNA真核表达载体，提取纯化的质粒转染CEF细胞，可有效抑制MDV gI和gE基因的表达，并利用DF1、Vero、MDCK稳定细胞系进一步检测干扰序列抑制MDV gI和gE基因表达的效果。