基于激光捕获显微切割技术的空间分辨蛋白质组学方法

摘要

本发明提供了一种基于激光捕获显微切割技术的空间分辨蛋白质组学方法，即采用激光捕获显微切割的磁珠法痕量分析及质谱分析方法，具体包括通过激光捕获显微切割技术切割福尔马林固定石蜡包埋等组织切片的痕量目标组织，并收集至管盖中；加入裂解液完全覆盖痕量目标组织，在恒温水浴中原位孵育裂解；裂解得到的蛋白质溶液中加入还原剂和烷基化试剂进行反应；再加入磁珠和乙醇，然后加入缓冲液、蛋白水解酶进行酶解；将肽段溶液进行色谱分离和质谱检测；本发明的空间分辨蛋白质组学方法能够显著降低单个样本所需的起始组织量，显著提升蛋白质提取效率和质谱鉴定能力，从而可以与现有主流空间分辨转录组技术的分辨率对接。